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人胚胎干细胞高效分化为巨核细胞模型的建立

中国细胞生物学学报 2014年第11期36卷 1470-1477页

作者：高洁杨亦青庞素蕾刘鑫卢利莎雷晓华熊涛王洪涛马峰周家喜中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室天津300020 河北北方学院医学检验学院张家口075000 长江大学生命科学学院荆州434025 中国科学院动物研究所北京100101 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所成都610052

人胚胎干细胞具有无限增殖潜能,且能够分化为包括巨核细胞在内的大多数的成熟血细胞。因此,为解决临床治疗血小板来源不足而建立一种由人胚胎干细胞高效分化获得成熟巨核细胞的分化模型具有重要应用前景。该文利用人胚胎干细胞与m AGM-S... 详细信息

人胚胎干细胞具有无限增殖潜能,且能够分化为包括巨核细胞在内的大多数的成熟血细胞。因此,为解决临床治疗血小板来源不足而建立一种由人胚胎干细胞高效分化获得成熟巨核细胞的分化模型具有重要应用前景。该文利用人胚胎干细胞与m AGM-S3基质细胞系共培养进行早期造血前体细胞的定向分化,并在分化第14 d获得大量"卵石样"造血前体细胞(CD43+细胞、CD45+细胞)。将"卵石样"造血前体细胞分离后,用无血清培养基分阶段添加SCF、TPO、IL-6、IL-3、FLt-3、IL-11等细胞因子进行巨核细胞定向诱导分化。结果显示,在分化的第3 d,CD41a+细胞比例可高达48.5%,CD42b+细胞比例可高达30.0%。对分化第6 d的细胞进行Wright-Giemsa染色,可见形态典型的巨核细胞。综上所述,该研究初步建立了一种人胚胎干细胞高效分化为巨核细胞的模型,为体外获得大量巨核细胞奠定了基础。

关键词：人胚胎干细胞 mAGM-S3 造血分化巨核细胞

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日本血吸虫可溶性抗原基因的生物信息学分析

长江大学学报（自科版）（中旬） 2012年第12期9卷 16-18页

作者：熊涛张枫卢利莎倪凤娥长江大学生命科学学院湖北荆州434025

应用国际互联网生物信息学网站，分析整理了日本血吸虫（Schistosomasis japonicum）抗原基因编码的蛋白质序列。结果表明，在15个日本血吸虫抗原基因编码的蛋白中，等电点最高的是AF500622，最低的是AM26213；亲水性最高的是AF370036... 详细信息

应用国际互联网生物信息学网站，分析整理了日本血吸虫（Schistosomasis japonicum）抗原基因编码的蛋白质序列。结果表明，在15个日本血吸虫抗原基因编码的蛋白中，等电点最高的是AF500622，最低的是AM26213；亲水性最高的是AF370036，最低的是AF50062。对日本血吸虫抗原基因编码的蛋白质进行生物信息学的整理分类，为进行抗原提取和可溶性研究奠定了基础。

关键词：日本血吸虫(Schistosomasis japonicum) 生物信息学基因序列分析

利用CRISPR/Cas9技术构建敲除MEIS2基因的HEK293T人胚肾细胞系

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中国细胞生物学学报 2015年第4期37卷 535-541页

作者：卢利莎白杨刘鑫王洪涛高洁杨亦青苏培刘翠翠王钰张磊升熊涛周家喜长江大学生命科学学院荆州434025 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室天津300020 河北北方学院医学检验学院张家口075000

CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术,利用人工设计的向导RNA(singleguide RNA,sg RNA)介导外源表达的Cas9蛋白与基因组靶点特异性结合以实现对基因组DNA的特异性切割,切割后的基因组DNA通过非同源末端连接或同源重组的方式进... 详细信息

CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术,利用人工设计的向导RNA(singleguide RNA,sg RNA)介导外源表达的Cas9蛋白与基因组靶点特异性结合以实现对基因组DNA的特异性切割,切割后的基因组DNA通过非同源末端连接或同源重组的方式进行修复,从而实现基因的敲除、敲入等。MEIS2属于一类高度保守的同源盒转录因子MEIS家族,研究发现,MEIS2广泛参与胚胎的早期发育及肿瘤的发生发展,但其发挥作用的机制目前还不是很清楚。该研究针对MEIS2基因作用的功能域,设计两个靶向MEIS2基因Exon3和Exon8的sg RNA,通过SURVEYOR分析及Western blot检测,确认了所设计sg RNA的有效性。进一步通过细胞分选及Western blot检测筛选出稳定敲除MEIS2基因的HEK293T细胞株。最后,通过序列测定确认MEIS2发生了移码突变。综上所述,该研究利用CRISPR/Cas9技术成功建立了完全敲除MEIS2的HEK293T细胞株,为研究MEIS2的功能和作用机制提供了有效工具。

关键词： MEIS2 CRISPR/Cas9系统基因敲除

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关于建立细胞生物学精品课程的几点思考

科技信息 2013年第1期 41-41,27页

作者：熊涛卢利莎董社琴孙文秀李智洋黄敏长江大学生命科学学院湖北荆州434025

本文结合教学实践经验,针对建立细胞生物学精品课程的一系列问题进行探讨,并且结合现代技术在细胞生物学中的应用,总结细胞生物学精品课程的教学模式及方法,从而有效地提高细胞生物学的教学效果。

关键词：细胞生物学精品课程教学模式教学效果

急性主动脉夹层合并2型糖尿病患者危险因素、预后及快速筛查研究

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中国全科医学 2025年第9期28卷 1100-1105页

作者：黄璐捷张小英俞莎莎浙江省宁波市医疗中心李惠利医院老年医学科

背景急性主动脉夹层（AAD）合并2型糖尿病的发病率呈上升趋势，然而，关于其危险因素和预后的研究较少。因此，积极寻求临床一种简便且有效的诊断工具已成为研究的重点。目的分析AAD合并2型糖尿病患者危险因素、预后及快速筛查方法。方... 详细信息

背景急性主动脉夹层（AAD）合并2型糖尿病的发病率呈上升趋势，然而，关于其危险因素和预后的研究较少。因此，积极寻求临床一种简便且有效的诊断工具已成为研究的重点。目的分析AAD合并2型糖尿病患者危险因素、预后及快速筛查方法。方法选取2016年1月—2022年10月宁波市医疗中心李惠利医院收治的168例AAD患者为研究对象，使用主动脉夹层检测风险评分（ADD-RS）量表对患者进行初筛分诊。选用主动脉CT血管造影（CTA）检查结果作为AAD确诊的“金标准”，比较主动脉CTA确诊结果与ADD-RS量表的初筛结果。根据是否合并2型糖尿病分为糖尿病组和非糖尿病组，收集两组的一般资料，采用多因素Logistic回归分析探讨AAD患者合并2型糖尿病的危险因素；比较两组的短期预后及疼痛评分。采用多因素Cox回归分析AAD患者短期预后的影响因素，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析ADD-RS量表对AAD合并2型糖尿病的筛查价值。结果本研究糖尿病组59例，非糖尿病组109例。多因素Logistic回归分析显示，增龄（OR=1.088,95%CI=1.042～1.136,P0.05）；两组30 d死亡率分别为3.39%和3.67%，差异无统计学意义（P>0.05）。多因素Cox回归分析显示高血压不是影响AAD患者短期预后的独立因素（HR=0.673,95%CI=0.094～4.791,P>0.05）。糖尿病组的ADD-RS为1(1)分，高于非糖尿病组的1(2)分（Z=-4.640,P<0.001）；糖尿病组的高风险及中风险患者均多于非糖尿病组（Z=2.309,P=0.021）;ADD-RS量表筛查AAD合并2型糖尿病的ROC曲线下面积为0.706(95%CI=0.634～0.779)。结论 AAD合并2型糖尿病患者的危险因素有年龄增高、BMI≥25 kg/m2、冠心病、高脂血症、LVEF升高，且ADD-RS量表在AAD合并2型糖尿病患者的风险评估中具有较高的临床筛查价值。

关键词：急性主动脉夹层糖尿病,2型主动脉夹层检测风险评分快速诊治

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新质生产力视域下高等教育产教融合的实践困境与优化路径

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高等工程教育研究 2025年第1期 111-116页

作者：陈立斌赵莉莎王小华西安交通大学实践教学中心工信部西安交通大学未来技术学院

习近平总书记在黑龙江考察期间首次提出要“积极培育战略性新兴产业和未来产业，加快形成新质生产力”,并在二十届三中全会和全国教育大会上强调要“实施科教兴国战略、人才强国战略、创新驱动发展战略”。发展新质生产力离不开富含深... 详细信息

习近平总书记在黑龙江考察期间首次提出要“积极培育战略性新兴产业和未来产业，加快形成新质生产力”,并在二十届三中全会和全国教育大会上强调要“实施科教兴国战略、人才强国战略、创新驱动发展战略”。发展新质生产力离不开富含深厚科学素养、具备跨学科知识和持续学习能力的高素质复合型创新型人才，深化产教融合协同育人是高校对接产业需求，推进人才培养供给侧改革的重要途径。当前产教融合已进入向深度融合阶段，校企合作更加紧密，资源共享更加深入，但仍然存在高校人才培养方向与行业产业需求脱节、产教融合机制不健全、校企合作不深入等问题。本文在梳理我国高校产教融合发展历程的基础上，分析了当前产教融合协同育人存在的系列问题，并据此提出优化路径：一是围绕产业需求优化调整教学内容；二是构建多主体参与的产教融合共同体；三是搭建跨学科产教深度融合平台；四是多措并举，激发企业深度参与产教融合的内驱力；五是改革教育评价体系，激发教师参与产教融合的动力。

关键词：新质生产力产教融合产业需求人才培养

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企业应收账款风险管理及防范措施

中国农业会计 2025年第1期35卷 12-14页

作者：余玲莎中国热带农业科学院海口实验站

近年来,市场经济发展迅速,竞争日益加剧,企业产品不断丰富,推动了买方市场的形成,许多企业为了在激烈的国内市场竞争环境下生存与发展,开始选择将产品赊销作为企业主要的市场营销策略,这也成为企业获得更多顾客的法宝。从理论上看,应收... 详细信息

近年来,市场经济发展迅速,竞争日益加剧,企业产品不断丰富,推动了买方市场的形成,许多企业为了在激烈的国内市场竞争环境下生存与发展,开始选择将产品赊销作为企业主要的市场营销策略,这也成为企业获得更多顾客的法宝。从理论上看,应收账款的增加对企业的经营成长是有益的,但也会引起经营风险的增加,需要加强风险管理。本文对应收账款风险管理进行研究,通过分析企业应收账款风险管理存在的问题,从事前控制、事中控制、事后控制三个方面提出了防范应收账款风险的策略。

关键词：应收账款风险管理防范措施

RUNX1-RUNX1T1融合转录本及WT1转录本水平检测的室间比对研究

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中华血液学杂志 2019年第11期40卷 889-894页

作者：秦亚溱朱立文林樉耿素霞刘生伟程辉邬成业肖敏李小青胡瑞萍王丽丽刘海燕马道新关涛叶远馨牛挺岑建农卢利莎孙黎杨同华王云贵李涛王玥李庆华赵晓甦李玲娣陈文敏龙玲玉黄晓军北京大学人民医院北京大学血液病研究所国家血液系统疾病临床医学研究中心100044 北京海思特医学检验实验室有限公司 100176 大连医科大学附属第一医院血液科 116011 广东省人民医院(广东省医学科学院)血液科广州510080 哈尔滨血液病肿瘤研究所 150010 海军军医大学附属长海医院血液内科上海200433 河南省人民医院血液病研究所郑州450003 华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞中心武汉430022 吉林大学第一医院血液科长春130021 解放军总医院第一医学中心血液病科北京100853 南通大学附属医院血液科 226001 山东大学齐鲁医院血液科济南250012 山西省肿瘤医院血液科太原030000 四川大学华西医院实验医学科成都610041 四川大学华西医院血液科成都610041 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所国家血液系统疾病临床医学研究中心215006 天津协和华美医学诊断技术有限公司 301617 武汉康圣达医学检验所有限公司 430075 云南省第一人民医院血液科昆明650034 浙江大学医学院附属第一医院血液科杭州310003 郑州大学第一附属医院血液科 450052 中国医科大学附属第一医院沈阳110001 中国医学科学院血液病医院(血液学研究所) 国家血液系统疾病临床医学研究中心天津300020

目的通过室间比对了解国内RUNX1-RUNX1T1融合转录本及WT1转录本检测现状和真实表现。方法北京大学人民医院(简称PKUPH)制备比对样品,即用RUNX1-RUNX1T1(-)患者与RUNX1-RUNX1T1(+)患者新鲜骨髓/外周血有核细胞进行不同比例的稀释,制备出1... 详细信息

目的通过室间比对了解国内RUNX1-RUNX1T1融合转录本及WT1转录本检测现状和真实表现。方法北京大学人民医院(简称PKUPH)制备比对样品,即用RUNX1-RUNX1T1(-)患者与RUNX1-RUNX1T1(+)患者新鲜骨髓/外周血有核细胞进行不同比例的稀释,制备出14种比对样本,每种样本各制备23份平行样本,加入TRIzol均质化后-70℃保存。各家中心采用RT-PCR技术同时检测各样本的RUNX1-RUNX1T1融合转录本及WT1转录本水平,统一以目的基因拷贝数/ABL拷贝数×100%的形式报告结果。通过Spearman相关分析计算各家中心与PKUPH检测结果之间的相关系数。结果①RUNX1-RUNX1T1比对:9份为阳性、5份为阴性样本,参与的20家实验室的假阳性率为5%(5/100),假阴性率为0(0/180)。每份阳性样本各家检测值均不相同,9份阳性样本各家报告的结果中位值为0.060%~176.7%,共覆盖3.5个log的范围,各份样本最高与最低报告结果的比值为5.5~12.3(去除1份明显偏离的结果)。85%(17/20)的实验室与PKUPH结果之间的相关系数≥0.98。②WT1比对:14份样本各家报告结果均不相同,中位值为0.16%~67.6%,覆盖2.6个log的范围,各样本检测最高值与最低值的比值为5.3~13.7.62%(13/21)的实验室与PKUPH结果的相关系数≥0.98。③两个转录本每家与PKUPH报告结果的相对关系不一致,2家均低于、7家均高于PKUPH,另11家为1个高于另一个低于PKUPH。结论同一样本各家中心报告的RUNX1-RUNX1T1及WT1转录本水平不同,大多数实验室与PKUPH报告的结果具有很高的一致性,实验室间不同转录本水平的相对关系不一定相同。

关键词：融合蛋白质类,RUNX1-RUNX1T1 WT1 实时聚合酶链反应室间比对

生物反馈助力电刺激对慢性非特异性腰痛患者下肢步行功能的改善

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中国组织工程研究 2025年第3期29卷 547-553页

作者：郑翔张明兴黄雅单莎瑞广东药科大学附属第一医院广东省广州市510080

背景:国内外关于慢性非特异性腰痛生物反馈疗法和三维步态功能分析的相关研究已开展很多,但是对二者结合的研究少有报道。目的:利用三维步态分析采集步态参数数据,研究生物反馈助力电刺激对慢性非特异性腰痛患者步行能力的改变效果。方... 详细信息

背景:国内外关于慢性非特异性腰痛生物反馈疗法和三维步态功能分析的相关研究已开展很多,但是对二者结合的研究少有报道。目的:利用三维步态分析采集步态参数数据,研究生物反馈助力电刺激对慢性非特异性腰痛患者步行能力的改变效果。方法:选择2021年6月至2022年9月在广东药科大学附属第一医院收治的60例慢性非特异性腰痛患者,男34例,女26例,年龄32-58岁。采用随机数字表法将60例患者分为对照组(n=30)与试验组(n=30),两组患者均接受腰部动态干扰电的常规治疗(20 min/次,1次/d,每周5次,持续治疗20次),对照组患者在常规治疗的基础上进行仰卧搭桥和俯卧搭桥的悬吊核心肌群训练(每周5次,持续治疗20次),试验组在对照组治疗的基础上进行生物反馈助力电刺激治疗(20 min/次,1次/d,每周5次,持续治疗20次)。比较分析两组患者治疗前后的腰痛评分、肌电信号平均值和步态参数。结果与结论:①两组患者治疗结束后的数字类比表评分、日本骨科协会(JOA)评分、Oswestry功能障碍指数均较治疗前明显改善(P<0.05),试验组治疗结束后的数字类比表评分、JOA评分、Oswestry功能障碍指数均优于对照组(P<0.05);②两组患者治疗结束后的腹直肌、臀大肌、竖脊肌表面肌电平均值均高于治疗前(P<0.05),试验组治疗结束后的腹直肌、臀大肌、竖脊肌表面肌电平均值均高于对照组(P<0.05);③两组患者治疗结束后的步宽、步速、步频、健患侧步长比值、健患侧支撑相比值、患健侧摆动相比值、健患侧髋关节及膝关节矢状面活动度和健患侧足偏角均优于治疗前(P<0.05),试验组治疗结束后的上述指标均优于对照组(P<0.05);④结果表明,生物反馈助力电刺激能明显缓解慢性非特异性腰痛,改善了患者下肢步行功能。

关键词：三维步态生物反馈助力电刺激慢性非特异性腰痛步行功能核心稳定训练