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作者：卢雪景河北医科大学

学位级别：硕士

目的：子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)为起源于子宫内膜上皮的恶性肿瘤,也是女性生殖道常见的恶性肿瘤之一，约占女性总癌症的7%，占女性生殖道恶性肿瘤的20%0%，近年来发病率和死亡率均有逐渐上升的趋势,严重危害女性健康。作为一... 详细信息

目的：子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)为起源于子宫内膜上皮的恶性肿瘤,也是女性生殖道常见的恶性肿瘤之一，约占女性总癌症的7%，占女性生殖道恶性肿瘤的20%0%，近年来发病率和死亡率均有逐渐上升的趋势,严重危害女性健康。作为一种性激素依赖性肿瘤，长期持续的无孕激素拮抗的内源性或外源性雌激素刺激是目前比较认同的病因之一。传统的治疗手段主要是手术治疗，辅以放疗、化疗、激素治疗，然而在肿瘤化疗的过程中，抗癌药物在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常增殖细胞也有杀伤作用，因而影响化疗的效果。所以如何使药物对肿瘤细胞最大限度的杀伤，而对正常细胞毒性减少到最低的化疗方案成为人们关注的焦点之一。近年来，肿瘤的分子靶向治疗越来越受到研究者的重视，也为开创子宫内膜癌的新的治疗方法指明了方向。细胞色素P4501B1(cytochromeP4501B1,CYP1B1)是一种在许多与激素相关的肿瘤组织中特异性高表达的酶，可代谢雌激素成为致癌产物，激活芳香烃类前致癌物。已有研究发现，CYP1B1在子宫内膜癌组织中高表达，而在相应的正常组织中低表达,表明CYP1B1在子宫内膜癌的发生及发展的过程中很可能起重要的作用。2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯(2,3′,4,5′-tetramethoxystilbene，TMS)是目前所发现的专一性最高的CYP1B1抑制剂之一,它可以特异性抑制CYP1B1介导的雌二醇4位羟化。本研究以子宫内膜癌细胞Ishikawa为研究对象，探讨TMS对细胞增殖和凋亡的影响，初步探讨其内在作用机制，为子宫内膜癌的靶向性治疗提供新的思路。方法： 1细胞培育：常规复苏冻存的Ishikawa细胞接种于100ml培养瓶中,在含10%胎牛血清，100U/ml的青霉素及链霉素的DMEM培养基，37℃、5%CO2饱和湿度培养箱中培养。以0.25%胰蛋白酶消化传代，于倒置显微镜下观察细胞形态。 2应用免疫细胞化学检测子宫内膜癌细胞Ishikawa中CYP1B1蛋白的表达情况：采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(Streptavidin/Peroxidase,SP)法。 3应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测TMS对Ishikawa细胞的增殖程度的影响，绘制细胞生长抑制率曲线,并在倒置显微镜下观察用药前后细胞形态学改变。 4应用流式细胞仪检测TMS对Ishikawa细胞凋亡和细胞周期的影响：将浓度为2.5×105个/ml的细胞悬液接种于100ml培养瓶中，待贴壁后，实验组加入不同浓度(10、20、40、80μmol/L)的TMS培养液，对照组加入等量的培养液。继续培养48h，用胰酶消化后收集细胞，70%的冷乙醇固定，PI(50μg/ml)0.5ml避光染色后,置流式细胞仪(美国BeckmanCoulter公司生产)分析。 5应用流式细胞仪检测TMS对Ishikawa细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Survivin表达水平的影响：同上述收集不同浓度(0、10、20、40、80μmol/L)TMS作用48h后的Ishikawa细胞，70%的冷乙醇固定后，分别加入Bcl-2、Bax及Survivin抗体(各抗体均按1:50稀释)孵育，再加入相应的FITC-IgG二抗(1:50稀释)孵育后，置流式细胞仪分析。 6运用统计软件SPSS13.0对所有数据进行统计学分析：所有实验数据均采用SPSS13.0软件进行统计分析，实验结果以x±s表示，多组比较时，方差齐者，采用单因素的方差分析，组间多重比较用SNK法;方差不齐者，采用非参数检验，组间多重比较用Kruskal-WallisH法。P<0.05表示有显著性差异。结果： 1人子宫内膜癌细胞Ishikawa中CYP1B1蛋白为阳性表达，细胞浆或胞核中可见棕黄色颗粒，表明Ishikawa细胞中存在CYP1B1蛋白。 2不同浓度(10、20、40、80μmol/L)的TMS分别作用于子宫内膜癌细胞Ishikawa24h、48h、72h后,细胞增殖受到明显抑制,各浓度间抑制率差异显著(P<0.05)，且呈时间和浓度依赖性。 3倒置显微镜下观察TMS作用后Ishikawa细胞的形态学变化：对照组的Ishikawa细胞生长状态良好，细胞伸展,呈细长多边形、梭形,呈对数生长，随时间推移，细胞逐渐增多,细胞接触紧密。当不同浓度(10、20、40、80μmol/L)的TMS作用Ishikawa细胞48h时,可见细胞皱缩变形,由梭形、多边形变成圆形,崩解坏死,细胞脱壁悬浮，细胞浆内出现空泡,细胞间隙变大。并出现细胞质浓缩,变圆,细胞核浓缩、核碎裂等细胞凋亡特征性形态学改变,但未见大量凋亡小体,凋亡细胞随着TMS浓度的增加而增加，贴壁细胞密度随着TMS浓度的增加而降低。 4TMS对Ishikawa

关键词： 2,3’,4,5’-四甲氧基二苯乙烯(TMS) 子宫内膜癌 Ishikawa细胞株 CYP1B1 流式细胞术免疫细胞化学

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低分子肝素钙联合血栓弹力图治疗复发性流产诊疗中的应用

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中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生 2022年第7期 4-6页

作者：卢雪景河北省石家庄市妇幼保健院河北石家庄050000

探讨低分子肝素钙联合血栓弹力图治疗复发性流产诊疗中的影响。方法选取2021年2月至2022年6月期间本院110例复发性流产患者,以随机数字表法分为两组,两组均观察血栓弹力图参数,将55例接受常规治疗纳入参照组,55例接受常规治疗+低分子... 详细信息

探讨低分子肝素钙联合血栓弹力图治疗复发性流产诊疗中的影响。方法选取2021年2月至2022年6月期间本院110例复发性流产患者,以随机数字表法分为两组,两组均观察血栓弹力图参数,将55例接受常规治疗纳入参照组,55例接受常规治疗+低分子肝素钙治疗纳入实验组。对比两组妊娠结局、凝血功能指标、血栓弹力图参数及安全性。结果实验组保胎成功率较参照组更高,P0.05,治疗后实验组较参照组更低,P0.05;治疗前两组R值、K值、α角、MA值、CI值对比无差异,P>0.05,治疗后R值、MA值、CI值对比有差异,P0.05;两组安全性对比无差异,P>0.05。结论低分子肝素钙联合血栓弹力图治疗复发性流产,改善患者妊娠结局提高保胎成功率。

关键词：低分子肝素钙复发性流产血栓弹力图黄体酮

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血栓弹力图联合血小板聚集率对血栓前状态所致复发性流产结局的预测价值研究

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婚育与健康 2023年第5期 1-3页

作者：卢雪景河北省石家庄市妇幼保健院

目的：浅析血栓弹力图(TEG)联合血小板聚集率对血栓前状态(PTS)所致复发性流产(RSA)结局的预测价值。方法：研究周期为2020年1月—2022年7月，设计总样本57例RSA患者纳入观察组，57例健康体检人群纳入对照组。通过血栓弹力图指标、血小... 详细信息

目的：浅析血栓弹力图(TEG)联合血小板聚集率对血栓前状态(PTS)所致复发性流产(RSA)结局的预测价值。方法：研究周期为2020年1月—2022年7月，设计总样本57例RSA患者纳入观察组，57例健康体检人群纳入对照组。通过血栓弹力图指标、血小板聚集率与凝血指标对比，研判TEG联合血小板聚集率对PTS所致RSA结局的预测价值。结果：在R值、MA值、血小板聚集率与凝血指标方面，结果表明观察组优于对照组（P<0.05）。结论：经TEG联合血小板聚集率、凝血指标与血流变学指标，对PTS导致RSA患者具备明显的现实意义。

关键词：血栓弹力图血小板聚集率复发性流产血流变学

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高强度聚焦超声治疗子宫肌瘤的临床应用研究

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中国科技期刊数据库医药 2022年第6期 143-146页

作者：卢雪景石家庄市妇幼保健院河北石家庄050000

探讨分析高强度聚焦超声治疗子宫肌瘤的临床应用价值。方法此次研究,选取石家庄市妇幼保健院子宫肌瘤患者,共计80例,2020年3月-2022年1月,患者均接受高强度聚焦超声治疗,对治疗结局对比与分析。结果治疗后患者子宫体积、病灶体积,小... 详细信息

探讨分析高强度聚焦超声治疗子宫肌瘤的临床应用价值。方法此次研究,选取石家庄市妇幼保健院子宫肌瘤患者,共计80例,2020年3月-2022年1月,患者均接受高强度聚焦超声治疗,对治疗结局对比与分析。结果治疗后患者子宫体积、病灶体积,小于治疗前(P0.05);治疗后患者PBAC、经期,小于治疗前(P0.05)。结论对子宫肌瘤患者使用高强度聚焦超声治疗,可改善患者子宫体积,病灶体积,促进患者术后恢复,调节患者月经情况,减少妊娠不良事件发生几率,临床价值明确。

关键词：子宫肌瘤高强度聚焦超声病灶体积子宫体积月经失血图

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阿司匹林联合低分子肝素钙治疗血栓前状态致早期习惯性流产的临床疗效

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中国科技期刊数据库医药 2022年第6期 86-89页

作者：卢雪景石家庄市妇幼保健院河北石家庄050000

探讨分析阿司匹林联合低分子肝素钙治疗血栓前状态致早期习惯性流产的临床疗效。方法此次研究,抽选石家庄市妇幼保健院收治的120例,血栓前状态致早期习惯性流产患者,2019年5月-2022年2月,随机电脑抽选下患者分组,60例对照组使用低分子... 详细信息

探讨分析阿司匹林联合低分子肝素钙治疗血栓前状态致早期习惯性流产的临床疗效。方法此次研究,抽选石家庄市妇幼保健院收治的120例,血栓前状态致早期习惯性流产患者,2019年5月-2022年2月,随机电脑抽选下患者分组,60例对照组使用低分子肝素治疗,研究组则联合阿司匹林治疗,对两组治疗结局对比与分析。结果对比两组治疗前所得D-D、TT、PAⅠ-1,无统计学意义(P>0.05);研究组治疗后D-D、TT、PAⅠ-1,优于对照组(P<0.05);研究组妊娠结局,优于对照组(P<0.05);研究组不良反应发生几率,低于对照组(P<0.05);研究组治疗有效率高于对照组(P<0.05)。结论对血栓前状态致早期习惯性流产患者,使用阿司匹林与低分子肝素钙联合治疗,可调节患者D-D、TT、PAⅠ-1,改善妊娠结局,减少不良反应发生几率,促进治疗效果提升,临床价值明确。

关键词：血栓前状态致早期习惯性流产阿司匹林低分子肝素钙临床效果

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LEEP刀宫颈锥切术治疗宫颈上皮内瘤变患者的效果

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中国科技期刊数据库医药 2022年第7期 11-13页

作者：卢雪景石家庄市妇幼保健院河北石家庄050000

探讨 LEEP手术在子宫颈上皮内瘤变性手术中的应用价值。方法此次研究,抽选石家庄市妇幼保健院收治宫颈上皮内瘤变患者,共计100例,2020年2月-2022年3月,随机电脑抽选患者分组,对照组50例接受冷刀宫颈锥切术治疗,研究组50例接受LEEP刀宫... 详细信息

探讨 LEEP手术在子宫颈上皮内瘤变性手术中的应用价值。方法此次研究,抽选石家庄市妇幼保健院收治宫颈上皮内瘤变患者,共计100例,2020年2月-2022年3月,随机电脑抽选患者分组,对照组50例接受冷刀宫颈锥切术治疗,研究组50例接受LEEP刀宫颈锥切术治疗,对两组治疗结局对比与分析。结果研究组伤口愈合时间及住院时间均短于对照组,术中出血量少于对照组(P<0.05);研究组总有效率高于对照组(P<0.05);并发症发生率低于对照组(P<0.05)。结论 LEEP刀在子宫颈上皮内瘤的应用,能有效地改善病人的临床症状,减少出血,减少术后的出血,增加术后的疗效。

关键词：宫颈上皮内瘤变 LEEP刀宫颈锥切术冷刀宫颈锥切术治疗效果

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细胞色素P4501B1及其抑制剂在肿瘤治疗中的应用进展

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实用癌症杂志 2012年第3期27卷 320-322页

作者：卢雪景李利河北医科大学附属冀医四院妇产科 050011

细胞色素P450酶（CYPs）是1个广泛存在于人体组织中,以铁卟啉为辅基的蛋白质家族,大多为单加氧酶,可以催化多种代谢反应。文献已报道细胞色素P4501B1（CYP1B1）是1种在许多与激素相关的肿瘤组织中特异性高表达的CYP450酶,可代谢雌激素... 详细信息

细胞色素P450酶（CYPs）是1个广泛存在于人体组织中,以铁卟啉为辅基的蛋白质家族,大多为单加氧酶,可以催化多种代谢反应。文献已报道细胞色素P4501B1（CYP1B1）是1种在许多与激素相关的肿瘤组织中特异性高表达的CYP450酶,可代谢雌激素为致癌产物,激活芳香烃类前致癌物,

关键词：细胞色素P4501B1 抑制剂肿瘤治疗

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杜氏盐藻电击转化方法的系统优化

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生物工程学报 2009年第4期25卷 520-525页

作者：吕朋举闫红霞李杰刘红涛卢雪景薛乐勋郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州450052

本研究系统分析了盐藻生长状态、电击条件、电击缓冲液成分和质粒浓度等条件对电击转化效率的影响。实验结果表明:正常接种后培养7d对数生长中期的盐藻细胞,在25μF、0.8kV的电击条件下加入终浓度为10μg/mL的质粒可使盐藻电击转化效率... 详细信息

本研究系统分析了盐藻生长状态、电击条件、电击缓冲液成分和质粒浓度等条件对电击转化效率的影响。实验结果表明:正常接种后培养7d对数生长中期的盐藻细胞,在25μF、0.8kV的电击条件下加入终浓度为10μg/mL的质粒可使盐藻电击转化效率达到1.85‰;电击缓冲液中加入0.4mol/L的甘油可使转化效率显著提高至2.03‰(P<0.05)。在上述优化电击体系下,运用3种不同质粒分别转化盐藻细胞后获得的转化效率无显著差异。通过对电击转化中相关因素的优化,本研究建立了一种适用于杜氏盐藻的高效稳定的电击转化体系,为杜氏盐藻的转基因研究提供有效方法。

关键词：杜氏盐藻电击转化效率转基因研究

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杜氏盐藻DCA1启动子内GT重复序列在盐诱导调控中的作用

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中国生物工程杂志 2009年第7期29卷 50-55页

作者：罗清菊李杰闫红霞卢雪景吕玉民薛乐勋郑州大学生物系郑州450052

为了研究杜氏盐藻双拷贝碳酸酐酶(DCA1)启动子中高度重复的GT序列在盐诱导表达时的调控作用,设计不同的引物,通过PCR法获得6条不同长度的DCA1启动子片段,分别与gus报告基因融合后构建6个表达载体;电击法转化杜氏盐藻细胞。组织化学染色... 详细信息

为了研究杜氏盐藻双拷贝碳酸酐酶(DCA1)启动子中高度重复的GT序列在盐诱导表达时的调控作用,设计不同的引物,通过PCR法获得6条不同长度的DCA1启动子片段,分别与gus报告基因融合后构建6个表达载体;电击法转化杜氏盐藻细胞。组织化学染色和荧光定量法检测GUS在不同盐浓度下的瞬时表达。结果显示,DCA1启动子内高度重复的GT序列无论与其上游、下游或上下游片段同时结合均能驱动gus基因的表达,并且其表达受氯化钠浓度调控,其中和上下游均结合时活性最强;无GT重复序列的融合片段及GT重复的下游片段也能驱动gus基因的表达,但其表达不受氯化钠浓度调控;而GT重复的上游片段不能驱动gus基因的表达。结果提示:盐藻DCA1启动子中高度重复的GT序列在盐诱导调控中起重要作用,可能为一种新型的盐诱导元件。

关键词：杜氏盐藻碳酸酐酶 gus基因 GT重复序列

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外源一氧化氮缓解盐胁迫下杜氏盐藻氧化损伤的初步研究

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河南农业科学 2009年第5期38卷 47-52页

作者：卢雪景刘红涛柴玉荣朱大恒罗清菊吕鹏举薛乐勋郑州大学生物工程系细胞生物学研究室河南郑州450001

研究外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)缓解3.0 mol/L NaCl胁迫对杜氏盐藻的氧化损伤作用并探讨其初步机理。结果表明:与单独盐胁迫相比,添加低浓度的SNP(0.5μmol/L和1μmol/L)能促进杜氏盐藻的生长,显著提高其叶... 详细信息

研究外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)缓解3.0 mol/L NaCl胁迫对杜氏盐藻的氧化损伤作用并探讨其初步机理。结果表明:与单独盐胁迫相比,添加低浓度的SNP(0.5μmol/L和1μmol/L)能促进杜氏盐藻的生长,显著提高其叶绿素含量,并增强了超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.05)。其中,1μmol/L SNP处理24 h后SOD活性提高了1.6倍。此外,半定量RT-PCR结果显示,低浓度的SNP(0.5μmol/L和1μmol/L)对盐胁迫下杜氏盐藻Fe-SOD基因的转录具有促进作用,24 h时作用显著(P<0.05),表达量分别提高了21.18%和27.41%,而高浓度的SNP(50μmol/L)抑制Fe-SOD基因的表达,加剧了盐胁迫带来的氧化伤害。

关键词：盐胁迫硝普钠杜氏盐藻氧化损伤

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