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内皮型一氧化氮合酶在骨髓内皮祖细胞治疗缺血性脑血管病中的作用

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中国老年学杂志 2011年第22期31卷 4491-4494页

作者：卢桃利罗勇重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/NO在血管新生和血管发生中起着重要作用。脑缺血时,缺血组织内的eNOS表达增加,促进NO的释放,有利于骨髓内皮祖细胞（EPCs）的动员、迁移、归巢。而EPCs能在缺血组织分化为成熟的血管内皮细胞,修复损伤的内皮... 详细信息

内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/NO在血管新生和血管发生中起着重要作用。脑缺血时,缺血组织内的eNOS表达增加,促进NO的释放,有利于骨髓内皮祖细胞（EPCs）的动员、迁移、归巢。而EPCs能在缺血组织分化为成熟的血管内皮细胞,修复损伤的内皮,参与新生血管的形成,改善组织细胞的供血。

关键词：内皮型一氧化氮(eNOS) 内皮祖细胞血管发生

SCF/c-kit信号转导通路介导电针促进局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内血管再生的研究

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SCF/c-kit信号转导通路介导电针促进局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内血...

作者：卢桃利重庆医科大学

学位级别：硕士

背景目前缺血性脑血管病已被例为严重威胁人类健康的重大疾病之一，其发病率、致残率、复发率和致死率都很高。目前对该病治疗的研究仍为医学研究的重点。电针作为传统的非药物治疗方法，通过刺激体表穴位以激活体内的保护机制，在改善... 详细信息

背景目前缺血性脑血管病已被例为严重威胁人类健康的重大疾病之一，其发病率、致残率、复发率和致死率都很高。目前对该病治疗的研究仍为医学研究的重点。电针作为传统的非药物治疗方法，通过刺激体表穴位以激活体内的保护机制，在改善脑缺血方面的作用肯定，已被广泛应用于临床，但具体机制仍不十分明确。近年研究表明，内皮祖细胞（endothelial progenitor cells, EPCs）属于干细胞群，同时存在于幼体和成体中，一方面在胚胎发育阶段参与血管发生，同时能依靠动员、迁移及分化等一系列过程介导出生后的血管形成。脑缺血后尽快恢复缺血周围区血供，能促进缺血后的神经再生及血管新生，有利于功能恢复。但在脑缺血后血管再生机制的研究中，对电针促进脑缺血后EPCs动员、迁移及归巢形成新生血管的机制研究较少。近年已有大量实验证实，PI3K/Akt确实参与EPCs的增殖、迁移、归巢的过程。但对它的下游信号内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitricoxide synthase，eNOS）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）的研究相对少见。有研究提示，激活后的PI3K/AKt能使下游信号分子eNOS的Ser1177磷酸化，增加一氧化氮（nitric oxide，NO）生成。NO通过活化MMP-9，完成骨髓EPCs的动员、迁移及归巢。近年的研究表明，干细胞因子（stem cell factor, SCF）是是一种具有多功能的细胞因子，在MMP-9的作用下，通过与其受体c-kit结合介导EPCs动员、迁移、归巢。以往大量报道证实SCF/c-kit通路能促进脑缺血后的神经再生，但关于SCF/c-kit通路在促进血管再生方面的研究很少见。本研究通过制作SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型，并采用穴位电针作为治疗手段，观察电针作用下缺血区大脑皮质eNOSmRNA和蛋白、MMP-9mRNA和蛋白、SCF及其受体c-kit mRNA和蛋白表达的变化规律，探讨在电针干预下eNOS/MMP-9、SCF/c-kit在脑缺血/再灌注后的作用，并进一步探讨电针改善脑缺血、促进脑内血管再生的机制。目的1．探讨SCF/c-Kit通路在大鼠局灶脑缺血/再灌注损伤后对脑内血管再生的可能作用;2．探讨eNOS、MMP-9在大鼠局灶脑缺血/再灌注损伤后脑内血管再生中的可能作用;3．探讨电针对大鼠局灶脑缺血/再灌注损伤后脑内eNOS、MMP-9、SCF、c-Kit蛋白及mRNA表达时空变化规律的影响。方法雄性SD大鼠125只随机分为假手术组（假手术组，n=15）、局灶脑缺血/再灌注组（模型组，n=55）、局灶脑缺血/再灌注加电针干预组（电针组，n=55）。把模型组及电针组分为局灶脑缺血2h再灌注后1d、3d、7d、14d、21d5个亚组。模型组和电针组均用线栓法制作SD大鼠大脑中动脉局灶脑缺血/再灌注模型。电针组取双侧“合谷”穴（LI4）为刺激穴位。采用神经症状学评分评估局灶脑缺血/再灌注大鼠神经功能缺损症状。免疫组化法检测各时间点大脑缺血周围皮质区eNOS、MMP-9、SCF及c-kit蛋白的表达;RT-PCR法检测eNOS、MMP-9、SCF及c-kit mRNA的表达;Western blot法检测eNOS、MMP-9、SCF蛋白的表达。其中SCF、c-kit mRNA及蛋白定量检测选择再灌注3d、7d、14d。MMP-9及eNOS蛋白及mRNA检测选择再灌注1d、3d、7d。结果1．神经症状学评分SD大鼠局灶脑缺血/再灌注及电针干预后，在再灌注1d、3d、7d及14d均可见不同程度的神经缺损症状。再灌注1d、3d，神经症状学评分轻微减少，模型组与电针组比较差异无显著性（p>0.05）;随着缺血再灌注时间的延长，再灌注7d、14d时，大鼠神经功能有所恢复，评分逐渐减少，电针组评分明显低于模型组，差异有统计学意义（p<0.05）。2．局灶脑缺血/再灌注及电针干预对eNOS蛋白和mRNA表达的影响免疫组化、Western blot及RT-PCR结果显示：eNOS阳性细胞表达以缺血侧皮质、海马为主，阳性细胞为神经元及内皮细胞，梗塞周围小胶质细胞和星型胶质细胞也可见胞浆黄染的阳性细胞。假手术组脑组织有少量eNOS蛋白及mRNA表达。模型组eNOS蛋白及mRNA表达于再灌注1d开始增加，3d达峰值。电针组eNOS蛋白及mRNA表达规律同模型组，再灌注1d表达增加，高峰仍在3d，再灌注7d有所下降。与假手术组比较，模型组及电针组各时间点eNOS蛋白及mRNA表达增高显著（P<0.01）。与模型组比较，电针组各时间点eNOS蛋白及mRNA的表达明显上调（P<0.05）。3．局灶脑缺血/再灌注及电针干预对MMP-9蛋白和mRNA表达的

关键词：电针局灶脑缺血/再灌注血管再生 SCF/c-kit eNOS MMP-9 合谷穴

电针对局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血和骨髓内皮祖细胞的作用

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针刺研究 2012年第3期37卷 179-185页

作者：孙宏毅罗勇卢桃利周承秦文熠李扬蔡艳丽重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:探讨电针对局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血及骨髓中与血管再生相关的因子及细胞的影响。方法:54只SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,采用线栓法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,并按局灶性脑缺血2h再灌注后的观察时间点,将模型... 详细信息

目的:探讨电针对局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血及骨髓中与血管再生相关的因子及细胞的影响。方法:54只SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,采用线栓法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,并按局灶性脑缺血2h再灌注后的观察时间点,将模型组和电针组分为1、2、3、7d各4个亚组,每个时间点6只大鼠。电针刺激大鼠双侧"合谷"穴,刺激时间15min,每日1次。采用流式细胞术检测外周血内皮祖细胞(EPCs)、趋化因子受体4+(CXCR 4+)细胞和骨髓EPCs占单核细胞的百分比,酶联免疫法检测血清中基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)蛋白浓度。结果:局灶性脑缺血/再灌注大鼠1d模型组和电针组较正常组外周血EPCs和CXCR 4+细胞数量均显著增高(P<0.01),2d电针组高于模型组(P<0.05);2d电针组骨髓EPCs数量显著高于正常组和模型组(P<0.05,P<0.01);模型组和电针组血清SDF-1α蛋白浓度第1天均增至最高,较正常组差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且第1、2天电针组显著高于模型组(P<0.01)。结论:电针能促进局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血EPCs、CXCR 4+细胞和骨髓EPCs数量的增加,该作用可能与SDF-1α表达上调相关。

关键词：电针局灶性脑缺血/再灌注 "合谷"穴基质细胞衍生因子-1α 内皮祖细胞外周血骨髓

红景天苷促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞表型转变及神经功能修复

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中国老年学杂志 2019年第12期39卷 2986-2991页

作者：卢桃利霍芳芳翟中杰张蓓成都市第二人民医院神经内科四川成都610015 空军军医大学第一附属医院神经内科空军军医大学卫生统计学教研室

目的探讨红景天苷对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响及促进神经功能恢复的作用机制。方法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型。随机分为对照组和红景天苷组。术后3d、7d和14d,采用免疫荧光双标法及实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)... 详细信息

目的探讨红景天苷对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响及促进神经功能恢复的作用机制。方法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型。随机分为对照组和红景天苷组。术后3d、7d和14d,采用免疫荧光双标法及实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)观察巨噬细胞促炎(M1)和抑炎(m2)表型细胞表达并计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测损伤局部组织炎症因子的表达。采用神经功能评分(BNS)评估小鼠神经功能恢复情况。结果与对照组相比,红景天苷组M1表型细胞(iNOS/CD11b/CD86)表达降低(P<0.05),m2表型细胞(Arg1/CD11b/YM-1)表达增加(P<0.05);红景天苷组能下调促炎因子〔肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β〕表达(P<0.05),促进抑炎因子IL-10表达(P<0.05),还能促进脊髓损伤后神经功能恢复(P<0.01)。结论红景天苷能促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞由M1向m2表型转变,抑制炎症因子表达。红景天苷可能通过参与巨噬细胞极性发挥神经保护作用。

关键词：脊髓损伤巨噬细胞表型红景天苷炎症反应

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1例脑梗死静脉溶栓病例的思考

中国卒中杂志 2018年第6期13卷 612-615页

作者：卢桃利张蓓成都市第二人民医院神经内科成都610017

1病例资料患者男性,60岁,因＂左侧肢体无力3个多小时＂入院。3 h前（上午9：00）无明显诱因突发左侧肢体无力,左上肢不能抬起,不能站立,言语不清,症状持续10余分钟后部分缓解能勉强站立。1个多小时前,患者左侧肢体无力、言语不清症状再... 详细信息

1病例资料患者男性,60岁,因＂左侧肢体无力3个多小时＂入院。3 h前（上午9：00）无明显诱因突发左侧肢体无力,左上肢不能抬起,不能站立,言语不清,症状持续10余分钟后部分缓解能勉强站立。1个多小时前,患者左侧肢体无力、言语不清症状再次加重,急诊120送入我院。既往史：患有甲型病毒性肝炎病史,无高血压、糖尿病、心脏病、慢性阻塞性肺疾病、肿瘤等慢性病史,无结核等传染病史。

关键词：阿替普酶静脉溶栓血管再闭塞栓子崩解

槲皮素促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞表型转变及功能恢复

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基础医学与临床 2018年第5期38卷 686-691页

作者：卢桃利霍芳芳翟中杰张蓓成都市第二人民医院神经内科四川成都610015 空军军医大学第一附属医院神经内科陕西西安710003 空军军医大学卫生统计学教研室陕西西安710003

目的探讨槲皮素对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响。方法通过钳夹法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型,随机分为脊髓损伤组(SCI组)和脊髓损伤+槲皮素治疗组(Quercetin组),术后1~14 d于腹腔注射槲皮素(1次/天),SCI组腹腔注射0.9%... 详细信息

目的探讨槲皮素对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响。方法通过钳夹法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型,随机分为脊髓损伤组(SCI组)和脊髓损伤+槲皮素治疗组(Quercetin组),术后1~14 d于腹腔注射槲皮素(1次/天),SCI组腹腔注射0.9%Na Cl溶液。术后3、7和14 d,用激光共聚焦荧光显微镜观察巨噬细胞表型M1(i NOS)和M2(Arg1)并计数;用real-time PCR检测局部组织炎性因子mRNA的表达。用BMS量表对小鼠神经功能损伤修复情况进行评价。结果与SCI组相比,Quercetin组M1(i NOS/CD11b)表型细胞的比例下降(P<0.05),M2(Arg1/CD11b)表型细胞的比例上调(P<0.05);同时,Quercetin组促炎因子(TNF-α、NOS2)的表达下降(P<0.05),抑炎因子(TGF-β、IL-10)的表达上调(P<0.05)。且Quercetin组在损伤后7和14后BMS评分均显著高于SCI组(P<0.05)。结论槲皮素可以促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞表型由M1向M2表型转变,抑制炎性因子的表达,对炎性反应的调控是其发挥神经保护作用的可能机制之一。

关键词：脊髓损伤巨噬细胞表型槲皮素炎性反应

电针对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑皮质eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响

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基础医学与临床 2012年第2期32卷 158-163页

作者：卢桃利罗勇孙宏毅周承秦文熠李扬蔡艳丽重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的探讨电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内缺血皮质区eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。缺血2 h后把模型组和电针组分为再灌注1、3和... 详细信息

目的探讨电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内缺血皮质区eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。缺血2 h后把模型组和电针组分为再灌注1、3和7 d 3个时间点。取双侧"合谷"穴(LI 4)为电针刺激穴位。免疫组化法检测eNOS蛋白的表达;反转录聚合酶链法检测eNOS mRNA的表达;Western blot法检测eNOS、MMP-9蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区eNOS蛋白及mRNA表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,电针组各时间点eNOS蛋白及mRNA明显增加(P<0.01)。eNOS蛋白表达于再灌注3 d达高峰,假手术组表达为0.4291±0.0173,模型组再灌注3 d表达为0.7374±0.0252,电针组表达为0.8536±0.0212,各组比较有显著差异(P<0.01)。与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区MMP-9蛋白的表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,电针组MMP-9蛋白的表达于再灌注1 d显著低于模型组(P<0.01),再灌注3、7 d电针组MMP-9蛋白的表达明显高于模型组(P<0.01)。结论电针可上调局灶脑缺血/再灌注大鼠缺血皮质区eNOS蛋白及mRNA、MMP-9蛋白的表达。

关键词：电针局灶脑缺血/再灌注 eNOS MMP-9 血管再生 “合谷”穴

普拉克索与艾司西酞普兰治疗帕金森病合并抑郁患者的临床效果

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中国医药导报 2020年第32期17卷 64-67页

作者：杨旭张翼刘萍萍屈战利何冬梅卢桃利马英四川省南充市中心医院川北医学院第二临床学院神经内科四川南充637000 成都市第二人民医院神经内科四川成都610015 川北医学院附属医院神经内科四川南充637000

目的探讨普拉克索与艾司西酞普兰治疗帕金森病合并抑郁患者的临床效果。方法选取2018年1月—2019年12月四川省南充市中心医院收治的120例帕金森病合并抑郁的患者为研究对象。采用随机数字表法将其分为观察A组(采用普拉克索治疗,40例)、... 详细信息

目的探讨普拉克索与艾司西酞普兰治疗帕金森病合并抑郁患者的临床效果。方法选取2018年1月—2019年12月四川省南充市中心医院收治的120例帕金森病合并抑郁的患者为研究对象。采用随机数字表法将其分为观察A组(采用普拉克索治疗,40例)、观察B组(采用艾司西酞普兰治疗,40例)、对照组(采用美多芭治疗,40例),对各组患者汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、统一帕金森病评分量表(UPDRS)、39项帕金森病调查问卷(PDQ-39)评分及不良反应发生率进行分析。结果治疗后三组患者HAMD评分比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论普拉克索与艾司西酞普兰能够有效改善帕金森病患者抑郁情况,且普拉克索治疗效果优于艾司西酞普兰,明显改善患者抑郁症状,从而提高患者生活质量。

关键词：帕金森病抑郁普拉克索艾司西酞普兰临床效果

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内质网应激在肝脏疾病中的研究进展

中国全科医学 2024年第21期27卷 2679-2684页

作者：李川吴云冲杨颜颜卢桃刘玉娟林世德遵义医科大学附属医院感染科贵州省遵义市563000

大量研究证实内质网应激(ERS)与肝脏疾病的发生、发展密切相关,但ERS与肝脏疾病进展的关联机制目前尚未明确,还需进一步探索。诸多研究发现,适度的ERS能激活未折叠蛋白反应(UPR)以保护细胞,而严重或持续的ERS将诱导细胞凋亡。因此,探讨... 详细信息

大量研究证实内质网应激(ERS)与肝脏疾病的发生、发展密切相关,但ERS与肝脏疾病进展的关联机制目前尚未明确,还需进一步探索。诸多研究发现,适度的ERS能激活未折叠蛋白反应(UPR)以保护细胞,而严重或持续的ERS将诱导细胞凋亡。因此,探讨ERS在肝脏疾病发病机制中的作用可能有助于发现新的治疗策略。故本文就ERS和UPR在多种肝脏疾病中的研究现状及其潜在治疗策略进行阐述。

关键词：肝病内质网应激未折叠蛋白反应细胞凋亡炎症

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