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组胺H1和H2受体在新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电调节中的作用

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生理学报 2008年第3期60卷 397-402页

作者：齐莹千智斌吴中海南方医科大学生理学教研室广州510515

本研究探讨组胺H1和H2受体在新生大鼠基本节律性呼吸的发生和调节中的作用。以改良的Kreb's液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连舌下神经根的呼吸节律性放电活动(respiratory-related rhyth-mical disch... 详细信息

本研究探讨组胺H1和H2受体在新生大鼠基本节律性呼吸的发生和调节中的作用。以改良的Kreb's液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连舌下神经根的呼吸节律性放电活动(respiratory-related rhyth-mical discharge activity,RRDA)。实验分为5组:第1、2、3组分别单独给予组胺(histamine,HA)、H1受体特异阻断剂pyrilamine和H2受体特异阻断剂cimetidine;第4组分别先后给予HA和HA+pyrilamine;第5组分别先后给予HA和HA+cimetidine,观察舌下神经根RRDA的变化。结果显示,单独给予HA后呼吸周期(respiratory cycle,RC)及呼气时程(expiratory time,TE)明显缩短,而吸气时程(inspiratory time,TI)及放电积分幅度(integral amplitude,IA)无明显变化;给予pyrilamine后RC、TE明显延长,TI、IA也无明显变化,且HA的作用可以被pyrilamine逆转;给予cimetidine后RC、TE、TI、IA均无明显变化,且HA的作用不能被cimetidine逆转。结果提示,H1受体参与哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节,H2受体对哺乳动物基本节律性呼吸的调控无明显影响。

关键词：组胺 H1 受体 H2 受体延髓脑片

组胺H1受体在新生大鼠离体延髓脑片呼吸神经元电活动中的作用

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南方医科大学学报 2010年第1期30卷 54-56页

作者：千智斌齐莹吴中海南方医科大学生理学教研室广东广州510515 新乡医学院基础医学院河南新乡453003 郑州市社会医疗保险中心河南郑州450052

目的探讨组胺H1受体对新生大鼠延髓脑片吸气神经元放电的调制作用。方法制作新生大鼠离体延髓脑片标本,保留舌下神经根,使用改良Kreb's液(MKS)灌流延髓脑片。用吸附电极记录到舌下神经根呼吸相关节律性放电活动(RRDA)后,以细胞外记录方... 详细信息

目的探讨组胺H1受体对新生大鼠延髓脑片吸气神经元放电的调制作用。方法制作新生大鼠离体延髓脑片标本,保留舌下神经根,使用改良Kreb's液(MKS)灌流延髓脑片。用吸附电极记录到舌下神经根呼吸相关节律性放电活动(RRDA)后,以细胞外记录方式在面神经后核内侧区同步记录吸气神经元放电活动。稳定记录吸气神经元放电20min后,用5μmol/L组胺灌流延髓脑片20min;使用空白MKS冲洗至RRDA和吸气神经元放电基本恢复后;再用含组胺H1受体特异拮抗剂10μmol/Lpyrilamine的MKS灌流脑片。观察组胺和pyrilamine对吸气神经元放电的呼吸周期(RC)、吸气时程(TI)、呼气时程(TE)、放电积分幅度(IA)和单位放电的峰频率(PF)等指标的作用。结果给予组胺后,吸气神经元放电的RC缩短25.86%、TE缩短27.03%,TI、IA和PF无变化;使用pyrilamine后RC延长21.46%、TE延长22.15%,TI,IA和PF无变化。结论组胺H1受体参与调节新生大鼠离体延髓脑片吸气神经元放电活动。激活H1受体对吸气神经元放电有兴奋作用。

关键词：面神经后核内侧区组胺H1受体延髓脑片吸气神经元

甘氨酸对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电活动的调制

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南方医科大学学报 2008年第12期28卷 2142-2145页

作者：程静千智斌吴中海南方医科大学生理学教研室广东广州510515 新乡医学院基础医学院河南新乡453003

目的探讨甘氨酸(Gly)在延髓基本节律性呼吸放电发生和调节中的作用。方法以改良Kreb's液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动(RRDA)后,第1、2组在灌流液中分别单独给予Gl... 详细信息

目的探讨甘氨酸(Gly)在延髓基本节律性呼吸放电发生和调节中的作用。方法以改良Kreb's液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动(RRDA)后,第1、2组在灌流液中分别单独给予Gly受体的特异性激动剂Gly和特异性拮抗剂士的宁(STR);第3组分别先后给予Gly和Gly+STR,观察舌下神经根RRDA的变化,探讨Gly对其调节作用。结果给予Gly后,吸气时程和放电的积分幅度显著缩短,呼气时程和呼吸周期无明显变化;给予STR后,呼气时程和呼吸周期缩短,吸气时程和放电的积分幅度无明显变化,且Gly的作用可部分被STR逆转。结论Gly参与了哺乳动物基本呼吸节律的调节。

关键词：甘氨酸延髓呼吸节律节律性放电

GABAA受体在尼可刹米引起的新生大鼠呼吸兴奋中的作用

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南方医科大学学报 2008年第3期28卷 301-304页

作者：千智斌齐莹吴中海南方医科大学生理学教研室

目的探讨γ-氨基丁酸A(GABAA)受体在尼可刹米引起的新生大鼠呼吸兴奋中的作用。方法制作新生大鼠离体延髓脑片标本,包含面神经后核内侧区并保留舌下神经根,给予灌流改良Krebs液,记录舌下神经根的呼吸相关节律性放电活动(RRDA)。实验分为... 详细信息

目的探讨γ-氨基丁酸A(GABAA)受体在尼可刹米引起的新生大鼠呼吸兴奋中的作用。方法制作新生大鼠离体延髓脑片标本,包含面神经后核内侧区并保留舌下神经根,给予灌流改良Krebs液,记录舌下神经根的呼吸相关节律性放电活动(RRDA)。实验分为5组:第1组分别以浓度为0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0μg/ml尼可刹米灌流脑片,观察舌下神经根RRDA的变化,做出尼可刹米的量效曲线并选择最适浓度;第2组以浓度为10、20、40、60μmol/L的GABA灌流脑片,观察RRDA的变化做出量效曲线选择最适浓度;第3组以10μmol/L荷牡丹碱灌流脑片;第4组联合应用40μmol/LGABA和10μmol/L荷牡丹碱灌流脑片;第5组5μg/ml尼可刹米灌流脑片产生明显作用后冲洗至RRDA基本恢复,再联合灌流5μg/ml尼可刹米和10μmol/L荷牡丹碱。结果尼可刹米浓度在0.5￣7.0μg/ml对延髓脑片RRDA有兴奋作用,5μg/ml时对吸气时程(TI)、放电幅度积分(IA)、呼吸周期(RC)等呼吸指标综合效果最显著。GABA在40μmol/L对RRDA放电的TI、IA、RC抑制作用最显著。荷牡丹碱对TI、IA、RC均有兴奋作用。联合使用GABA和荷牡丹碱,RRDA与对照组相比无显著改变。联合使用尼可刹米和荷牡丹碱,与单独使用尼可刹米相比TI、IA显著增强,RC无显著改变。结论尼可刹米能够增强新生大鼠离体脑片舌下神经根RRDA,GABAA受体可能是尼可刹米作用途径之一。

关键词：面神经后核内侧区尼可刹米 GABAA受体延髓脑片

孕期酒精暴露对新生大鼠延髓基本节律性呼吸放电的作用

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南方医科大学学报 2015年第4期35卷 598-601页

作者：姬明丽吴云红千智斌新乡医学院基础医学院生理学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院机能学实验室河南新乡453003

目的：探讨孕期酒精暴露对子代新生大鼠延髓脑片基本节律性呼吸放电（rhythmic respiratory discharge activity, RRDA）的作用。方法制作包含面神经后核内侧区（the medial region of the nucleus retrofacialis, mNRF）并保留舌下神... 详细信息

目的：探讨孕期酒精暴露对子代新生大鼠延髓脑片基本节律性呼吸放电（rhythmic respiratory discharge activity, RRDA）的作用。方法制作包含面神经后核内侧区（the medial region of the nucleus retrofacialis, mNRF）并保留舌下神经根的新生大鼠离体延髓脑片标本，给予灌流改良的Kreb＇s液（modified Kreb＇s solution, MKS），使用吸附电极记录延髓脑片腹侧面舌下神经根RRDA，分析RRDA的变化。实验分为5组：对照组、4%酒精暴露组、6%酒精暴露组、8%酒精暴露组和10%酒精暴露组，研究孕期不同浓度酒精暴露对RRDA的作用。结果对照组、4%酒精暴露组、6%酒精暴露组、8%酒精暴露组各组组内RRDA在50 min内吸气时程（TI）、呼吸频率（RF）、放电积分幅度（IA）无统计学差异，10%酒精暴露组RRDA节律不规整；与对照组相比，4%-10%酒精暴露组的RRDA随酒精浓度增加逐渐降低，TI缩短、RF下降、IA减弱。结论孕期酒精暴露抑制子代新生大鼠延髓脑片舌下神经根RRDA，这可能是孕期酒精暴露抑制子代呼吸功能的基础。

关键词：孕期酒精暴露基本节律性呼吸放电延髓脑片新生大鼠

mdr1、MRP和GST-π在非小细胞肺癌多药耐药机制中的作用

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中国现代医学杂志 2006年第1期16卷 27-31,36页

作者：姬明丽千智斌新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003 新乡医学院机能实验室河南新乡453003

目的探讨非小细胞肺癌的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因和蛋白mdr1、MRP、GST-π的表达,对比分析非小细胞肺癌的化疗耐药性与耐药相关基因表达的关系,明确各耐药相关基因在介导非小细胞肺癌耐药机制中的作用。方法应用肿瘤细... 详细信息

目的探讨非小细胞肺癌的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因和蛋白mdr1、MRP、GST-π的表达,对比分析非小细胞肺癌的化疗耐药性与耐药相关基因表达的关系,明确各耐药相关基因在介导非小细胞肺癌耐药机制中的作用。方法应用肿瘤细胞体外培养和MTT法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂+氟尿嘧啶3种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行3种耐药相关基因(mdr1、MRP以及GST-π)表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂+氟尿嘧啶耐药。其中,19例(20.9%)对3种用药均敏感,27例(29.8%)对3种用药均耐药,其耐药性与组织学类型和分化程度无关(P!0.05)。P-gp、MRP和GST-π在91例非小细胞肺癌中总的阳性表达率分别为:58.2"、73.6%和64.8%。鳞癌和腺癌相比P-gp、MRP、和GST-π的表达差异无显著性(P!0.05)。P-gp、MRP和GST-π的表达与对3种化疗用药的耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间差异也有显著性(P#0.05)。结论P-gp、MRP和GST-π在非小细胞肺癌中均有较高的阳性表达并共同介导参与了非小细胞肺癌固有化疗耐药的机制。

关键词：非小细胞肺癌多药耐药 mdr1基因 MRP基因谷胱甘肽转移酶-π基因体外药敏试验免疫组织化学

尼可刹米对新生大鼠大脑皮层神经元钠通道的兴奋作用

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重庆医学 2010年第9期39卷 1053-1055页

作者：千智斌宋晓荣姬明丽河南省新乡医学院机能学实验室 453003 河南省新乡医学院病理生理学教研室 453003

目的观察尼可刹米对新生大鼠皮层神经元电压依赖性钠通道的作用。方法应用全细胞膜片钳技术观察尼可刹米对新生大鼠脑片皮层神经元电压依赖性钠电流的作用。结果尼可刹米增加皮层神经元河豚毒素(TTX)敏感性电压依赖钠电流;尼可刹米使钠... 详细信息

目的观察尼可刹米对新生大鼠皮层神经元电压依赖性钠通道的作用。方法应用全细胞膜片钳技术观察尼可刹米对新生大鼠脑片皮层神经元电压依赖性钠电流的作用。结果尼可刹米增加皮层神经元河豚毒素(TTX)敏感性电压依赖钠电流;尼可刹米使钠通道稳态激活曲线向超极化方向移动,钠通道半数激活电压(V1/2)从给予尼可刹米前的(-34.67±3.07)mV变为给予尼可刹米后的(-37.63±3.37)mV(n=10,P<0.05);尼可刹米使钠通道的稳态失活曲线向去极化方向移动,钠通道半数失活电压(V1/2)从给予尼可刹米前的(-43.36±3.06)mV变为给予尼可刹米后的(-33.24±2.05)mV(n=10,P<0.01)。结论尼可刹米通过改变皮层神经元钠通道的动力学特征来增加电压依赖性钠电流,这可能是尼可刹米兴奋中枢神经元的作用机制之一。

关键词：尼可刹米皮层神经元全细胞膜片钳钠通道

红鳍东方鲀SREBP-1和SREBP-2基因克隆及表达分析

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华北农学报 2016年第4期31卷 74-79页

作者：张伟姬明丽郭前进千智斌新乡医学院基础医学院河南新乡453003

为了研究红鳍东方鲀SREBP-1和SREBP-2基因的功能及在脂肪代谢中的分子机制,从红鳍东方鲀脂肪组织提取总RNA,反转录获得c DNA模板,利用设计的引物PCR扩增获得SREBP-1和SREBP-2开放阅读框(ORF),SREBP-1基因ORF区的c DNA序列长度为3 330 bp... 详细信息

为了研究红鳍东方鲀SREBP-1和SREBP-2基因的功能及在脂肪代谢中的分子机制,从红鳍东方鲀脂肪组织提取总RNA,反转录获得c DNA模板,利用设计的引物PCR扩增获得SREBP-1和SREBP-2开放阅读框(ORF),SREBP-1基因ORF区的c DNA序列长度为3 330 bp,编码1 109个氨基酸,SREBP-2基因ORF区的c DNA序列为3 444 bp,编码1 147个氨基酸。实时荧光定量PCR检测SREBP-1基因在红鳍东方鲀不同组织中的表达特征,结果表明,SREBP-1在脑组织中表达丰度最高,其次为眼、脂肪组织、肠、鳃、脾脏、心脏及肝脏,在肌肉中表达丰度最低。将SREBP-1连接到原核表达载体p ET32a上,利用IPTG对重组质粒p ET32a-SREBP-1在大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE电泳显示在141 k Da处有特异性的条带出现。

关键词：红鳍东方鲀 SREBP-1基因 SREBP-2基因原核表达

红鳍东方鲀去乙酰化酶SIRT3基因的克隆及原核表达

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2016年第4期42卷 424-428页

作者：张伟姬明丽张军华千智斌新乡医学院基础医学院河南新乡453003

从红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肝脏组织中提取总RNA,通过RT–PCR扩增,获得SIRT3基因的编码阅读框(ORF),用原核表达载体p ET32a(+)构建p ET32a/SIRT3重组质粒,用异丙基–β–D–硫代半乳糖苷(IPTG)将重组质粒p ET32a/STRT3在大肠杆菌R... 详细信息

从红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肝脏组织中提取总RNA,通过RT–PCR扩增,获得SIRT3基因的编码阅读框(ORF),用原核表达载体p ET32a(+)构建p ET32a/SIRT3重组质粒,用异丙基–β–D–硫代半乳糖苷(IPTG)将重组质粒p ET32a/STRT3在大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,并用镍柱纯化融合表达蛋白。结果显示,红鳍东方鲀SIRT3基因(tr SIRT3)ORF区大小为1 263 bp大小,编码420个氨基酸。经IPTG诱导表达后,获得1个带组氨酸(His)标签的融合蛋白,目的蛋白主要存在于上清溶液中,为可溶性表达。用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,获得了相对分子质量约66 000的重组蛋白。

关键词：红鳍东方鲀去乙酰化酶 SIRT3 基因基因克隆原核表达