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国内部分动物园与花鸟市场鹦鹉热衣原体病原学检测

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中国动物检疫 2024年第6期41卷 50-55页

作者：刘心仪包银莉张释丹陆浩天文洪然陈柳蓉张钲浩李金飞陈蓉刘燕代蕾刘广锦南京农业大学三亚研究院海南三亚572025 龙岩学院福建龙岩364012 南京农业大学江苏南京210095 南京红山森林动物园江苏南京210028 北京动物园北京100044 海南省动物疫病预防与控制中心海南海口570203

为了解国内动物园与花鸟市场鸟群中鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)的流行现状,通过构建TaqMan荧光定量PCR方法,对江苏省和北京市3处采样点采集的168份禽鸟粪便样本进行了检测,并基于OmpA基因对阳性样本进行了基因序列分析。结果... 详细信息

为了解国内动物园与花鸟市场鸟群中鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)的流行现状,通过构建TaqMan荧光定量PCR方法,对江苏省和北京市3处采样点采集的168份禽鸟粪便样本进行了检测,并基于OmpA基因对阳性样本进行了基因序列分析。结果显示:在江苏省1处花鸟市场检出31份Cps阳性,个体阳性率为41.3%(31/75),在其他2处动物园采样点未检出阳性;阳性样品来自虎皮鹦鹉(23份)、牡丹鹦鹉(5份)、玄凤鹦鹉(2份)和珍珠鸟(1份)。在阳性样本中,共扩增出18个OmpA基因片段,其中16份样本的基因序列相同,与另外2份阳性样本序列不在同一分支,但所有阳性样本均属于基因A型。结果表明,花鸟市场存在较高的Cps流行风险,感染源较为集中。结果提示,各地应着重加强花鸟市场Cps流行的防控,严格落实相关监管措施,加强检疫监管,从而降低Cps传播率并保障公共卫生安全。

关键词：鹦鹉热衣原体核酸检测 qPCR 基因进化树遗传分析

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猪圆环病毒体外高效增殖研究进展

中国兽医学报 2023年第4期43卷 812-817页

作者：雷白时薛拥志李秀丽包银莉张武超赵款袁万哲河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北省人畜共患病原微生物分析与防控重点实验室河北保定071001 河北北方学院动物科技学院河北张家口075131 龙岩学院预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室福建龙岩364012

猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus diseases,PCVDs)主要通过疫苗产品进行预防,病毒增殖水平与疫苗研发密切相关,随着新发病原PCV3和PCV4的出现和广泛流行,对于实现此类病毒体外高效增殖,已经成为开展相应病毒病原学、发病机制及... 详细信息

猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus diseases,PCVDs)主要通过疫苗产品进行预防,病毒增殖水平与疫苗研发密切相关,随着新发病原PCV3和PCV4的出现和广泛流行,对于实现此类病毒体外高效增殖,已经成为开展相应病毒病原学、发病机制及其疫苗研究方面的瓶颈。鉴于4种猪圆环病毒(PCV)在基因组结构、复制机制等方面的相似性,现对其中已实现体外培养的PCV2,在促进其病毒增殖方面的方法和研究进展进行总结和概括,以期进一步提升现有PCV2增殖水平,并对实现PCV3或PCV4的体外培养提供助力,从而促进PCV疫苗的研发和相关病原学与发病机制的深入研究。

关键词：猪圆环病毒体外培养病毒增殖研究进展

猪流行性腹泻病毒S基因全序列扩增方法的建立及应用

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中国兽医科学 2023年第12期53卷 1563-1569页

作者：包银莉许洵锴郑灿阳王燚林鸿颖戴爱玲曾旭健黄翠琴龙岩学院生命科学学院福建龙岩364012 动物源性人兽共患病防控福建省高校工程研究中心福建龙岩364012 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建福州350002 闽西职业技术学院福建龙岩364021

为解决现有猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因全序列获得方法存在的成功率低、操作繁琐的问题,针对NCBI中已知PEDV S基因上下游序列,筛选保守区域用于RT-PCR扩增引物的设计,并从特异性、灵敏性以及临床应用效果等方面对该方法进行了验证。结... 详细信息

为解决现有猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因全序列获得方法存在的成功率低、操作繁琐的问题,针对NCBI中已知PEDV S基因上下游序列,筛选保守区域用于RT-PCR扩增引物的设计,并从特异性、灵敏性以及临床应用效果等方面对该方法进行了验证。结果显示,成功建立了一种可通过1对引物实现PEDV S基因全序列及其上下游部分片段体外扩增的RT-PCR方法,最适退火温度为52℃。该方法具有高度的特异性,仅可与PEDV的cDNA发生反应,不与猪其他常见病原的cDNA或DNA发生交叉反应;具有良好的灵敏性,检测限为4.44×10^(4)copies/μL;具有良好的普适性,10份PEDV临床阳性样品均可扩增出预期大小的目的片段,并成功实现了S全基因测序和遗传进化分析。该方法的建立简化了S基因全序列体外扩增的方法,提高了体外扩增的成功率。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因 RT-PCR 全长序列进化分析

嵌合口蹄疫病毒VP1抗原基因的重组脑心肌炎病毒的构建及鉴定

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中国兽医科学 2022年第11期52卷 1405-1414页

作者：王露露张武超雷白时包银莉王志刚赵款袁万哲河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北省兽医生物技术创新中心河北保定071001 龙岩学院福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室福建龙岩364012 杭锦旗独贵拉镇综合保障和技术推广中心内蒙古鄂尔多斯017499

将口蹄疫病毒(FMDV)VP1全长、VP1 B细胞表位(135~160、198~213aa)和T细胞表位(20~40aa)组合为不同长度分别插入脑心肌炎病毒(EMCV),构建嵌合FMDV VP1重组EMCV。通过融合PCR及酶切的方法,将外源片段插入EMCV L蛋白第5、6位aa之间,得到重... 详细信息

将口蹄疫病毒(FMDV)VP1全长、VP1 B细胞表位(135~160、198~213aa)和T细胞表位(20~40aa)组合为不同长度分别插入脑心肌炎病毒(EMCV),构建嵌合FMDV VP1重组EMCV。通过融合PCR及酶切的方法,将外源片段插入EMCV L蛋白第5、6位aa之间,得到重组质粒pWSK-EMCV-FMDV VP1、pWSK-EMCV-FMDV VP1(TB)和pWSK-EMCV-FMDV VP1(2TB),将其转染至BSR T7/5细胞拯救重组病毒EMCV/RvBD_(2)W-VP1、EMCV/RvBD_(2)W-VP1(TB)和EMCV/RvBD_(2)W-VP1(2TB),并在BHK-21细胞传代分析重组病毒的生物学特性。结果显示,PCR扩增得到1344 bp、909 bp和1155 bp的外源基因融合片段,表明成功构建了3种重组质粒;3株重组病毒EMCV/RvBD_(2)W-VP1、EMCV/RvBD_(2)W-VP1(TB)和EMCV/RvBD_(2)W-VP1(2TB)在BHK-21细胞传至F5代,病毒滴度分别为1×10^(7.85)TCID_(50)/mL、1×10^(8.06)TCID_(50)/mL、1×10^(7.76)TCID_(50)/mL;通过RT-PCR、IFA等方法对F5代重组病毒进行鉴定,显示重组病毒EMCV/RvBD_(2)W-VP1(TB)可以稳定遗传,且病毒复制水平与亲本病毒相一致,而其他2株重组病毒在传代过程中缺失。结果表明,本研究构建了3个重组EMCV质粒,转染细胞后携带FMDV VP1抗原表位的重组病毒稳定遗传,为后续以EMCV为骨架构建活载体疫苗奠定了理论基础。

关键词：口蹄疫病毒脑心肌炎病毒感染性克隆 VP1

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我国PEDV毒株结构蛋白遗传变异情况分析

猪业科学 2018年第10期35卷 86-87页

作者：曾旭健包银莉成都农业科技职业学院四川成都610030 四川海林格生物制药有限公司四川成都610030

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的急性、高度接触性传染病。2010年前,我国主要以散发为主;2010年后,该病在我国全面暴发。大量的研究表明,PEDV毒株发生了变异。文章对PEDV的4个结构蛋白的变异情况进行了分析,对其变异方式和程度... 详细信息

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的急性、高度接触性传染病。2010年前,我国主要以散发为主;2010年后,该病在我国全面暴发。大量的研究表明,PEDV毒株发生了变异。文章对PEDV的4个结构蛋白的变异情况进行了分析,对其变异方式和程度进行了阐述。在编码PEDV结构蛋白的基因中,S基因变异程度最大,变异主要发生在S1区域,变异方式涵盖插入、缺失和突变;M基因、E基因和N基因则相对保守,但也出现了一定程度的进化和变异的趋势,变异方式主要为突变。对于不断涌现的变异株,需要正确地、客观地认识毒株与疫苗效果之间的关系。

关键词：猪流行性腹泻结构蛋白遗传变异

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北疆文化建设的价值指引与路径选择

内蒙古社会科学 2024年第2期45卷 23-30页

作者：包银山内蒙古自治区社会科学院内蒙古呼和浩特010010

北疆文化是中华文化的重要组成部分,北疆文化建设是中国特色社会主义文化建设的内蒙古实践。弘扬北疆文化、推进北疆文化建设、打造北疆文化品牌,是内蒙古自治区党委在完成好习近平总书记交给内蒙古的五大任务和全方位建设模范自治区两... 详细信息

北疆文化是中华文化的重要组成部分,北疆文化建设是中国特色社会主义文化建设的内蒙古实践。弘扬北疆文化、推进北疆文化建设、打造北疆文化品牌,是内蒙古自治区党委在完成好习近平总书记交给内蒙古的五大任务和全方位建设模范自治区两件大事、全面建设社会主义现代化国家新征程上书写内蒙古新篇章中作出的重大文化发展决策,具有重要的战略前瞻性、宏观引领性和现实指导性。推进北疆文化建设、打造北疆文化品牌,必须坚持正确的价值指引,依托北疆的丰厚资源,推动文化的创新交融,以新时代北疆文化建设凝聚各族人民书写中国式现代化的强大精神力量。

关键词：北疆文化价值指引实践路径

学生参与事务服务对社会主义核心价值观培育的影响——以龙岩学院为例

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科教导刊 2020年第6期 91-92+119页

作者：曾旭健包银莉龙岩学院

高等学校中的大学生事务服务中心因其天然的多部门联动特性、服务和信息集中性优势、贴近学生生活的特殊地理位置,已成为推进"三全育人"工作的重要抓手,"服务育人"的重要窗口,以及培育大学生社会主义核心价值观的前沿阵地。本文就学生... 详细信息

高等学校中的大学生事务服务中心因其天然的多部门联动特性、服务和信息集中性优势、贴近学生生活的特殊地理位置,已成为推进"三全育人"工作的重要抓手,"服务育人"的重要窗口,以及培育大学生社会主义核心价值观的前沿阵地。本文就学生参与作为事务服务的重要层面,研究其在促进事务服务和大学生社会主义核心价值观培育中的影响和应对策略。

关键词：学生参与事务服务社会主义核心价值观服务育人

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规模化猪场流行性腹泻防控案例分析

猪业科学 2018年第6期35卷 106-107页

作者：包银莉李高凯余世勇胡彬四川海林格生物制药有限公司四川成都610030

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)引起的急性、高度接触性传染病。其毒株的高度变异性给该病的防控带来了难度。福建某规模化养猪场发生腹泻疫情,通过胶体金检测确诊为猪流行性腹泻病毒感染。... 详细信息

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)引起的急性、高度接触性传染病。其毒株的高度变异性给该病的防控带来了难度。福建某规模化养猪场发生腹泻疫情,通过胶体金检测确诊为猪流行性腹泻病毒感染。疫病初期通过返饲与疫苗肌肉注射等方式进行防控,疫情未得到有效控制。为快速控制疫情,结合猪流行性腹泻病毒的发病与排毒规律,从"降低排毒、激发黏膜免疫、构筑免疫屏障、切断传染源、加强饲养管理"等角度,提出"三打两喷+仔猪喷鼻"的疫情防控方案,方案执行1周,腹泻疫情得到有效控制,发病率由90%以上降低到8.60%。同时,该方案在四川地区24个规模猪场得到了有效的验证。

关键词：猪流行性腹泻防控案例分析

黏膜免疫:在动物疫病免疫防控中的重要地位和作用

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猪业科学 2018年第2期35卷 106-107页

作者：包银莉曾旭健赵金旺胡勇四川海林格生物制药有限公司四川成都611130 成都农业科技职业学院四川成都611130

黏膜是动物机体内表面积最大的一个组织,由呼吸道、消化道、泌尿生殖道、眼角膜、内耳以及多种外分泌腺的管道黏膜所构成.它是动物机体与内、外环境进行物质交换和信息交流的重要部位,同时也是多种病原微生物及其他抗原侵入机体的主要门... 详细信息

黏膜是动物机体内表面积最大的一个组织,由呼吸道、消化道、泌尿生殖道、眼角膜、内耳以及多种外分泌腺的管道黏膜所构成.它是动物机体与内、外环境进行物质交换和信息交流的重要部位,同时也是多种病原微生物及其他抗原侵入机体的主要门户.报道指出：95%以上的传染病病原微生物的入侵门户是由黏膜入侵机体.

关键词：黏膜免疫动物疫病病原微生物防控动物机体泌尿生殖道信息交流物质交换