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T细胞亚群及相关免疫分子在生理性衰老过程中的调节性表达及其意义

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T细胞亚群及相关免疫分子在生理性衰老过程中的调节性表达及其意义

作者：史进方苏州大学

学位级别：硕士

生理性衰老（Aging or Senescence）是指伴随年龄增长的全方位多系统的由基因严格控制的循序渐进的生理性的自然过程,其普遍性、内因性、进行性及有害性作为衰老的标准被普遍接受。在长期的对于衰老机制的探索过程中形成了各种流派、众... 详细信息

生理性衰老（Aging or Senescence）是指伴随年龄增长的全方位多系统的由基因严格控制的循序渐进的生理性的自然过程,其普遍性、内因性、进行性及有害性作为衰老的标准被普遍接受。在长期的对于衰老机制的探索过程中形成了各种流派、众多假说,而免疫功能降低导致机体衰老的假说愈来愈引起人们的关注。许多研究表明老年人较年轻人更易于感染各种疾病,尤其机体对从未接触过的新的抗原物质免疫应答明显降低,而疾病的发生发展不仅使得老年群体生活质量下降,甚至有可能威胁生命,成为机体生理性衰老的重要原因之一。虽然免疫功能的降低在疾病的发生发展中起重要作用已为大家接受,但对于其在生理性衰老过程中作用的机制尚未完全明了。最近的研究显示,与年轻个体相比较,老年群体T细胞亚群发生了明显变化,表现为CD3+T细胞、CD4+T细胞降低,而CD8+T细胞百分数增高,初始T细胞降低而记忆T细胞增加,CD28在老年人T细胞上的表达降低,血浆中IL-2水平下降,而对于IL-4及IL-6大部分的观点认为伴随年龄增高而增高,但也有持不同观点者。本研究进一步观察了T细胞及其各亚群的相对数及绝对数在生理性衰老过程中的变化,CD28分子在不同T细胞亚群上的表达以及可溶性

关键词：生理性衰老免疫机制 T细胞亚群细胞因子流式细胞仪

白细胞介素2、4、6水平在衰老过程中的表达及其意义

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中华老年医学杂志 2006年第1期25卷 46-47页

作者：史进方顾国浩张学光江苏省苏州大学附属第一医院检验科江苏省临床免疫学重点实验室 215006 江苏省苏州大学生命科学院

细胞因子是一组由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成和分泌的具有多种生物学活性的蛋白质或多肽,通过与相应靶细胞上的特异性受体结合产生不同的生物学效应,具有介导和调节免疫应答及炎症反应、刺激造血、参与组织修复等功能。

关键词：白细胞介素2 衰老过程其意义非免疫细胞水生物学活性生物学效应细胞因子受体结合炎症反应

低功率激光照射促进大鼠急性骨骼肌钝挫伤肌肉再生

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苏州大学学报（医学版） 2008年第6期28卷 889-892,896,F0002页

作者：罗丽张林孙中文史进方苏州大学体育学院运动人体科学系江苏苏州215021 苏州卫生职业技术学院检验药学系江苏苏州215104 苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215006

目的探讨635 nm GaAlAs激光照射对急性骨骼肌钝挫伤大鼠组织学愈合进程及腓肠肌Ⅱb型肌球蛋白重链(MHC-Ⅱb)mRNA表达的影响。方法建立大鼠急性骨骼肌钝挫伤模型,激光治疗组采用美国Erchonia EML(ML2)型低功率GaALAs激光器在钝挫伤局部... 详细信息

目的探讨635 nm GaAlAs激光照射对急性骨骼肌钝挫伤大鼠组织学愈合进程及腓肠肌Ⅱb型肌球蛋白重链(MHC-Ⅱb)mRNA表达的影响。方法建立大鼠急性骨骼肌钝挫伤模型,激光治疗组采用美国Erchonia EML(ML2)型低功率GaALAs激光器在钝挫伤局部进行照射,正常对照组、自然愈合组不进行照射。通过HE染色光镜观察、透射电镜观察和实时荧光定量PCR法,对损伤区域腓肠肌进行形态学和分子生物学研究。结果HE染色光镜观察和电镜观察结果显示,激光照射组肌肉再生速度显著快于自然愈合组,且胶原纤维生成很少;激光治疗组腓肠肌MHC-Ⅱb mRNA的表达量在损伤后第2、3、7天显著高于自然愈合组。结论635 nm GaAlAs激光能促进急性骨骼肌钝挫伤模型大鼠腓肠肌MHC-Ⅱb mRNA的表达,从而促进肌肉再生,提高愈合质量。

关键词：低功率激光急性骨骼肌钝挫伤 Ⅱb型肌球蛋白重链实时荧光定量PCR 大鼠

碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检测T细胞亚群技术的改进

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临床检验杂志 2000年第2期18卷 110-117页

作者：彭群新顾国浩史进方程利苏州医学院附一院检验科!江苏苏州215006

我们自1993年以来,对碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(AppAAp)桥联酶技术反复摸索,对原技术 [1]作不断改进,改进要点介绍如下:(1)玻片预处理的改进:原法按稀盐酸浸泡→水洗→95%乙醇浸泡处理,此处理的玻片30%左右出现染色不佳,细胞脱落等情况.

关键词：碱性磷酸酶细胞粘附片剂剂型

共信号分子CD40/CD40L质粒标准品的构建

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第44期13卷 8675-8679页

作者：王亮史进方蔡惠芬蒋敏顾国浩苏州市木渎医院检验科江苏省苏州市215101 苏州大学附属第一医院检验科江苏省临床免疫学实验室江苏省苏州市215006

背景:目前,对CD40/D40L的研究主要集中在可溶性和蛋白方面,对其在转录水平上的研究文献不多,可能与其无商品化质粒标准品有关。目的:构建检测CD40/CD40L mRNA表达水平差异的标准品。设计、时间及地点:单一样本实验,于2009-04在苏州大学... 详细信息

背景:目前,对CD40/D40L的研究主要集中在可溶性和蛋白方面,对其在转录水平上的研究文献不多,可能与其无商品化质粒标准品有关。目的:构建检测CD40/CD40L mRNA表达水平差异的标准品。设计、时间及地点:单一样本实验,于2009-04在苏州大学附属第一医院检验科实验室完成。材料:取手术切除的子宫肌瘤组织,经患者知情同意。方法:以手术切除的子宫肌瘤组织细胞的总RNA为模板、Random6mers为引物反转录合成cDNA,用该cDNA为模板PCR扩增人CD40/CD40L基因相应的cDNA片断,构建PMD-18-CD40/CD40L重组质粒,鉴定测序后,用荧光定量PCR制作标准曲线。主要观察指标:①RNA质量检测结果。②扩增的目的片段电泳结果。③CD40/CD40L基因测序结果。④标准品的扩增情况。结果:组织提取的总RNA完整性良好,构建的CD40/CD40L质粒经PCR扩增后分别得到136bp,200bp的清晰条带,测序结果与目的片段完全一致,且质粒的原始浓度为2.66×1013、2.45×1013copies/mL,倍比稀释至2.0×106copies/mL均能得到良好的标准曲线(R2=1)。结论:实验成功构建了CD40/CD40L基因荧光定量PCR标准质粒。

关键词： CD40/CD40L T-A克隆荧光定量PCR

单核苷酸多态性分析技术在2型糖尿病易感基因研究中的应用特点

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第13期11卷 2559-2562页

作者：杨春香史进方顾国浩苏州大学附属第一医院检验科(江苏省临床免疫学重点实验室) 江苏省苏州市215006

目的:总结单核苷酸多态性分析技术在2型糖尿病易感基因研究中的应用成果。资料来源:应用计算机检索2000-01/2006-10Pubmed数据库与2型糖尿病易感基因相关的文献,检索词“type2diabetes,susceptibility gene”,并限定语种为“English”... 详细信息

目的:总结单核苷酸多态性分析技术在2型糖尿病易感基因研究中的应用成果。资料来源:应用计算机检索2000-01/2006-10Pubmed数据库与2型糖尿病易感基因相关的文献,检索词“type2diabetes,susceptibility gene”,并限定语种为“English”。同时检索2000-01/2006-10CNKI数据库相关文献,检索词“SNP,检测方法”,并限定语种为中文。同时手工检索相关书籍。资料选择:主要纳取实用性强和技术较新的单核苷酸多态性检测方法以及其在2型糖尿病易感基因研究中的具体应用。排除重复文献。资料提炼:对选择的文献进一步查找全文,共提炼出28篇文章进行综述,其中8篇中文文献,20篇英文文献。资料综合:2型糖尿病属于复杂遗传病,探索其基因基础,可为新的治疗方案提供资料。单核苷酸多态性分析技术可观察2型糖尿病与特殊的等位基因、基因型以及单倍体之间的关系,在研究易感基因方面有重要作用。而目前常用的单核苷酸多态性分析技术有:直接测序技术、限制性片段长度多态性分析技术、TaqMan探针技术、质谱分析法、基因芯片技术、分子信标技术、变性高效液相色谱技术、连接酶检测反应技术和多靶点液相芯片法技术等。结论:单核苷酸多态性分析技术作为易感基因研究的新技术,其应用日益广泛和深入。人们已发现一些基因的单核苷酸多态性位点的多态性可能与2型糖尿病的发生密切相关。所以,如何选择合适的单核苷酸多态性分析技术对糖尿病的易感基因进行深入研究是至关重要的。

关键词： 2型糖尿病单核苷酸多态性检测技术

膜型和可溶性CD28分子在衰老过程中的调节性表达

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中华老年医学杂志 2006年第4期25卷 288-289页

作者：史进方顾国浩孙中文张学光江苏省苏州大学附属第一医院检验科江苏省临床免疫学重点实验室 215006 江苏省苏州大学生命科学院 215006

　　为研究CD28分子在衰老过程中的表达情况,我们于2004年9～12月选择了513名健康人外周血标本进行膜型CD28分子（membrane CD28,mCD28）的表达以及其中300名健康人外周血血清进行可溶性CD28分子（sCD28）含量的测定,报道如下。

关键词： CD28分子衰老过程可溶性膜型调节性外周血血清表达情况健康人血标本

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生物分子在生理性衰老中的研究进展

中华老年医学杂志 2014年第4期33卷 447-448页

作者：赵春楠史进方顾国浩苏州大学附属第一医院检验科 215006

解释衰老现象的学说复杂繁多，各种衰老学说也都有一定的科学依据，我们拟从炎症、酶类、激素等方面对与衰老有关的生物分子的研究进展做一综述。

关键词：衰老生物学标记物

可溶性B7-H4在食管癌患者血清中的表达分析

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广东医学 2009年第6期30卷 925-926页

作者：蒋敏顾国浩张光波史进方苏州大学附属第一医院检验科江苏省临床免疫重点实验室江苏苏州215006

目的分析评价血清中可溶性B7-H4(soluble B7-H4,sB7-H4)在食管癌患者血清中的表达及其诊断价值。方法采用ELLISA法检测分析46例食管癌患者和35例健康对照者血清中sB7-H4含量,利用受试者工作特性曲线(ROC),根据曲线下面积(AUC)分析sB7-H... 详细信息

目的分析评价血清中可溶性B7-H4(soluble B7-H4,sB7-H4)在食管癌患者血清中的表达及其诊断价值。方法采用ELLISA法检测分析46例食管癌患者和35例健康对照者血清中sB7-H4含量,利用受试者工作特性曲线(ROC),根据曲线下面积(AUC)分析sB7-H4作为食管癌诊断标记分子的诊断价值。同时检测上述标本中CEA的含量,将两者的诊断效率进行比较。结果与健康对照相者比,食管癌患者血清中sB7-H4显著升高(P<0.001),其在食管癌诊断中的灵敏度(93%)和准确性(87%)均高于CEA。结论sB7-H4是一个有临床应用前景的食管癌诊断血清标记分子。

关键词：可溶性B7-H4 食管肿瘤血清诊断