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聚合酶链式反应快速检测畜肉食品中鸭源性成分

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食品科学 2014年第10期35卷 163-165页

作者：史艳宇刘金华王莹邴炜华蕾刘晓晖王颖周亮王潇吉林省产品质量监督检验院吉林长春130022 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

目的:建立一种快速、特异、灵敏的鸭源性成分检测方法。方法:以鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因序列为靶位点设计引物,进行聚合酶链式反应扩增,建立鸭源性成分检测方法;以常见畜禽肉,包括羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿... 详细信息

目的:建立一种快速、特异、灵敏的鸭源性成分检测方法。方法:以鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因序列为靶位点设计引物,进行聚合酶链式反应扩增,建立鸭源性成分检测方法;以常见畜禽肉,包括羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿肉等参考动物物种进行特异性检测;以50 mg/kg羊肉DNA作为稀释液,对鸭肉DNA进行梯度稀释,检测灵敏度。结果:该方法能够有效的对鸭源性成分进行快速检测,具有较强的特异性,灵敏度较高(0.1μg/kg),且羊肉成分的存在对鸭肉灵敏度检测没有影响,可以快速、准确检测畜肉食品中掺杂的鸭源性成分。

关键词：鸭源性成分细胞色素C氧化酶Ⅲ基因聚合酶链式反应检测

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金黄色葡萄球菌便携式计数测试片的研制

现代食品科技 2020年第3期36卷 296-301,218页

作者：董娜崔雯雯徐琳琳郑慧纹史艳宇陈萍吉林农业大学食品科学与工程学院吉林长春130118 吉林省食品检验所吉林长春130022

为了研制新型便携式计数测试片检测食品中金黄色葡萄球菌,本文通过正交试验对金黄色葡萄球菌测试片中培养基成份进行优化;研究冷水可溶性凝胶的复配比例,以及优化后的表面活性剂对复配凝胶质构特性的影响。结果表明,金黄色葡萄球菌测试... 详细信息

为了研制新型便携式计数测试片检测食品中金黄色葡萄球菌,本文通过正交试验对金黄色葡萄球菌测试片中培养基成份进行优化;研究冷水可溶性凝胶的复配比例,以及优化后的表面活性剂对复配凝胶质构特性的影响。结果表明,金黄色葡萄球菌测试片中培养基组分为胰蛋白胨10 g/L,牛肉膏5 g/L,酵母膏1 g/L,甘氨酸12 g/L,氯化锂5 g/L,尿素0.2 g/L,亚碲酸钾10 mg/L,卵黄粉6 g/L,表面活性剂最优添加量为D-甘露醇4 g/L,丙酮酸钠5 g/L;冷水可溶性凝胶复配比例为瓜尔胶:聚丙烯酸钠=7:3;添加优化后的D-甘露醇和丙酮酸钠的复合冷水可溶性凝胶可获得最优的凝胶质构,其硬度和黏性分别为1362.04 g和630.41 g。将本研究的测试片与国标平板计数方法相比,其检测结果相关性良好(R^2=0.995),可达到相同水平的检出限2CFU/m L和灵敏度(100%)。本文研究的金黄色葡萄球菌测试片可应用于食品中金黄色葡萄球菌的定量检测。

关键词：金黄色葡萄球菌测试片冷水可溶性凝胶质构特性

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分子生物技术在芽孢杆菌快速鉴定的应用进展

中国卫生检验杂志 2012年第2期22卷 412-413,416页

作者：李媛媛关树文安伟史艳宇王伟董巧红张爽辛若竹吉林省产品质量监督检验院长春130022 吉林大学生命科学学院长春130021 吉林省梅河口市产品质量检验所梅河口135000

芽孢杆菌作为益生菌的一种，因其特有的生物特性成为研究热点，并作为微生物菌剂广泛应用于饲料添加剂、植物病害防治和污水处理。芽孢杆菌包括非致病性的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、多粘... 详细信息

芽孢杆菌作为益生菌的一种，因其特有的生物特性成为研究热点，并作为微生物菌剂广泛应用于饲料添加剂、植物病害防治和污水处理。芽孢杆菌包括非致病性的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌及对人和动物致病的炭疽芽孢杆菌，及可引起食物中毒的蜡状芽孢杆菌等近50种^[1-3]。

关键词：芽孢杆菌鉴定分子生物学

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乳杆菌计数测试片凝胶特性与显色特性的研究

中国乳品工业 2020年第4期48卷 8-12页

作者：何湃陈萍王尹潇董娜任常菲史艳宇吉林农业大学食品科学与工程学院长春130022 吉林省食品检验所长春130012

本研究以GB 4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》中的MRS培养基为基础培养基,通过对乳杆菌计数测试片凝胶特性和显色特性研究,研制操作简便、显色清晰、结果准确的乳杆菌计数测试片,对乳中乳杆菌进行计数检验... 详细信息

本研究以GB 4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》中的MRS培养基为基础培养基,通过对乳杆菌计数测试片凝胶特性和显色特性研究,研制操作简便、显色清晰、结果准确的乳杆菌计数测试片,对乳中乳杆菌进行计数检验。结果表明:本研究主要对乳杆菌计数测试片的凝胶组成及显色成分进行研究,确定凝胶组成:瓜尔胶、结冷胶、聚丙烯酸钠、卡拉胶4种复配冷水可溶性凝胶,最优凝胶特性为凝胶速度0.5 s,吸水率151.52 mL/g,保水率89.22 mL/g,浊度81%。显色成分为显色剂2,3,5-氯化三苯基四氮唑,添加量为0.08 g/L。乳杆菌计数测试片法与国标方法比较,准确率达到99%,其最低检测限达3 CFU/mL。

关键词：乳杆菌凝胶质构显色特性测试片

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黑曲霉实时荧光PCR检测方法的建立

中国生物制品学杂志 2009年第3期22卷 291-293页

作者：刘金华贺丹史艳宇黄宇王丽任常菲吉林大学基础医学院病原生物学教研室长春130021 吉林出入境检验检疫局长春130062 吉林省产品质量监督检验院长春130022

目的建立黑曲霉实时荧光PCR检测方法。方法对6种主要病原曲霉(黑曲霉、烟曲霉、杂色曲霉、构巢曲霉、土曲霉及黄曲霉)的GAPDH基因序列进行比对分析,选择黑曲霉特异位点设计引物和探针,对黑曲霉进行实时荧光PCR扩增,并检测该方法的灵敏... 详细信息

目的建立黑曲霉实时荧光PCR检测方法。方法对6种主要病原曲霉(黑曲霉、烟曲霉、杂色曲霉、构巢曲霉、土曲霉及黄曲霉)的GAPDH基因序列进行比对分析,选择黑曲霉特异位点设计引物和探针,对黑曲霉进行实时荧光PCR扩增,并检测该方法的灵敏度及特异性。结果该方法可检出2.78×10-10μg/ml的黑曲霉基因组DNA;对亲源关系较近的11株不同种曲霉及4株其他属临床常见的病原真菌进行实时荧光PCR检测,未发现有交叉反应。结论已建立了灵敏度高、特异性好的快速检测黑曲霉的实时荧光PCR方法。

关键词：黑曲霉实时荧光PCR 特异性灵敏度

几种常见肠道致病菌多重PCR检测的效果评价

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吉林大学学报（医学版） 2012年第2期38卷 382-385页

作者：刘金华史艳宇马路遥魏春艳邵丽筠王海龙吉林出入境检验检疫局吉林长春130062 吉林省产品质量监督检验院吉林长春130022 吉林大学药学院生物医学工程教研室吉林长春130021 内蒙古自治区锡林郭勒盟东乌珠穆沁旗公安局内蒙古乌里雅斯太026300 吉林大学再生医学科学研究所吉林长春130021

目的:建立一种应用多重PCR技术,能够同时快速准确检测大肠杆菌O157、副溶血性弧菌、普通变形杆菌和单核细胞增生李斯特菌4种常见肠道致病菌的方法。方法:根据大肠杆菌O157、副溶血性弧菌、普通变形杆菌、单核细胞增生李斯特菌的特异基... 详细信息

目的:建立一种应用多重PCR技术,能够同时快速准确检测大肠杆菌O157、副溶血性弧菌、普通变形杆菌和单核细胞增生李斯特菌4种常见肠道致病菌的方法。方法:根据大肠杆菌O157、副溶血性弧菌、普通变形杆菌、单核细胞增生李斯特菌的特异基因作为目的基因,设计相应的引物,并进行实验优化以确立对4种肠道致病菌的检测体系。并对市售经果汁样品人工随机染菌后进行模拟样品验证。结果:该多重PCR方法能够有效地扩增出相应致病菌的目的基因片段,其中单核细胞增生李斯特菌扩增片段为155 bp,大肠杆菌O157扩增片段为366 bp,变形杆菌扩增片段为522 bp,副溶血弧菌扩增片段为199 bp,且特异性较强。对4种目标菌的检测灵敏度可达到***-1。能够检测出模拟样品中随机接种的任意3种细菌。结论:利用建立的多重PCR可以快速、准确地筛查大肠杆菌O157、副溶血弧菌、普通变形杆菌和单核细胞增生李斯特菌。

关键词：多重聚合酶链反应大肠杆菌O157 副溶血性弧菌普通变形杆菌单核细胞增生李斯特菌

蜜蜂黑蜂王台病毒RT-PCR快速检测方法的建立

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中国生物制品学杂志 2011年第10期24卷 1227-1229页

作者：薛力刚史艳宇祝长青宋战昀王振国刘金华吉林农业大学发展学院长春130600 吉林省产品质量监督检验院长春130022 江苏出入境检验检疫局南京210001 吉林出入境检验检疫局长春130062

目的建立蜜蜂黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)的RT-PCR快速检测方法。方法根据BQCV全基因组序列,在其3′端1 000 bp的区域内设计1对特异性PCR引物,从受BQCV感染的蜜蜂的蛹样品中提取总RNA,进行RT-PCR,并对该法的特异性、敏... 详细信息

目的建立蜜蜂黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)的RT-PCR快速检测方法。方法根据BQCV全基因组序列,在其3′端1 000 bp的区域内设计1对特异性PCR引物,从受BQCV感染的蜜蜂的蛹样品中提取总RNA,进行RT-PCR,并对该法的特异性、敏感性及重复性进行验证。结果从BQCV全基因组序列中可扩增出700 bp的基因条带。该方法可扩增0.1 ng的BQCV DNA;仅能在BQCV中扩增出700 bp的目的基因条带,在蜜蜂急性麻痹病病毒、残翼病病毒、蜜蜂囊状幼虫病病毒中均未扩增出目的基因条带;对相同样品进行多次检测,均在700 bp处出现目的条带。结论已成功建立BQCV RT-PCR快速检测方法,该方法特异性强,敏感性高,重复性好,可用于黑蜂王台病的快速诊断和混合感染的鉴别诊断。

关键词：黑蜂王台病病毒逆转录聚合酶链式反应

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加强教师队伍建设提高学校教学质量 001

食品中幽门螺杆菌荧光PCR快速检测方法的建立及评价

朔州日报

作者：马晓蓉康利荣史艳宇

本报讯 (记者　马晓蓉　实习生　康利荣　史艳宇)　7月24日，副市长王贵平带领市教育部门负责人深入平鲁区和朔城区就教育工作进行调研。王贵平指出，要留住优秀学生，必须提高教学质量。教学质量的提高，教师是关键，必须加强教师队伍建?

关键词：

来源： cnki报纸评论

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cnki报纸

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吉林大学学报（医学版） 2011年第1期37卷 175-178页

作者：刘静秋史艳宇刘金华邴炜华蕾杨波朱颖王洪昌吉林省产品质量监督检验院吉林长春130022 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

目的:建立一种快速、特异、灵敏的幽门螺杆菌检测方法,并对方法进行评价,为快速、准确、有效检测幽门螺杆菌方法的建立提供依据。方法:以尿素酶基因序列为靶位点,用Primer Express 3.0软件设计引物及探针,经Blast软件对相似序列搜索后,... 详细信息

目的:建立一种快速、特异、灵敏的幽门螺杆菌检测方法,并对方法进行评价,为快速、准确、有效检测幽门螺杆菌方法的建立提供依据。方法:以尿素酶基因序列为靶位点,用Primer Express 3.0软件设计引物及探针,经Blast软件对相似序列搜索后,筛选出一套最优与常见致病菌无交叉反应的引物;分别用食品中常见致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、沙门菌和空肠弯曲菌DNA进行特异性实验;将计数过的幽门螺杆菌菌悬液与牛奶样品混合液,梯度稀释后分别提取DNA进行荧光PCR扩增,确定检测方法的灵敏度;对人工污染幽门螺杆菌的生奶及生肉样品进行检测验证方法的可行性。结果:利用尿素酶基因设计的引物及探针仅对幽门螺杆菌有扩增曲线,而其他对照以及阴性对照均未有明显扩增曲线;能够对生奶及生肉中污染的幽门螺杆菌进行有效扩增;设计的引物对幽门螺杆菌的检测敏感性可达到***-1,检测可以在4d内完成。结论:荧光PCR方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测食品中污染的幽门螺杆菌。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶基因荧光PCR 食品