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RBP4多态性与2型糖尿病患者的相关性研究

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临床检验杂志 2008年第3期26卷 200-203页

作者：杨春香顾国浩卢大儒刘宏亮钟逾史进方金晓华苏州大学附属第一医院复旦大学生命科学院上海200433

目的探讨视黄醛结合蛋白(RBP4)基因多态性在苏州地区汉族人群中的频率分布及其与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法采用TaqMan探针基因分型技术结合琼脂糖凝胶电泳技术,检测384例T2DM患者和384例健康人RBP4的多态性,同时测定其空腹血糖(FBG... 详细信息

目的探讨视黄醛结合蛋白(RBP4)基因多态性在苏州地区汉族人群中的频率分布及其与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法采用TaqMan探针基因分型技术结合琼脂糖凝胶电泳技术,检测384例T2DM患者和384例健康人RBP4的多态性,同时测定其空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平。结果T2DM组和对照组RBP4-803,G>A;+5169,C>T;+6969,G>C3个单核苷酸多态性(SNP)位点的基因型频率和等位基因频率分布的差异无统计学意义(P>0.05)。经Logistic回归分析,校正年龄、性别、体质指数等因素影响后,各位点基因型相对风险分析未发现与T2DM发生有关的基因型,而且通过年龄、性别、高血压病史、TG、TC进行的分层分析,也未发现各基因型之间发生T2DM风险的差异性。单倍体表型分析也未发现与T2DM有关的单倍型。结论RBP4-803,G>A;+5169,C>T;+6969,G>C多态性与中国苏州地区T2DM的发生无关。

关键词： 2型糖尿病视黄醛结合蛋白基因单核苷酸多态性

乙型肝炎病毒感染不同时期外周血单个核细胞微小RNA表达变化及其意义

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中华检验医学杂志 2012年第6期35卷 544-549页

作者：张静史进方高纯蒋敏王玉林甘建和江敏华顾国浩苏州大学附属第一医院检验科 215006 苏州大学附属第一医院感染科

目的探讨微小RNA（microRNAs，miRNAs）在乙型肝炎病毒（HBV）感染不同时期表达谱的变化及其意义。方法建立检测miRNA的RNADNA嵌合探针液态芯片（xMAP）法，对其特异性、重复性、准确性进行评估；2010年10月至2011年10月收集苏州大学附... 详细信息

目的探讨微小RNA（microRNAs，miRNAs）在乙型肝炎病毒（HBV）感染不同时期表达谱的变化及其意义。方法建立检测miRNA的RNADNA嵌合探针液态芯片（xMAP）法，对其特异性、重复性、准确性进行评估；2010年10月至2011年10月收集苏州大学附属第一医院住院和门诊急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎后肝硬化及肝癌患者各40例，健康对照40名；采用xMAP液态芯片技术检测外周血单个核细胞（PBMC）中miR-191、-223、-222、-145、-21、-31、-126、-20a、-372的表达水平，以miR-103为内参，将（靶miRNA分子平均荧光强度一对应本底平均荧光强度）／（miR-103平均荧光强度-对应本底平均荧光强度）的比值作为有效数据分析各组miRNAs表达特征，采用SPSS17．0统计软件，组间比较用单因素方差分析，若差异有统计学意义，用LSD-t法行组间两两比较。结果xMAP液态芯片法检测miRNAs特异性为100％；重复性实验证实高值参比品的检测信号CV值均小于5％，低值参比品的检测信号CV值均小于10％；准确性实验证实9种miRNA的回收率为（1004-5）％；miR-222（F=1．32，P〉0．05）、-191（F=1．98，P〉0．05）、-145（F=0．78，P〉0．05）、-21（F=0．64，P〉0．05）、-31（F=0．83，P〉0．05）、-372（F=1．75，P〉0．05）组间表达差异无统计学意义；miR-223组间表达差异有统计学意义（F=14．56，P〈0．05），在急性乙型肝炎组表达最高（15．37±4．01），肝癌组表达最低（6．91±3．18）；组间miR-126表达差异有统计学意义（F=17．43，P〈0．05），在健康对照组表达最高（6．33±2．75），肝癌组表达最低（2．38±1．07）；组间miR-20a表达差异有统计学意义（F=19．48，P〈0．05），健康对照组表达最低（0．33±0．18），肝癌组表达最高（0．81±0．24）。结论xMAP液态芯片法检测miRNA特异性强、准确度高、重复性好，适合大通量临床检测；miRNA的检测可为HBV感染的慢性化进展机制提供一个新的研究线索。

关键词：肝炎病毒,乙型白细胞,单核微RNAs 肝炎,乙型芯片分析技术

肺炎克雷伯菌分离株的耐药性与毒力基因分布及相互关系研究

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重庆医学 2016年第20期45卷 2820-2823页

作者：赵瑞珂李艳萌顾国浩韩清珍赵丽娜钱雪峰张险峰史进方徐杰苏州大学附属第一医院检验科 215006 山东省日照市人民医院检验科 276826

目的研究肺炎克雷伯菌的耐药性与毒力基因的分布及二者间的关系,为临床合理使用抗菌药物和控制感染提供依据。方法分离出172株肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法(K-B法)做药物敏感试验;聚合酶链反应(PCR)检测rmpA、aer-1、aer-2、magA、gyrB-... 详细信息

目的研究肺炎克雷伯菌的耐药性与毒力基因的分布及二者间的关系,为临床合理使用抗菌药物和控制感染提供依据。方法分离出172株肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法(K-B法)做药物敏感试验;聚合酶链反应(PCR)检测rmpA、aer-1、aer-2、magA、gyrB-2、ybt、wcaG毒力基因。结果 172株肺炎克雷伯菌分离株对头孢菌素类头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟与头孢曲松的耐药率分别为38.4%、34.9%、33.1%、32.0%。rmpA、aer-1、aer-2、magA、gyrB-2、ybt、wcaG毒力基因的阳性率分别为49.4%、55.8%、42.4%、16.3%、51.7%、53.5%、20.9%。肺炎克雷伯菌毒力基因分布与耐药性呈负相关,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肺炎克雷伯菌毒力基因数与耐药性密切相关,临床应注意抗菌药物的合理应用,防止肺炎克雷伯菌耐药性的产生和传播。

关键词：肺炎克雷伯菌毒力基因耐药性

检测到耐药细菌的重度烧伤患者呼吸道与创面细菌培养及其药敏试验结果分析

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山东医药 2016年第31期56卷 90-92页

作者：赵瑞珂顾国浩张险峰韩清珍钱雪峰李翔翔史进方徐杰刘冬梅苏州大学附属第一医院临床检测中心江苏苏州215006

目的观察检测到多重耐药细菌的重度烧伤患者呼吸道与创面致病菌培养情况,并分析其药敏特征。方法重度烧伤患者13例,收集患者呼吸道与创面送检标本分离出的致病菌株共356株。收集13例患者的356株分离菌株分布情况及药敏试验结果并分析。... 详细信息

目的观察检测到多重耐药细菌的重度烧伤患者呼吸道与创面致病菌培养情况,并分析其药敏特征。方法重度烧伤患者13例,收集患者呼吸道与创面送检标本分离出的致病菌株共356株。收集13例患者的356株分离菌株分布情况及药敏试验结果并分析。结果分离的致病菌356株中,革兰阳性菌5株(1.4%),革兰阴性菌351株(98.6%)。革兰阴性菌中,最常见的致病菌是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和黏质沙雷菌,近80%的菌株为多重耐药或泛耐药菌株,对头孢菌素、碳青霉烯类和喹诺酮类几乎全耐药,仅部分菌株对复方磺胺、庆大霉素与丁胺卡那敏感。患者呼吸道与创伤面分离菌中存在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌、耐碳青霉类阴沟肠杆菌和泛耐药鲍曼不动杆菌等多种多重耐药或泛耐药细菌交替感染;一个时间段内某个多重耐药菌株或泛耐药菌株可在不同患者间传播,并导致烧伤患者病情恶化甚至死亡。结论重度烧伤患者呼吸道与创面分离的致病菌绝大多数为革兰阴性菌,其中最常见的是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和黏质沙雷菌,多数为多重耐药或泛耐药菌株,且存在多种多重耐药或泛耐药细菌交替感染、传播的现象。

关键词：重度烧伤多重耐药病原谱耐药性药敏试验呼吸道创面

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万古霉素依赖性屎肠球菌的生物学特性观察

山东医药 2016年第43期56卷 26-29页

作者：韩清珍徐杰张险峰钱雪峰章杨史进方仇惠英苏州大学附属第一医院临床检测中心江苏苏州215006 苏州大学附属第一医院江苏省血液病研究所

目的观察万古霉素依赖性屎肠球菌(VDEfm-1501)的生物学特性。方法 1株从1例血液病患者尿液中分离到的依赖万古霉素生长的VDEfm-1501,先用VITEK 2细菌鉴定仪对其进行菌种鉴定,之后用PCR法和VITEK MS质谱鉴定法对其进一步验证。E-test法检... 详细信息

目的观察万古霉素依赖性屎肠球菌(VDEfm-1501)的生物学特性。方法 1株从1例血液病患者尿液中分离到的依赖万古霉素生长的VDEfm-1501,先用VITEK 2细菌鉴定仪对其进行菌种鉴定,之后用PCR法和VITEK MS质谱鉴定法对其进一步验证。E-test法检测VDEfm-1501万古霉素依赖生长特性及生长所需的最低万古霉素浓度;K-B法检测VDEfm-1501耐药性;PCR法检测VDEfm-1501耐药基因;多位点序列分型法对VDEfm-1501进行序列型(ST)分型;PCR法对VDEfm-1501的D-丙氨酸连接酶基因(ddl基因)进行测序。结果随着VDEfm-1501传代次数增多其万古依赖性逐渐减弱,传至第5代时这种依赖性不再明显,第6代时几乎完全消失;VDEfm-1501正常生长至少需要1.0μg/m L的万古霉素。VDEfm-1501对氨苄青霉素、庆大霉素及环丙沙星耐药,仅对利奈唑胺和四环素敏感;VDEfm-1501携带庆大霉素耐药基因[ace(6')-Ie-aph(2″)-la基因]。VDEfm-1501为耐万古霉素的肠球菌(VRE)ST型,属于CC17克隆复合体。VDEfm-1501的ddl基因942 bps位置上插入了"GG"。结论 VDEfm-1501依赖万古霉素生长的特性容易丢失,其生长所需的最低万古霉素浓度为1.0μg/m L。VDEfm-1501多重耐药,携带耐药基因ace(6')-Ie-aph(2")-la基因。VDEfm-1501属于VRE的ST型。ddl基因942 bps位置上"GG"的插入导致了VDEfm-1501的出现。

关键词：肠球菌耐万古霉素的肠球菌万古霉素依赖性肠球菌屎肠球菌万古霉素依赖性屎肠球菌万古霉素替考拉宁

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究

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重庆医学 2015年第34期44卷 4821-4824页

作者：李艳萌赵瑞珂黄宝丽张险峰韩清珍顾国浩陈泽良史进方徐杰苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215006 军事医学科学院疾病预防控制所传染病控制中心北京100071

目的对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据。方法采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MR... 详细信息

目的对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据。方法采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因。结果药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0%,对克林霉素耐药率为58.8%,对复方磺胺类耐药率为13.8%,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75%、SCCmecⅢ型(13.75%)、SCCmecⅤ型(12.5%)。Spa分型,28株为t2460型(35%)、9株为t002型(11%)、6株为t030型(8%)、7株为t632型(9%)、5株为t037型(6%),其他Spa型相对分散。pvl基因阳性率为7.5%(6株),tsst基因为阴性。结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MRSA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药。

关键词：交叉感染葡萄球菌,金黄色 SCCmec分型 Spa分型耐药性

HLA—B27亚型与强直性脊柱炎相关性分析

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苏州医学 2007年第2期30卷 91-93页

作者：喻霞云顾国浩高纯史进方狄文英张俭张辉苏州大学附属第一医院检验科 215006 苏州市中心血站检验科 215006

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）与HLA—B27密切相关，而HLA—B27并不是单一性抗原，它是由多种亚型构成的一组抗原的总称，各亚型核苷酸序列存在着个别位点上的差异，在不同地区、不同种族的人群HLA—B27亚型基因分布频率... 详细信息

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）与HLA—B27密切相关，而HLA—B27并不是单一性抗原，它是由多种亚型构成的一组抗原的总称，各亚型核苷酸序列存在着个别位点上的差异，在不同地区、不同种族的人群HLA—B27亚型基因分布频率不相同。本文为了解苏州地区汉族人群的正常健康人和AS患者的HLA—B27亚型基因分布的特点，

关键词：强直性脊柱炎 B27 HLA 亚型基因分布频率汉族人群核苷酸序列正常健康人

标本保存温度和保存时间对流式细胞仪检测淋巴细胞亚群及人类白细胞抗原B27结果的影响

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中国血液流变学杂志 2016年第3期26卷 354-358页

作者：刘冬梅黄宝丽史进方苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215006

目的通过分析标本保存温度和保存时间对流式细胞仪检测淋巴细胞亚群和人类白细胞抗原B27（HLA-B27）结果的影响，为流式细胞仪检测淋巴细胞亚群及HLA-B27提供标准化依据。方法采用流式细胞仪连续5d检测分别保存于24℃和4℃条件下的健康... 详细信息

目的通过分析标本保存温度和保存时间对流式细胞仪检测淋巴细胞亚群和人类白细胞抗原B27（HLA-B27）结果的影响，为流式细胞仪检测淋巴细胞亚群及HLA-B27提供标准化依据。方法采用流式细胞仪连续5d检测分别保存于24℃和4℃条件下的健康体检者外周血淋巴细胞亚群数量及HLA-B27阳性标本荧光强度，分析标本保存温度和保存时间对检测结果的影响。结果24℃条件下标本保存第4天起，淋巴细胞亚群检测结果差异有统计学意义（P〈0．01），4℃条件下标本保存第2天起差异有统计学意义（P〈0．05）；24℃和4。c条件下，HLA-B27荧光强度值均第2天起差异即有统计学意义（P〈0．01）。结论流式细胞仪检测淋巴细胞亚群，24℃条件下标本可保存3d，4℃条件保存的标本不宜用于淋巴细胞亚群检测；HLA-B27标本须当天检测，不宜保存，否则会影响检测结果的可靠性。

关键词：流式细胞仪淋巴细胞亚群 HLA-B27

宫颈癌组织中B7-H3蛋白的表达变化及其与HPV感染的关系

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山东医药 2011年第30期51卷 4-5页

作者：蔡惠芬史进方顾国浩卢春冬任玉香吴凤英第三军医大学附属第一医院西南医院重庆400038 苏州市苏州大学附属第一医院

目的观察宫颈癌组织中的B7家族同族3(B7-H3)蛋白的表达变化,探讨其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法采用免疫组化SP法检测50例宫颈癌组织肿瘤细胞和血管内皮细胞(宫颈癌组)中及15例子宫肌瘤组织(对照组)中的B7-H3蛋白。采用人乳头... 详细信息

目的观察宫颈癌组织中的B7家族同族3(B7-H3)蛋白的表达变化,探讨其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法采用免疫组化SP法检测50例宫颈癌组织肿瘤细胞和血管内皮细胞(宫颈癌组)中及15例子宫肌瘤组织(对照组)中的B7-H3蛋白。采用人乳头状瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒检测两组HPV感染情况。结果宫颈癌组肿瘤细胞B7-H3蛋白阳性41例,内皮细胞B7-H3蛋白阳性为24例;对照组宫颈组织细胞B7-H3蛋白阳性为3例,内皮细胞中无B7-H3表达,两组相比,P均<0.05。宫颈癌组中HPV感染25例;对照组中无HPV感染者。宫颈癌组肿瘤细胞及血管内皮细胞中B7-H3蛋白表达与HPV感染呈正相关(r分别为0.364 4、0.400 3,P均<0.05)。结论宫颈癌肿瘤细胞及血管内皮细胞中B7-H3呈高表达,且与HPV感染有关。

关键词：宫颈肿瘤 B7家族同族人乳头瘤病毒