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血浆胞外囊泡源性circ0001874通过负向调控miR-515-5p介导胃癌MGC-803细胞免疫逃逸

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现代免疫学 2024年第3期44卷 256-263页

作者：刘昌化闫圣玉谢文彪单汉国彭肃南华大学衡阳医学院附属第二医院胃肠外科衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第二医院肛肠科衡阳421001

为探讨血浆胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)源性circ0001874对胃癌MGC-803细胞免疫逃逸的影响,收集89例胃癌患者癌组织及其癌旁组织,同时分离血液中的EV,并将circ0001874 siRNA干扰质粒、circ0001874过表达质粒及其相关阴性对照质... 详细信息

为探讨血浆胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)源性circ0001874对胃癌MGC-803细胞免疫逃逸的影响,收集89例胃癌患者癌组织及其癌旁组织,同时分离血液中的EV,并将circ0001874 siRNA干扰质粒、circ0001874过表达质粒及其相关阴性对照质粒转染至EV中,采用qRT-PCR检测circ0001874和miR-515-5p的表达水平。将miR-515-5p inhibitor及其阴性对照NC inhibitor转染至MGC-803细胞,再分别与EV共培养48 h,采用qRT-PCR检测各组细胞中circ0001874和miR-515-5p的表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,Transwell法检测各组细胞侵袭情况,Western blotting检测各组肿瘤细胞参与免疫逃逸的蛋白[凋亡相关因子配体(factor related apoptosis ligand,FasL)、吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)、PD-L2和PD-L1]表达水平。结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中circ0001874表达水平升高(P<0.05),而miR-515-5p表达水平降低(P<0.05);circ0001874过表达或敲低后,EV中miR-515-5p表达水平降低或升高(P<0.05);与si-circ0001874 EV共培养后,MGC-803细胞中miR-515-5p表达水平升高,细胞增殖活性,细胞侵袭数量及免疫逃逸蛋白FasL、PD-L1、PD-L2和IDO1表达水平降低(P<0.05);抑制miR-515-5p可以逆转si-circ0001874 EV对MGC-803细胞增殖、侵袭及免疫逃逸的影响。该研究提示,血浆EV源性circ0001874通过靶向负调控miR-515-5p促进胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭及免疫逃逸。

关键词：胃癌胞外囊泡 circ0001874 微小RNA-515-5p 免疫逃逸

基于lncRNA DGCR5介导miR-1180/SFRP1/Wnt通路对结直肠癌细胞生长转移的影响

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中国医学工程 2023年第7期31卷 1-7页

作者：陈茂良单汉国南华大学附属第二医院胃肠外科湖南衡阳421001

目的分析长链编码RNA(lncRNA)DiGeorge综合征临界区基因5(DGCR5)对结直肠癌细胞生长转移的影响,并基于miR-1180/分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)/Wnt通路分析其中的机制。方法选取人结直肠癌细胞系SW480进行培养。将SW480细胞分为对照组(C组... 详细信息

目的分析长链编码RNA(lncRNA)DiGeorge综合征临界区基因5(DGCR5)对结直肠癌细胞生长转移的影响,并基于miR-1180/分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)/Wnt通路分析其中的机制。方法选取人结直肠癌细胞系SW480进行培养。将SW480细胞分为对照组(C组,正常培养SW480细胞)、DGCR5 NC组(SW480细胞+转染DGCR5 NC载体)、DGCR5 mimic组(SW480细胞+转染DGCR5 mimic载体)以及DGCR5 inhibitor组(SW480细胞+转染DGCR5 inhibitor载体)。转染完成后采用qPCR检测各组细胞中DGCR5的表达,验证细胞是否转染成功;分别采用CCK8法、克隆形成实验、平板划痕实验以及Transwell实验检测细胞活力、增值、迁移以及侵袭情况。荧光素酶报告测定lncRNA DGCR5与miR-1180的靶向关系;qPCR检测转染后各组细胞miR-1180/SFRP1的表达;WB检测各组细胞SFRP1、Wnt和β-catenin蛋白表达水平。结果与DGCR5 NC组比较,DGCR5 inhibitor组细胞的lncRNA DGCR5表达水平下降;DGCR5 mimic组细胞的lncRNA DGCR5表达水平上升(P<0.05)。与DGCR5 NC组比较,DGCR5 mimic组细胞相对增值率显著下降,DGCR5 inhibitor组显著上升(P<0.05)。与C组、DGCR5 NC组比较,DGCR5 mimic组细胞的克隆数目、细胞愈合率、细胞侵袭数量均明显降低,而DGCR5 inhibitor组均明显升高(P<0.05)。荧光酶素报告结果证实miR-1180是lncRNA DGCR5的靶基因。与DGCR5 NC组比较,DGCR5 mimic组miR-1180、Wnt mRNA及蛋白、β-catenin蛋白表达水平均明显降低,SFRP1 mRNA及蛋白表达水平明显升高;而DGCR5 inhibitor组miR-1180、Wnt mRNA及蛋白、β-catenin蛋白表达水平均明显升高,SFRP1 mRNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论lncRNA DGCR5可通过抑制miR-1180/SFRP1/Wnt通路的表达来抑制SW480细胞的增殖、转移与侵袭。

关键词： lncRNA DGCR5 miR-1180 SFRP1 Wnt 结直肠癌细胞生长转移

Ezrin/YAP信号轴促进胃癌细胞增殖的作用研究

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中国普通外科杂志 2023年第10期32卷 1617-1623页

作者：覃一晋单汉国陈茂良彭肃王春云阳乐彬南华大学附属第二医院胃肠外科湖南衡阳421001

背景与目的:笔者前期研究发现埃兹蛋白(Ezrin)与YAP蛋白在胃癌组织中表达升高,且与患者不良预后密切相关。因此,本研究在胃癌细胞中进一步分析两者的关系与作用。方法:将胃癌细胞分别用Ezrin特异性siRNA序列(si-Ezrin)转染、YAP激动剂(H... 详细信息

背景与目的:笔者前期研究发现埃兹蛋白(Ezrin)与YAP蛋白在胃癌组织中表达升高,且与患者不良预后密切相关。因此,本研究在胃癌细胞中进一步分析两者的关系与作用。方法:将胃癌细胞分别用Ezrin特异性siRNA序列(si-Ezrin)转染、YAP激动剂(HY-101299B组)处理、si-Ezrin转染+HY-101299B处理,以转染无关siRNA序列的胃癌细胞为阴性对照。随后分别用CCK-8法及平板克隆实验检测细胞的增殖活力、Transwell实验检测细胞的侵袭能力,并用qPCR和Western blot检测各组细胞中YAP及其下游靶分子的mRNA及蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,转染si-Ezrin的胃癌细胞的增殖能力明显减弱,细胞中YAP及其下游分子(Mst、WW45、Lats1、Lats2、TEAD)的mRNA与蛋白水平表达明显下调,而HY-101299B处理的胃癌细胞上述指标均呈反向变化(均P0.05)。结论:Ezrin在胃癌中起了致癌因子的作用,机制可能与其激活YAP通路促进胃癌细胞的增殖有关。

关键词：胃肿瘤 FERM结构域 YAP信号蛋白质类细胞增殖

三氧化二砷诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡及抑制VEGF表达的研究

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三氧化二砷诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡及抑制VEGF表达的研究

作者：单汉国南华大学

学位级别：硕士

目的:本实验研究AsO诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡及对凋亡蛋白bcl-2/bax的影响;探讨AsO对肝癌细胞株BEL-7402血管内皮生长因子表达的影响。方法:以MTT法观察AsO对肝癌细胞株BEL-7402生长的抑制;倒置显微镜下观察肝癌细胞生长情况;... 详细信息

目的:本实验研究AsO诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡及对凋亡蛋白bcl-2/bax的影响;探讨AsO对肝癌细胞株BEL-7402血管内皮生长因子表达的影响。方法:以MTT法观察AsO对肝癌细胞株BEL-7402生长的抑制;倒置显微镜下观察肝癌细胞生长情况;姬姆萨染色、吖啶橙染色观察不同浓度和作用时间下AsO诱导肝癌细胞株BEL-7402凋亡的形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化;间标法流式细胞技术测定AsO作用后肝癌细胞Bcl-2/bax的表达;免疫组化SABC染色法检测AsO作用后肝癌细胞VEGF的表达。结果:各浓度组AsO(1-8μmol/L)均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关;倒置显微镜下每日观察对照组和各实验组细胞形态的变化,发现随着浓度增高,肝癌细胞贴壁能力明显下降,细胞脱落呈漂浮生长状态,随作用时间延长,脱落细胞逐渐增多,至72h时有70%-80%的细胞呈悬浮生长。低浓度的AsO(1～2 μmol/L)即对肝癌细胞株Bel-7402有明显的抑制作用,且可使肝癌细胞发生凋亡;在姬姆萨染色、吖啶橙染色观察凋亡细胞形态变化时,均可见到典型的凋亡细胞,晚期可见凋亡小体。流式细胞术细胞周期分析中,AsO能将肝癌细胞阻滞于G/M期,在G峰前出现明显的凋亡峰:流式细胞术对bcl-2、bax两种基因编码蛋白的表达进行检测,经AsO作用的人肝癌细胞株Bel-7402 bcl-2基因编码蛋白表达减少,bax基因编码蛋白表达增加。用SABC免疫组织化学方法检测肝癌细胞株BEL-7402 VEGF的表达情况。结果显示:癌细胞胞浆内呈棕黄色,提示肝癌细胞中VEGF表达强阳性。

关键词：三氧化二砷人肝癌细胞株 BEL-7402 凋亡 bcl-2 bax基因编码蛋白血管内皮生长因子

同方学位论文库评论

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不可切除的局部进展期胃癌转化治疗疗效观察

中国急救医学 2017年第A1期37卷 286-287页

作者：单汉国黄笛鸣罗康宁南华大学附属第二医院胃肠外科湖南衡阳421001

目的评估卡培他滨联合奥沙利铂对不可切除的局部进展期胃癌转化治疗的疗效及安全性.方法对不可切除的局部进展期胃癌患者给予卡培他滨联合奥沙利铂化疗方案转化治疗.化疗6个周期后,经腹部增强CT、超声内镜及肿瘤标志物检测等手段综合... 详细信息

目的评估卡培他滨联合奥沙利铂对不可切除的局部进展期胃癌转化治疗的疗效及安全性.方法对不可切除的局部进展期胃癌患者给予卡培他滨联合奥沙利铂化疗方案转化治疗.化疗6个周期后,经腹部增强CT、超声内镜及肿瘤标志物检测等手段综合评估病情.观察指标为化疗反应率、手术R0切除率、不良反应、无进展生存期及总生存期.结果纳入39例不可切除的局部进展期胃癌患者.经术前6个周期化疗后,化疗反应率为61.5%,手术R0切除率为51.2%;化疗不良反应白细胞减少症发生率为15.4%,中性粒细胞减少症发生率为10.3%,呕吐发生率为12.8%;中位无进展生存期及总生存期分别为12.3、28.7个月.结论卡培他滨联合奥沙利铂术前诱导化疗具有有效的抗肿瘤效果,可增加不可切除的局部进展期胃癌R0切除机会、延长患者总体生存时间,无特殊化疗不良反应.

关键词：胃肿瘤转化治疗外科手术

维普期刊数据库评论

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应用结直肠癌基因检测指导术后化疗

基因组学与应用生物学 2019年第1期38卷 326-332页

作者：单汉国周晓丽黄笛鸣陈茂良南华大学附属第二医院衡阳421001

为了探讨结直肠癌基因检测在术后化疗中的应用价值,本研究于2015年2月至2017年2月期间,选取在我院行结直肠癌根治术患者102例,根据患者选取的治疗方案,分为观察组(n=47)和对照组(n=55)。其中观察组根据术后肿瘤组织基因检测结果给予化... 详细信息

为了探讨结直肠癌基因检测在术后化疗中的应用价值,本研究于2015年2月至2017年2月期间,选取在我院行结直肠癌根治术患者102例,根据患者选取的治疗方案,分为观察组(n=47)和对照组(n=55)。其中观察组根据术后肿瘤组织基因检测结果给予化疗方案,对照组直接选用FOLFOX4方案,随访观察两组无进展生存期和总生存期。研究发现,观察组检测到1例Nras基因突变,3例Braf基因突变,19例Kras基因突变,2例Pik3ca基因突变;Kras基因突变与肿瘤部位和分化程度有关(p0.05)。研究表明结直肠癌基因检测指导术后化疗,可以提高患者无进展生存期和总生存期,具有较好的应用价值。

关键词：结直肠癌基因检测化疗无进展生存期总生存期

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初中英语新课程改革背景下阅读教学策略探究

初中英语新课程改革背景下阅读教学策略探究

腹腔镜结直肠癌根治术对老年结直肠癌患者胃肠功能的影响

2021年基础教育发展研究高峰论坛

作者：单汉国山东省东营市利津县凤凰实验中学

最新新课改的内容,学生不仅要学习一些基础的知识理论,而且要具备学习英语课程的核心素养。老师需要明确初中英语阅读理解课堂教学的目标和任务,学生不仅要学习基本的英语单词和语法,而且要提升学生的学习能力、语言表达和交际能力,进... 详细信息

最新新课改的内容,学生不仅要学习一些基础的知识理论,而且要具备学习英语课程的核心素养。老师需要明确初中英语阅读理解课堂教学的目标和任务,学生不仅要学习基本的英语单词和语法,而且要提升学生的学习能力、语言表达和交际能力,进一步提升学生的综合素质与能力。基于此,本篇文章对初中英语新课程改革背景下阅读教学策略进行研究,以供参考。

关键词：初中英语新课程改革背景阅读教学策略

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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医学理论与实践 2017年第16期30卷 2393-2394页

作者：单汉国南华大学附属第二医院(新院)胃肠外科湖南省衡阳市421001

目的:探讨腹腔镜结直肠癌根治术治疗老年结直肠癌患者对其胃肠功能的影响。方法:将我院2015年3月-2017年3月收治的80例老年结直肠癌患者,随机分为观察组与对照组,对照组患者经传统开腹手术治疗,观察组患者经腹腔镜结直肠癌根治术治疗,... 详细信息

目的:探讨腹腔镜结直肠癌根治术治疗老年结直肠癌患者对其胃肠功能的影响。方法:将我院2015年3月-2017年3月收治的80例老年结直肠癌患者,随机分为观察组与对照组,对照组患者经传统开腹手术治疗,观察组患者经腹腔镜结直肠癌根治术治疗,对比两组患者手术相关指标及胃肠功能恢复情况。结果:观察组患者术中出血量与对照组相比显著减少(P<0.05),住院时间明显短于对照组(P<0.05);观察组患者肛门排气时间、进食时间明显短于对照组(P<0.05),胃动素及胃泌素水平均高于对照组(P<0.05)。结论:腹腔镜结直肠癌根治术治疗老年结直肠癌患者可减少出血量、缩短住院时间、有利于胃肠功能尽早恢复。

关键词：腹腔镜结直肠癌根治术胃肠功能出血量

miR-143在mTOR大肠癌发生发展中的作用及其机制

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实用医学杂志 2016年第2期32卷 192-195页

作者：刘添文张北平赵小青单汉国广东省中医院消化科广州市510120 南华大学附属第二医院肿瘤中心胃肠外科湖南省衡阳市421001

目的:研究m TOR通过下调mi R-143对大肠癌的发生发展的调控作用及其机制。方法:Western blot、q PCR检测m TOR抑制剂处理前后大肠癌细胞中m TOR信号通路蛋白相关蛋白及mi R-143的表达;q PCR检测TSC2敲低后HT-29细胞中mi R-143的变化;MT... 详细信息

目的:研究m TOR通过下调mi R-143对大肠癌的发生发展的调控作用及其机制。方法:Western blot、q PCR检测m TOR抑制剂处理前后大肠癌细胞中m TOR信号通路蛋白相关蛋白及mi R-143的表达;q PCR检测TSC2敲低后HT-29细胞中mi R-143的变化;MTT及克隆形成实验检测TSC2敲低后HT-29细胞的增殖能力及克隆形成能力;MTT及克隆形成实验检测mi R-143对HT-29细胞增殖能力及克隆形成能力的影响;MTT及克隆形成实验检测mi R-143 mimic能否逆转m TOR对HT-29细胞增殖能力的影响;裸鼠成瘤实验验证m TOR通过下调mi R-143促进大肠癌的发展;Western blot、q PCR检测大肠癌组织及癌旁组织中m TOR信号通路蛋白相关蛋白及mi R-143的表达。结果:雷帕霉素抑制大肠癌细胞m TOR信号通路后,mi R-143表达上调;m TOR活化促进HT-29细胞的增殖能力及克隆形成能力;mi R-143抑制HT-29细胞的增殖能力及克隆形成能力;mi R-143可以逆转m TOR过度活化对HT-29细胞增殖能力的影响;在mi R-143水平升高的情况下,m TOR不能有效地发挥其促癌效应;相对于癌旁组织,大肠癌组织m TOR过度活化且mi R-143表达下调,与前期实验结果一致。结论 :m TOR通过下调mi R-143促进大肠癌的发生发展。

关键词：大肠癌 miR-143 mTOR