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生物复杂环境下的核磁共振技术和应用:机遇与挑战并存

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科学通报 2019年第8期64卷 773-787页

作者：刘重旭王玉娟喻志武王俊峰中国科学院合肥物质科学研究院强磁场科学中心中国科学院强磁场与离子束物理生物学重点实验室合肥230031 中国科学技术大学合肥230036

核磁共振(nuclear magnetic resonance, NMR)技术是研究生物大分子结构、动力学和相互作用最理想的工具之一.近年来,高场NMR波谱仪的使用和NMR实验方法的不断创新,在很大程度上提高了NMR技术检测的灵敏度和分辨率,使NMR技术得到快速发... 详细信息

核磁共振(nuclear magnetic resonance, NMR)技术是研究生物大分子结构、动力学和相互作用最理想的工具之一.近年来,高场NMR波谱仪的使用和NMR实验方法的不断创新,在很大程度上提高了NMR技术检测的灵敏度和分辨率,使NMR技术得到快速发展和广泛应用.目前,生命科学与物质科学的交叉融合使生命科学研究从观察、描述性科学转向定量、可预测性科学,多种学科交叉渗透发展已成为科学研究领域十分普遍的现象.在这种趋势下,生物复杂环境下的磁共振谱学研究体系日趋成熟,本文重点回顾和讨论了多学科交叉研究趋势下NMR技术在生物复杂体系中的应用和发展,主要包括复杂膜环境下的膜蛋白研究、复杂细胞环境下的细胞内NMR(in-cell NMR)研究以及骨组织的固体NMR研究等.

关键词：核磁共振生物复杂环境膜蛋白 in-cell NMR 骨生物材料

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哺乳动物季节性繁殖的神经内分泌调节机制

遗传 2012年第3期34卷 281-288页

作者：赖平王凭青张宝云储明星刘重旭谭颖樊奇重庆大学生物工程学院重庆400030 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院家养动物遗传资源与种质创新重点开放实验室北京100193

动物的季节性繁殖,是指其繁殖活动从静止到复苏的一个年周期性循环。研究显示,kisspeptin和RFRP对繁殖的季节性变化具有重要作用。非繁殖期最显著的特点是雌激素对GnRH分泌的负反馈效应的增加,而雌激素的这种效应是由kisspeptin神经元... 详细信息

动物的季节性繁殖,是指其繁殖活动从静止到复苏的一个年周期性循环。研究显示,kisspeptin和RFRP对繁殖的季节性变化具有重要作用。非繁殖期最显著的特点是雌激素对GnRH分泌的负反馈效应的增加,而雌激素的这种效应是由kisspeptin神经元传导的。因此,kisspeptin是影响繁殖活动的一个重要因子。RFRP的表达依赖于褪黑激素的分泌并呈现出季节性变化,在非繁殖期对繁殖活动的抑制作用非常明显。此外,甲状腺激素在繁殖期的终止上发挥着至关重要的作用,而多巴胺能神经元A14/A15也促进了雌激素负反馈效应的季节性变化。这些神经元系统通过协同作用一起调节了生殖功能随光周期的季节性转变。文章对繁殖的季节性和这4个神经内分泌系统之间的关系进行了系统的阐述。

关键词：季节性繁殖 kisspeptin RFRP 甲状腺激素多巴胺能神经元A14/A15

RFRP-3对哺乳动物生殖功能和能量平衡的影响

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遗传 2012年第8期34卷 969-976页

作者：向伟赖平张宝云王凭青储明星樊奇刘重旭谭颖重庆大学生物工程学院重庆400030 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室北京100193

哺乳动物的生殖功能受体内状态和外部环境综合作用的影响,这种综合作用通过作用于HPG轴的刺激因子和抑制因子之间的相对平衡来调控生殖。RFRP-3是目前下丘脑中唯一已知的HPG轴抑制因子。大量研究证实,RFRP-3能够抑制GnRH和LH的分泌,进... 详细信息

哺乳动物的生殖功能受体内状态和外部环境综合作用的影响,这种综合作用通过作用于HPG轴的刺激因子和抑制因子之间的相对平衡来调控生殖。RFRP-3是目前下丘脑中唯一已知的HPG轴抑制因子。大量研究证实,RFRP-3能够抑制GnRH和LH的分泌,进而影响生殖功能。然而,RFRP-3对LH分泌的抑制作用是发生在垂体水平还是下丘脑水平尚不清楚。此外,RFRP-3还可能参与了MLT对哺乳动物季节性繁殖调控的信号通路,但是MLT对RFRP-3神经元的作用方式仍不清楚。此外,RFRP-3还可能在能量平衡和动物行为的调控中发挥着重要作用。文章就RFRP-3对HPG轴的调节机制以及其在能量平衡调节和行为调控中的作用进行了系统的阐述,并针对目前尚待解决的一些问题进行了探讨。

关键词： RFRP-3 生殖功能 GnRH 能量平衡季节性变化

贵州白山羊和古蔺马羊脂联素基因多态性及其与繁殖性能的关联研究

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中国农业科学 2011年第9期44卷 1916-1922页

作者：刘重旭王凭青张宝云储明星邓腊梅谭颖樊奇重庆大学生物工程学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室

【目的】阐明西南地区具有代表性的山羊品种脂联素(adiponectin)基因的多态性及其与繁殖性能之间的关系,为山羊高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。【方法】根据牛的ADIPOQ序列设计4对引物,采用PCR-SSCP技术检测ADIPOQ在川东白山羊、... 详细信息

【目的】阐明西南地区具有代表性的山羊品种脂联素(adiponectin)基因的多态性及其与繁殖性能之间的关系,为山羊高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。【方法】根据牛的ADIPOQ序列设计4对引物,采用PCR-SSCP技术检测ADIPOQ在川东白山羊、大足黑山羊、贵州白山羊、金堂黑山羊、板角山羊、成都麻羊、南江黄羊、古蔺马羊和马头山羊等9个山羊品种中的单核苷酸多态性,同时在贵州白山羊和古蔺马羊两个群体中研究脂联素基因多态性与山羊繁殖力之间的关系。【结果】4对引物中只有引物P4存在多态性。对于P4的扩增片段,在不同的山羊品种中检测到AA、AG和GG 3种基因型,测序分析表明与AA型相比,GG型有一处单碱基突变(954G→A)。GG型和AG型的贵州白山羊产羔数最小二乘均值分别比AA型的多0.18只(P0.05)。【结论】表明ADIPOQ可能是影响贵州白山羊和古蔺马羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密连锁的遗传标记。

关键词：山羊繁殖力 ADIPOQ PCR-SSCP

CBL联合ETM教学法在神经内科教学查房中的应用体会

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国际医药卫生导报 2022年第23期28卷 3367-3369页

作者：廖旺刘重旭罗皓雨杨少青广州医科大学附属第二医院神经内科广州510250

临床实践是医学生将来开展工作承上启下的一步,并且在纷繁复杂的神经内科知识中传统教学的适用度较低,所以如何高效利用这一时间段为临床工作打下坚固的基础,是带教老师必须解决的问题。笔者结合神经科特点,采用以问题为导向,兼引导学... 详细信息

临床实践是医学生将来开展工作承上启下的一步,并且在纷繁复杂的神经内科知识中传统教学的适用度较低,所以如何高效利用这一时间段为临床工作打下坚固的基础,是带教老师必须解决的问题。笔者结合神经科特点,采用以问题为导向,兼引导学生掉入“陷阱”为过程的陷阱教学法(excavation teaching method,ETM)联合基于病例教学法(case-based learning,CBL)的教学模式,取得较好效果,值得大力推广。

关键词： PBL MET 神经内科教学模式

表皮生长因子受体基因(EGFR)多态性及其与山羊产羔数的相关分析

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农业生物技术学报 2011年第6期19卷 1034-1041页

作者：宋文静王凭青张宝云储明星孔祥军谭颖樊奇刘重旭重庆大学生物工程学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室

表皮生长因子受体是雌性生殖功能的关键因子,本研究旨在分析表皮生长因子受体基因(epidermalgrowth factor receptor,EGFR)的多态性与山羊繁殖性能之间的关系。参考牛的EGFR基因序列设计14对引物,采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR... 详细信息

表皮生长因子受体是雌性生殖功能的关键因子,本研究旨在分析表皮生长因子受体基因(epidermalgrowth factor receptor,EGFR)的多态性与山羊繁殖性能之间的关系。参考牛的EGFR基因序列设计14对引物,采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测在西南地区具有代表性的10个山羊(Caprahircus)品种(马头山羊、波尔山羊、古蔺马羊、川东白山羊、大足黑山羊、贵州白山羊、金堂黑山羊、板角山羊、成都麻羊和南江黄羊)中EGFR基因的单核苷酸多态性,并且在贵州白山羊、古蔺马羊和川东白山羊中分析EGFR基因多态性与山羊繁殖力之间的相关性。结果显示,14对引物中有2对引物(P3和P13)的扩增片段出现多态性。对于P3的扩增片段,在不同的山羊品种中检测到AA、AB和BB三种基因型,测序分析表明BB基因型与AA基因型相比有一处单碱基突变(115837C→T)。在3个品种中,AA基因型和AB基因型的产羔数最小二乘均值差异不显著(P>0.05),BB基因型的样本非常有限,没有统计意义;对于P13的扩增片段,在不同的山羊品种中检测到GG、HH和GH型三种基因型,测序分析表明HH基因型与GG基因型相比有一处单碱基突变(173015 G→A)。GG基因型在贵州白山羊和川东白山羊中产羔数最小二乘均值显著高于GH基因型(P<0.05),而在古蔺马羊样本中只存在GG基因型,HH基因型的样本在三个品种中都很少存在。本研究初步表明,EGFR基因可能是影响山羊产仔数性状的一个主效基因或是与该性状紧密遗传连锁的一个分子遗传标记。

关键词：山羊繁殖力表皮生长因子受体基因(EGFR) PCR-SSCP

大足黑山羊性激素结合球蛋白基因的克隆与多态性分析

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生物技术通报 2010年第10期26卷 149-155,177页

作者：谭颖王凭青何腾龙储明星邓腊梅樊奇张宝云刘重旭重庆大学生物工程学院重庆400030 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)是广泛存在于哺乳动物血清中的糖蛋白,血清SHBG可结合与转运性激素,从而在一定程度上控制血清性激素浓度,血清性激素浓度将会影响体内促黄体激素/促卵泡激素比率,最终影响排卵性能... 详细信息

性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)是广泛存在于哺乳动物血清中的糖蛋白,血清SHBG可结合与转运性激素,从而在一定程度上控制血清性激素浓度,血清性激素浓度将会影响体内促黄体激素/促卵泡激素比率,最终影响排卵性能。以大足黑山羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增,克隆测序等方法获得SHBG基因序列,经DNAMAN软件与BLAST比对分析其单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)。结果发现,SHBG基因内含子4中有两处突变(A215G、G607A),外显子5中有一处无义突变(A733G),外显子7中也有两处无义突变(A371G、A380G)。通过染色体步移获得了1 190 bp的SHBG基因5′端调控区序列,启动子预测分析显示此基因没有TATA盒和CCAAT盒,也没有发现人SH-BG基因多态性研究中发现的TAAAA重复序列。本研究结果有望为大足黑山羊SHBG基因多态性与繁殖力的关系提供科学依据。

关键词：性激素结合球蛋白大足黑山羊 TAAAA重复染色体步移单核苷酸多态性

miR-132对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤的保护作用

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国际医药卫生导报 2022年第13期28卷 1796-1800页

作者：廖旺杨少青刘重旭罗皓雨侯涛路关超广州医科大学附属第二医院神经内科广州510260 陕西省富平县医院神经内科渭南711700

目的探讨微小RNA-132(miR-132)对PC12细胞的保护作用及其可能的作用机制。方法研究时间为2021年9月至2022年3月。取对数生长期PC12细胞,采用谷氨酸处理,建立兴奋性损伤模型;实验组采用瞬时转染法转染miR-132 mimics,培养24 h后加入谷氨... 详细信息

目的探讨微小RNA-132(miR-132)对PC12细胞的保护作用及其可能的作用机制。方法研究时间为2021年9月至2022年3月。取对数生长期PC12细胞,采用谷氨酸处理,建立兴奋性损伤模型;实验组采用瞬时转染法转染miR-132 mimics,培养24 h后加入谷氨酸处理24 h。采用CCK8法检测各组PC12细胞存活率;流式细胞术检测活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)及丙二醛(MDA),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6的表达。采用LSD-t检验和χ2检验。结果谷氨酸处理后的PC12细胞,miR-132表达水平低于对照组(P<0.01)。转染miR-132 mimics后PC12细胞的活力均高于转染NCmimics后(P<0.05)。转染miR-132 mimics后的氧化应激水平较NCmimics组降低(均P<0.05)。miR-132 mimics细胞炎症因子下调。结论miR-132可促进PC12细胞的增殖、抑制PC12细胞凋亡,其机制可能为抑制氧化应激,下调炎症调节相关因子IL-1β、IL-6的表达。

关键词：脑梗死神经细胞 miR-132

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胚胎发育过程中的DNA甲基化作用

生命科学研究 2011年第2期15卷 170-175页

作者：谭颖王凭青何腾龙张宝云储明星樊奇刘重旭重庆大学生物工程学院中国重庆400030 中国农业科学院家养动物遗传资源与种质创新重点开放实验室中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国北京100193

哺乳动物的正常发育取决于表观遗传学调控机制准确无误地运行.其中尤为重要的是发生在原生殖细胞和胚胎中的基因组范围内的DNA甲基化模式重排等表观遗传学修饰.胚胎发育过程中的DNA甲基化作用与基因印记的建立、基因表达的调控以及细胞... 详细信息

哺乳动物的正常发育取决于表观遗传学调控机制准确无误地运行.其中尤为重要的是发生在原生殖细胞和胚胎中的基因组范围内的DNA甲基化模式重排等表观遗传学修饰.胚胎发育过程中的DNA甲基化作用与基因印记的建立、基因表达的调控以及细胞和胚胎的形态建成都密切相关.DNA甲基化发生机制和功能的阐明将对哺乳动物个体发育与人类疾病研究有重要意义.

关键词： DNA甲基化重编程胚胎发育原生殖细胞胎盘