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长链非编码RNANEAT1对HaCaT细胞中miR-485-5p和STAT3表达的影响

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临床皮肤科杂志 2024年第2期53卷 75-83页

作者：唐志铭丁继存陆鹭单霄王咏露鹿晓兰荆梦晴徐州市中医院皮肤科江苏徐州221003 徐州市第一人民医院烧伤整形科江苏徐州221000

目的:探讨LncRNA NEAT1对HaCaT细胞中miR-485-5p和STAT3表达的调控及对HaCaT细胞增殖、凋亡的影响。方法:采用PCR、Western印迹法检测HaCat细胞和正常人表皮角质形成细胞(NHEK细胞)中LncRNANEAT1、miR-485-5p及STAT3 mRNA和蛋白表达情况。荧光原位杂交技术(FISH)和双荧光素酶报告基因检测LncRNA NEAT1、miR-485-5p和STAT3之间的靶向调控关系。再通过RNA干扰技术分别沉默HaCat细胞中LncRNANEAT1、STAT3表达,以及转染miR-485-5p模拟剂(mimic)和抑制剂(inhibitor)分别上、下调miR-485-5p,然后应用PCR、Western Blot、流式细胞术、CCK8等实验技术分别检测LncRNANEAT1、miR-485-5p、STAT3表达及细胞增殖、凋亡情况。结果:与NHEK细胞组相比,LncRNA NEAT1和STAT3在HaCaT细胞组中高表达,而miR-485-5p在HaCaT细胞中低表达;miR-485-5p与LncRNA NEAT1共定位于HaCaT细胞质,且miR-485-5p与LncRNA NEAT1 3′-UTR、STAT3 3′-UTR之间存在互补结合序列;共转染转野生型psiCHECK-LncRNA NEAT1-3′UTR-WT、psiCHECK-STAT3-3′UTR-WT重组质粒时,miR-485-5pmimic组相对萤光素酶活性明显低于miR-NC组。而共转染突变型psiCHECK-LncRNANEAT1-3′UTR-MUT、psiCHECK-STAT3-3′UTR-MUT重组载体质粒时,miR-485-5p mimic组和miR-NC组萤光素酶活性无明显差异;沉默LncRNA NEAT1或STAT3均可抑制HaCaT细胞增殖及促进其凋亡;下调miR-485-5p可促进HaCaT细胞增殖及抑制其凋亡,而上调miR-485-5p则与之相反;下调miR-485-5p可减弱沉默LncRNANEAT1对HaCaT细胞功能的影响。结论:LncRNANEAT1可通过充当竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)吸附miR-485-5p增强STAT3表达来促进HaCaT细胞增殖并抑制其凋亡。

关键词： HaCaT细胞银屑病 LncRNA NEAT1 miR-485-5p STAT3

调Q-Nd:YAG激光联合桂枝茯苓汤加减治疗痰瘀互结型玫瑰痤疮疗效分析

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内蒙古中医药 2024年第1期43卷 108-111页

作者：鹿晓兰李敬果唐志铭单霄陈桂升张晓宇李洁管志强丁继存徐州市中医院皮肤科江苏徐州230038 徐州市第一人民医院皮肤科江苏东徐州230038

目的:评价调Q-Nd:YAG激光联合桂枝茯苓汤加减治疗痰瘀互结型玫瑰痤疮疗效的影响。方法:将纳入研究的129例痰瘀互结型玫瑰痤疮病患者按照随机数表法分为治疗组和对照1.2组。对照1组予以调Q-Nd:YAG激光治疗,对照2组予以桂枝茯苓汤加减治... 详细信息

目的:评价调Q-Nd:YAG激光联合桂枝茯苓汤加减治疗痰瘀互结型玫瑰痤疮疗效的影响。方法:将纳入研究的129例痰瘀互结型玫瑰痤疮病患者按照随机数表法分为治疗组和对照1.2组。对照1组予以调Q-Nd:YAG激光治疗,对照2组予以桂枝茯苓汤加减治疗。治疗组采用联合治疗方案。统计三组治疗前后各项临床症状[毛细血管扩张面积占比和丘疹(脓疱)以及瘙痒红斑]评分及临床疗效、皮肤病生活质量指数(DLQI)量表评分,并比较三组临床疗效及不良反应情况和复发情况。结果:三组治疗前基本情况差异无统计学意义(P>0.05);治疗组皮损改善明显,有效率达86.0%(37/43),对照组有效率为65.1%(28/43)/60.4%(26/43),与对照1.2组比较差异有统计学意义(P0.05)。复发率方面,对照1.2组明显高于治疗组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:调Q-Nd:YAG激光联合桂枝茯苓汤加减治疗痰瘀互结型玫瑰痤疮临床疗效显著,不良反应少且复发率低,值得临床应用。

关键词：调Q-Nd:YAG激光桂枝茯苓汤加减痰瘀互结型玫瑰痤疮生活质量指数丘疹脓疱型

葆青口服液对肝郁脾虚型黄褐斑大鼠模型MDA、SOD及皮肤黑色素细胞的影响

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葆青口服液对肝郁脾虚型黄褐斑大鼠模型MDA、SOD及皮肤黑色素细胞...

作者：单霄南京中医药大学

学位级别：硕士

研究目的采用紫外线照射、肌注黄体酮、劳倦及束缚综合方式建立肝郁脾虚型黄褐斑大鼠动物模型,以逍遥丸为对照组,观察葆青口服液对动物模型皮肤中黑色素细胞的分布和数量、血清和皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)的活力、丙二醛(MDA)含量的影... 详细信息

研究目的采用紫外线照射、肌注黄体酮、劳倦及束缚综合方式建立肝郁脾虚型黄褐斑大鼠动物模型,以逍遥丸为对照组,观察葆青口服液对动物模型皮肤中黑色素细胞的分布和数量、血清和皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)的活力、丙二醛(MDA)含量的影响。研究内容和方法本实验选择昆明种白色雌性大鼠60只,体重(200±5)g。采用紫外线局部照射、肌注黄体酮、劳倦及束缚方式制作肝郁脾虚型黄褐斑病理模型。实验4周后用佳能EOS600D相机记录造模前后大鼠背部皮肤的变化。筛选合格的模型鼠48只,然后随机分成6组：空白对照组(A)、肝郁脾虚黄褐斑模型组(B)、葆青口服液低剂量治疗组(C)、葆青口服液中剂量治疗组(D)、葆青口服液高剂量治疗组(E)、逍遥丸对照组(F),每组8只,按实验设计分笼喂养,实验4周后,下腔静脉取血检测血清SOD活性和血清MDA含量的变化;背部皮肤取材HE染色、HMB-45染色,观察黑色素的变化;背部取材制备皮肤组织匀浆检测皮肤SOD活性和MDA含量的变化,记录实验数据,使用SPSS18.0软件包进行统计处理并对疗效进行评价。研究结果1、在综合方式下造模形成的肝郁脾虚型黄褐斑大鼠模型组与空白对照组相比：模型组大鼠皮肤组织和血清中SOD值低于空白对照组,具有显著性差异(P<0.01,P<0.05);模型组大鼠皮肤组织中的MDA值和血清中MDA值与空白对照组相比提高,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。2、各组大鼠皮肤组织SOD值比较：经多个相关样本的非参数检验,X2=20.286,P=0.001<0.01,各组皮肤组织SOD有非常显著性差异;葆青口服液高、低剂量组与中剂量组相比未呈现一定的量效关系;葆青口服液中剂量组的SOD值明显高于逍遥丸组和模型组。3、各组大鼠血清中SOD活性值比较：经多个相关样本的非参数检验,X2=19.214,P=0.002<0.01,各组血清中SOD有非常显著性差异;模型组明显低于其他各组;葆青口服液中剂量组血清组织SOD活性高于高、低剂量组;葆青口服液中剂量组与逍遥丸组、模型组相比较,能显著提高大鼠血清SOD活力。4、各组大鼠皮肤组织匀浆MDA值比较：经多个相关样本的非参数检验,X2=14,P=0.016<0.05,各组皮肤组织MDA有显著性差异;葆青口服液低、中、高剂量对大鼠皮肤组织匀浆MDA值未见明显差异,葆青口服液中剂量组MDA值低于逍遥丸组和模型组。5、各组大鼠血清中MDA值比较：经多个相关样本的非参数检验,X2=21.143,P=0.001<0.01,各组皮肤组织MDA有非常显著性差异;模型组MDA值明显高于其它组;葆青口服液中剂量组的大鼠血清中MDA值低于低剂量组和高剂量组;葆青口服液中剂量组MDA值低于模型组及逍遥丸组。6、从皮肤的病理切片中可以观察到葆青口服液中剂量组皮下色素较其他治疗组减少,HMB-45染色弱阳性。研究结论葆青口服液中剂量组与其他治疗组相比,能提高肝郁脾虚型黄褐斑大鼠模型皮肤组织和血清中的SOD活力、降低皮肤组织和血清中的MDA值;与逍遥丸组相比有显著的差异;从皮肤的病理切片中可以观察到葆青口服液中剂量组大鼠模型皮下色素着色面积、深度明显低于其他四组。实验结果为葆青口服液防治黄褐斑提供了一定的理论基础和实验依据。

关键词：葆青口服液黄褐斑大鼠模型 MDA SOD 黑色素细胞

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果酸联合凉膈散面膜治疗中度痤疮的临床疗效

内蒙古中医药 2023年第7期42卷 88-89页

作者：陆鹭管志强唐志铭单霄徐州市中医院皮肤科江苏徐州221000 徐州市第一人民医院皮肤科江苏徐州221000

目的:观察果酸联合凉膈散面膜治疗中度痤疮的临床疗效。方法:将符合改良Pillsbury标准的267例患者分成三组,分别为果酸联合凉膈散组(试验组89例),单纯果酸对照组(T1组89例),果酸联合中药倒膜对照组(T2组89例),治疗6周观察疗效。结果:果... 详细信息

目的:观察果酸联合凉膈散面膜治疗中度痤疮的临床疗效。方法:将符合改良Pillsbury标准的267例患者分成三组,分别为果酸联合凉膈散组(试验组89例),单纯果酸对照组(T1组89例),果酸联合中药倒膜对照组(T2组89例),治疗6周观察疗效。结果:果酸联合凉膈散组总体有效率86.51%(77/89),对照T1组为53.93%(48/89),对照T2组为69.66%(62/89),试验组与对照T1组有显著差异(P<0.01),与对照T2组有一般差异(P<0.05)。结论:果酸联合凉膈散面膜疗效确切,为中度痤疮优秀治疗组合。

关键词：果酸凉膈散面膜联合疗效观察

犀地凉血方通过LncRNA NEAT1/miR-485-5p/STAT3调控网络对HaCaT细胞增殖、凋亡影响的研究

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中华皮肤科杂志 2023年第7期56卷 642-650页

作者：唐志铭荆梦晴陆鹭单霄张翠侠张晓宇孟飒徐州市中医院皮肤科徐州221003

目的探讨犀地凉血方对HaCaT细胞LncRNA NEAT1/miR-485-5p/STAT3调控网络及细胞增殖、凋亡的影响。方法以IL-17诱导的HaCaT细胞为研究对象,通过qPCR、Western印迹法检测LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3 mRNA和蛋白在HaCaT细胞和正常人表皮角质形成细胞(NHEK细胞)中的表达。采用荧光原位杂交技术(FISH)观察LncRNA NEAT1、miR-485-5p在HaCaT细胞中的表达;采用双萤光素酶报告基因实验验证LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3之间的靶向调控关系。犀地凉血方煎煮取汁给予大鼠灌胃后采集含药血清,以含药血清干预和/或LncRNA-NEAT1过表达载体转染HaCaT细胞,将HaCaT细胞分对照组、过表达LncRNA NEAT1组、犀地凉血方组、犀地凉血方+过表达LncRNA NEAT1组,采用qPCR、Western印迹法、流式细胞仪、CCK8等实验技术分别检测LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3表达及细胞增殖、凋亡情况。采用独立样本t检验、单因素方差分析、LSD-t检验进行统计学分析。结果IL-17诱导的HaCaT细胞组LncRNA NEAT1、STAT3 mRNA相对表达水平(1.84±0.21、2.20±0.24)高于NHEK细胞组(1.00±0.11、1.00±0.11,均P0.05)。过表达LncRNA NEAT1组HaCaT细胞中LncRNA NEAT1、STAT3(包括STAT3 mRNA和STAT3、p-STAT3蛋白)表达水平高于对照组,miR-485-5p表达水平低于对照组;犀地凉血方组LncRNA NEAT1、STAT3表达水平低于对照组,miR-485-5p表达水平高于对照组;犀地凉血方+过表达LncRNA NEAT1组LncRNA NEAT1、STAT3表达水平低于过表达LncRNA NEAT1组,而miR-485-5p表达水平高于过表达LncRNA NEAT1组(均P<0.05)。CCK8法检测显示,药物干预24、48、72 h时,过表达LncRNA NEAT1组HaCaT细胞增殖活性明显高于对照组,犀地凉血方+过表达LncRNA NEAT1组HaCaT细胞增殖活性高于犀地凉血方组,但二者均低于对照组(均P<0.05)。过表达LncRNA NEAT1组HaCaT细胞凋亡率(5.84%±0.28%)低于对照组(14.75%±0.83%,LSD-t=3.48,P=0.002),而犀地凉血方组(35.72%±3.62%)高于对照组(LSD-t=5.34,P=0.001);犀地凉血方+过表达LncRNA NEAT1组细胞凋亡率(27.64%±2.82%)高于过表达LncRNA NEAT1组(LSD-t=9.06,P<0.001)。结论犀地凉血方能抑制HaCaT细胞增殖并促进其凋亡,作用机制与其干预LncRNA NEAT1/miR-485-5p/STAT3调控网络相关。

关键词：银屑病微RNAs STAT3转录因子角蛋白细胞细胞增殖细胞凋亡犀地凉血方 LncRNA NEAT1

犀地凉血方对银屑病模型小鼠LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3表达及相关炎症因子水平的影响

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中国皮肤性病学杂志 2023年第4期37卷 406-415页

作者：唐志铭荆梦晴李敬果陆鹭单霄陈桂升李洁徐州市中医院皮肤科江苏徐州221003

目的探讨犀地凉血方治疗银屑病的机制。方法将30只BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组及犀地凉血方低、中、高剂量组,每组5只。对照组小鼠背部脱毛区外涂凡士林,而其余各组小鼠则外涂咪喹莫特(IMQ)乳膏造模,并于造模当天给... 详细信息

目的探讨犀地凉血方治疗银屑病的机制。方法将30只BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组及犀地凉血方低、中、高剂量组,每组5只。对照组小鼠背部脱毛区外涂凡士林,而其余各组小鼠则外涂咪喹莫特(IMQ)乳膏造模,并于造模当天给药干预。采用PASI评分对小鼠皮损情况进行评价,HE染色观察皮损病理形态学特征,IHC检测皮损组织中STAT3蛋白表达情况,qPCR及Western blot分别检测皮损组织中LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3基因及蛋白表达情况,ELISA法检测外周血中IL-17A、TNF-α、IL-22水平。结果模型组小鼠出现典型的银屑病样皮损及相应的组织病理学改变,而犀地凉血方各剂量组能明显减轻小鼠皮损处红斑、鳞屑及浸润程度,降低PASI评分,并减轻表皮增生、角化过度及淋巴细胞浸润等。与对照组相比,模型组小鼠皮损组织中LncRNA NEAT1、STAT3高表达而miR-485-5p低表达;犀地凉血方各剂量组中LncRNA NEAT1、STAT3表达降低,miR-485-5p表达升高。与对照组相比,模型组小鼠外周血中IL-17A、TNF-α、IL-22含量显著升高,而犀地凉血方各剂量组能明显降低三者水平。结论犀地凉血方能明显改善银屑病模型小鼠皮损及降低外周血中相关炎症因子水平,作用机制可能与其干预LncRNA NEAT1调控miR-485-5p、STAT3表达有关。

关键词：犀地凉血方银屑病 LncRNA NEAT1 miR-485-5p STAT3

SA-PQ-11/CF阳极提高MFC废水处理效果与发电性能

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精细化工 2024年第5期41卷 1101-1107页

作者：樊立萍温越霄沈阳化工大学工业环境-资源协同控制与优化技术辽宁省高校重点实验室辽宁沈阳110142 沈阳化工大学环境与安全工程学院辽宁沈阳110142

为提高微生物燃料电池(MFC)的废水处理效果和发电性能,制备了一种海藻酸钠(SA)-聚季铵盐-11(PQ-11)/碳毡(CF)阳极(SA-PQ-11/CF),分别以制药废水和糖蜜废水为阳极液,以CF为阴极,构建了MFC系统,采用SEM对阳极表面形貌进行了表征,通过循环... 详细信息

为提高微生物燃料电池(MFC)的废水处理效果和发电性能,制备了一种海藻酸钠(SA)-聚季铵盐-11(PQ-11)/碳毡(CF)阳极(SA-PQ-11/CF),分别以制药废水和糖蜜废水为阳极液,以CF为阴极,构建了MFC系统,采用SEM对阳极表面形貌进行了表征,通过循环伏安(CV)特性和电化学阻抗(EIS)特性、化学需氧量(COD)去除率对其性能进行了考察。结果表明,SA-PQ-11/CF阳极具有较大的比表面积,MFC的溶液电阻和电荷转移电阻得到明显降低。阳极液为制药废水时,采用SA-PQ-11/CF阳极的MFC的稳态输出电压和COD去除率分别约为0.22 V和62%,较常规CF阳极的MFC分别提高了100%和130%;阳极液为糖蜜废水时,采用SA-PQ-11/CF阳极的MFC的稳态输出电压和COD去除率分别为0.15 V和43%,分别较采用常规CF阳极的MFC提高了275%和95%。

关键词：微生物燃料电池废水处理阳极改性海藻酸钠聚季铵盐-11 发电性能

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论替代履行的实体法定位

求索 2024年第4期 74-83页

作者：任倩霄吉林大学法学院暨理论法学研究中心吉林长春130012

《民法典》第581条规定的替代履行呈现出“混血儿”特质:从债权人角度观之,债权人可借助替代履行获得实际履行从而实现合同目的,其与实际履行请求权极为接近;自债务人角度观之,因债务人须承担替代履行的费用,替代履行与替代给付的损害... 详细信息

《民法典》第581条规定的替代履行呈现出“混血儿”特质:从债权人角度观之,债权人可借助替代履行获得实际履行从而实现合同目的,其与实际履行请求权极为接近;自债务人角度观之,因债务人须承担替代履行的费用,替代履行与替代给付的损害赔偿亦有相似之处。从《民法典》第581条将替代履行的适用范围限定于不得强制履行的债务可知,替代履行不同于替代交易,替代履行的费用求偿权亦非替代给付的损害赔偿请求权,而是一种独立的违约救济措施。现行法中关于实际履行和损害赔偿的相关规则不可全盘适用于替代履行,须结合替代履行的体系定位逐一判断。此外,替代履行是对替代执行的突破和例外,其适用范围应当有所限制。

关键词：替代履行替代交易替代给付的损害赔偿不得强制履行

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LncRNA NEAT1与银屑病及其共病关系的研究进展

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皮肤性病诊疗学杂志 2023年第1期30卷 38-43页

作者：唐志铭荆梦晴单霄陆鹭李洁徐州市中医院江苏徐州221003

长链非编码RNA核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,NEAT1)可通过参与核旁斑形成、充当竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)、表观遗传修饰等途径调控基因表达,从而参与炎症反应、免疫应答、细胞增殖分化... 详细信息

长链非编码RNA核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,NEAT1)可通过参与核旁斑形成、充当竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)、表观遗传修饰等途径调控基因表达,从而参与炎症反应、免疫应答、细胞增殖分化等生理和病理学过程,与许多疾病的发生密切相关。LncRNA NEAT1在银屑病及其共病中表达明显升高,在其发生发展中发挥重要作用。本文就LncRNA NEAT1概况、在银屑病及其共病中的作用机制研究进展做一综述。

关键词：长链非编码RNA LncRNA NEAT1 银屑病银屑病共病