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作者：卢存龙青岛大学

学位级别：硕士

背景高尿酸血症和痛风是严重危害人们健康和降低生活水平的一种代谢性疾病。近年来随着人们生活水平的提高,高蛋白、高果糖饮食的生活方式引起高尿酸血症和痛风的发病率显著升高。高尿酸血症不但是痛风和尿酸性肾病的发病原因,而且大量... 详细信息

背景高尿酸血症和痛风是严重危害人们健康和降低生活水平的一种代谢性疾病。近年来随着人们生活水平的提高,高蛋白、高果糖饮食的生活方式引起高尿酸血症和痛风的发病率显著升高。高尿酸血症不但是痛风和尿酸性肾病的发病原因,而且大量的研究表明高尿酸血症与肥胖、脂代谢紊乱、2型糖尿病、非酒精性脂肪肝、心血管疾病密切相关。对于高尿酸血症的治疗,主要治疗措施包括改善生活方式、药物降低血清尿酸水平,但效果不佳。随着减重手术的发展,某些代谢性疾病如肥胖、2型糖尿病患者减重手术后糖代谢异常明显改善,同时在临床上观察到肥胖患者减重手术后血清尿酸水平也不同程度降低。但是这些研究主要来源于临床观察,并且高尿酸血症与这些疾病之间是否存在因果关联以及减重手术降低血清尿酸水平的具体机制仍然存在争议,因此在本实验中在第一部分中我们首先建立了高尿酸血症大鼠模型,动态观察高尿酸血症大鼠模型建立过程中糖脂代谢和肠道菌群的变化,并在第二部分中通过观察减重手术对高尿酸血症大鼠糖脂代谢和肠道菌群的影响,探究其相关的机制。现将本实验中的两个部分的研究进行简要介绍:第一部分高尿酸血症大鼠模型建立过程中代谢和肠道菌群的动态变化目的:探究高尿酸血症大鼠建模过程中糖脂代谢和肠道菌群的动态变化。方法:8周龄Wistar大鼠30只随机分为高尿酸血症模型组(Model)和对照组(Control)。模型组自由进食含有10%酵母膏的高嘌呤饲料,并且每日灌胃腺嘌呤和氧嗪酸钾一次,持续三周建立高尿酸血症大鼠模型。空白对照组自由进食标准实验动物饲料,同时灌胃等量的生理盐水。建模过程中每周分别处死模型组和对照组5只,处死前留取粪便样本-80℃保存,细菌16Sr DNA焦磷酸测序技术通过Illumina平台进行肠道菌群分析,麻醉后腹主动脉取血分离血清后样本后检测空腹血糖、血脂等血液学指标。结果:建模过程中,与对照组相比,模型组大鼠血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,空腹血糖、胰岛素水平显著增高,通过计算胰岛素抵抗指数HOMA-IR发现模型组显著高于对照组,同时观察到模型组血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平逐渐升高并显著高于正常对照组,而高密度脂蛋白胆固醇水平显著低于正常对照组。肠道菌群16S r DAN焦磷酸测序后基于unweighted unifrace的主成分分析(Principal coodinate analysis,PCo A)发现模型组与对照组聚类显著分离。肠道菌群物种注释分析发现模型组肠道菌群中益生菌lactobacillus和产丁酸盐菌Ruminococcus spp.和Roseburia spp.相对丰度显著降低,而机会性致病菌Proteobacteria,Escherichia coli和Bacteroides fragilis相对丰度显著升高。Pearson相关性分析显示Entorococcus(r=0.43,P=0.02)和Escherichia(r=0.37,P=0.048)的相对丰度与血清尿酸水平呈正相关关系,而Prevotella(r=-0.32,P=0.03)和Anaerovibrio(r=-0.36,P=0.02)的相对丰度与血清尿酸水平呈负相关关系。虽然Roseburia(r=-0.28,P=0.14)和Ruminococcus(r=-0.32,P=0.1)的相对丰度与血清尿酸水平呈负相关,但是统计学上无显著差异。结论:高尿酸血症大鼠建模过程中糖代谢和脂代谢发生紊乱,同时肠道菌群也发生显著改变。高尿酸血症与肠道菌群失调可能具有密切联系。第二部分Roux-en-Y胃旁路手术和袖状胃切除术对高尿酸血症大鼠代谢和肠道菌群的影响目的:探究两种主要的减重手术Roux-en-Y胃旁路手术(Roux-en-Y gastric bypass,RYGB)和袖状胃切除术(Sleeve gastrectomy,SG)对高尿酸血症大鼠血尿酸、血糖、血脂代谢的影响,并通过观察术后炎症性指标脂多糖(LPS)、IL-6、TNF-α和黄嘌呤氧化酶(XO)活性变化和肠道菌群的变化,探究其相关的机制。方法:8周龄Wistar大鼠40只随机分为高尿酸血症模型组(model,n=30)和空白对照组(control,n=10)。模型组自由进食含有10%酵母膏的高嘌呤饲料,并且每日灌胃腺嘌呤和氧嗪酸钾一次,持续三周建立高尿酸血症大鼠模型。空白对照组自由进食标准实验动物饲料和同期灌胃生理盐水。三周后模型组随机分为RYGB组、SG组和假手术组(Sham),每组10只大鼠,并进行相应的手术处理。术前与术后2、4、6、8周分别对大鼠的体重、食物摄入量进行记录。术前与术后对血清尿酸、肌酐和尿素氮,空腹血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数、血清甘油三酯和总胆固醇等生化指标和LPS、IL-6、TNF-α等炎症指标和XO浓度进行检

关键词：高尿酸血症 Roux-en-Y胃旁路手术袖状胃切除术糖脂代谢肠道菌群尿酸

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餐厨垃圾混菌发酵制备燃料乙醇

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环境工程学报 2013年第2期7卷 727-731页

作者：刘爱民徐双锁蔡欣彭鹏卢存龙安徽师范大学生命科学学院生态环境与生态安全安徽省高校重点实验室芜湖241000 安徽师范大学生命科学学院重要生物资源的保护和利用研究安徽省重点实验室芜湖241000

以校园餐厨垃圾为原料,利用根霉和枯草芽胞杆菌进行糖化预处理,再接种啤酒酵母发酵产乙醇。通过单因素实验,以乙醇产量为响应值,对发酵条件进行优化。实验结果表明:乙醇产量最佳的发酵条件为:当底料含水率为22.79%,啤酒酵母接种量为15%... 详细信息

以校园餐厨垃圾为原料,利用根霉和枯草芽胞杆菌进行糖化预处理,再接种啤酒酵母发酵产乙醇。通过单因素实验,以乙醇产量为响应值,对发酵条件进行优化。实验结果表明:乙醇产量最佳的发酵条件为:当底料含水率为22.79%,啤酒酵母接种量为15%,30℃培养条件下,经过5 d发酵,乙醇产量最高可达到6.67%。选用餐厨垃圾丰富了燃料乙醇的取材途径,实现了原材料的多元化,采用微生物预降解原材料为实现高产乙醇奠定了基础。

关键词：餐厨垃圾糖化预处理啤酒酵母乙醇发酵条件

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稻秸蓝藻混合厌氧发酵沼液及其化学物质对尖孢镰刀菌西瓜专化型生长的影响

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生态学报 2012年第14期32卷 4585-4592页

作者：刘爱民徐双锁蔡欣卢存龙彭鹏安徽师范大学生命科学学院生态环境与生态安全安徽省高校重点实验室重要生物资源的保护和利用研究安徽省重点实验室芜湖241000

研究稻秸与蓝藻(1∶1)混合厌氧发酵的沼液及其微量化学成分对尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusaruim oxysporum ***,FON)的孢子萌发、孢子数量、菌丝生长的影响。结果表明:40%浓度的发酵沼液即可100%抑制孢子萌发,20%浓度的沼液即可达到98.74%... 详细信息

研究稻秸与蓝藻(1∶1)混合厌氧发酵的沼液及其微量化学成分对尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusaruim oxysporum ***,FON)的孢子萌发、孢子数量、菌丝生长的影响。结果表明:40%浓度的发酵沼液即可100%抑制孢子萌发,20%浓度的沼液即可达到98.74%的抑制菌体产生孢子,100%浓度的沼液显著抑制气生菌丝的生长;进一步GC-MS分析发现沼液有机物成分中烷类较多,存在微量的四氯化碳(CCl4)、六氯乙烷(C2Cl6)、1,1-二乙氧基乙烷(CH3CH(OCH2CH3)2)3种化学物质;三者都具有显著的抑菌效果,且随浓度的增加而增大,尤其CH3CH(OCH2CH3)2的抑菌效果最好;0.75%浓度的3种化学物质对孢子萌发的抑制率即可达到100%;在培养基中分别加入CCl4、C2Cl6、CH3CH(OCH2CH3)2的浓度为1.00%时,镰刀菌的产孢数量分别降低了5.67%、18.05%、8.72%;培养4d,三者对尖孢镰刀菌西瓜专化型气生菌丝生长的抑制效果均达到90.40%,效果显著。研究表明沼液中确实存在对病原微生物具有明显抑制作用的多种有效的化学成分,可作为防治病原菌的首选药剂。

关键词：尖孢镰刀菌西瓜专化型稻秸与蓝藻混合厌氧发酵沼液 CCl4 C2Cl6 CH3CH(OCH2CH3)2 抑菌率

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1株高产纤维素酶菌株的筛选鉴定及对稻秆降解的研究

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华南农业大学学报 2019年第1期40卷 84-91页

作者：程鹏刘姗姗王玉卢存龙刘爱民安徽师范大学生命科学学院/生物环境与生态安全安徽省高校省级重点实验室/重要生物资源保护与利用研究安徽省重点实验室安徽芜湖241000 中国科学技术大学生命科学学院安徽合肥230026

【目的】筛选高效纤维素降解菌,用于稻秆原位还田菌剂的开发。【方法】通过稻秆粉培养基和刚果红-纤维素选择性培养基,从芜湖地区腐殖土中筛选分离出高效纤维素降解菌CX1,测定不同底物条件和不同反应温度下的纤维素酶活性。通过滤纸条... 详细信息

【目的】筛选高效纤维素降解菌,用于稻秆原位还田菌剂的开发。【方法】通过稻秆粉培养基和刚果红-纤维素选择性培养基,从芜湖地区腐殖土中筛选分离出高效纤维素降解菌CX1,测定不同底物条件和不同反应温度下的纤维素酶活性。通过滤纸条崩解试验、土培降解试验、菌株与化学物质协同降解稻秆试验、发酵液对小麦幼苗生长的影响试验,探究菌株CX1腐解稻秆的特性。【结果】通过菌株形态学特征及16S rDNA序列相似性(99%)比对,确定CX1为高温嗜热芽孢杆菌Thermophilic Bacillus sp.。以稻秆粉为底物,50℃条件下菌株CX1纤维素酶活力达13.87 U·mL^(–1),65℃时酶活力仍能达到9.73 U·mL^(–1)。添加菌株CX1培养4 d后滤纸条完全崩解,到15 d时,稻秆纤维素降解率达到52.55%,土培40 d时稻秆相对降解率达到25.38%。预先用质量浓度为0.05 g·mL^(–1)的NaOH溶液浸泡处理的稻秆更利于菌株CX1对稻秆的降解,腐解14 d时稻秆失重率比对照组增加了6.69%。添加经菌株CX1降解稻秆后的发酵液可使小麦的各项生长指标有明显提高,小麦的出苗率、苗高、根鲜质量和苗鲜质量分别提高了9.66%、55.55%、59.71%和118.84%。【结论】菌株CX1对高温具有耐受性,能高效降解纤维素,可在农业生产中促进稻秆原位还田方面发挥积极的作用。

关键词：稻秆降解纤维素酶高温嗜热芽孢杆菌腐解特性

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两株红酵母混合发酵产β-胡萝卜素及其影响因素

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食品工业科技 2013年第21期34卷 157-161页

作者：彭鹏刘园园刘爱民卢存龙高娜马雪李瑞萍安徽师范大学生命科学学院生态环境与生态安全安徽省高校重点实验室重要生物资源的保护和利用研究安徽省重点实验室安徽芜湖241000

探讨了粘红酵母(Rhodotorula glutinis31229)和红酵母菌株RY-01混合发酵产β-胡萝卜素的影响因素。实验结果表明,两株红酵母混合发酵的β-胡萝卜素产量比单菌发酵显著提高,达到8837.83μg/L,菌体生物量也达到了23.56g/L;β-胡萝卜素产... 详细信息

探讨了粘红酵母(Rhodotorula glutinis31229)和红酵母菌株RY-01混合发酵产β-胡萝卜素的影响因素。实验结果表明,两株红酵母混合发酵的β-胡萝卜素产量比单菌发酵显著提高,达到8837.83μg/L,菌体生物量也达到了23.56g/L;β-胡萝卜素产量的积累与菌体生物量的积累并不同步,在时间上有一定的滞后性;混合发酵的最适碳源和氮源分别是麦芽糖和蛋白胨;K+和Mg2+对β-胡萝卜素的产量有一定的影响作用,但不显著;橘皮干粉浸汁对混合发酵菌体生物量和β-胡萝卜素产量有较大的促进作用,分别提高了41.3%和52.8%。本研究为β-胡萝卜素高产菌株的选育和β-胡萝卜素的进一步开发利用提供了参考。

关键词：红酵母混合发酵菌体生物量 β-胡萝卜素产量

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混菌共培养发酵产物对胃腺癌SGC-7901细胞的体外抑制作用

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中国生物制品学杂志 2014年第4期27卷 453-457页

作者：卢存龙张园园刘爱民高娜杨超程双怀安徽师范大学生命科学学院生态环境与生态安全安徽省高校重点实验室重要生物资源的保护和利用研究安徽省重点实验室安徽芜湖241000

目的探讨巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)分别与金针菇(Flammulina velutiper)共培养发酵产物对胃腺癌SGC-7901细胞的体外抑制作用。方法将金针菇接种于固体发酵培养基(啤酒糟、甘蔗渣和梨渣的比例为... 详细信息

目的探讨巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)分别与金针菇(Flammulina velutiper)共培养发酵产物对胃腺癌SGC-7901细胞的体外抑制作用。方法将金针菇接种于固体发酵培养基(啤酒糟、甘蔗渣和梨渣的比例为5∶4∶1)中培养5 d,再分别接种巨大芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌发酵培养5 d,提取发酵产物,MTT法检测发酵产物对SGC-7901细胞的体外抑制作用。结果巨大芽胞杆菌和金针菇共发酵产物经121℃处理后,对SGC-7901细胞的抑制率为77.75%;蜡样芽胞杆菌与金针菇的发酵产物经121℃处理后,对SGC-7901细胞的抑制率为78.88%,分别比巨大芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌单独培养的固体发酵产物经121℃处理后的抑制率提高了11.45倍和13.04倍,比金针菇单独培养的固体发酵产物经121℃处理后对SGC-7901细胞的抑制率(52.02%)分别提高了49.46%和51.63%。结论巨大芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌分别与金针菇共培养的发酵产物对胃腺癌SGC-7901细胞具有较高的抑制作用,为抗肿瘤药物的筛选及指导临床应用开辟了更广阔的前景。

关键词：胃腺癌细胞金针菇巨大芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌共培养发酵

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链霉菌WH63的抑藻效应

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环境工程学报 2016年第7期10卷 3931-3936页

作者：刘爱民闪雅婷卢存龙张园园昌青青曹圆圆安徽师范大学生命科学学院生态环境与生态安全安徽省高校重点实验室重要生物资源的保护和利用研究安徽省重点实验室芜湖241000

研究链霉菌WH63抑藻效应。以铜绿微囊藻作为受试对象,通过平板实验、液体发酵、链霉菌WH63发酵产物分析、藻毒素含量测定和水培青菜,探讨链霉菌WH63抑藻效应。结果发现,链霉菌WH63活菌和过滤除菌后的发酵液均有抑制铜绿微囊藻生长的能力... 详细信息

研究链霉菌WH63抑藻效应。以铜绿微囊藻作为受试对象,通过平板实验、液体发酵、链霉菌WH63发酵产物分析、藻毒素含量测定和水培青菜,探讨链霉菌WH63抑藻效应。结果发现,链霉菌WH63活菌和过滤除菌后的发酵液均有抑制铜绿微囊藻生长的能力,第4天时接种3%过滤除菌的链霉菌WH63发酵液抑藻率就达到了96.7%,且WH63菌株的发酵液具有很好的热稳定性,乙酸乙酯的萃取WH63菌株发酵液抑藻效果最好,其抑藻物质为脂溶性弱极性物质。进一步分析其第15天的抑藻水样,COD含量比正常生长的铜绿微囊藻下降了61.4%,BOD下降了13.4%,藻毒素含量比其低57.9%,继续培养到第40天时都没有回绿现象,且水样清澈。用杀藻后的水样直接浇灌青菜种子,观察种子萌发数,结果表明,处理后的水样发芽率为100%,发芽势、活力指数、茎长和幼苗鲜重比水对照分别提高10.2%、147%、121%和71.6%。实验表明,用链霉菌WH63抑藻后的水样具有很好的促植物生长和提高植物抗性的效果,为链霉菌以后运用到水培蔬菜抑藻剂的开发提供了一定的理论基础。

关键词：链霉菌WH63 抑藻效应水培促生长

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不同栽培年限蓝莓根际土壤微生物群落多样性分析

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西北农业学报 2018年第7期27卷 1041-1048页

作者：董德武刘宇卢存龙王丽雪刘爱民安徽师范大学生命科学学院生物环境与生态安全安徽省高校省级重点实验室重要生物资源保护与利用研究安徽省重点实验室安徽芜湖241000

采用磷脂脂肪酸(PLFA)生物标记法分析树龄5a、6a、9a蓝莓根际土壤微生物的多样性,结果表明,不同栽培年限蓝莓根际土壤的PLFA标记存在差异,呈现不同的变化趋势;与9a植株相比,6a植株多1个16∶1w9细菌类群,5a植株多a15∶0和16∶1w9 2个细... 详细信息

采用磷脂脂肪酸(PLFA)生物标记法分析树龄5a、6a、9a蓝莓根际土壤微生物的多样性,结果表明,不同栽培年限蓝莓根际土壤的PLFA标记存在差异,呈现不同的变化趋势;与9a植株相比,6a植株多1个16∶1w9细菌类群,5a植株多a15∶0和16∶1w9 2个细菌类群,5a植株蓝莓根际土壤PLFA总量最大;与非种植区土壤相比,蓝莓根际特有a17∶0、i17∶1w5、7cy17∶0、9cy19∶0 4个细菌类群,且总量与树龄高度相关,可与a15∶0和16∶1w9的细菌总量联合推测栽培年龄。相关分析结果表明,速效钾的质量分数与树龄呈负相关,且栽培区土壤均低于非种植区土壤。蓝莓根际土壤微生物总量、假单胞杆菌、AM真菌和腐生真菌等与根际土壤有效磷、速效钾质量分数呈正相关。蓝莓根际微生物群落主要由细菌和真菌构成,对蓝莓生长具有重要影响。

关键词：蓝莓根际土壤微生物群落磷脂脂肪酸标记

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稻秸与蓝藻混合厌氧发酵产沼气试验研究

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安徽师范大学学报（自然科学版） 2011年第3期34卷 260-264页

作者：徐双锁刘爱民蔡欣卢存龙彭鹏安徽师范大学生命科学学院生态环境与生态安全安徽省重点实验室安徽省重要生物资源保护和利用研究重点实验室安徽芜湖241000

分别以单一稻秸和稻秸中添加蓝藻为底料,控制发酵温度35±1℃进行厌氧发酵产沼气的对比试验.结果表明:稻秸和蓝藻相混合是良好的沼气发酵原料,其产气速度、产量明显高于单一稻秸为底料的处理.实验B组稻秸和蓝藻1:1混合厌氧发酵的两次产... 详细信息

分别以单一稻秸和稻秸中添加蓝藻为底料,控制发酵温度35±1℃进行厌氧发酵产沼气的对比试验.结果表明:稻秸和蓝藻相混合是良好的沼气发酵原料,其产气速度、产量明显高于单一稻秸为底料的处理.实验B组稻秸和蓝藻1:1混合厌氧发酵的两次产气高峰期都集中在发酵的前16d,而实验A组单一稻秸处理只有发酵第7d的一次产气高峰;前者的TS单日最高产气量、平均日产气量、累积产气量、TS产气潜力和甲烷含量分别为20.21ml.g-1、541.97ml、38480ml、456.09ml.g-1和76.88%,都明显高于后者的4.57ml.g-1、347ml、6940ml、42.03ml.g-1和42.33%的各项指标;并且实验B组的料液TS降解率52.54%远高于实验A组的5.52%;在整个发酵过程中,各组pH保持在6.5-7.2的范围内.

关键词：稻秸蓝藻厌氧发酵产气量甲烷

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不同预处理方式对碱法提取米渣蛋白得率的影响

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食品科学 2014年第10期35卷 103-106页

作者：刘爱民冯定山张园园卢存龙曹圆圆安徽师范大学生命科学学院生态环境与生态安全安徽省高校重点实验室重要生物资源的保护与利用研究安徽省重点实验室安徽芜湖241000

研究不同的预处理方式对碱法提取米渣蛋白得率的影响。结果表明:分别用质量分数0.5%柠檬酸或稀释20倍的醋酸(0.875 mol/L)对米渣在25℃处理180 min,再用0.1 mol/L NaOH溶液提取,温度50℃,提取时间27 h,则蛋白提取率有较大提高;蛋白质提... 详细信息

研究不同的预处理方式对碱法提取米渣蛋白得率的影响。结果表明:分别用质量分数0.5%柠檬酸或稀释20倍的醋酸(0.875 mol/L)对米渣在25℃处理180 min,再用0.1 mol/L NaOH溶液提取,温度50℃,提取时间27 h,则蛋白提取率有较大提高;蛋白质提取率分别为84.60%和80.1%,高于未经过酸处理的米渣蛋白提取率。质量分数为0.5%柠檬酸和稀释20倍(0.875mol/L)的醋酸预处理的大米渣蛋白质经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,用体积分数18%分离胶有利于蛋白质电泳的分离;蛋白质在提取过程中分解成小的片段,主要集中在9.5 kD和4.1 kD附近,其中4.1 kD蛋白含量较多,且用质量分数0.5%柠檬酸预处理后碱法提取的蛋白质颜色纯白鲜亮,质地细腻润滑。

关键词：大米渣预处理蛋白质提取率十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳

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