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茶黄素通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路促进小鼠乳腺肿瘤细胞凋亡

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动物营养学报 2023年第2期35卷 1288-1297页

作者：田朋谢维娜丁红研单兴根刘畅李玉赵畅冯士彬王希春吴金节安徽农业大学动物科技学院合肥230036

本试验旨在研究茶黄素促进小鼠乳腺肿瘤细胞凋亡的作用机制。采用不同浓度[0(A组)、48(B组)、88(C组)、128μmol/L(D组)]茶黄素处理小鼠乳腺肿瘤细胞(C-127细胞)24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光显微镜... 详细信息

本试验旨在研究茶黄素促进小鼠乳腺肿瘤细胞凋亡的作用机制。采用不同浓度[0(A组)、48(B组)、88(C组)、128μmol/L(D组)]茶黄素处理小鼠乳腺肿瘤细胞(C-127细胞)24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光显微镜检测细胞活性与坏死情况,透射电镜观察细胞形态,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测半胱氨酸特异性天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA相对表达量,Western Blot法检测活化后的Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、PI3K、Akt、Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果显示:1)与A组相比,B组细胞存活率显著降低(P<0.05),C组、D组细胞存活率极显著降低(P<0.01)。2)与A组相比,B组、C组、D组细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。3)与A组相比,B组Akt的mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),PI3K、Bcl-2的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),Caspase-3、Bax的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);C组和D组PI3K、Bcl-2和Akt的mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),Caspase-3和Bax的mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。4)与A组相比,B组Bcl-2的蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),Cleaved-Caspase-3的蛋白表达水平极显著升高(P<0.01);C组和D组Cleaved-Caspase-3和Bax的蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),PI3K、Akt、Bcl-2的蛋白表达水平极显著降低(P<0.01)。5)荧光显微镜和透视电镜观察可见,随着茶黄素浓度的升高,细胞活性逐渐降低,坏死细胞逐渐增多,线粒体变大,线粒体嵴增多;染色质浓缩分布在核膜周围或一侧,呈眼球状;自噬体内吞噬线粒体、内质网和一些细胞内的胞质成分,再与细胞膜融合后,形成凋亡小体。综上所述,茶黄素可通过PI3K/Akt信号通路促进促凋亡基因的表达,降低抗凋亡基因的表达,从而促进小鼠乳腺肿瘤细胞凋亡,达到抗肿瘤的作用;并且,随着茶黄素浓度的增大,茶黄素促进小鼠乳腺肿瘤细胞凋亡的作用增强。

关键词： C-127细胞茶黄素细胞凋亡 PI3K/Akt信号通路

粗根荨麻多糖对巨噬细胞吞噬功能和极化的影响

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食品工业科技 2024年

作者：伍根瑞马建成李继兴罗娅包爽王重娟吴明一昆明医科大学附属延安医院大理大学药学院中国科学院昆明植物研究所

目的：研究粗根荨麻鼠李半乳糖醛酸聚糖（Urtica macrorrhiza Hand.-***， UMRG）和粗根荨麻阿拉伯半乳聚糖（Urtica macrorrhiza Hand.-Mazz. Arabinogalactan， UMAG）对巨噬细胞的吞噬功能和极化的影响。方法：CCK8法研究粗根荨麻多... 详细信息

目的：研究粗根荨麻鼠李半乳糖醛酸聚糖（Urtica macrorrhiza Hand.-***， UMRG）和粗根荨麻阿拉伯半乳聚糖（Urtica macrorrhiza Hand.-Mazz. Arabinogalactan， UMAG）对巨噬细胞的吞噬功能和极化的影响。方法：CCK8法研究粗根荨麻多糖UMRG、UMAG对巨噬细胞活力的影响；中性红实验、流式细胞术、激光共聚焦研究UMRG、UMAG对巨噬细胞吞噬功能的影响；流式细胞术研究UMRG、UMAG对巨噬细胞极化的影响；Griess法和酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测UMRG、UMAG对巨噬细胞一氧化氮（Nitric oxide，NO）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素6（Interleukin 6，IL-6）、白细胞介素1β（Interleukin 1β，IL-1β）分泌水平的影响。结果：UMRG和UMAG在10～320 μg/mL浓度范围内对巨噬细胞均无显著的细胞毒性；UMRG和UMAG均可显著增强巨噬细胞对中性红和模式抗原的吞噬作用（P根荨麻多糖UMRG、UMAG可激活巨噬细胞，增强巨噬细胞的吞噬功能，主要促进巨噬细胞向M1型极化，增强免疫活性，且UMRG活性强于UMAG。

关键词：粗根荨麻多糖巨噬细胞吞噬极化

APS对DEX诱导的IPEC-J2细胞凋亡的保护作用

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中国兽医科学 2023年第1期53卷 127-134页

作者：谢维娜田朋单兴根丁红研王蕾赵畅李玉冯士彬王希春吴金节安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036

本试验旨在探讨黄芪多糖(APS)对地塞米松(DEX)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)凋亡的保护作用。采用不同浓度的APS(0~0.8 mg/m L)或DEX(0~0.7 mg/m L)处理IPEC-J2细胞24 h,利用细胞计数试剂(CCK-8)检测细胞活性,确定药物作用浓度。对照... 详细信息

本试验旨在探讨黄芪多糖(APS)对地塞米松(DEX)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)凋亡的保护作用。采用不同浓度的APS(0~0.8 mg/m L)或DEX(0~0.7 mg/m L)处理IPEC-J2细胞24 h,利用细胞计数试剂(CCK-8)检测细胞活性,确定药物作用浓度。对照组无添加,A组添加0.4 mg/m L APS培养,D组添加0.4 mg/m L DEX培养,A+D组添加0.4 mg/m L APS+0.4 mg/m L DEX共培养。采用Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒检测细胞的存活情况,流式细胞仪检测IPEC-J2细胞的凋亡情况,透射电子显微镜观察细胞的形态,实时荧光定量PCR检测凋亡基因Caspase3、Caspase9、Bid、Bcl-2 m RNA的相对表达量,Western-blotting检测Caspase3、Caspase9、Bid、Bcl-2蛋白的表达水平。结果表明,APS可以通过调控凋亡蛋白和基因的表达来抑制DEX诱导的IPEC-J2细胞的凋亡,恢复IPEC-J2细胞的活性,起到保护猪小肠上皮细胞作用。

关键词：黄芪多糖地塞米松猪小肠上皮细胞细胞凋亡

直接氨SOFC-GT混合动力系统性能及航空应用

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航空动力学报 2024年第4期39卷 165-179页

作者：徐乐根毛军逵梁凤丽王在兴杨孟林南京航空航天大学能源与动力学院江苏省航空动力系统重点实验室南京210016

建立了基于直接氨燃料的固体氧化物燃料电池-燃气轮机(SOFC-GT)混合动力系统仿真模型,开发了一种架构优化的高功率-质量比的高效发电系统,并研究了燃料利用率和系统燃料分配对系统功率分配、各子部件质量以及其㶲损失等性能的影响。基于... 详细信息

建立了基于直接氨燃料的固体氧化物燃料电池-燃气轮机(SOFC-GT)混合动力系统仿真模型,开发了一种架构优化的高功率-质量比的高效发电系统,并研究了燃料利用率和系统燃料分配对系统功率分配、各子部件质量以及其㶲损失等性能的影响。基于所建立的模型分析了压气机压比、燃料摩尔流量、空气摩尔流量等输入参数对系统性能的影响,在最优性能条件下对系统进行功率-质量比分析。仿真结果表明该系统的净发电效率为56.85%,㶲效率为50.71%,净发电量为213 kW,功率-质量比为0.7303 kW/kg,达到美国能源部太平洋西北国家实验室(PNNL)为SOFC-GT混合动力系统应用于航空航天领域制定的标准。在此基础上,讨论了该系统在商用飞机主动力和辅助动力上的应用,表明SOFC-GT混合动力系统在航空领域具有良好的应用前景。

关键词：氨燃料电池固体氧化物燃料电池-燃气轮机混合动力系统系统效率功率-质量比航空动力

鸭疫里默氏杆菌AS87_05150基因缺失株的构建及部分生物学特性分析

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中国预防兽医学报 2023年第10期45卷 1001-1007,1018页

作者：单兴根田祥强王佳玲谢维娜田朋胡志群高永恒嵇辛勤吴金节胡青海安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

为探究鸭疫里默氏杆菌(RA)IX型分泌系统(T9SS)分泌的假定蛋白AS87_05150的功能,本研究采用自杀质粒同源重组的方法构建RA Yb2株AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5150及其回补株cYb2Δ5150,经PCR及测序鉴定,结果显示AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5... 详细信息

为探究鸭疫里默氏杆菌(RA)IX型分泌系统(T9SS)分泌的假定蛋白AS87_05150的功能,本研究采用自杀质粒同源重组的方法构建RA Yb2株AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5150及其回补株cYb2Δ5150,经PCR及测序鉴定,结果显示AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5150和回补株cYb2Δ5150均正确构建,缺失株的表型为16S r RNA^(+)AS87_05150 ORF^(-),回补株的表型为16S r RNA^(+)AS87_05150 ORF^(+)。采用荧光定量PCR(qPCR)检测Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株AS87_05150基因的转录水平;根据上述3株菌不同时间的OD_(600nm)值绘制各菌株的生长曲线;采用微量结晶紫法检测各菌株生物被膜(BF)的形成能力;将10^(7)cfu/孔的Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株分别感染Vero细胞,检测各菌株对Vero细胞的黏附和侵袭力。q PCR检测结果显示,cYb2Δ5150株中AS87_05150 m RNA相对转录水平比Yb2株高约19倍(P根据各组鸭的死亡情况,计算Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株的LD_(50)分别为6.85×10^(5)cfu、8.75×10^(7)cfu和4.681×10^(8)cfu,即缺失株LD_(50)比野生株高约127倍,但回补株的LD_(50)比缺失株高约5倍。载菌量测定结果显示,Yb2Δ5150株和cYb2Δ5150株感染鸭血液、肝脏、脑组织中的细菌载量比Yb2株感染鸭的载菌量均极显著降低(P<0.001),但前两者之间上述指标均无显著差异。本实验结果表明AS87_05150与RA Yb2株的BF形成和致病性相关,但回补株对雏鸭的毒力和致病性均未回复到野生株的水平。本研究为进一步解析RA AS87_05150的功能及分子致病机制等奠定了基础。

关键词：鸭疫里默氏杆菌 Ⅸ型分泌系统(T9SS) 基因缺失生物被膜致病性