检索结果-南通市图书馆

小鼠多瘤病毒荧光PCR检测方法的建立及其在裸鼹鼠感染情况调查中的应用

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中国比较医学杂志 2017年第12期27卷 91-96页

作者：李晓波付瑞王淑菁卫礼贺争鸣王吉岳秉飞中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所北京100050

目的建立多瘤病毒荧光定量PCR检测方法,并对裸鼹鼠中多瘤病毒感染情况进行调查。方法比较NCBI中小鼠多瘤病毒(Genbank:NC_001515)的核酸序列,选择保守区域设计引物和探针,建立多瘤病毒的荧光定量PCR方法,对方法的敏感性和特异性进行验... 详细信息

目的建立多瘤病毒荧光定量PCR检测方法,并对裸鼹鼠中多瘤病毒感染情况进行调查。方法比较NCBI中小鼠多瘤病毒(Genbank:NC_001515)的核酸序列,选择保守区域设计引物和探针,建立多瘤病毒的荧光定量PCR方法,对方法的敏感性和特异性进行验证。人工感染9只1日龄KM乳鼠,21 d后采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、盲肠内容物和血液等组织脏器,用建立的荧光PCR方法进行检测,验证方法在应用中的有效性,最后用该方法检测62份裸鼹鼠的盲肠内容物样本。结果建立的检测方法特异性好,在以多瘤病毒为模板时出现明显的荧光信号,以猴空泡病毒、小鼠K病毒、小鼠微小病毒和大鼠细小病毒H-1株为模板时无荧光信号出现;方法的最低检出限为100 copies/μL;人工感染小鼠的心、肝、脾、肺、肾和盲肠内容物中均检测到多瘤病毒核酸,其中肺组织中含量最高,脑、胸腺和血液中未检出;62份裸鼹鼠的盲肠内容物样本经检测多瘤病毒为阴性。结论建立的多瘤病毒荧光定量PCR方法可有效检测动物组织中的多瘤病毒,对裸鼹鼠自然感染多瘤病毒的调查为实验用裸鼹鼠微生物标准的制定提供了参考。

关键词：多瘤病毒裸鼹鼠小鼠荧光定量PCR方法

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实验小鼠病毒抗体诊断试剂盒的研究及应用

实验动物与比较医学 1991年第4期22卷 205-207,256页

作者：贺争鸣吴惠英卫礼刘佐民中国药品生物制品检定所实验动物标准化室

对已研制的5种小鼠病毒(流行性出血热EHF;淋巴细胞脉络丛脑膜炎LCM;鼠痘Ect.;鼠肝炎MHV;仙台Sendai;)抗体ELISA试剂盒,从敏感性、特异性、稳定性、重复性等方面进行了全面评价。同时应用ELISA试剂盒对来自国内18省市26个单位的普通级小... 详细信息

对已研制的5种小鼠病毒(流行性出血热EHF;淋巴细胞脉络丛脑膜炎LCM;鼠痘Ect.;鼠肝炎MHV;仙台Sendai;)抗体ELISA试剂盒,从敏感性、特异性、稳定性、重复性等方面进行了全面评价。同时应用ELISA试剂盒对来自国内18省市26个单位的普通级小鼠进行了监测。冻干试剂便于保存,其实验的稳定性和实验结果的重复性均令人满意。在监测的26个鼠群中,MHV和Sendai的群感染率分别为15％和19％。

关键词：试剂盒小鼠病毒抗体

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不同方法检测鼠群Sendai抗体的研究

实验动物科学 1989年第1期20卷 12-16页

作者：吴惠英卫礼贺争鸣王秀清刘媛中国药品生物制品检定所北京实验动物中心

前言 Sendai病毒在实验鼠群中呈隐性感染较多,易被人们疏忽。鼠群一旦被感染常会改变体内细胞免疫反应,干扰医用科学试验结果。1979年Parker等注意到这个问题,用ELISA检测Sendai抗体。我们自1983年以来用ELISA检测鼠群中Sendai抗体,取代... 详细信息

前言 Sendai病毒在实验鼠群中呈隐性感染较多,易被人们疏忽。鼠群一旦被感染常会改变体内细胞免疫反应,干扰医用科学试验结果。1979年Parker等注意到这个问题,用ELISA检测Sendai抗体。我们自1983年以来用ELISA检测鼠群中Sendai抗体,取代了HI法。又考虑到ELISA仍不利于基层工作,我们进一步应用了SRH,该法比较简便,能在基层应用。此外,我们还比较了ELISA和IFA,这两种方法都有较好的敏感性,可在有条件的实验室选用。

关键词：抗体滴度 Sendai 细胞免疫反应试验结果实验鼠 Parker 敏感性试验基层工作溶血环小鼠脱脚病

应用光敏生物素探针检测杂交瘤及细胞中的小鼠白血病病毒

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北京实验动物科学与管理 1994年第4期11卷 3-5页

作者：贺争鸣刘佐民卫礼吴惠英中国药品生物制品检定所

采用ＢａｍＨＩ酶切和琼脂糖凝胶电泳技术，从重组质粒ＰｓＦｌｌ中回收５ｋｂ小鼠白血病病毒（ＭｕＬＶ）ＤＮＡ片段，经光敏生物素标记后制备ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测杂交瘤细胞、ＭｃＡｂ纯品以及ＳＰ２／０细胞中的ＭｕＬｖ。... 详细信息

采用ＢａｍＨＩ酶切和琼脂糖凝胶电泳技术，从重组质粒ＰｓＦｌｌ中回收５ｋｂ小鼠白血病病毒（ＭｕＬＶ）ＤＮＡ片段，经光敏生物素标记后制备ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测杂交瘤细胞、ＭｃＡｂ纯品以及ＳＰ２／０细胞中的ＭｕＬｖ。结果表明：此探针灵敏度可达２５ｐｇ，特异性好，在被检测的１３株杂交瘤细胞和２株ＳＰ２／０细胞中分别查出５株和１株为ＭｕＬｖ阳性，ＭｃＡｂ纯品中未发现ＭｕＬｖ。

关键词：光敏生物素探针小鼠白血病病毒杂交瘤细胞

呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法的建立

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中国比较医学杂志 2012年第9期22卷 46-50页

作者：王吉卫礼贺争鸣岳秉飞中国食品药品检定研究院、国家实验动物微生物、遗传检测中心北京100050

目的建立呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法,应用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。方法根据已发表的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)M1基因序列,设计合成引物。提取Reo3细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件... 详细信息

目的建立呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法,应用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。方法根据已发表的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)M1基因序列,设计合成引物。提取Reo3细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件,进行特异性、敏感性、重复性试验。结果建立的Reo3RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定。以Reo3 RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为0.42pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-9/mL。结论建立的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法可用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。

关键词：呼肠孤病毒Ⅲ型反转录聚合酶链式反应实验动物人用动物源性材料及生物制品

淋巴细胞性脉络丛胞膜炎病毒单克隆抗体的研制及初步鉴定

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北京实验动物科学与管理 1994年第4期11卷 6-7页

作者：卫礼贺争鸣吴惠英张然刘佐民中国药品生物制品检定所

用提纯的ＬＣＭ病毒抗原（主要为ＮＰ６３）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，应用鼠—鼠杂交瘤技术获得了三珠（１Ｅ２、１Ｃ６和２Ｄ２）分泌抗ＬＣＭＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经检测，它们所分泌的抗体亚类分别为ＩｇＧ１（１Ｅ２）和Ｉｇ... 详细信息

用提纯的ＬＣＭ病毒抗原（主要为ＮＰ６３）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，应用鼠—鼠杂交瘤技术获得了三珠（１Ｅ２、１Ｃ６和２Ｄ２）分泌抗ＬＣＭＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经检测，它们所分泌的抗体亚类分别为ＩｇＧ１（１Ｅ２）和ＩｇＭ（１Ｃ６）。亲和力为７５μｇ（１Ｅ２）和５μｇ（１Ｃ６）。腹水效价为１０５。免疫荧光阻断法和ＥＬＩＳＡ阻断试验测定结果一致，１Ｅ２的标记物能阻断２Ｄ２，但不能阻断１Ｃ６。三株ＭｃＡｂ对７种鼠源性病毒抗原（ＲｅＯ３、Ｓｅｎｄａｉ、ＭＨＶ、ＧＤⅦ、ＥＨＦＰＶＭ和Ｅｃｔｒｏ）均无反应。

关键词： LCMV 杂交瘤单克隆抗体研制鉴定

实验大鼠流行性出血热病毒抗体检测试剂盒的研制及应用

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中国比较医学杂志 1993年第Z2期12卷 25-28页

作者：贺争鸣卫礼刘佐民吴惠英张然中国药品生物制品检定所

在对正常大鼠血清OD值分布区域测定的基础上,采用双标准(OD>0.13 P/N≥2.1)进行结果的判定,避免了因阴性对照血清OD值偏低而造成的假阳性结果。阻断试验及IFA和RPHI实验结果证实了试剂盒特异性好。冻干试剂质量稳定,便于保存。试剂盒使... 详细信息

在对正常大鼠血清OD值分布区域测定的基础上,采用双标准(OD>0.13 P/N≥2.1)进行结果的判定,避免了因阴性对照血清OD值偏低而造成的假阳性结果。阻断试验及IFA和RPHI实验结果证实了试剂盒特异性好。冻干试剂质量稳定,便于保存。试剂盒使用方便,适于在基层单位推广应用。

关键词：实验大鼠 EHFV 试剂盒

乙脑病毒嵌套式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

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乙脑病毒嵌套式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

全国人畜共患病学术研讨会

作者：高正琴贺争鸣邢瑞昌卫礼王吉中国药品生物制品检定所

目的建立适用于检测人用猪源性生物制品中外源性乙脑病毒(JEV)的嵌套式RT-PCR方法。方法根据已公布的JEV序列(GenBank登录号为M55506),设计合成两对引物,对JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK-21细胞抽提RNA进行RT-PCR和RT-nested P... 详细信息

目的建立适用于检测人用猪源性生物制品中外源性乙脑病毒(JEV)的嵌套式RT-PCR方法。方法根据已公布的JEV序列(GenBank登录号为M55506),设计合成两对引物,对JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK-21细胞抽提RNA进行RT-PCR和RT-nested PCR,将PCR产物进行了克隆测序;同时对猪细小病毒(PPV)、猴空泡病毒40(SV40)及正常乳鼠脑组织、正常BHK-21细胞、PK-15细胞、BSC-1细胞提取核酸进行PCR,并对210份临床样品进行了检测。结果 PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测,JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK-21细胞均扩增出1 015 bp和622 bp目的基因片段,而PPV、SV40及未感染JEV的乳鼠脑组织、正常BHK-21细胞、PK-15细胞、BSC-1细胞均未见特异性扩增条带,210份猪组织样品中未检出阳性样品。RT-nested PCR检测的最低限度为10 PFU病毒。从样品核酸的提取到PCR扩增及检测结果的报告可在8小时内完成。结论本研究建立的RT-Nested PCR方法具有快速、特异、敏感、可靠的特点,可用于人用猪源性生物制品中外源性JEV的污染检测。

关键词：乙脑病毒反转录-嵌套式聚合酶链反应检测

来源： cnki会议评论

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语文课堂教学有效性的提升策略研究

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