检索结果-南通市图书馆

一种酿酒酵母表达cDNA文库分离纤维质降解酶系基因的方法

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

食品工业科技 2012年第3期33卷 167-169,271页

作者：华承伟谢凤珍于江傲河南科技学院生命科技学院．河南新乡453003 河南科技学院新科学院河南新乡453003

目的:建立一种筛选自然界产纤维质降解酶系基因的新方法。方法:对酿酒酵母表达载体pYES2多克隆位点加入真核生物稀有限制性酶切位点SfiI进行改造,利用SMART技术,以大肠杆菌文库为转导,构建了拟青霉(Paecilomyces sp.H28)的酿酒酵母全长c... 详细信息

目的:建立一种筛选自然界产纤维质降解酶系基因的新方法。方法:对酿酒酵母表达载体pYES2多克隆位点加入真核生物稀有限制性酶切位点SfiI进行改造,利用SMART技术,以大肠杆菌文库为转导,构建了拟青霉(Paecilomyces sp.H28)的酿酒酵母全长cDNA表达文库。结果:利用纤维质-刚果红染色法从文库筛选到多种纤维素和半纤维素降解酶系基因。结论:成功构建了拟青霉的酿酒酵母表达cDNA文库,加快了纤维质降解酶系基因的快速分离,也为其它相关基因的快速分离提供了有益的借鉴。

关键词：酿酒酵母表达cDNA文库纤维质降解酶分离拟青霉

酸、热胁迫条件下酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因的表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代食品科技 2015年第11期31卷 80-85页

作者：徐茜茜华承伟刘晓娇焦凌霞河南科技学院食品学院河南新乡453003 商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

本研究在克隆得到酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922T SOD基因全序列的基础上,利用荧光实时定量PCR技术分别检测酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因在酸、热胁迫条件下的表达差异。结果表明:该基因在正常生长条件下组成性表达,在酸、热胁迫下表达量在... 详细信息

本研究在克隆得到酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922T SOD基因全序列的基础上,利用荧光实时定量PCR技术分别检测酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因在酸、热胁迫条件下的表达差异。结果表明:该基因在正常生长条件下组成性表达,在酸、热胁迫下表达量在短时间内迅速上调,酸胁迫0.5 h表达量为对照组的4.63倍,胁迫1 h表达量升至最高,为对照组的32.55倍,随后表达量迅速下调,胁迫5 h时表达量降至对照组的1.67倍。70℃热胁迫5 min时SOD基因相对表达量为对照组的2.81倍,胁迫25 min时表达量升至最高,为对照组的15.05倍,随后表达量下调,胁迫40 min时表达量降至对照组的4.93倍。酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因对酸、热环境胁迫具有快速反应的特点,表明酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因与该菌嗜热耐酸的独特生理适应机制密切相关。

关键词：酸土脂环酸芽孢杆菌 SOD 基因表达酸胁迫热胁迫

微波提取苹果汁中脂环酸芽孢杆菌DNA的PCR检测方法研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品科学 2012年第14期33卷 154-157页

作者：焦凌霞华承伟樊明涛魏新元西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 河南科技学院食品学院河南新乡453003

根据Genbank公布的酸土脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus acidoterrestris DSM 3922T)鲨烯环化酶序列自行设计一对引物,利用微波技术直接从果汁样品中提取目标菌DNA,对引物特异性、微波法提取DNA的扩增效果及检测灵敏度进行探讨。结果表... 详细信息

根据Genbank公布的酸土脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus acidoterrestris DSM 3922T)鲨烯环化酶序列自行设计一对引物,利用微波技术直接从果汁样品中提取目标菌DNA,对引物特异性、微波法提取DNA的扩增效果及检测灵敏度进行探讨。结果表明:微波功率1000W、处理时间30s、经5000r/min离心2min即可获得酸土脂环酸芽孢杆菌基因组DNA,所得模板质量符合聚合酶链式反应检测要求,目的条带清晰,检测时间仅为2h,检测限为200CFU/mL,有望真正应用于苹果汁生产的在线检测。

关键词：脂环酸芽孢杆菌苹果汁微波处理聚合酶链式反应检测限

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

红色链霉菌发酵产红霉素培养基的响应面优化

中国生物制品学杂志 2011年第6期24卷 728-731,736页

作者：华承伟于江傲谢凤珍河南科技学院生命科技学院河南新乡453003 河南科技学院新科学院河南新乡453003

目的采用响应面法对红色链霉菌(Streptomyces erythreus)发酵产红霉素培养基进行优化。方法利用Design-Expert 8的Min Run Res IV多因子两水平设计,对发酵培养基的有机碳源和氮源的组成进行因素的效应评价,利用最峭攀登搜索法为响应面... 详细信息

目的采用响应面法对红色链霉菌(Streptomyces erythreus)发酵产红霉素培养基进行优化。方法利用Design-Expert 8的Min Run Res IV多因子两水平设计,对发酵培养基的有机碳源和氮源的组成进行因素的效应评价,利用最峭攀登搜索法为响应面分析的中心组合设计确定中心区,利用响应面分析得到优化培养基组成。结果淀粉、糊精、豆饼粉和玉米浆因素对红霉素产量有显著影响,其最佳组成为:淀粉5.24%,糊精1.43%,豆饼粉4.56%,玉米浆1.47%。结论利用响应面法已成功优化了红霉素发酵培养基组成的碳源和氮源,摇瓶发酵产红霉素化学效价为6 192 U/ml。

关键词：红色链霉菌红霉素发酵培养基响应面优化

拟青霉内切β-1,3(4)-葡聚糖酶基因克隆、表达及重组酶性质

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学通报 2011年第11期38卷 1657-1665页

作者：华承伟谢凤珍陈晓静河南科技学院生物工程系河南新乡453003

采用改造的酿酒酵母表达载体pYES2-GSL构建了拟青霉Paecilomyces ***30表达cDNA文库,刚果红平板法筛到一内切β-1,3(4)-葡聚糖酶基因(PsBg16A),全长cDNA为1 217 bp,完整开放阅读框(ORF)951 bp,编码316个氨基酸,属于糖苷水解酶16家族。... 详细信息

采用改造的酿酒酵母表达载体pYES2-GSL构建了拟青霉Paecilomyces ***30表达cDNA文库,刚果红平板法筛到一内切β-1,3(4)-葡聚糖酶基因(PsBg16A),全长cDNA为1 217 bp,完整开放阅读框(ORF)951 bp,编码316个氨基酸,属于糖苷水解酶16家族。去信号肽的PsBg16A克隆入表达载体pET28a(+)并在*** BL21成功表达,经16°C 20%乳糖诱导24 h,酶活达482 U/mL。重组PsBg16A可水解大麦葡聚糖、地衣多糖和昆布多糖,显示PsBg16A为典型的β-1,3(4)-葡聚糖酶(EC 3.***.1.6),重组酶最适pH和温度分别为7.0和65°C,对大麦葡聚糖、地衣多糖和昆布多糖的Km分别为3.12、4.86和10.32 g/L。

关键词：拟青霉 β-1,3(4)-葡聚糖酶基因克隆表达性质

酸土脂环酸芽孢杆菌Fe-SOD基因克隆及生物信息学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代食品科技 2015年第3期31卷 43-49页

作者：焦凌霞华承伟徐茜茜王俊杰赵瑞香河南科技学院食品学院河南新乡453003

酸土脂环酸芽孢杆菌具有嗜酸耐热的独特生理特性,从该属细菌中分离到的多种酶类都具有耐酸热稳定性,是筛选耐酸耐热酶的重要菌种资源。超氧化物歧化酶(SOD)由于具有重要的生理功能而广泛用于食品、药品及化妆品等行业。为了深入探讨酸... 详细信息

酸土脂环酸芽孢杆菌具有嗜酸耐热的独特生理特性,从该属细菌中分离到的多种酶类都具有耐酸热稳定性,是筛选耐酸耐热酶的重要菌种资源。超氧化物歧化酶(SOD)由于具有重要的生理功能而广泛用于食品、药品及化妆品等行业。为了深入探讨酸土脂环酸芽孢杆菌SOD的分子生物学特性,本研究利用同源克隆、交错式热不对称PCR技术和生物信息学方法进行Fe-SOD基因克隆、测序及序列分析。结果表明,Fe-SOD基因(GenBank序列号:JN614998)ORF全长为606bp,编码202个氨基酸,其推测氨基酸序列与来源于酸热脂环酸芽孢杆菌DSM446的Fe-SOD(ACV58017.1)序列相似性最高,为78%。整个蛋白序列含有Fe/MnSODs家族的5个模体,SOD活性中心含有金属离子结合配基His27、His82、Asp164和His168,具有Fe/MnSODs家族典型的蛋白结构特征。酸土脂环酸芽孢杆菌Fe-SOD基因的克隆和生物信息学分析为进一步构建原核表达载体、获得生产耐酸热Fe-SOD的基因工程菌株奠定基础。

关键词：酸土脂环酸芽孢杆菌 Fe-SOD 基因克隆生物信息学

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中温木聚糖酶高产真菌菌株筛选及产酶条件

湖北农业科学 2012年第16期51卷 3475-3478,3482页

作者：华承伟焦玲霞于江傲河南科技学院生命科技学院河南新乡453003 河南科技学院食品学院河南新乡453003

利用以木聚糖作为惟一碳源的基础盐培养基,在30℃培养条件下,从新乡周边土样及腐殖质中筛选到1株β-木聚糖酶高产真菌菌株(Fusarium ***28)。该菌株在20～40℃生长良好,最适生长温度30℃。产酶培养条件优化结果表明,在培养温度为30℃,... 详细信息

利用以木聚糖作为惟一碳源的基础盐培养基,在30℃培养条件下,从新乡周边土样及腐殖质中筛选到1株β-木聚糖酶高产真菌菌株(Fusarium ***28)。该菌株在20～40℃生长良好,最适生长温度30℃。产酶培养条件优化结果表明,在培养温度为30℃,培养基初始pH 6.0,以玉米芯为碳源,以蛋白胨、酵母粉和玉米浆为有机氮源,发酵4 d,木聚糖酶活性达562.6 U/mL,木聚糖酶最适pH和温度分别为6.5和40℃。

关键词：中温木聚糖酶真菌筛选菌株产酶条件

耐热β-1,3(4)-葡聚糖酶源真菌筛选、鉴定及产酶条件优化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品工业科技 2012年第13期33卷 131-134页

作者：华承伟于江傲谢凤珍陈晓静孙婷婷河南科技学院生科院河南新乡453003 河南科技学院新科学院河南新乡453003

利用葡聚糖作为唯一碳源的基础盐培养,在50℃培养条件下,从新乡周围土样及腐殖质中筛选到一株产β-1,3(4)-葡聚糖酶耐热真菌菌株(***30)。该菌株在40～60℃能较好生长,最适生长温度45℃。产酶培养优化条件表明:在培养温度为45℃,初始培... 详细信息

利用葡聚糖作为唯一碳源的基础盐培养,在50℃培养条件下,从新乡周围土样及腐殖质中筛选到一株产β-1,3(4)-葡聚糖酶耐热真菌菌株(***30)。该菌株在40～60℃能较好生长,最适生长温度45℃。产酶培养优化条件表明:在培养温度为45℃,初始培养基pH6.5,以大麦麸皮为碳源,以蛋白胨、酵母粉和玉米浆为有机氮源,发酵4d,葡聚糖酶活达132.4U/mL,葡聚糖酶最适pH和温度分别为7.0和70℃。

关键词：耐热β-1 3(4)-葡聚糖酶真菌筛选优化

拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶同源模建、分子对接与分子动力学模拟

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

计算机与应用化学 2013年第4期30卷 370-374页

作者：华承伟师玉忠于江傲常景玲李兰河南科技学院生命科技学院河南新乡453003 河南科技学院食品学院河南新乡453003

在同源模建得基础上,采用分子对接和分子动力学(MD)模拟方法研究了拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶与β-1,3(4)-葡聚糖(G4G4G3G4G4G)和β-1,3-葡聚糖(G3G3G3G3G3G)的相互作用机制。对接结果显示,该酶对β-1,3(4)-葡聚糖具有较β-1,3-葡聚糖更... 详细信息

在同源模建得基础上,采用分子对接和分子动力学(MD)模拟方法研究了拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶与β-1,3(4)-葡聚糖(G4G4G3G4G4G)和β-1,3-葡聚糖(G3G3G3G3G3G)的相互作用机制。对接结果显示,该酶对β-1,3(4)-葡聚糖具有较β-1,3-葡聚糖更高的结合力,动力学轨迹分析显示,葡聚糖酶催化β-1,3(4)-葡聚糖的机制要比催化β-1,3-葡聚糖更为复杂。

关键词： β-13(4)-葡聚糖酶同源模建分子对接分子动力学