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组织工程血管模型中的细胞粘附

中国动脉硬化杂志 2004年第4期12卷 399-401页

作者：刘录山王贵学危当恒唐朝克王佐易光辉徐世荣杨永宗重庆大学教育部生物力学与组织工程重点实验室暨重庆大学生物工程学院重庆市400444 南华大学心血管病研究所湖南省衡阳市421001

本文运用一种模拟血流动力学状态的平板流动腔血管模型 ,研究在不同剪切力作用和不同处理因素对内皮细胞的粘附保留状态的影响。用不同因素处理细胞载片后在其上培养细胞 ,再用同一剪切力作用 ,或者用同一底物处理细胞载片后用不同剪切... 详细信息

本文运用一种模拟血流动力学状态的平板流动腔血管模型 ,研究在不同剪切力作用和不同处理因素对内皮细胞的粘附保留状态的影响。用不同因素处理细胞载片后在其上培养细胞 ,再用同一剪切力作用 ,或者用同一底物处理细胞载片后用不同剪切力作用。结果发现 ,在生理剪切力条件下 ,低剪切力 (2 .1Pa)作用时细胞保留率为 90 .38%± 2 .0 9% ,比高剪切力 (4 .2Pa)作用时细胞保留率 (4 6 .5 8%± 1.98% )要高 ;多聚赖氨酸处理时的细胞保留率 (90 .38%± 2 .0 9% )和纤维连接素处理时的细胞保留率 (91.5 9%± 1.2 4 % )比Ⅳ型胶原处理时细胞保留率 (19.77%± 1.0 5 % )要高 ,且不同底物对细胞脱落行为有不同影响 ;而血管内皮生长因子基因转染对细胞粘附无明显影响。此结果提示 ,低剪切力、多聚赖氨酸和纤维连接素有利于组织工程血管模型中的细胞粘附。

关键词：生物医学工程学组织工程血管模型中细胞粘附的变化平行平板流动腔剪切力组织工程血管模型细胞粘附

低密度脂蛋白对血管内皮细胞骨架及粘附能力的影响

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医用生物力学 2006年第2期21卷 105-110页

作者：危当恒王贵学黄华刘录山王佐唐朝克重庆大学生物工程学院生物力学与组织工程教育部重点实验室

目的研究低密度脂蛋白(LDL)诱导的血管内皮细胞脂质及细胞骨架的改变及其对内皮细胞粘附的影响。方法不同浓度LDL(0mg/L,50mg/L,100mg/L,150mg/L)孵育内皮细胞24h。采用高效液相色谱法检测细胞内胆固醇酯;油红O检测细胞内脂质;FITC标记... 详细信息

目的研究低密度脂蛋白(LDL)诱导的血管内皮细胞脂质及细胞骨架的改变及其对内皮细胞粘附的影响。方法不同浓度LDL(0mg/L,50mg/L,100mg/L,150mg/L)孵育内皮细胞24h。采用高效液相色谱法检测细胞内胆固醇酯;油红O检测细胞内脂质;FITC标记的鬼笔环肽进行F-actin纤维荧光标记;流室系统检测生理剪切流场下(1.5Pa)内皮细胞的粘附。结果不同浓度LDL(50mg/L,100mg/L,150mg/L)均导致细胞内胆固醇酯含量增加,其结果分别为(80.3±1.5)μg/g,(115.5±2.2)μg/g和(160.6±3.2)μg/g,与对照组(61.3±1.6)μg/g相比P<0.05;油红O染色内皮细胞内脂质含量明显增加。荧光染色发现,对照组内皮细胞的F-actin纤维主要富集在相邻细胞膜的周边,细胞质中未见密集的F-actin纤维;随着LDL浓度的增加,内皮细胞内F-actin纤维形态和分布发生明显的改变,出现应力纤维;在高浓度LDL下,大部分细胞周边的F-actin纤维消失,胞质中出现密集的应力纤维。在生理剪切流场下,高浓度LDL降低内皮细胞的粘附与保留,150mg/L组内皮细胞的粘附与保留仅50%±10%,对照组为93%±5%。结论LDL增加内皮细胞中脂质含量,损伤细胞骨架,降低内皮细胞的顺应性,降低内皮细胞的粘附。

关键词：内皮细胞低密度脂蛋白细胞骨架剪切力

肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响

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中国动脉硬化杂志 2004年第5期12卷 541-544页

作者：甘露刘录山唐朝克万载阳危当恒万腊香杨永宗南华大学心血管病研究所湖南省衡阳市421001

探讨大鼠腹腔肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响。用大鼠腹腔肥大细胞上清液和氧化型低密度脂蛋白处理平滑肌细胞 4 8h后 ,逆转录聚合酶链反应检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,免疫细胞化学染色... 详细信息

探讨大鼠腹腔肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响。用大鼠腹腔肥大细胞上清液和氧化型低密度脂蛋白处理平滑肌细胞 4 8h后 ,逆转录聚合酶链反应检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,免疫细胞化学染色检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果发现 ,与对照组相比 ,处理组平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达降低 ,免疫细胞化学染色后 ,处理组细胞浆内棕色颗粒比对照组少且染色浅。结果提示 ,肥大细胞在体外抑制平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达 ,并且能协同氧化型低密度脂蛋白对Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的抑制作用。

关键词：病理学与病理生理学肥大细胞对胶原表达的影响逆转录聚合酶链反应肥大细胞平滑肌细胞胶原动脉粥样硬化

剪切流场中低密度脂蛋白对内皮细胞迁移的影响

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剪切流场中低密度脂蛋白对内皮细胞迁移的影响

第八届全国生物力学学术会议

作者：黄华王贵学危当恒唐朝君邱菊辉邓林红杨力邓小燕樊瑜波重庆大学生物工程学院北京航空航天大学生物工程系

前言:内皮细胞是血管壁的重要组成成分,其迁移特性对于内皮细胞受损的血管壁再内皮化具有重要意义。由于内皮细胞与血液有着充分的接触,其迁移过程必然受到多种因素的影响。在血管内的浓度极化区域中,低密度脂蛋白长时间滞留使得内皮细...

前言:内皮细胞是血管壁的重要组成成分,其迁移特性对于内皮细胞受损的血管壁再内皮化具有重要意义。由于内皮细胞与血液有着充分的接触,其迁移过程必然受到多种因素的影响。在血管内的浓度极化区域中,低密度脂蛋白长时间滞留使得内皮细胞顺应流场的变形性和粘附力等降低,导致内皮细胞在剪切应力作用下更易于受到损伤并导致脱落。内皮细胞迁移特性的变化对损伤处再内皮化具有重要意义,在一定程度上

关键词：

清道夫受体AI转基因小鼠对动脉粥样硬化具有易感性

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中国动脉硬化杂志 2002年第3期10卷 185-189页

作者：万腊香陈修 Sookja Kim Chung 吴孟津万载阳危当恒王建杨永宗南华大学心血管病研究所湖南省衡阳市421001 中南大学湘雅医学院药理学教研室湖南省长沙市410078 香港大学分子生物学研究所

通过本室已建立的人清道夫受体AI转基因小鼠对动脉粥样硬化的易感性的研究 ,以阐明人清道夫受体在动脉粥样硬化中的作用。为此 ,用人清道夫受体转基因小鼠 (F3)的纯合子 (TghSR AI+ +)、杂合子 (TghSR AI+ )、聚合酶链反应阴性 (TghSR ... 详细信息

通过本室已建立的人清道夫受体AI转基因小鼠对动脉粥样硬化的易感性的研究 ,以阐明人清道夫受体在动脉粥样硬化中的作用。为此 ,用人清道夫受体转基因小鼠 (F3)的纯合子 (TghSR AI+ +)、杂合子 (TghSR AI+ )、聚合酶链反应阴性 (TghSR AI )和C57BL 6小鼠各 1 2只 ,喂高脂高胆固醇饲料 1 4周后 ,取动物心脏和主动脉 ,作连续石蜡切片或冰冻切片 ,HE染色或油红O染色 ,用图象分析系统测量和计算主动脉动脉粥样硬化病变面积。结果发现 ,喂高脂高胆固醇饲料 1 4周后 ,小鼠动脉粥样硬化病变主要位于主动脉窦至主动脉弓的区域内 ,但纯合子鼠的动脉粥样硬化病变除在整个主动脉根部外 ,病变已扩展到胸主动脉、冠状动脉和肾动脉。C57BL 6鼠和阴性小鼠的主动脉窦区瓣膜附着处仅有轻微损伤。计算机图象分析发现 ,纯合子鼠主动脉粥样硬化病变的平均面积为 1 4 4 864± 1 71 0 3μm2 ,与杂合子组 (1 1 1 32 2± 1 0 71 3μm2 )相比 ,差异有显著性统计学意义 (P <0 .0 5) ;与聚合酶链反应阴性 ( )小鼠或C57BL 6小鼠相比 ,差异有非常显著性统计学意义 (P <0 .0 1 )。提示纯合子鼠动脉粥样硬化病变最严重 ,其次是杂合子鼠 ,而非转基因小鼠主动脉动脉粥样硬化病变较轻。转基因小鼠肝、肾也可见明显的病变。

关键词：清道夫受体转基因基因表达动脉粥样硬化病理

基质细胞衍生因子1对低密度脂蛋白诱导单核—内皮细胞粘附的影响

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中国动脉硬化杂志 2006年第5期14卷 387-390页

作者：危当恒王贵学王佐刘录山吕运成唐朝克重庆大学生物工程学院南华大学心血管病研究所湖南省衡阳市421001

目的观察基质细胞衍生因子1对低密度脂蛋白诱导的单核细胞-内皮细胞粘附的调节作用,以进一步探讨基质细胞衍生因子1在动脉粥样硬化中的作用。方法密度梯度离心法分离人低密度脂蛋白;逆转录聚合酶反应检测内皮细胞基质细胞衍生因子1mRNA... 详细信息

目的观察基质细胞衍生因子1对低密度脂蛋白诱导的单核细胞-内皮细胞粘附的调节作用,以进一步探讨基质细胞衍生因子1在动脉粥样硬化中的作用。方法密度梯度离心法分离人低密度脂蛋白;逆转录聚合酶反应检测内皮细胞基质细胞衍生因子1mRNA表达,Westernblot检测基质细胞衍生因子1蛋白质的表达;细胞记数法观察低密度脂蛋白及基质细胞衍生因子1抗体干预对内皮细胞单核细胞粘附的影响。结果对照组几乎没有基质细胞衍生因子mRNA以及蛋白质的表达,随着低密度脂蛋白浓度增加,基质细胞衍生因子1mRNA以及蛋白质的表达水平明显增加。低密度脂蛋白浓度为50mgL、100mgL和150mgL时,每个视野粘附的单核细胞数分别为60±20、97±26和170±32,而正常对照组为20±5,差异有极显著性意义(P<0.01)。终浓度为0.1mgL、0.5mgL和1mgL基质细胞衍生因子1抗体干预后,粘附的单核细胞数分别为113±23、53±21和41±10,均低于低密度脂蛋白对照组的186±31,与低密度脂蛋白对照组差异有显著性意义(P<0.05)。结论低密度脂蛋白促进内皮细胞与单核细胞的粘附,其机制与促进内皮细胞表达基质细胞衍生因子1密切相关。

关键词：生物工程内皮细胞单核细胞细胞粘附低密度脂蛋白基质细胞衍生因子1

血管局部剪切力改变促进内膜增生及动脉粥样斑块形成

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血管局部剪切力改变促进内膜增生及动脉粥样斑块形成

第八届全国生物力学学术会议

作者：危当恒王贵学邓林红杨力刘录山王佐杨永宗邓小燕樊瑜波重庆大学生物工程学院南华大学心血管疾病研究所北京航空航天大学生物工程系

前言:研究表明动脉粥样硬化总是发生在动脉的弯曲、分叉及狭窄部位,如主动脉弓、颈动脉分支、冠状动脉、腹主动脉分支和股动脉分支等特殊部位。这些动脉部位的血液流动常常伴随着流动的分离、回流等复杂流动现象,并且伴随着局部剪切应...

前言:研究表明动脉粥样硬化总是发生在动脉的弯曲、分叉及狭窄部位,如主动脉弓、颈动脉分支、冠状动脉、腹主动脉分支和股动脉分支等特殊部位。这些动脉部位的血液流动常常伴随着流动的分离、回流等复杂流动现象,并且伴随着局部剪切应力的改变。为了进一步探讨剪切应力对动脉粥样硬化发生发展的作用,本文采用外科手术的方法,在兔的左颈总动脉处套环作一狭窄模型,改变套环的远心端和近心端局部剪切应

关键词：

生理层流剪切应力诱导血管内皮细胞自噬影响血管内皮细胞功能

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中国动脉硬化杂志 2013年第9期21卷 I0028-I0028页

作者：郭凤霞李小红唐雅玲刘慧婷王佐危当恒动脉硬化学湖南省重点实验室南华大学心血管疾病研究所湖南省衡阳市421001

目的探讨生理层流剪切应力对血管内皮细胞自噬以及自噬对血管内皮细胞功能的影响。方法采用平行平板流动腔装置灌流系统，0、15dye／cm。灌注血管内皮细胞1h。RT—PCR及Westernblot检测自噬相关基因（LC3、Beclin-1）及血管内皮细胞功... 详细信息

目的探讨生理层流剪切应力对血管内皮细胞自噬以及自噬对血管内皮细胞功能的影响。方法采用平行平板流动腔装置灌流系统，0、15dye／cm。灌注血管内皮细胞1h。RT—PCR及Westernblot检测自噬相关基因（LC3、Beclin-1）及血管内皮细胞功能相关基因（eNOS、ET-1）mRNA和蛋白表达。在此基础上，分别用3-MA（自噬抑制剂）、雷帕霉素（自噬激动剂）处理。***及Westernblot检测血管内皮细胞eNOS、ET-1mRNA及蛋白表达。结果RT—PCR及Westernblot结果表明，与0dye／cm。相比，15dye／cm。剪切应力处理1h后，Beclin-1及LC3mRNA及蛋白均表达上调；血管内皮细胞eNOS蛋白表达量增加，而ET-1表达量降低；当加入自噬激动剂雷帕霉素后，血管内皮细胞eNOS的mRNA及蛋白较处理前表达进一步增加，而ET．1表达进一步降低；加入自噬抑制剂3-MA后，eNOS表达降低，ET一1的mRNA和蛋白较处理前表达升高。结论生理层流剪切应力上调血管内皮细胞自噬，影响血管内皮细胞功能。

关键词：自噬剪切应力血管内皮细胞

肺炎衣原体感染增加巨噬细胞内脂质蓄积与三磷酸腺苷结合盒转运体1表达的关系

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肺炎衣原体感染增加巨噬细胞内脂质蓄积与三磷酸腺苷结合盒转运体...

第八次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：刘录山程艳丽杨永宗唐朝克危当恒万载阳王贵学重庆大学生物工程学院南华大学心血管病研究所南华大学心血管病研究所重庆大学生物工程学院重庆大学生物工程学院南华大学心血管病研究所重庆大学生物工程学院

＜正＞目的肺炎衣原体感染是动脉粥样硬化发病危险因素之一。血管壁内巨噬细胞内脂质蓄积是动脉粥样硬化的主要病理形态学特征。研究肺炎衣原体感染对氧化低密度脂蛋白处理巨噬细胞内脂质的蓄积的影响及机制的探讨,将对阐明肺炎衣原体... 详细信息

＜正＞目的肺炎衣原体感染是动脉粥样硬化发病危险因素之一。血管壁内巨噬细胞内脂质蓄积是动脉粥样硬化的主要病理形态学特征。研究肺炎衣原体感染对氧化低密度脂蛋白处理巨噬细胞内脂质的蓄积的影响及机制的探讨,将对阐明肺炎衣原体感染和动脉粥样硬化关系提供新的理论依据。方法本文研究中应用低速

关键词：病理学与病理生理学肺炎衣原体氧化低密度脂蛋白 Hep-2细胞巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体1