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枸杞多糖对过氧化氢诱导的HK-2细胞自噬及ERK/mTOR通路激活的影响

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职业与健康 2024年第10期40卷 1333-1337页

作者：单铁强郭明皮珊珊张银平郭菲单铁英秦皇岛市海港医院检验科河北秦皇岛066000 秦皇岛市海港医院肾内科河北秦皇岛066000 河北工程大学医学院河北邯郸056002

目的分析枸杞多糖对过氧化氢所致人肾小管上皮细胞(human kidney,HK-2)的损伤情况、细胞内自噬蛋白表达以及细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路的激活情况,探讨枸杞多糖改善其氧化损伤的作用机制。方法体外培养人源性HK-2细胞,根据处理方式不同分为对照组、枸杞多糖组、氧化应激组及干预组。对照组使用细胞培养液;枸杞多糖组使用含有枸杞多糖的细胞培养液;氧化应激组使用含有过氧化氢的细胞培养液;干预组先用枸杞多糖细胞培养液孵育24 h,再滴加过氧化氢孵育30 min,每组处理时间相同。观察每组细胞的生长状态;使用细胞活力检测盒分析各组细胞的存活率;比色法分析胞质所含丙二醛(malondialdehyde,MDA)的量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性;蛋白印迹评估胞质内自噬蛋白微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)及ERK/mTOR通路相关蛋白ERK、磷酸化-ERK(phosphorylation ERK,p-ERK)、mTOR和磷酸化-mTOR(phosphorylation mTOR,p-mTOR)的含量。结果与对照组比较,枸杞多糖组细胞生长状态、存活率、胞质所含MDA含量和SOD活性、自噬蛋白LC3及ERK/mTOR通路相关蛋白ERK、p-ERK、mTOR和p-mTOR的含量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);氧化应激组细胞皱缩、悬浮较多,存活率[(51.16±4.85)%]下降、MDA[(4.78±0.81)mmol/L]升高、SOD[(10.11±1.17)U/L]降低,胞质内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ[(0.391±0.058)]降低、p-ERK/ERK[(1.526±0.185)]、p-mTOR/mTOR[(1.423±0.174)]升高(均P强细胞的自噬作用,提高细胞存活率,改善其氧化损伤。

关键词：枸杞多糖自噬肾小管上皮细胞外调节蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白信号通路

枸杞多糖通过激活Nrf2/HO-1通路保护HK-2细胞氧化损伤的作用

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中国实验诊断学 2024年第4期28卷 474-477页

作者：赵杰史素芳单铁强郭明皮珊珊张银平郭菲邯郸市中心医院临检科河北邯郸056002 河北工程大学附属医院护理科河北邯郸056002 秦皇岛市海港医院检验科河北秦皇岛066000 秦皇岛市海港医院肾内科河北秦皇岛066000

目的分析枸杞多糖(LBP)干预对氧化损伤的人肾小管上皮细胞(HK-2)内的核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路蛋白表达的变化,探索LBP拮抗HK-2细胞氧化损伤的分子机制。方法采用过氧化氢诱导HK-2细胞制备氧化损伤细胞模型,HK-... 详细信息

目的分析枸杞多糖(LBP)干预对氧化损伤的人肾小管上皮细胞(HK-2)内的核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路蛋白表达的变化,探索LBP拮抗HK-2细胞氧化损伤的分子机制。方法采用过氧化氢诱导HK-2细胞制备氧化损伤细胞模型,HK-2被分成4组:正常组、LBP组、氧化损伤组及LBP干预组。观察4组细胞的长势和形态变化;细胞活力测定法比较每组细胞的存活率;比色法分析氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的水平;免疫印迹技术检测细胞内Nrf2/HO-1通路蛋白Nrf2、HO-1的相对水平。结果正常组和LBP组相比,两组的细胞长势、形态和存活率,细胞产生MDA的量、SOD和GSH-Px的水平,通路蛋白Nrf2、HO-1的相对水平均无明显差异(均P>0.05);氧化损伤组和正常组相比,细胞皱缩变圆并脱落、贴壁细胞变少,存活率减少、MDA量增加、SOD和GSH-Px降低,通路蛋白Nrf2、HO-1的相对值下降(均P<0.05);LBP干预组和氧化损伤组相比,细胞长势、形状恢复、贴壁细胞较多,存活率增加、MDA量减少、SOD和GSH-Px升高,通路蛋白Nrf2、HO-1的相对值升高(均P<0.05)。结论枸杞多糖能通过激活Nrf2/HO-1通路提高HK-2细胞的抗氧化酶活性达到减轻细胞氧化损伤的目的。

关键词：枸杞多糖肾小管上皮细胞氧化损伤 Nrf2/HO-1通路

香加皮对大鼠食管癌形成的影响及其免疫调节作用的实验研究

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香加皮对大鼠食管癌形成的影响及其免疫调节作用的实验研究

作者：单铁强河北医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨香加皮三萜类化合物对模型大鼠食管癌病理变化的影响及其免疫调节作用,以期为治疗食管癌寻找有效药物,同时为中药香加皮的二次开发利用提供实验依据。方法: 1食管癌动物模型的构建及实验分组。 1.1健康雄性F344大鼠141只,被... 详细信息

目的:探讨香加皮三萜类化合物对模型大鼠食管癌病理变化的影响及其免疫调节作用,以期为治疗食管癌寻找有效药物,同时为中药香加皮的二次开发利用提供实验依据。方法: 1食管癌动物模型的构建及实验分组。 1.1健康雄性F344大鼠141只,被随机分为正常对照组、大豆油对照组、模型组、低剂量治疗组、高剂量治疗组。 1.2以上各组大鼠按下列方法处理:正常对照组常规饲养,大豆油对照组肌注大豆油1ml/kg;模型组大鼠仅皮下注射甲基苄基亚硝胺NMBA(0.5mg/kg);治疗低剂量组在注射NMBA(0.5mg/kg)诱癌的同时预防性给予肌注香加皮三萜类化合物10mg/kg治疗;治疗高剂量组在注射NMBA(0.5mg/kg)诱癌的同时预防性给予肌注香加皮三萜类化合物20mg/kg治疗。以上各组均每周给药3次,共5周。 2光镜下观察食管组织病理学变化。 3免疫组织化学SP法检测各组大鼠食管粘膜PCNA蛋白表达水平的变化。 4采用流式细胞技术,分析香加皮三萜类化合物对实验性大鼠外周血中T淋巴细胞亚群CD4CD25调节性T细胞的影响。 5应用ELISA检测技术,分析香加皮三萜类化合物对实验性大鼠外周血中细胞因子IL-2、IL-10水平的影响。结果: 1实验动物一般状况:实验期间各组大鼠体重正常增长,各组间平均体重变化无显著性差异。正常对照组、大豆油对照组、模型组及治疗组大鼠肝、肾、肺等脏器未见肉眼可见和组织病理学上的变化。 2正常对照组及大豆油对照组在实验整个过程中未发现食管肿瘤的发生。用NMBA处理大鼠9周后,未发现食管肿瘤的发生。而NMBA处理大鼠15周后,约有18%的动物出现肉眼可见的多发或单发的隆起性病变,实验25周时,66.7%模型组大鼠发生肉眼可见(≥1mm)食管肿瘤;香加皮三萜类化合物高剂量治疗组和低剂量治疗组均明显降低了食管癌大鼠肿瘤发生,其发病率降至20%和33.3%(p强;诱癌不同时间(9、15、25周)其模型组PCNA阳性细胞数分别为213.17±29.74、268.35±39.56、327.24±28.19,统计分析表明,模型组PCNA阳性表达数显著高于正常对照组的表达。香加皮三萜类化合物高低、剂量治疗组与模型组相比,PCNA的表达均显著降低(p强。 3香加皮三萜类化合物能使大鼠食管癌外周血中CD4 T细胞比例升高、CD4CD25 Tr细胞比例降低;4香加皮三萜类化合物可有效抑制实验性食管癌大鼠外周血IL-10的表达、增加实验性食管癌大鼠外周血中IL-2的水平。

关键词：甲基苄基亚硝胺香加皮 PCNA 食管癌 CD4+CD25+调节性T细胞 IL-10 IL-2 免疫调节

高校“一站式”学生社区建设内在逻辑与实践进路

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江苏高教 2024年第5期 87-91页

作者：单德伟强飙南京审计大学润园书院南京211815 南京审计大学党委宣传部南京211815 南京审计大学&《江苏高教》编辑部高等教育研究协同创新中心南京211815

高校“一站式”学生社区作为生态育人空间,是现代大学治理体系下学生综合管理模式改革的重要抓手,其建设内在逻辑是有效链接“一二三四课堂”、服务学生成长发展需求、培养学生完整人格。目前,高校“一站式”社区建设仍面临理念共识不... 详细信息

高校“一站式”学生社区作为生态育人空间,是现代大学治理体系下学生综合管理模式改革的重要抓手,其建设内在逻辑是有效链接“一二三四课堂”、服务学生成长发展需求、培养学生完整人格。目前,高校“一站式”社区建设仍面临理念共识不深、协同机制不畅、文化建设不强、科技赋能水平不高等现实困境。文章基于高校育人环境供给和学生成长需求平衡的视角,以学生成长需求侧为支点,研究如何为学生提供高效、便捷的一站式服务,在借鉴空间生产理论、社区理论和“一站式服务”理念基础上,从主体、客体、制度和文化“四个维度”思考高校“一站式”学生社区建设整体推进路径。

关键词：高校“一站式”学生社区育人环境供给空间生产社区式服务

双氢青蒿素对脂多糖诱导的心肌成纤维细胞分泌炎性因子及NF-κB通路激活的影响

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职业与健康 2023年第21期39卷 2907-2910,2916页

作者：王燕单铁强栗志英李俊娇马景红齐秀芳邯郸市第二医院综合外科河北邯郸056002 秦皇岛市海港医院检验科河北秦皇岛066000 河北工程大学附属医院心内科河北邯郸056002 邯郸市第一医院血液内科河北邯郸056002

目的观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对脂多糖刺激的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖、分化、分泌胶原以及分泌炎性因子及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路激活的影响,探究DHA抑制心脏纤维化的分子机制... 详细信息

目的观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对脂多糖刺激的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖、分化、分泌胶原以及分泌炎性因子及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路激活的影响,探究DHA抑制心脏纤维化的分子机制。方法采用胰酶消化SD乳鼠心肌组织,获取其中的CFs。实验将CFs分为正常组(培养液)、DHA组(100 ng/mL DHA的培养液)、脂多糖组(50μg/mL脂多糖的培养液)、治疗组(50μg/mL脂多糖和100 ng/mL DHA的培养液)。每组细胞同时孵育48 h后,检测各组CFs的增殖变化;ELISA定量培养液中Ⅰ型胶原(collagen type I,ColⅠ)、Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,ColⅢ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)及白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平;免疫印迹法评估胞质内平滑肌-a-肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)、核因子κBp65(nuclear factorκBp65,NF-κBp65)及磷酸化核因子κBp65(phosphorylated nuclear factorκBp65,p-NF-κBp65)的水平。结果与正常组对比,DHA组的细胞增殖、培养液中ColⅠ、ColⅢ、TNF-α、IL-6及IL-1β的含量,胞质内a-SMA、NF-κBp65及p-NF-κBp65蛋白含量及NF-κBp65/p-NF-κBp65比值比较差异均无统计学意义(均P>0.05);脂多糖组细胞数目(0.1229±0.0014)增加,培养液中ColⅠ[(0.7532±0.0877)ng/L]、ColⅢ[(0.7233±0.0968)ng/L]、TNF-α[(46.78±3.60)pg/L]、IL-6[(30.08±3.93)pg/L]及IL-1β[(12.10±1.55)pg/L]含量均上升,胞质内a-SMA(0.438±0.026)、NF-κBp65(1.221±0.049)、p-NF-κBp65(1.209±0.048)的含量及NF-κBp65/p-NF-κBp65比值(0.967±0.046)均增加(均P<0.05);与脂多糖组对比,治疗组的细胞数目(0.1156±0.0012)减少,培养液中ColⅠ[(0.5424±0.0636)ng/L]、ColⅢ[(0.5027±0.0579)ng/L]、TNF-α[(25.32±3.05)pg/L]、IL-6[(19.12±3.00)pg/L]及IL-1β[(7.34±0.96)pg/L]含量均下降,胞质内a-SMA(0.208±0.020)、NF-κBp65(0.528±0.035)、p-NF-κBp65(0.206±0.026)的含量及NF-κBp65/p-NF-κBp65比值(0.412±0.025)均减少(均P<0.05)。结论双氢青蒿素能拮抗脂多糖刺激的CFs增殖、分化、分泌胶原及炎性因子的活性,这与其能有效降低NF-κB通路活性密切相关。

关键词：双氢青蒿素脂多糖心肌成纤维细胞炎性因子 NF-κB通路

枸杞多糖对肾小管上皮细胞的氧化损伤及PI3K/AKT信号通路的影响

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职业与健康 2023年第6期39卷 764-768页

作者：宋倩单铁英侯鑫陈楠单铁强刘晓丽邯郸市第一医院内科河北邯郸056002 河北工程大学医学院河北邯郸056002 秦皇岛市海港医院检验科河北秦皇岛066000 河北工程大学附属医院肾内科河北邯郸056002

目的观察枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))刺激所致的肾小管上皮细胞(HK2)的损伤作用以及磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶(protein kinase,AKT)通路蛋白表达的情况。方法孵育HK2细胞,采用H_(2)O_(2)刺激制作损伤模型。根据实验设计分为正常组、LBP对照组、模型组和LBP干预组。正常组:正常孵育;LBP对照组:正常孵育液中滴加LBP;模型组:正常孵育液中滴加H_(2)O_(2);LBP干预组:预先用LBP孵育24 h后再滴加H_(2)O_(2)。H_(2)O_(2)和LBP在孵育液中的含量分别为100μmol/L、100 mg/L。每组均干预24 h。光镜观察细胞形态变化,试剂盒测定其存活率,流式技术仪检验其凋亡率,比色法比较胞质内丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,蛋白印迹评估胞质内B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl 2-Associated X,Bax)、PI3K、AKT以及磷酸化的PI3K(p-PI3K)、AKT(p-AKT)水平。结果正常组和LBP对照组相比,在形态状况、存活率及凋亡率、胞质内MDA、SOD、Bcl-2、Bax、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT方面差异均无统计学意义(均P>0.05);模型组与正常组相比,细胞变圆、脱落,存活率[(50.23±3.38)%]降低,凋亡率[(52.49±3.56)%]增加,MDA含量[(4.63±0.69)mmol/L]上升,SOD活力[(9.56±0.71)U/L]下降,胞质内Bcl-2(0.165±0.023)、p-PI3K/PI3K(0.413±0.057)及p-AKT/AKT(0.647±0.063)含量降低,Bax含量(1.058±0.034)升高(均P<0.05);LBP干预组与模型组比较,细胞伸展、脱落少,存活率[(85.31±3.49)%]增加,凋亡率[(24.62±2.97)%]下降,MDA含量[(2.08±0.35)mmol/L]降低,SOD活力[(17.03±1.45)U/L]升高,胞质内Bcl-2(0.854±0.044)、p-PI3K/PI3K(0.718±0.079)及p-AKT/AKT(0.975±0.112)含量增加,Bax含量(0.213±0.023)减少(均P<0.05)。结论LBP能保护H_(2)O_(2)刺激所致的肾小管上皮细胞氧化损伤,增加其存活率并降低凋亡率,减少胞内有害物质,这些均和PI3K/AKT通路的激活紧密相关。

关键词：枸杞多糖过氧化氢肾小管上皮细胞 PI3K/AKT通路氧化损伤

枸杞多糖对睡眠剥夺大鼠血液中T细胞亚群及相关炎性因子的影响

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职业与健康 2023年第3期39卷 317-321页

作者：栾和芝单铁强姜柳韩长海祁皎吕晶河北港口集团有限公司港口医院检验科河北秦皇岛066000 秦皇岛市海港医院检验科河北秦皇岛066000 河北工程大学医学院河北邯郸056002

目的分析枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对睡眠剥夺大鼠血液中T细胞亚群型的数量、相关炎性因子以及大鼠行为能力的影响,探讨LBP对睡眠剥夺大鼠的免疫保护机制。方法将SD大鼠通过“多平台水环境”技术成功制备剥夺睡... 详细信息

目的分析枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对睡眠剥夺大鼠血液中T细胞亚群型的数量、相关炎性因子以及大鼠行为能力的影响,探讨LBP对睡眠剥夺大鼠的免疫保护机制。方法将SD大鼠通过“多平台水环境”技术成功制备剥夺睡眠大鼠模型,按照干预方法将其均等分成3组(模型组、LBP干预组及西药干预组),每组6只,同时把6只健康同种属大鼠作为对照组。在建模成功后4组鼠每天的干预用药不同,LBP干预组:灌服LBP(0.54 mg/kg),西药干预组:灌服舒乐安定(6 g/kg),模型组和对照组:灌服等容量三蒸水,持续用药4周。检测血液中T淋巴细胞亚群CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的比例以及CD4+T/CD8+T的比值;ELISA检测血液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-2(interleukin-2,IL-2)及白介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量;检测各组大鼠的行为学指标以衡量其大脑学习记忆功能的变化。结果和对照组相比,模型组大鼠血液中CD4+T细胞比例减少[(25.64±2.53)%],CD8+T细胞比例增多[(20.71±2.21)%],CD4+T/CD8+T比值(1.66±0.13)降低,血液中的炎性因子:TNF-α[(15.99±2.02)ng/mL]、IFN-γ[(3.22±0.45)ng/mL]、IL-1β[(22.70±2.87)pg/mL]、IL-2[(15.85±1.77)ng/mL]及IL-6[(64.65±6.23)pg/mL]的含量均增加,大鼠的行为能力[(42.36±4.60)s,(10.26±1.68)次]升高(均P0.05)。结论 LBP能够通过调节大鼠血液中T细胞亚型的数量及降低炎性因子的含量来提高睡眠剥夺大鼠的行为能力。

关键词：枸杞多糖睡眠剥夺 T细胞亚群炎性因子行为能力

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基于人工智能的电力系统运维知识大脑

智能物联技术 2024年第3期56卷 34-37页

作者：单铁园深圳力维智联技术有限公司广东深圳518057

针对电力系统运维知识庞杂、运维资料众多及运维人员上手慢等问题,提出一套基于人工智能的电力系统运维知识大脑的构建方法。知识大脑主要针对电力系统海量运维资料素材进行信息提取,根据电力系统的行业特点和运维相关的具体要求,完成... 详细信息

针对电力系统运维知识庞杂、运维资料众多及运维人员上手慢等问题,提出一套基于人工智能的电力系统运维知识大脑的构建方法。知识大脑主要针对电力系统海量运维资料素材进行信息提取,根据电力系统的行业特点和运维相关的具体要求,完成知识摘要、知识搜索、智能推荐及智能问答等4个业务构建,能够提升电力运维人员的上岗前知识学习速度和上岗后故障处理速度,为电力系统的安全运维提供保障。

关键词：人工智能电力系统运维知识大脑知识图谱

香加皮单体成分宝藿苷I对食管癌细胞增殖及凋亡的影响

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肿瘤 2009年第2期29卷 123-126页

作者：王丽芳单保恩刘丽华任凤芝单铁强河北医科大学第四医院科研中心石家庄050011 河北医科大学第二医院检验科石家庄050000 华北制药集团新药研究开发有限责任公司石家庄050015

目的:研究香加皮单体成分宝藿苷Ⅰ在体内外对人食管癌细胞Eca109的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法:采用柱层析和高效液相色谱等逐步分离法对香加皮抗肿瘤活性成分进行分离和纯化,应用薄层层析和电喷质谱分析进行成分鉴定;采用... 详细信息

目的:研究香加皮单体成分宝藿苷Ⅰ在体内外对人食管癌细胞Eca109的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法:采用柱层析和高效液相色谱等逐步分离法对香加皮抗肿瘤活性成分进行分离和纯化,应用薄层层析和电喷质谱分析进行成分鉴定;采用MTT法分析不同浓度宝藿苷Ⅰ对食管癌细胞株Eca109增殖的抑制作用;应用FCM分析细胞周期变化和凋亡率变化;皮下注射Eca109细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,通过肌肉注射给药检测宝藿苷Ⅰ的体内抗肿瘤效果;Western印迹法检测移植瘤组织凋亡相关基因survivin的表达变化。结果:宝藿苷Ⅰ可明显抑制Eca109细胞的增殖(P单体成分宝藿苷Ⅰ不仅在体外对Eca109细胞的增殖具有显著的抑制作用,在体内也有较好的抗食管癌效果。其抗瘤机制可能与阻滞Eca109细胞周期发展和诱导凋亡相关基因survivin的表达降低有关。

关键词：食管肿瘤模型, 动物细胞, Eca109 香加皮宝藿苷Ⅰ