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稀土离子及其柠檬酸配合物诱导人红细胞的溶血作用

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北京大学学报（医学版） 2002年第2期34卷 163-166页

作者：劳凤云李荣昌王夔北京大学药学院化学生物学系北京100083

目的 :研究稀土离子Ln3 +及其柠檬酸根配合物 [Ln(Cit) 2 ]3 - 诱导人红细胞的溶血作用。方法 :将不同浓度的Ln3 +或 [Ln(Cit) 2 ]3 - 与人红细胞温育后 ,用分光光度法测定离心上清液中的血红蛋白浓度 ,计算相对溶血率H %。用外推法确... 详细信息

目的 :研究稀土离子Ln3 +及其柠檬酸根配合物 [Ln(Cit) 2 ]3 - 诱导人红细胞的溶血作用。方法 :将不同浓度的Ln3 +或 [Ln(Cit) 2 ]3 - 与人红细胞温育后 ,用分光光度法测定离心上清液中的血红蛋白浓度 ,计算相对溶血率H %。用外推法确定临界溶血浓度cH0 。结果 :14种稀土离子对人红细胞的临界溶血浓度cH0 已经确定 ;发现 [Ln(Cit) 2 ]3 - 的H %～c关系曲线为非对称的“钟”型曲线 ,结论 :稀土离子Ln3 +具有较低的临界溶血浓度 ,这说明Ln3 +与红细胞有较强的作用及细胞毒性。 [Ln(Cit) 2 ]3 - 诱导的人红细胞相对溶血率H %与稀土离子在介质中的物种分布有关。

关键词：稀土离子柠檬酸配合物诱导人红细胞溶血作用

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刺五加叶柄的体细胞胚胎发生研究

中草药 2009年第8期40卷 1302-1305页

作者：邢朝斌劳凤云田春迎王建石华北煤炭医学院生物科学系河北唐山063000 华北煤炭医学院药学系河北唐山063000

目的以来源广泛、原植物药用成分量可测定的刺五加叶柄为外植体,研究刺五加体细胞胚胎发生情况,为实现药用成分高产刺五加的快速繁殖奠定基础。方法以3年生植株萌发15 d以内的刺五加复叶叶柄为外植体,考察2,4-D和BA对刺五加体细胞胚胎... 详细信息

目的以来源广泛、原植物药用成分量可测定的刺五加叶柄为外植体,研究刺五加体细胞胚胎发生情况,为实现药用成分高产刺五加的快速繁殖奠定基础。方法以3年生植株萌发15 d以内的刺五加复叶叶柄为外植体,考察2,4-D和BA对刺五加体细胞胚胎发生的影响。结果28 d培养后,2,4-D 1.5 mg/L+BA 1.0 mg/L处理的叶柄外植体中71.4%直接产生或经由愈伤组织间接产生了8.5个体胚。两种产生方式均可在诱导培养基中进行,但间接发生比例较少。转入相同或降低2,4-D质量浓度的培养基后,体胚渐次发育成熟。同时新的体胚也在逐渐产生,经由间接途径产生的体胚所占比例也随之上升。结论刺五加可以通过萌发15 d以内的复叶叶柄外植体实现体细胞胚胎发生,体胚诱导率取决于2,4-D和BA的质量浓度。

关键词：刺五加叶柄体细胞胚胎 2,4-D BA

HPLC法测定刺五加中刺五加苷B和刺五加苷E的含量

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现代预防医学 2008年第12期35卷 2280-2281页

作者：劳凤云李小娜邢朝斌李佳芮华北煤炭医学院唐山 063000 华北煤炭医学院

[目的]建立刺五加中刺五加苷B和刺五加苷E含量的测定方法。[方法]采用高效液相色谱(HPLC)法测定刺五加苷B和刺五加苷E的含量。[结果]在同一色谱条件下,刺五加苷B在2.76～43.92μg·ml-1范围内线性关系良好,r=0.9998,回收率98.7%,RSD为1.... 详细信息

[目的]建立刺五加中刺五加苷B和刺五加苷E含量的测定方法。[方法]采用高效液相色谱(HPLC)法测定刺五加苷B和刺五加苷E的含量。[结果]在同一色谱条件下,刺五加苷B在2.76～43.92μg·ml-1范围内线性关系良好,r=0.9998,回收率98.7%,RSD为1.8%;刺五加苷E在2.34～37.52μg·ml-1范围内线性关系良好,r=0.9996,回收率为101.9%,RSD为2.0%。[结论]该分析方法简便、准确、重现性好,可用于刺五加药材中刺五加苷B和刺五加苷E的含量测定。

关键词： HPLC法刺五加苷B 剌五加苷E

刺五加鲨烯合酶基因的表达及其对皂苷含量的影响

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经济林研究 2013年第1期31卷 25-29页

作者：邢朝斌龙月红劳凤云庄鹏宇修乐山河北联合大学生命科学学院河北唐山063000 河北联合大学药学院河北唐山063000

为了了解刺五加鲨烯合酶基因(squalene synthase,SS)的表达特点及其对刺五加中皂苷含量的影响情况,以GAPDH基因为内参照基因,采用实时定量PCR技术,分析了SS基因在刺五加不同生长发育时期不同器官中的表达量及茉莉酸甲酯对其表达的影响情... 详细信息

为了了解刺五加鲨烯合酶基因(squalene synthase,SS)的表达特点及其对刺五加中皂苷含量的影响情况,以GAPDH基因为内参照基因,采用实时定量PCR技术,分析了SS基因在刺五加不同生长发育时期不同器官中的表达量及茉莉酸甲酯对其表达的影响情况;还利用SPSS 17.0软件分析了SS基因的表达量与刺五加中皂苷总含量的相关性。结果表明,在刺五加的整个生长期中,SS基因的表达量呈现出"低—高—低—高—低"的变化趋势:萌芽期(4月26日)该基因的表达量最低,而盛花期(6月26日)该基因的表达量最高,为萌芽期的3.11倍;SS基因在刺五加根中的表达量显著高于茎、叶和叶柄中的表达量(P<0.05),其在茎中的表达量最低,仅为根中表达量的51.88%。茉莉酸甲酯可提高SS基因的表达量,但其与对照组的差异未达到显著水平。刺五加中的皂苷总含量与SS基因的表达量间呈现出同升同降的变化趋势,存在极显著的正相关关系(P<0.01)。文中初步判定,鲨烯合酶是刺五加皂苷生物合成的关键酶。

关键词：刺五加鲨烯合酶基因表达皂苷实时定量PCR

内生真菌对刺五加皂苷合成关键酶基因表达及皂苷含量的影响

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中国中药杂志 2012年第14期37卷 2041-2045页

作者：邢朝斌龙月红劳凤云何闪梁能松李宝财河北联合大学生命科学学院河北唐山063000 河北联合大学药学院河北唐山063000

目的:分析刺五加内生真菌菌株P116-1a,P116-1b,P109-4,P312-1对刺五加中皂苷合成关键酶基因SS(squalenesynthase),SE(squalene epoxidase),bAS(β-amyrin synthase)表达量和皂苷含量的影响。方法:伤口法回接内生真菌。以GAPDH为内参照基因,Real time PCR法检测关键酶基因表达量的变化。分光光度法测定刺五加的总皂苷含量。结果:回接P116-1a和P116-1b 30 d,刺五加SS基因的表达量显著提高(P<0.05),P109-4和P312-1无显著变化,之后出现降低-相等-降低的变化趋势。回接菌株P312-1 30 d,刺五加SE的表达量显著提升(P<0.05),回接菌株P116-1b和P312-1 90 d,SE的表达量分别显著提升至对照的130%,161%(P<0.05)。回接120 d,4个菌株处理的SE表达量均显著高于对照(P<0.05)。各处理bAS的表达量在回接60～120 d时均显著高于对照(P<0.05)。4个菌株均显著提高了刺五加的皂苷含量(P<0.05)。结论:菌株P116-1a,P116-1b,P109-4,P312-1可显著影响刺五加SS,SE,bAS的表达量,进而影响刺五加的皂苷含量,其中bAS为主要靶点基因。

关键词：刺五加内生真菌关键酶基因表达分析

刺五加鲨烯合酶和鲨烯环氧酶基因单核苷酸多态性及其与总皂苷量的相关性研究

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中草药 2012年第10期43卷 2020-2024页

作者：邢朝斌劳凤云龙月红梁能松陈龙何闪河北联合大学生命科学学院河北唐山063000 河北联合大学药学院河北唐山063000

目的筛选刺五加鲨烯合酶(SS)和鲨烯环氧酶(SE)基因存在的单核苷酸多态性(SNP)位点,分析各SNP位点与刺五加总皂苷量的相关性。方法采用分光光度法测定刺五加总皂苷的量,并划分为具有显著差异(P<0.01)的高、低量组;RT-PCR法扩增刺五加SS... 详细信息

目的筛选刺五加鲨烯合酶(SS)和鲨烯环氧酶(SE)基因存在的单核苷酸多态性(SNP)位点,分析各SNP位点与刺五加总皂苷量的相关性。方法采用分光光度法测定刺五加总皂苷的量,并划分为具有显著差异(P<0.01)的高、低量组;RT-PCR法扩增刺五加SS、SE基因,根据测序结果筛选SNP位点,利用R×C表的χ2检验分析相关关系。结果刺五加SS基因存在6处SNP,其中704 bp位点为错义突变,其他位点为同义突变,各位点均不与刺五加总皂苷量显著相关。SE基因存在9处SNP,其中导致错义突变的164、199、227、232 bp位点及同义突变的279、285 bp位点与刺五加总皂苷量显著相关(P<0.05),其他位点为同义突变,与刺五加总皂苷量间无显著相关性。结论刺五加SS和SE基因存在SNP,SE基因164～285 bp位点的AGAACG与刺五加总皂苷高量组显著相关,TAGTTC与低量组显著相关。

关键词：鲨烯合酶鲨烯环氧酶单核苷酸多态性刺五加总皂苷相关性

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中药多糖提取、分离纯化方法的研究进展

中国药房 2016年第19期27卷 2700-2703页

作者：李翠丽王炜张英李继安劳凤云华北理工大学药学院河北唐山063000 华北理工大学中医学院河北唐山063000

目的:为中药多糖提取、分离纯化方法的进一步研究提供参考。方法:以"多糖""提取""分离纯化""Polysaccharides""Extraction""Abruption""Purification"等为关键词,组合查询2010-2015年Pub Med、中国知网、万方、维普等数据库中的相关文献... 详细信息

目的:为中药多糖提取、分离纯化方法的进一步研究提供参考。方法:以"多糖""提取""分离纯化""Polysaccharides""Extraction""Abruption""Purification"等为关键词,组合查询2010-2015年Pub Med、中国知网、万方、维普等数据库中的相关文献,对中药多糖提取、分离纯化方法进行综述。结果:共查阅到相关文献200余篇,其中有效文献34篇。多糖提取方法既有热水浸提法、酸碱浸提法、酶解提取法、微波辅助提取法、超声辅助提取法和超高压提取法等单一方法,也有超声微波辅助法、微波辅助酶法、超声波辅助酶法等联用方法。多糖分离纯化过程一般是先除杂,再对多糖组分进行分级纯化。分级纯化的常用方法有沉淀法、凝胶色谱法、阴离子交换色谱法、大孔树脂柱色谱法、超滤法等。结论:现阶段提取、分离纯化技术得到的多糖大多为粗制品,质量难以控制,故对中药多糖的提取、分离纯化方法还需要进一步研究。

关键词：多糖提取分离纯化

海洋微生物代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性及抑制类型

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现代预防医学 2008年第11期35卷 2098-2100页

作者：劳凤云吴少杰杨志娟郭瑞华韩刚华北煤炭医学院药学系淮海工学院海洋学院淮海工学院现代教育技术中心

[目的]了解海洋微生物代谢产物对α-葡萄糖苷酶抑制剂的能力及其抑制类型,以发现糖尿病等与糖代谢有关的疾病的新型治疗药物。[方法]42株海洋微生物经发酵和乙酸乙酯提取,获得粗提物,用比色法对粗提物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性和抑制... 详细信息

[目的]了解海洋微生物代谢产物对α-葡萄糖苷酶抑制剂的能力及其抑制类型,以发现糖尿病等与糖代谢有关的疾病的新型治疗药物。[方法]42株海洋微生物经发酵和乙酸乙酯提取,获得粗提物,用比色法对粗提物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性和抑制剂动力学测定。[结果]从中发现6株菌株的代谢产物具有不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性;其中菌株Act09和Act18抑制活力较强,其IC50分别为2.51μl(含粗提物276.10μg)和1.48μl(含粗提物118.4μg)。菌株Act09产生的是反竞争性抑制物,而菌株Act18产生的是非竞争性抑制物。[结论]海洋微生物代谢产物可能含有新类型的α-葡萄糖苷酶抑制剂。

关键词： α-葡萄糖苷酶抑制剂非竞争性抑制反竞争性抑制

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不同产地刺五加中刺五加苷B、E含量的比较

不同产地刺五加中刺五加苷B、E含量的比较