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淫羊藿苷及其降解产物抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

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淫羊藿苷及其降解产物抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

作者：南敏伦吉林农业大学

学位级别：硕士

文献报道淫羊藿苷有多方面的药理活性,初步研究表明淫羊藿苷具有抑制α-葡萄糖苷酶活性,但与目前临床应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂相比有一定的差距,为改善其活性,拟通过水解得到淫羊藿苷的次级苷或苷元,在获得具有更强活性的α-葡萄糖苷... 详细信息

文献报道淫羊藿苷有多方面的药理活性,初步研究表明淫羊藿苷具有抑制α-葡萄糖苷酶活性,但与目前临床应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂相比有一定的差距,为改善其活性,拟通过水解得到淫羊藿苷的次级苷或苷元,在获得具有更强活性的α-葡萄糖苷酶抑制剂的同时,通过各水解产物的结构与活性的关系分析初步明确淫羊藿苷降解产物的活性作用基团,为将来继续研究奠定基础。本论文中,首先从淫羊藿药材入手,釆用钙离子技术,水提取淫羊藿黄酮,AB-8大孔吸附树脂富集纯化,得到淫羊藿总黄酮;采用ODS色谱柱分离得到淫羊藿苷;并且对淫羊藿苷进行酶水解、酸水解、酶水解与酸水解相结合的方式进行结构修饰,采用薄层色谱法、理化方法、核磁共振波谱法对水解后的结构修饰物进行了结构鉴定,分别为淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、水合淫羊藿素、环淫羊藿素及脱水淫羊藿素。建立了α-葡萄糖苷酶筛选模型,以酵母来源α-葡萄糖苷酶对前述各化合物进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选,实验结果表明,水合淫羊藿素及环淫羊藿素的活性不理想,脱水淫羊藿素、淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ体外活性较淫羊藿苷好,其中脱水淫羊藿素(IC50=0.102 mg·m L-1)的活性最好,与拜糖平(IC50=0.850 mg·m L-1)相比抑制活性更强,在较低的浓度下(0.05 mg·m L-1)就能够抑制α-葡萄糖苷酶的活性;以大鼠小肠内黏膜酶进行了活性验证,与前述酵母来源α-葡萄糖苷酶实验结果基本吻合;此外,对脱水淫羊藿素的抑制类型进行了研究,测得脱水淫羊藿素为α-葡萄糖苷酶的竞争性抑制剂。采用在正常ICR小鼠与四氧嘧啶造成的糖尿病小鼠负荷淀粉的情况下观察脱水淫羊藿素对血糖的影响、对小鼠血清中糖化血清蛋白的影响及对小鼠血清胰岛素的影响。实验结果表明,脱水淫羊藿素具有很强的降低正常ICR小鼠和四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠餐后各时间点的血糖值;同时,脱水淫羊藿素具有明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的空腹血糖,相同剂量下,脱水淫羊藿素比阳性对照药拜糖平的效果略佳,并存在一定的量效关系。本文应用Schrodinger软件进行分子对接设计,Docking energy的结果表明脱水淫羊藿素显示了较强的结合能力,活性最好,与我们实验得出的结论一致。降解产物的活性检测结果及软件分析结果的排列顺序均表明分子中所含的异戊烯基及酚羟基可能为淫羊藿苷降解产物发挥α-葡萄糖苷酶抑制作用的活性基团。

关键词：淫羊藿苷降解产物 α-葡萄糖苷酶活性基团

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心舒胶囊质量标准研究

中成药 2005年第9期27卷 1109-1111页

作者：赫玉芳南敏伦司学玲赵全成吉林天药科技股份有限公司吉林长春130012 吉林省西洋参集团有限公司吉林靖宇135200

心舒胶囊是吉林天药科技股份有限公司在传统产品心舒丸的基础上经过改革而研制的新制剂,是由三七、丹参、冰片、藤合欢、木香、苏合香等中药组成.具有行气活血,通窍,解郁的功效,用于冠心病引起的胸闷气短,心绞痛.其中三七为常用中药,系... 详细信息

心舒胶囊是吉林天药科技股份有限公司在传统产品心舒丸的基础上经过改革而研制的新制剂,是由三七、丹参、冰片、藤合欢、木香、苏合香等中药组成.具有行气活血,通窍,解郁的功效,用于冠心病引起的胸闷气短,心绞痛.其中三七为常用中药,系五加科植物三七Panax Notoginseng（Burk.）F.H. Chen的干燥根.临床应用十分广泛具有散瘀止血,消肿定痛的功效.在中成药中与三七配伍者不胜枚举,本文通过对心舒胶囊中冰片、丹参薄层鉴别,利用高效液相色谱法对人参皂苷Rb1和Rg1的含量进行了测定,并对该方法学进行考察,结果表明该方法可以控制复方制剂的质量。[第一段]

关键词：心舒胶囊质量标准 HPLC 人参皂苷Rb1 人参皂苷Rg1

HPLC法测定熊胆救心滴丸中人参皂苷Rg_1和人参皂苷Re的含量

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沈阳药科大学学报 2005年第1期22卷 26-28,32页

作者：赫玉芳南敏伦司学玲赵全成吉林天药科技股份有限公司吉林长春130012 吉林省西洋参集团有限公司吉林靖宇135200

目的建立熊胆救心滴丸中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法。方法采用DikmaODSC18柱 ,流动相为乙腈 0 0 5 % (φ)磷酸溶液 (V∶V =2 1∶79) ,检测波长为 2 0 3nm。结果人参皂苷Rg1在 0 3～ 2 4 μg内其含量与峰面积呈良好的... 详细信息

目的建立熊胆救心滴丸中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法。方法采用DikmaODSC18柱 ,流动相为乙腈 0 0 5 % (φ)磷酸溶液 (V∶V =2 1∶79) ,检测波长为 2 0 3nm。结果人参皂苷Rg1在 0 3～ 2 4 μg内其含量与峰面积呈良好的线性关系 ,平均回收率为 98 8% ,RSD为1 78%。人参皂苷Re在 0 2～ 1 6 μg内其含量与峰面积呈良好的线性关系 ,平均回收率为10 1 5 % ,RSD为 2 2 9%。结论测定方法准确、重现性好。

关键词：高效液相色谱法人参皂苷Rg1 人参皂苷Re 熊胆救心滴丸

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绒草清带片质量标准研究

药物分析杂志 2007年第8期27卷 1186-1189页

作者：赫玉芳南敏伦刘静月赵全成吉林省中医中药研究院长春130021

目的:建立绒草清带片的定性定量方法。方法:采用 TLC 法对处方中秦皮、赤芍、香附进行了定性鉴别;采用 HPLC 法,色谱柱:Shim-pack(岛津)C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水(每100 mL 磷酸水中加0.1 g 十二烷基硫酸钠)(46:54... 详细信息

目的:建立绒草清带片的定性定量方法。方法:采用 TLC 法对处方中秦皮、赤芍、香附进行了定性鉴别;采用 HPLC 法,色谱柱:Shim-pack(岛津)C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水(每100 mL 磷酸水中加0.1 g 十二烷基硫酸钠)(46:54)为流动相,检测波长为265 nm,流速1 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量10μL,对方中关黄柏所含小檗碱进行含量测定。结果:绒草清带片中秦皮、赤芍、香附薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;绒草清带片中小檗碱的含量测定线性范围为0.09～0.45μg(r=0.9999),平均回收率为99.8%(RSD=0.96%,n=5)。结论:薄层色谱鉴别和含量测定方法准确可行,重复性好,可有效地控制绒草清带片的质量。

关键词：绒草清带片质量标准 HPLC 小檗碱

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两种长白山橐吾挥发油成分分析

食品科学 2010年第10期31卷 228-230页

作者：董然南敏伦刘洪章吉林农业大学园艺学院吉林长春130118 吉林省中医药科学院吉林长春130118

以蹄叶橐吾和有毛蹄叶橐吾叶片为原料,采用水蒸气蒸馏法提取其挥发油,用面积归一化法测定其相对含量并用气相色谱-质谱(GC-MS)法鉴定其化学成分。结果表明:从两种马蹄叶挥发油中均分离得到11个化学组分峰,共鉴定出13个化合物,其中蹄叶... 详细信息

以蹄叶橐吾和有毛蹄叶橐吾叶片为原料,采用水蒸气蒸馏法提取其挥发油,用面积归一化法测定其相对含量并用气相色谱-质谱(GC-MS)法鉴定其化学成分。结果表明:从两种马蹄叶挥发油中均分离得到11个化学组分峰,共鉴定出13个化合物,其中蹄叶橐吾鉴定出9个化合物,占总挥发油的72.72%,主要成分为α-金合欢烯、石竹烯、A-法呢烯及3,7-二甲基-6-辛烯-1-醇甲酸酯,前3种倍半萜类化合物以60.23%的总相对含量占优势;有毛蹄叶橐吾鉴定出7个化合物,占总挥发油的67.52%,主要成分为3,7,11-三甲基-2,6,10-十二烷三烯-1-醇乙酸酯(金合欢醇乙酸酯)、植物醇、石竹烯及石竹烯氧化物,后两种倍半萜类化合物相对含量为20.07%;已鉴定的化合物均首次从这两种橐吾叶片中检出。

关键词：蹄叶橐吾挥发油气相色谱-质谱(GC-MS)

Box-Behnken响应面法优化紫穗槐根中总异黄酮提取工艺

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中成药 2016年第5期38卷 1177-1179页

作者：赵昱玮南敏伦于淼司学玲吕娜赫玉芳吉林省中医药科学院吉林长春130012 长春三德天晟科技有限公司吉林长春130012 修正药业长春高新制药有限公司吉林长春130012 吉林农业大学吉林长春130118

目的优化紫穗槐根中总异黄酮的提取工艺。方法以毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷为指标,采用紫外分光光度法测定总异黄酮含有量。在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面法研究乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数对紫穗槐总... 详细信息

目的优化紫穗槐根中总异黄酮的提取工艺。方法以毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷为指标,采用紫外分光光度法测定总异黄酮含有量。在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面法研究乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数对紫穗槐总异黄酮提取率的影响。结果最优提取工艺为乙醇体积分数70%,料液比1∶13,提取时间3 h,提取次数3次。在此条件下,紫穗槐根总异黄酮的提取率为5.59%。结论该工艺简便可靠,提取率高,可为紫穗槐根中总异黄酮的开发利用奠定基础。

关键词：紫穗槐根总异黄酮提取工艺 Box-Behnken响应面法

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炎热清片中龙胆苦苷的薄层鉴别及含量测定

中国实验方剂学杂志 2013年第3期19卷 118-120页

作者：赵昱玮于淼司学玲南敏伦梁雪丽袁媛孙玉滨吉林天药药物研发有限公司长春130012 修正药业长春高新制药有限公司长春130012 吉林省中医药科学院长春130012 吉林天药本草堂制药有限公司长春130012 白求恩医科大学制药厂长春130012

目的:建立炎热清片中龙胆苦苷的薄层鉴别及含量测定的方法。方法:采用TLC对组方中龙胆苦苷进行定性鉴别和采用HPLC对其进行含量测定。结果:薄层色谱斑点分离效果较好(Rf=0.600),斑点显色清晰且无干扰、重复性好;龙胆苦苷在0.222 5～1.78... 详细信息

目的:建立炎热清片中龙胆苦苷的薄层鉴别及含量测定的方法。方法:采用TLC对组方中龙胆苦苷进行定性鉴别和采用HPLC对其进行含量测定。结果:薄层色谱斑点分离效果较好(Rf=0.600),斑点显色清晰且无干扰、重复性好;龙胆苦苷在0.222 5～1.78μg线性关系良好(n=5)。结论:该方法简便、准确,适用于组方中龙胆苦苷的鉴别和含量测定。

关键词：炎热清片龙胆苦苷薄层色谱高效液相色谱

RP-HPLC法同时测定金莲花中3种碳苷黄酮的含量

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沈阳药科大学学报 2013年第3期30卷 197-200页

作者：赫玉芳南敏伦赵昱玮司学玲何帆赵全成吉林省中医药科学院吉林长春130012 修正药业集团长春高新制药有限公司吉林长春130012

目的建立金莲花药材中3种碳苷黄酮含量同时测定的方法,以比较不同产地金莲花药材及不同部位中3种成分的含量。方法采用RP-HPLC法。色谱柱:Shim-pack C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈体积分数为0.35%的磷酸溶液(体积比为16∶84)... 详细信息

目的建立金莲花药材中3种碳苷黄酮含量同时测定的方法,以比较不同产地金莲花药材及不同部位中3种成分的含量。方法采用RP-HPLC法。色谱柱:Shim-pack C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈体积分数为0.35%的磷酸溶液(体积比为16∶84),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:345 nm,柱温:25℃。结果荭草苷、牡荆苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷能够达到基线分离;荭草苷在9.94～99.40 mg·L-1、牡荆苷在2.49～24.90 mg·L-1、荭草素2″OβL半乳糖苷在10.64～106.40 mg·L-1内线性关系良好。结论本方法为金莲花药材的综合利用和资源开发提供了参考,有利于控制金莲花药材的质量。

关键词：反相高效液相色谱法金莲花荭草苷牡荆苷荭草素-2”-O-β-L-半乳糖苷

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紫穗槐根的指纹图谱分析及指标成分含量测定

中药材 2016年第9期39卷 2041-2045页

作者：赵昱玮于淼南敏伦吕娜司学玲赫玉芳吉林省中医药科学院吉林长春130012 长春三德天晟科技有限公司吉林长春130012 吉林农业大学吉林长春130118 修正药业长春高新制药有限公司吉林长春130012

目的:采用HPLC法建立紫穗槐根的指纹图谱,并建立同时测定紫穗槐根中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量的方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱... 详细信息

目的:采用HPLC法建立紫穗槐根的指纹图谱,并建立同时测定紫穗槐根中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量的方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长为260 nm。对采集的10批紫穗槐根进行测定,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"(2004A)版进行相似度评价,运用SPSS软件进行聚类分析。结果:建立了紫穗槐根的HPLC指纹图谱及4种成分的含量测定方法。10批紫穗槐根的HPLC指纹图谱共标定16个共有峰,相似度均在0.90以上。结论:该方法建立的紫穗槐根HPLC指纹图谱特征性强、重复性好,为紫穗槐根的鉴定及质量控制提供了参考。

关键词：紫穗槐指纹图谱含量测定