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TRAF4在胃癌组织中的表达及意义

世界华人消化杂志 2011年第4期19卷 374-378页

作者：刘辉琦李菊英刘杰王生兰青海大学医学院病理生理教研室青海省西宁市810001 青海大学医学院病理教研室青海省西宁市810001

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)在胃癌发生、发展中的作用.方法:应用组织芯片采用免疫组织化学法检测10例正常胃组织、45例胃癌及癌旁组织中TRAF4的表达,TUNEL法检测TRAF4阳性胃癌及正常胃组织中细胞凋亡.结果:TRAF4在正常... 详细信息

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)在胃癌发生、发展中的作用.方法:应用组织芯片采用免疫组织化学法检测10例正常胃组织、45例胃癌及癌旁组织中TRAF4的表达,TUNEL法检测TRAF4阳性胃癌及正常胃组织中细胞凋亡.结果:TRAF4在正常胃组织中呈浆、核阳性表达.其浆阳性率在正常胃组织(80%)、不典型增生(93.3%)和胃癌(95.6%)中逐渐增高,但差异无统计学意义.而核阳性率在正常胃组织中高于胃癌(70.0%vs35.6%,P<0.05),在高分化胃癌中高于低分化胃癌(71.4%vs26.1%,P<0.05),在无淋巴转移胃癌中高于伴有淋巴转移(52.4%vs20.8%,P<0.05).TRAF4表达阳性正常胃组织细胞凋亡百分率高于胃癌组织(75vs37.2,P<0.05).结论:TRAF4在胃癌中具有较低核表达,且其核表达与胃癌分化程度呈正相关,与胃癌转移呈负相关,同时可能抑制胃癌凋亡.

关键词：胃癌肿瘤坏死因子受体相关因子-4 免疫组织化学凋亡

藏药三味檀香汤散对全脑缺血/再灌注大鼠海马CA1区神经元DND和凋亡的影响

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中成药 2012年第9期34卷 1790-1792页

作者：刘杰刘辉琦王生兰曹学锋吴穹青海大学医学院青海西宁810001

目的探讨藏药三味檀香汤散对大鼠全脑缺血/再灌注损伤(I/R)海马CA1区神经元迟发性死亡(DND)、TUNEL凋亡阳性细胞数及相关凋亡蛋白caspase-3表达的影响。方法 48只成年雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、全脑缺血/再灌注模型组、藏药... 详细信息

目的探讨藏药三味檀香汤散对大鼠全脑缺血/再灌注损伤(I/R)海马CA1区神经元迟发性死亡(DND)、TUNEL凋亡阳性细胞数及相关凋亡蛋白caspase-3表达的影响。方法 48只成年雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、全脑缺血/再灌注模型组、藏药三味檀香汤散低、高剂量预处理组(藏药低、高剂量组)。硫堇染色下观察海马CAl区锥体神经元组织学分级(Histological grade,HG)和神经元密度(neuronal density,ND),反映DND程度;分别用TUNEL原位标记法和免疫组织化学法检测各组大鼠海马CA1区神经细胞凋亡阳性个数和caspase-3表达的变化,反映凋亡程度。结果藏药低、高剂量组HG级别降低、ND数增高、TUNEL凋亡阳性细胞数、caspase-3表达下降,与全脑缺血/再灌注组比较,均有统计学意义(P<0.05);藏药低、高剂量组间比较,后者作用强于前者,其中ND数、TUNEL凋亡阳性细胞数差异有统计学意义(P<0.05)。结论藏药三味檀香汤散预防给药可能有减轻全脑缺血/灌注损伤后海马CA1区DND、抑制caspse-3表达,进而起到神经保护作用。

关键词：三味檀香汤散全脑缺血/再灌注损伤 DND 凋亡 caspase-3

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DCLK1在胃癌干细胞中的作用及机制研究

中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 411-419页

作者：张威王光辉刘辉琦刘永年青海大学医学部青海西宁810001

目的:研究双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)对胃癌干细胞生物学特性的作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:无血清培养液悬浮培养胃癌干细胞,用DCLK1抑制剂DCLK1-IN-1靶向抑制胃癌干细胞中DCLK1活性。用Western blo... 详细信息

目的:研究双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)对胃癌干细胞生物学特性的作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:无血清培养液悬浮培养胃癌干细胞,用DCLK1抑制剂DCLK1-IN-1靶向抑制胃癌干细胞中DCLK1活性。用Western blot法检测胃癌干细胞中DCLK1、干性相关蛋白(SOX2和OCT4)、细胞增殖相关蛋白(cyclin D1和c-MYC)、耐药相关蛋白(ABCG2和TOP2A)、上皮-间充质转化相关蛋白(E-cadherin、vimen‐tin和Snail)和PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平。用CCK-8法测定DCLK1对胃癌干细胞活力及耐药的影响;用甲基纤维素成球法测定DCLK1对胃癌干细胞自我更新的影响。用细胞划痕实验和Transwell实验测定DCLK1对胃癌干细胞迁移和侵袭功能的影响。结果:胃癌干细胞中DCLK1及干性相关蛋白SOX2和OCT4表达明显高于亲本细胞(P<0.01)。DCLK1抑制组胃癌干细胞的增殖、耐药、迁移和侵袭能力明显低于Sphere细胞组(P<0.01)。DCLK1抑制组细胞增殖相关蛋白c-MYC和cyclin D1表达下调,耐药相关蛋白TOP2A和ABCG2表达下调,上皮标志物E-cadherin表达上调,间充质标志物vimentin和Snail表达下调,PI3K/AKT/mTOR相关蛋白表达及其磷酸化水平降低(P<0.01)。结论:DCLK1在胃癌干细胞中高表达,它可能通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进胃癌干细胞增殖、耐药、侵袭和迁移。DCLK1可作为靶向胃癌干细胞的潜在靶点。

关键词：双皮质素样激酶1 胃癌干细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路

杂交瘤单抗15B7靶向抑制ESA阳性肝癌干细胞的体外侵袭能力和顺铂耐药性

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肿瘤 2015年第6期35卷 597-603页

作者：杨婧莫文秀刘辉琦遇珑孙立新杨治华孙力超冉宇靓北京协和医学院/中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的 :研究一株杂交瘤细胞分泌的识别上皮特异性抗原(epithelial specii c antigen,ESA)阳性肝癌干细胞的单克隆抗体(简称单抗)15B7的体外功能,为靶向肝癌干细胞的肝癌治疗提供候选抗体药物。方法 :采用无血清悬浮培养及PKH26染色法确... 详细信息

目的 :研究一株杂交瘤细胞分泌的识别上皮特异性抗原(epithelial specii c antigen,ESA)阳性肝癌干细胞的单克隆抗体(简称单抗)15B7的体外功能,为靶向肝癌干细胞的肝癌治疗提供候选抗体药物。方法 :采用无血清悬浮培养及PKH26染色法确定肝癌Bel7402-V3细胞球中存在肿瘤干细胞。采用FCM法和双色细胞免疫荧光法检测ESA和单抗15B7识别的抗原蛋白在Bel7402-V3细胞中的表达情况。采用无血清悬浮培养法观察单抗15B7作用对Bel7402-V3细胞球自我更新能力的影响,细胞计数试剂盒-8法检测单抗15B7对Bel7402-V3细胞的顺铂耐药性的影响,Transwell实验检测单抗15B7对Bel7402-V3细胞侵袭能力的影响。结果 :Bel7402-V3细胞经无血清悬浮培养11 d后形成的细胞球体中存在单个PKH26染色阳性的肿瘤干细胞。单抗15B7识别的抗原分子能与ESA一起共定位于Bel7402-V3细胞。单抗15B7能显著抑制Bel7402-V3细胞在无血清培养液中成球(P<0.05),抑制率达32.4%;单抗15B7能够有效降低Bel7402-V3细胞的顺铂耐药性(P<0.05),实验组与未经单抗15B7处理的对照组半数抑制浓度分别为0.14μg/m L和0.27μg/m L;此外,单抗15B7亦能抑制Bel7402-V3细胞的侵袭能力(P<0.05),抑制率达30.7%。结论 :杂交瘤单抗15B7在体外能够显著抑制ESA阳性肝癌干细胞的自我更新、耐药和侵袭能力,推测其可作为肝癌干细胞靶向治疗的有价值的候选抗体药物。

关键词：肝肿瘤肿瘤干细胞抗体,单克隆肿瘤浸润抗药性,肿瘤上皮特异性抗原

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高海拔少数民族地区胃溃疡穿孔96例分析

医学理论与实践 2011年第12期24卷 1427-1428页

作者：刘辉琦刘慧青海大学医学院病理生理教研室青海省西宁市810001 青海省西宁市人民医院消化内科

目的:探讨高海拔少数民族地区不同生活习惯和饮食结构对胃溃疡穿孔发病的影响。方法:对2000-2010年青海省海西地区96例胃穿孔患者的民族、饮食结构和生活习惯进行分析。结果:96例胃溃疡穿孔患者中蒙古族37例(38.5%),藏族29例(30.2%),回... 详细信息

目的:探讨高海拔少数民族地区不同生活习惯和饮食结构对胃溃疡穿孔发病的影响。方法:对2000-2010年青海省海西地区96例胃穿孔患者的民族、饮食结构和生活习惯进行分析。结果:96例胃溃疡穿孔患者中蒙古族37例(38.5%),藏族29例(30.2%),回族19例(19.8%),汉族11例(11.5%),2005年后发病人数逐年下降。结论:高海拔少数民族地区胃溃疡穿孔发病率增加但受国家卫生政策影响。

关键词：少数民族胃溃疡穿孔分析

内镜下窄带成像技术在诊断Barrett食管中的应用

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临床荟萃 2012年第2期27卷 149-150页

作者：刘慧刘辉琦西宁市第一人民医院消化内科青海西宁810000 青海大学医学院病理生理教研室青海西宁810000

Barrett食管（Barrett esophagus,BE）是指食管下段的复层鳞状上皮被单层柱状上皮所替代的一种病理现象,可伴或不伴肠化,其中伴有特殊肠上皮化生（specialized intestinal metaplasia,SIM）者属于食管腺癌的癌前病变。目前认为BE的癌变... 详细信息

Barrett食管（Barrett esophagus,BE）是指食管下段的复层鳞状上皮被单层柱状上皮所替代的一种病理现象,可伴或不伴肠化,其中伴有特殊肠上皮化生（specialized intestinal metaplasia,SIM）者属于食管腺癌的癌前病变。目前认为BE的癌变经过SIM→低度异型增生→高度异性型增生→原位癌→浸润性腺癌的过程[1]。

关键词： Barrett食管胃镜检查食管肿瘤

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云班课在“病理生理学”教学中的应用与实践

教育教学论坛 2021年第49期 106-109页

作者：刘辉琦青海大学医学院临床医学系青海西宁810001

为适应教育信息化趋势,调动学生学习的积极性与主动性,提高“病理生理学”教学效果,对云班课在“病理生理学”教学中的应用进行了探索。在青海大学2018级临床医学本科班“病理生理学”授课中使用云班课辅助教学,教学结束后进行问卷调查... 详细信息

为适应教育信息化趋势,调动学生学习的积极性与主动性,提高“病理生理学”教学效果,对云班课在“病理生理学”教学中的应用进行了探索。在青海大学2018级临床医学本科班“病理生理学”授课中使用云班课辅助教学,教学结束后进行问卷调查分析。结果表明,所有学生(100%)均反映云班课能够提供更多的学习资料且提交作业便捷,97%的学生愿意继续使用云班课,90%以上的学生认为云班课具有扩展知识面,提高学习积极性与主动性,以及学习效果好等优势,但只有68%的学生认为云班课能够增强团队协作意识。因此,基于云班课平台的混合式教学模式有助于增强学生对“病理生理学”的学习兴趣,促进学生主动学习,提高“病理生理学”教学效果,但在增强学生团队协作意识方面有待进一步提高。

关键词：云班课病理生理学应用

同型半胱氨酸促进大鼠血管平滑肌细胞增殖和表型转化

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中国病理生理杂志 2010年第7期26卷 1321-1324页

作者：王生兰刘辉琦曹学锋刘杰吴穹青海大学医学院病理生理学教研室青海西宁810001

目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化和增殖的影响,以期为Hcy作为动脉粥样硬化(AS)独立危验因子的分子机制提供证据。方法:体外培养大鼠血管平滑肌细胞,用不同浓度的Hcy作用于细胞24h后:(1)MTT法测定细胞的... 详细信息

目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化和增殖的影响,以期为Hcy作为动脉粥样硬化(AS)独立危验因子的分子机制提供证据。方法:体外培养大鼠血管平滑肌细胞,用不同浓度的Hcy作用于细胞24h后:(1)MTT法测定细胞的增殖率;(2)流式细胞术检测细胞周期;(3)半定量RT-PCR法检测平滑肌22α(SM22α)mRNA的表达;(4)透射电镜观察VSMCs的形态学特征,确定其表型转换特征。结果:Hcy可导致细胞增殖率增加;G0/G1期细胞逐渐减少,S期细胞逐渐增多;SM22α mRNA表达下调,Hcy浓度增至1000μmol/L时差异显著;透射电镜显示,高浓度Hcy作用后VSMCs胞浆中内质网、高尔基复合体明显增多、胞核大、染色质疏松。结论:Hcy促进VSMCs增殖的同时可促进其表型的转化。

关键词：高半胱氨酸血管平滑肌细胞细胞增殖表型

组织芯片技术在检测胃癌组织中TRAF4表达中的应用

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山东医药 2011年第7期51卷 7-8页

作者：刘辉琦刘慧刘杰王生兰青海大学医学院病理生理教研室西宁810001 西宁市第一人民医院

目的探讨组织芯片技术诊断胃癌的价值。方法采用免疫组化法检测胃癌组织芯片(胃正常组织10份、增生组织45份、胃癌组织45份)中肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)的表达。结果 TRAF4胞质阳性率在正常组织、增生组织和胃癌组织中逐渐增高... 详细信息

目的探讨组织芯片技术诊断胃癌的价值。方法采用免疫组化法检测胃癌组织芯片(胃正常组织10份、增生组织45份、胃癌组织45份)中肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)的表达。结果 TRAF4胞质阳性率在正常组织、增生组织和胃癌组织中逐渐增高,但差异无统计学意义。胞核阳性率逐渐降低,正常组织显著高于胃癌组织,P<0.05;胃癌组织中高分化者显著高于低分化者(P<0.05),无淋巴转移者显著高于有淋巴转移者,P<0.05。结论组织芯片可大规模、高效率检测胃癌组织样本,具有快速、方便、经济、准确等特点,可用于胃癌的早期诊断。

关键词：组织芯片胃肿瘤,胃癌肿瘤坏死因子受体相关因子4 免疫组织化学