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用一种新的免疫方法制备抗NPY单克隆抗体

中国免疫学杂志 1995年第2期11卷 92-94页

作者：刘顺爱毕无邪杨贵贞白求恩医科大学免疫学教研室

本文报道了在８淋巴细胞杂交瘤技术中采用脾内微量免疫及腹腔植入联合免疫方法获得了两株分泌抗神经肽Ｙ（ＮＰＹ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞系，用ＥＬＩＳＡ法测定腹水ＭｃＡｂ的效价为１０￣（－３）～１０￣（－５）。Ｅ... 详细信息

本文报道了在８淋巴细胞杂交瘤技术中采用脾内微量免疫及腹腔植入联合免疫方法获得了两株分泌抗神经肽Ｙ（ＮＰＹ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞系，用ＥＬＩＳＡ法测定腹水ＭｃＡｂ的效价为１０￣（－３）～１０￣（－５）。ＥＬＩＳＡ交叉试验结果表明，该ＭｃＡｂ不与ＡＣＴＨ反应，两种ＭｃＡｂ的亲和常数（Ｋａ）各为１×１０￣９Ｍ￣（－１）和５×１０￣７ｍｏｌ／Ｌ￣（－１），抗原决定簇分析结果表明此两种ＭｃＡｂ针对不同抗原决定簇。

关键词：脾脏腹腔植入神经肽Y 单克隆抗体

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嗜酸性粒细胞与组织免疫损伤

国外医学（免疫学分册） 1993年第5期16卷 235-239页

作者：刘顺爱杨贵贞白求恩医科大学免疫学教研室

嗜酸性粒细胞(EO)的特殊球颗粒中含有主要碱性蛋白(MBP)、嗜酸性粒细胞离子蛋白(ECP)、嗜酸性粒细胞衍生的神经毒素(EDN)、嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPO)等强碱性蛋白,脱颗粒引起上述物质的释放.EO通过强碱性蛋白和活性氧引起组织细胞损... 详细信息

嗜酸性粒细胞(EO)的特殊球颗粒中含有主要碱性蛋白(MBP)、嗜酸性粒细胞离子蛋白(ECP)、嗜酸性粒细胞衍生的神经毒素(EDN)、嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPO)等强碱性蛋白,脱颗粒引起上述物质的释放.EO通过强碱性蛋白和活性氧引起组织细胞损伤,EO还可以产生PAF,LTC_4,LTD_4等炎性介质而引起炎症反应,因而多种疾病可能与EO相关.

关键词：嗜酸性粒细胞组织免疫损伤

人源抗HBsAg抗体Fd段和L链高效表达菌株的筛选

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中国免疫学杂志 2001年第6期17卷 289-291页

作者：刘顺爱王学何玉先田波徐道振北京地坛医院病毒研究室北京100011 中国科学院微生物研究所分子病毒学与生物工程开放实验室北京100080

目的 :选用高效表达载体分别高效表达人源抗HBsAg抗体的Fd段和L链 ,经包涵体纯化和变性复性使Fd段和L链之间形成二硫键 ,最终制备有活性、高产量的人源抗HBsAg基因工程抗体Fab。方法 :用PCR法从可溶性表达重组质粒抗HBsAgFadComb3扩增F... 详细信息

目的 :选用高效表达载体分别高效表达人源抗HBsAg抗体的Fd段和L链 ,经包涵体纯化和变性复性使Fd段和L链之间形成二硫键 ,最终制备有活性、高产量的人源抗HBsAg基因工程抗体Fab。方法 :用PCR法从可溶性表达重组质粒抗HBsAgFadComb3扩增Fd段和L链后分别构建高效表达载体PQE32 Fd和PQE32 L ,并分别导入大肠杆菌M15中进行表达 ,用SDS PAGE筛选出高效表达克隆。结果 :SDS PAGE筛选的高效表达克隆M15 PQE32 Fd和M15 PQE32 L经IPTG诱导后以包涵体形式表达 ,其表达量很高。从高效表达克隆重新扩增Fd段和L链后进行测序鉴定发现所得的序列与已报道的抗HBsAg抗体Fab基因吻合率为 97%。结论 :虽然已有表达可溶性人源抗HBsAg基因工程抗体Fab的报道 ,但因其表达量低而不能实际应用。筛选出高效表达人源抗HBsAg抗体Fd段和L链的克隆 ,因为包涵体形式表达需经变性复性 ,虽然变性复性后其产量会受影响 ,但因表达量很高 ,所以还是有很高的实际应用价值。其包涵体变性复性条件仍需进一步探讨。

关键词： HBsAg 人源抗体Fab 高效表达乙肝抗体工程技术

HCBP6模拟磷酸化对肝细胞内三酰甘油合成的调控作用

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西安交通大学学报（医学版） 2021年第4期42卷 502-507页

作者：杨雪亮刘小静韩铭刘顺爱成军蔺淑梅西安交通大学第一附属医院营养科陕西西安710061 西安交通大学第一附属医院感染科陕西西安710061 首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所北京100020

目的探讨HCBP6模拟磷酸化对肝细胞内三酰甘油合成的调控作用,为代谢相关脂肪性肝病的治疗提供分子靶点。方法利用定点突变技术,模拟HCBP6 Ser-10、Ser-151磷酸化与去磷酸化。油红O染色与三酰甘油含量测定检测肝细胞内三酰甘油水平。qRT-... 详细信息

目的探讨HCBP6模拟磷酸化对肝细胞内三酰甘油合成的调控作用,为代谢相关脂肪性肝病的治疗提供分子靶点。方法利用定点突变技术,模拟HCBP6 Ser-10、Ser-151磷酸化与去磷酸化。油红O染色与三酰甘油含量测定检测肝细胞内三酰甘油水平。qRT-PCR及Western blotting检测SREBP1c、ACC1及FASN的表达。双萤光素酶报告基因检测SREBP1c启动子活性。结果HCBP6 Ser-10磷酸化促进三酰甘油生成;HCBP6 Ser-10磷酸化上调SREBP1c、ACC1、FASN基因表达;HCBP6 Ser-10磷酸化增强SREBP1c启动子活性。结论HCBP6 Ser-10磷酸化能明显增强SREBP1c启动子活性,上调SREBP1c-FASN信号通路转导,促进三酰甘油生成。

关键词：代谢相关脂肪性肝病三酰甘油 HCBP6 磷酸化 SREBP1c

HIV/AIDS与肝炎病毒感染者CD4^+、CD8^+淋巴细胞数的比较

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中国免疫学杂志 1999年第12期15卷 561-563页

作者：刘顺爱秦靖张卫华张启云徐克沂北京地坛医院病毒研究室北京100011

探讨ＨＩＶ携带者或ＡＩＤＳ病人（简称ＨＩＶ／ＡＩＤＳ）与肝炎病毒感染者的ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞变化，并进行比较。方法：用免疫磁珠法（ＤＹＮＡｂｅａｄｓ）检测ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞数，用双侧ｔ检验进行统计学处理... 详细信息

探讨ＨＩＶ携带者或ＡＩＤＳ病人（简称ＨＩＶ／ＡＩＤＳ）与肝炎病毒感染者的ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞变化，并进行比较。方法：用免疫磁珠法（ＤＹＮＡｂｅａｄｓ）检测ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞数，用双侧ｔ检验进行统计学处理。结果：全部ＨＩＶ／ＡＩＤＳ的ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞降低，且幅度大，８３．４％低于５００细胞／ｕｌ。在病毒性肝炎中降低的百分比和幅度均明显低于前者，只有２８．８％低于５５细胞／ｕｌ，且２４．２％大于８００细胞／ｕｌ。与同一水平ＣＤ４＋细胞相对应的ＨＩＶ／ＡＩＤＳＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞水平显著高于病毒性肝炎，ＣＤ８＋细胞水平随ＣＤ４＋Ｔ细胞增加而升高。ＣＤ４＋细胞平均水平较高的ＨＩＶ感染者自觉症状与ＣＤ４＋Ｔ细胞数之间无直接相关关系，说明只用ＣＤ４＋Ｔ细胞数来估计病人机体状态或只根据病人症状估计机体免疫状态是不太准确的。结论：ＨＩＶ／ＡＩＤＳ与病毒性肝炎存在不同程度的ＣＤ４＋、ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞异常；ＣＤ４＋Ｔ细胞是ＨＩＶ／ＡＩＤＳ的重要指标，但不是绝对指标；ＣＤ８＋Ｔ细胞与病人病情的变化及预后之间可能存在着很重要的关系，需进一步研究。

关键词： HIV/AIDS 病毒性肝炎 CD4^+T细胞 CD8^+T细胞

HIV／AIDS患者疾病进程与CD4^＋CD25^hi调节性T细胞之间相关性研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2009年第5期23卷 361-363页

作者：宋淑静冯鑫郭晶晶刘亚楠伦文辉魏红山刘顺爱北京地坛医院检验科 100011 首都医科大学传染病研究所、北京地坛医院传染病研究所首都医科大学传染病研究所、北京地坛医院感染中心

目的通过分析不同阶段HIV感染者外周血CD4^＋CD25^hi调节性T细胞（CD4^＋CD25^hi regulatory T cells，Treg cells）与外周血免疫状态和病毒载量的相关性，探讨Treg细胞对HIV／AIDS发病进程的影响。方法采集116例HIV感染者和21例正常人... 详细信息

目的通过分析不同阶段HIV感染者外周血CD4^＋CD25^hi调节性T细胞（CD4^＋CD25^hi regulatory T cells，Treg cells）与外周血免疫状态和病毒载量的相关性，探讨Treg细胞对HIV／AIDS发病进程的影响。方法采集116例HIV感染者和21例正常人对照外周血，用4色流式细胞术进行CD4^＋和CD8^＋T细胞绝对数计数；用3色流式细胞术进行Treg细胞测定；用荧光定量PCR法进行HIVRNA载量测定。实验数据用回归统计学方法和T检验方法进行分析。结果HIV感染者外周血Treg细胞频率在HIV感染初期显著下降，之后随着疾病的进程逐渐升高。在CD4^＋T细胞大于300／μl的患者低于正常对照组，在CD4^＋T细胞小于100/μm的患者高于正常对照组，差异具有统计学意义。Treg细胞频率与CD4^＋T淋巴细胞绝对数和CD4v／CD8^＋之间均呈负相关，其相关系数r和P值各为r=-0．564，P〈0．001和r=-0．377，P〈0．001；Treg细胞频率与血浆HIV病毒载量呈正相关，其相关系数r=0．514，P〈0．001。结论CD4^＋CD25^hi Treg细胞可能是参与艾滋病免疫发病机理的重要细胞，在HIV感染发病进程的不同阶段具有不同的意义，其确切机制有待进行进一步研究。

关键词： HIV T淋巴细胞抗原,CD4 受体,白细胞介素2

慢性乙型肝炎中医证型与HLA-DRB1位点表达探讨

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中国中西医结合杂志 2007年第10期27卷 898-900页

作者：王融冰周桂琴江宇泳孙凤霞孙静媛刘顺爱北京地坛医院北京100011

目的探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)中医证型与人类白细胞抗原-DRB1(HLA-DRB1)表达是否存在内在联系。方法用常规方法提取血液中白细胞DNA并用PCR方法对其相关片断进行扩增,用HLA基因分型芯片对HLA-DRB1位点进行分型检测。结果健康对照组有HL... 详细信息

目的探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)中医证型与人类白细胞抗原-DRB1(HLA-DRB1)表达是否存在内在联系。方法用常规方法提取血液中白细胞DNA并用PCR方法对其相关片断进行扩增,用HLA基因分型芯片对HLA-DRB1位点进行分型检测。结果健康对照组有HLA-DRB1*13表达,但在慢乙肝患者组未见其表达,两组比较,差异有显著性(P<0.05);慢乙肝患者分型有湿热中阻、肝郁脾虚、瘀血阻络、肝肾阴虚、脾肾阳虚,前三者为实证,后两者为虚证,慢乙肝辨证以实证居多。结论慢乙肝患者与健康对照者在HLA-DR某些位点表达上存在差异,这一差异的作用尚有待进一步证实,同时慢乙肝虚、实不同证型间HLA-DR基因位点表达可能存在不同。

关键词：慢性乙型肝炎实证虚证 HLA-DRBl

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艾滋病发病及病程进展中的几个重要标志

国外医学（病毒学分册） 1998年第3期5卷 95-96页

作者：刘顺爱王学北京地坛医院中国科学院微生物研究所

人源抗人免疫缺陷病毒1型噬菌体抗体库的构建及筛选

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中华实验和临床病毒学杂志 1998年第1期12卷 33-37页

作者：何玉先王学刘顺爱何忠平周莹徐克沂徐道振北京地坛医院病毒研究中心中国科学院微生物研究所

目的构建人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）特异性噬菌体抗体库，制备人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体。方法以半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）从ＨＩＶ－１感染者外周血单个核淋巴细胞中扩增抗体重链Ｆｄ和轻链（ｋ）基因，与噬菌... 详细信息

目的构建人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）特异性噬菌体抗体库，制备人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体。方法以半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）从ＨＩＶ－１感染者外周血单个核淋巴细胞中扩增抗体重链Ｆｄ和轻链（ｋ）基因，与噬菌体载体ｐＣｏｍｂ３连接，构建噬菌体抗体Ｆａｂ组合文库。对抗体库进行３轮吸附－洗脱－扩增的亲和选择后，以ＥＬＩＳＡ法筛选抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体，并进行ＤＮＡ序列分析和Ｆａｂ的可溶性表达。结果半巢式ＰＣＲ有效地扩增出Ｆｄ和ｋ基因，以此构建成容量为１９５×１０７的噬菌体抗体库。３轮亲和选择使特异性抗体得到高度富集，抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体阳性克隆占３２％。对一阳性克隆抗体基因ＣＨ１和ＣＬ部分ＤＮＡ序列进行了测定，并在大肠杆菌表达出可溶性Ｆａｂ。结论抗ＨＩＶ－１特异性噬菌体抗体库的构建和人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体的制备为今后筛选抗ＨＩＶ中和抗体奠定了基础，具有重要的应用价值。

关键词：抗体库人源单克隆抗体人免疫缺陷病毒