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我国现阶段普法教育研究

我国现阶段普法教育研究

作者：刘颖丽首都师范大学

学位级别：硕士

1986年以来，普法教育工作已经走过了二十年的历程，宣传了党的民主法制建设方针、宣传了邓小平同志民主法制思想、宣传了依法治国的基本方略，实现了三个历史性跨越，即：初步实现了从对一切有能力接受教育公民的启蒙教育到以提高领导... 详细信息

1986年以来，普法教育工作已经走过了二十年的历程，宣传了党的民主法制建设方针、宣传了邓小平同志民主法制思想、宣传了依法治国的基本方略，实现了三个历史性跨越，即：初步实现了从对一切有能力接受教育公民的启蒙教育到以提高领导干部依法决策、依法管理能力为重点的全民法律意识的跨越;初步实现了由单一普及法律条文向全方位推进依法治理的跨越;初步实现了普法依法治理工作由虚变实，由弱变强，向制度化、规范化、法制化的跨越。在准备撰写本文的初期，在所收集的资料中，笔者发现对于普法教育的学术研究几乎为空白，目前的文章大多是从事普法教育的工作人员，从工作实践出发，探讨普法教育的具体问题，偏重政治性和实践性，因此我萌发了从学理上研究普法教育的想法。本文共分为五部分进行论述，第一部分“普法教育概述”运用教育学原理，和比较分析、历史分析的方法，从普法教育的主体、客体、定义、特征、目标、功能出发，力争科学、严谨的研究普法教育理论。本文通过对第二部分“现阶段普法教育的必要性”和第三部分“普法教育的发展历史”的论述，着重探讨传统法律思想和近现代因素对普法教育的阻碍，和普法教育对于中国法治化进程的重要意义。第四部分“普法教育的内容”按照普法教育阶段性的要求，提炼归纳，总结出二十五年来的重点内容和阶段性的侧重内容。本文的第五部分是本文着重强调的，通过前面对普法教育的重要性和难点的分析，提出对“五五”普法教育的建议，建议从七个方面完善：根据不同群体特点，分类指导、分层施教;树立基层普法典型，抓好试点工作;引导公民正确认识法律实施中出现的问题;加快法制宣传教育立法，规范普法教育活动;引入与政治、经济、文化发展相关的新内容;努力提高普法宣传人员队伍素质;积极探索普法宣传的长效机制。并在文章结尾对未来的普法教育进行展望，分析普法教育的发展趋势。

关键词：普法教育 “五五”普法建议普法教育难点

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15例宫颈癌术前新辅助化疗的临床应用

15例宫颈癌术前新辅助化疗的临床应用

作者：刘颖丽大连医科大学

学位级别：硕士

目的探讨新辅助化疗对早期巨块型子宫颈癌的疗效。方法对大连医科大学附属第一医院妇产科2002年1月-2005年5月间收治的15例Ⅰb-Ⅱb期局部肿块直径≥4cm的宫颈癌患者，术前给予以铂类为基础的联合方案化疗1-2个疗程，后行广泛性子宫... 详细信息

目的探讨新辅助化疗对早期巨块型子宫颈癌的疗效。方法对大连医科大学附属第一医院妇产科2002年1月-2005年5月间收治的15例Ⅰb-Ⅱb期局部肿块直径≥4cm的宫颈癌患者，术前给予以铂类为基础的联合方案化疗1-2个疗程，后行广泛性子宫切除术和盆腔淋巴结清扫术，观察化疗后局部肿瘤体积的变化和盆腔淋巴结转移、宫颈浸润深度及标本切缘肿瘤浸润情况，随访治疗后的生存状况。结果 15例患者术前化疗后，宫颈局部肿瘤均有不同程度的缩小，14例临床有效，总临床反应率93.3％，12例进行了根治性手术，手术率80％。结论宫颈癌术前新辅助化疗可改善临床症状，减小肿瘤的体积和范围，降低肿瘤临床分期，提高手术率。然而新辅助化疗能否有效早期控制淋巴或脉管的微小转移灶和亚临床病灶及其对总体生存的意义需长时间、大样本的随访。

关键词：子宫颈癌新辅助化疗临床应用

二甲双胍联合瑞格列奈治疗老年2型糖尿病的疗效及对患者外周血MCP-1、NF-κB水平的影响

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中国老年学杂志 2018年第10期38卷 2307-2310页

作者：刘颖丽杨文长春医学高等专科学校吉林长春130031 吉林大学第二医院

目的探讨二甲双胍联合瑞格列奈对老年2型糖尿病(T2DM)患者的疗效及外周血单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和核因子(NF)-κB水平的影响。方法 T2DM患者136例随机分为观察组和对照组各68例。观察组给予口服盐酸二甲双胍联合瑞格列奈治疗,对照组... 详细信息

目的探讨二甲双胍联合瑞格列奈对老年2型糖尿病(T2DM)患者的疗效及外周血单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和核因子(NF)-κB水平的影响。方法 T2DM患者136例随机分为观察组和对照组各68例。观察组给予口服盐酸二甲双胍联合瑞格列奈治疗,对照组给予口服盐酸二甲双胍联合格列苯脲治疗。检测并比较两组治疗前及治疗后第3、6、12周末空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PBG)水平。比较两组治疗前及治疗12 w末糖化血红蛋白(Hb A1c)、三酰甘油(TG)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及外周血MCP-1、NF-κB水平。比较两组治疗期间不良反应发生情况。结果治疗3、6、12 w末,观察组FBG、PBG水平均显著低于对照组(P0.05)。结论在老年T2DM患者的治疗中,相对应用二甲双胍联合格列苯脲的治疗方案,应用二甲双胍联合瑞格列奈的治疗方案可提高血糖控制效果、有效降低患者胰岛素抵抗程度和外周血MCP-1水平,有助于提高临床疗效及防控并发症。

关键词：二甲双胍瑞格列奈 2型糖尿病单核细胞趋化蛋白-1 核因子-κB

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核桃不定根发生蛋白质组学研究

核桃不定根发生蛋白质组学研究

作者：刘颖丽河北农业大学

学位级别：硕士

不定根发生是无性系林业生产中的关键问题,核桃是重要的经济林树种又是难以诱发不定根的树种。所以,以核桃为试材从理论上探讨不定根发生机制具有重要理论与实践意义。本文首先以不同木本植物为试材,对蛋白质组学研究的关键技术-双向... 详细信息

不定根发生是无性系林业生产中的关键问题,核桃是重要的经济林树种又是难以诱发不定根的树种。所以,以核桃为试材从理论上探讨不定根发生机制具有重要理论与实践意义。本文首先以不同木本植物为试材,对蛋白质组学研究的关键技术-双向电泳的某些重要技术环节进行探讨,对其过程中蛋白质的样品制备、等电聚焦、平衡、凝胶染色等,等几个重要环节进行优化。通过比较研究得出丙酮沉降提取蛋白法,较适合于木本植物的叶、茎等蛋白质含量较低的器官;木本植物的种子等部位的蛋白质适合于用三氯乙酸制干粉法提取;Colloidal考马斯亮兰方法是一种较灵敏的蛋白质染色方法;建立了一套适合于木本植物的2-DE+MALDI-TOF-MS技术平台。采用优化的双向电泳方法,我们对核桃成熟子叶不定根发生过程中的相关蛋白质进行了鉴定,发现在不定根分化期(诱导5d)有44个蛋白质上调节表达,45个蛋白质下调节表达,108个蛋白质基本不变。进一步对上调节表达的33个蛋白质进行分析,其中18个蛋白质出现在根原基分化(诱导3d)之前。对发生变化的蛋白质进一步研究发现:下调节表达蛋白酸性蛋白居多,上调节表达蛋白碱性蛋白居多;下调节表达蛋白大分子量蛋白分布较多,下调节表达蛋白小分子量蛋白分布相对较多。最后我们选择了7个上调节表达蛋白质(L1、L2、L3、L8、L9、L43、L44)进行肽质谱指纹分析并进行同源性比较,发现L1是与过氧化氢酶相近的蛋白质;L2是与查尔酮合成酶相近的蛋白质;L3与硝酸盐转运蛋白质相近;L8、L9、L43、L44是新蛋白质,在已有的数据库中未能找到相近的蛋白质。进一步选择L1进行MS/MS分析确定为过氧化氢酶。本文根据木本植物的特点建立了一套与其相对应的蛋白质组学研究方法,首次利用蛋白质组学技术对核桃子叶不定根发生期间表达的蛋白质进行了解析。今后的研究应在现有结果的基础上,进一步拓展核桃子叶生根过程中的蛋白质差异表达的研究,改进现有的技术和方法,采用特异的或高通量蛋白质展示技术,鉴定更多的生根相关的蛋白质。

关键词：核桃不定根双向电泳质谱蛋白质组学

香菇C91-3发酵液蛋白分离纯化初步鉴定及其抗肿瘤机制的研究

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香菇C91-3发酵液蛋白分离纯化初步鉴定及其抗肿瘤机制的研究

作者：刘颖丽大连医科大学

学位级别：硕士

目的:我课题组经多年研究筛选得到的香菇C菌株,其菌丝体发酵液蛋白LFP91-3经抗肿瘤活性测定,证实其不仅具有体内抑制肿瘤生长作用还具有显著的体外直接杀伤肿瘤细胞的作用。本实验旨在对LFP91-3中的蛋白质组分进行分离纯化和初步鉴定,... 详细信息

目的:我课题组经多年研究筛选得到的香菇C菌株,其菌丝体发酵液蛋白LFP91-3经抗肿瘤活性测定,证实其不仅具有体内抑制肿瘤生长作用还具有显著的体外直接杀伤肿瘤细胞的作用。本实验旨在对LFP91-3中的蛋白质组分进行分离纯化和初步鉴定,以获得更加高效抗肿瘤活性蛋白,以深入了解香菇C菌丝体发酵液的抗肿瘤作用和作用机制,为临床应用打下良好基础。方法:利用生物工程发酵技术大量获得香菇C菌丝体发酵液[1],通过盐析、透析、冻干、DEAE- sepharose FF离子交换层析对发酵液的粗蛋白LFP91-3进行离子交换层析分离,用考马斯亮蓝法测定各管洗脱液的蛋白浓度,并依此绘制洗脱曲线。根据洗脱曲线用SDS-PAGE电泳方法测定各管洗脱液中的蛋白质纯度和蛋白质的分子量。将蛋白成分单一的洗脱液收集冷冻干燥,调整浓度为5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml,用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定不同浓度单一蛋白对S180、H22肿瘤细胞作用24小时、48小时、72小时的体外生长抑制活性;流式细胞仪检测5ug/ml,10ug/ml,15ug/ml单一蛋白对S180、H22肿瘤细胞作用24小时,诱导肿瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率以分析其可能的抗肿瘤机制;采用Caspase-3分光光度法检测Caspase-3在S180、H22细胞中的活性。经SDS-PAGE电泳,切割离子交换层析所得单一蛋白条带,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)测定单一蛋白的肽质量指纹谱(PMF),通过在NCBI数据库中查询识别的方式对此单一蛋白进行初步鉴定。结果:经盐析、透析、冻干得到香菇C菌丝体发酵液粗蛋白LFP91-3冻干粉,通过DEAE-Sepherose FF离子交换层析,0-0.5MNaCl梯度洗脱后,Microsoft Excel软件绘制洗脱曲线,得到4个洗脱峰;根据洗脱曲线用SDS-PAGE电泳测定洗脱峰Ⅳ各管洗脱液中蛋白质成分单一,分子量16KD左右,为离子交换层析得到的单一蛋白;MTT法显示该蛋白能在体外明显抑制S180、H22肿瘤细胞活性,其生长抑制率随单一蛋白作用时间的延长和浓度的增加而升高,呈时间和浓度的依赖性。单一蛋白作用于S180、H22细胞,作用时间24、48、72小时,作用浓度5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml ,S180和H22细胞活性最低抑制率分别为9.66±0.30和6.34±0.05。最高生长抑制率分别为67.23±0.42和33.64±0.85;该蛋白对S180细胞的生长抑制作用更为显著。随着作用时间的延长,抑制率明显增加,P<0.05。Annex in/PI双染色法染色,以流式细胞仪检测肿瘤的凋亡率结果表明单一蛋白能诱导肿瘤细胞的凋亡,浓度为5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml的单一蛋白作用于S180、H22细胞24小时,随着蛋白浓度的增加,S180细胞的早期凋亡率分别为0.82%、0.86%、1.95%, H22细胞的早期凋亡率分别为0.41%、0.79%、1.78%,肿瘤细胞的早期凋亡率随着单一蛋白的作用浓度而增加,表现出剂量-效应关系;单一蛋白作用S180、H22细胞后Caspase-3活性各个时间段相比也有显著差异(P<0.05)。随着作用时间的延长Caspase-3活性逐渐增加,单一蛋白诱导24 h后即可提高S180、H22细胞Caspase-3活性,分别达到12.27±0.167和6.93±0.200,时间延长到72h后,S180和H22细胞Caspase-3活性分别达到测定最高值31.93±0.200和24.6±0.367;MALDI—TOF—MS测定单一蛋白PMF,经NCBI数据库检索无吻合蛋白。初步证实其是一未知蛋白。结论:香菇C菌丝体发酵液的粗蛋白LFP91-3经盐析、透析、冻干、DEAE- sepharose FF离子交换层析分离得到四组蛋白,其中第四组经SDS-PAGE电泳为单一成分蛋白,分子量为16kDa左右,体外对S180,H22细胞的生长具有较强的抑制作用。试剂盒检测发现Caspase-3活性的升高,并且具有时间依赖性。预测该蛋白可能通过诱导Caspase-3蛋白表达进而诱导肿瘤细胞凋亡。经质谱测定、NCBI数据库检索没有查到吻合蛋白,初步证实其是一未知新蛋白。

关键词：香菇发酵液蛋白离子交换 Caspase-3 凋亡 MALDI—TOF—MS