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植物遗传资源学报 2015年第6期16卷 1307-1314页

作者：张艳艳王倩李晓旭孙亭亭龚达平杨明磊刘贯山中国农业科学院烟草研究所/中国农业科学院烟草遗传改良与生物技术重点开放实验室青岛266101 中国农业科学院研究生院北京100081

植物多药和有毒化合物排出家族(MATE,multidrug and toxic compound extrusion)是一类可转运毒素、金属离子、次级代谢产物的次级转运蛋白家族。该家族主要在植物的解毒机制中发挥作用,部分成员也参与植物的形态建成过程。MATE家族在烟... 详细信息

植物多药和有毒化合物排出家族(MATE,multidrug and toxic compound extrusion)是一类可转运毒素、金属离子、次级代谢产物的次级转运蛋白家族。该家族主要在植物的解毒机制中发挥作用,部分成员也参与植物的形态建成过程。MATE家族在烟草基因组中的数量、特征及功能目前尚未开展系统分析。本研究利用生物信息学方法对普通烟草(Nicotiana tabacum)基因组中的MATE基因进行了预测分析,共预测到131个基因,分为4个亚家族。亚家族3在进化树中形成较为独立的分枝,其跨膜区数量、亚细胞定位、保守结构域方面与其他亚家族不同。转录组数据显示,相当一部分MATE家族基因在所有组织中低量表达。GO功能注释结果表明该家族成员主要作为一种转运体,在应激响应、生物调控等过程中发挥作用。本研究为烟草及其他植物中MATE家族的鉴定和功能研究提供了数据基础。

关键词：普通烟草 MATE家族生物信息学分析

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甲基磺酸乙酯对烤烟种子发芽率的处理效应

中国烟草科学 2011年第3期32卷 17-20,27页

作者：王军伟蒋彩虹宋志美张丽王鲁王元英刘贯山中国农业科学院烟草研究所农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室青岛266101 中国农业科学院研究生院北京100081

以不同浓度的甲基磺酸乙酯（EMS）作为化学诱变剂,烤烟不同品种的种子为供试材料,探讨了EMS化学诱变剂对烟草种子发芽率、根长等性状差异的诱变处理效应。结果表明,在浓度为0.1%~1.3%的处理范围内,EMS对种子的发芽率主要呈抑制作用,但... 详细信息

以不同浓度的甲基磺酸乙酯（EMS）作为化学诱变剂,烤烟不同品种的种子为供试材料,探讨了EMS化学诱变剂对烟草种子发芽率、根长等性状差异的诱变处理效应。结果表明,在浓度为0.1%~1.3%的处理范围内,EMS对种子的发芽率主要呈抑制作用,但低浓度处理对种子发芽率和种子根长有促进作用,高浓度处理对种子发芽率和种子根长均呈显著抑制作用;以半致死浓度为选择标准,确定了不同烤烟品种间EMS诱变处理种子的适宜浓度为0.35%~0.52%,致死浓度均为1.3%;供试品种间EMS处理反映的敏感性为云烟87=云烟97〉红花大金元〉中烟100〉K326。

关键词：烤烟种子 EMS 半致死浓度突变体

番茄C2H2型锌指蛋白的鉴定及生物信息学分析

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江苏农业科学 2018年第12期46卷 23-27页

作者：胡军华王大伟杨明磊王新朱海朱佩刘贯山中国农业科学院烟草研究所/烟草行业烟草基因资源利用重点实验室山东青岛266101 中国农业科学院研究生院北京100081

植物C2H2型锌指蛋白转录因子广泛参与植物的生长发育及对逆境应答反应等生命过程。为了更好地理解番茄中C2H2型锌指蛋白转录因子的种类和数量,利用番茄基因组数据库,鉴定出92条番茄C2H2型锌指蛋白。蛋白质理化分析结果表明,不同亚家族... 详细信息

植物C2H2型锌指蛋白转录因子广泛参与植物的生长发育及对逆境应答反应等生命过程。为了更好地理解番茄中C2H2型锌指蛋白转录因子的种类和数量,利用番茄基因组数据库,鉴定出92条番茄C2H2型锌指蛋白。蛋白质理化分析结果表明,不同亚家族成员的氨基酸长度差异较大,且多为碱性氨基酸;进化树分析结果表明,所有C2H2家族成员被分为5个亚家族,每个亚家族成员数量差异较大;结构域分析显示每个成员都含有C2H2结构域,同一亚家族间结构域的数量、种类、分布具有一致性;染色体定位结果显示,有91个成员定位在12条染色体上;组织表达分析结果表明,C2H2转录因子基因家族成员在各个组织中都有表达,表达量具有差异性。本研究将为番茄C2H2型锌指蛋白的生物学功能分析提供参考。

关键词： C2H2型锌指蛋白番茄生物信息学进化树结构域染色体定位组织表达

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特征香韵烤烟新品种(系)多指标综合评价

分子植物育种 2023年第4期21卷 1370-1380页

作者：李功博吴新儒李志远王大伟晁江涛曹鹏云刘贯山中国农业科学院烟草研究所烟草行业烟草基因资源利用重点实验室青岛266101 中国农业科学院研究生院北京100089

特征香韵烤烟新品种(系)‘中烟特香301’、‘特5’、‘特18’是通过EMS(甲基磺酸乙酯)诱变烤烟品种‘中烟100’所得,具有优异的烟叶品质。为明晰‘中烟特香301’、‘特5’、‘特18’在山东烟区的推广应用价值,本试验以山东烟区主栽品种... 详细信息

特征香韵烤烟新品种(系)‘中烟特香301’、‘特5’、‘特18’是通过EMS(甲基磺酸乙酯)诱变烤烟品种‘中烟100’所得,具有优异的烟叶品质。为明晰‘中烟特香301’、‘特5’、‘特18’在山东烟区的推广应用价值,本试验以山东烟区主栽品种‘中烟100’为对照品种在山东省日照市莒县与诸城市开展品种比较试验,从大田生育期、植物学性状、农艺性状、田间主要病害、经济性状、原烟外观质量及原烟内在质量7个方面分析各品种(系)的性状特点。结果表明,与‘中烟100’相比,两地各品种(系)表现出以下特点:株高略矮、茎围较粗、节距略短、最大叶长较长;大田抗病性较好;总糖与还原糖含量较高,烟碱含量稍低;产量、产值、上等烟比例较高;原烟外观质量较好。综上特征香韵烤烟新品种(系)在山东省日照市和潍坊市具有良好的推广应用价值。

关键词：烤烟新品种(系) 综合评价

白肋烟晾制过程中烟叶外观变化与内在变化关系的研究

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烟草科技 1999年第6期32卷 37-39页

作者：李章海刘贯山王晓荣柴家荣汪开保合肥经济技术学院合肥市美菱大道121号230052 云南省烟草科学研究所玉溪市红塔路中段653100 芜湖卷烟厂安徽省芜湖市芜石路73号241002

对白肋烟晾制过程中烟叶外观变化与内在变化关系进行了研究。结果表明，烟叶的干物质和总糖、总氮等化学成分在凋萎期、变黄期减少较多；变褐期和凋萎期是叶片失水的主要阶段；变褐是叶片细胞发生破裂溶解而消失的外观表征，变褐期叶片... 详细信息

对白肋烟晾制过程中烟叶外观变化与内在变化关系进行了研究。结果表明，烟叶的干物质和总糖、总氮等化学成分在凋萎期、变黄期减少较多；变褐期和凋萎期是叶片失水的主要阶段；变褐是叶片细胞发生破裂溶解而消失的外观表征，变褐期叶片变薄程度最大。

关键词：白肋烟晾制变化烟叶烟草调制

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皖南烟叶可持续发展的环境及相应对策分析

中国烟草科学 2007年第2期28卷 52-55页

作者：刘贯山舒俊生季学军方鼎中国烟草总公司青州烟草研究所青岛266101 安徽中烟芜湖卷烟厂安徽芜湖241002 安徽皖南烟叶有限责任公司安徽宣城242000

通过2005～2006年皖南烟叶基地建设,分析了皖南烤烟生产的环境条件,指出了生产中存在的主要问题。从可持续发展的角度提出了解决对策:建设烟水配套工程,规划基本烟田和确定基本烟农,加强烟叶集约化和专业化建设,加大主要技术的研发力度... 详细信息

通过2005～2006年皖南烟叶基地建设,分析了皖南烤烟生产的环境条件,指出了生产中存在的主要问题。从可持续发展的角度提出了解决对策:建设烟水配套工程,规划基本烟田和确定基本烟农,加强烟叶集约化和专业化建设,加大主要技术的研发力度,切实提高烟农积极性,建立素质高和责任心强的烟技员队伍。

关键词：皖南烤烟环境条件可持续发展对策

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基于EST序列的烟草cSNP发掘

中国烟草科学 2012年第6期33卷 61-65页

作者：龚达平王鲁李凤霞王卫锋刘贯山孙玉合农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室中国农业科学院烟草研究所青岛266101

SNP标记是一类应用广泛的第三代分子标记。从GenBank下载普通烟草EST序列共计317 175条,用CAP3软件对序列进行拼接。设定SNP位点的冗余度大于2,采用AutoSNP软件检测cSNP。结合位点所在序列的文库和品种信息以及多个SNP位点的共分离分值... 详细信息

SNP标记是一类应用广泛的第三代分子标记。从GenBank下载普通烟草EST序列共计317 175条,用CAP3软件对序列进行拼接。设定SNP位点的冗余度大于2,采用AutoSNP软件检测cSNP。结合位点所在序列的文库和品种信息以及多个SNP位点的共分离分值来评价其可信度。结果表明,317 175条普通烟草EST拼接成重叠群中15 429个重叠群至少包含4个读长,鉴定出53 477个冗余度大于2的候选SNP,烟草中出现SNP的频率为0.34%。其中SNP的转换率大于颠换,插入/删除表现出A/T偏好。这些高质量SNP标记的发掘为开展烟草基因功能研究和分子育种奠定了良好的基础。

关键词：单核苷酸多态性序列表达标签单体型烟草

一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法

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生物技术通报 2015年第5期31卷 68-72页

作者：向小华焦禹顺吴新儒程亚增侯烁刘贯山王元英中国农业科学院烟草研究所中国农业科学院烟草遗传改良与生物技术重点开放实验室青岛266101 中国农业科学院研究生院北京100081 青岛农业大学农学与植物保护学院青岛266109

利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PC... 详细信息

利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PCR扩增,结果表明:改良方法回收的DNA的纯度高,特异性好,回收率与经典煮沸法相当。在保证回收产物的特异性时,用低温浓缩法替代乙醇/醋酸钠共沉淀也具有可行性及一定的创新性。

关键词：非变性聚丙烯凝胶 DNA小片段二次PCR 改良煮沸法胶回收

烟草NtLS基因RNA干扰表达载体的构建及遗传转化

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中国烟草科学 2011年第4期32卷 31-35页

作者：王卫锋太帅帅王鲁刘贯山李凤霞高晓明孙玉合农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室中国农业科学院烟草研究所青岛266101

腋芽的形成涉及多个调控基因,其中关键基因编码的蛋白属于植物特有的GRAS蛋白家族,它的突变或功能缺失将影响腋生分生组织的形成。笔者利用RACE技术克隆了烟草NtLS基因(GenBank登录号EU935581),NtLS与调控植物腋生分生组织形成的基因LS/... 详细信息

腋芽的形成涉及多个调控基因,其中关键基因编码的蛋白属于植物特有的GRAS蛋白家族,它的突变或功能缺失将影响腋生分生组织的形成。笔者利用RACE技术克隆了烟草NtLS基因(GenBank登录号EU935581),NtLS与调控植物腋生分生组织形成的基因LS/LAS/MOC1序列高度相似。本研究从该基因上选取干扰片段,构建了含有反向重复序列的RNAi干扰表达载体,并通过农杆菌侵染的方法转染烟草W38,以期为NtLS基因的功能研究奠定基础。

关键词：烟草 NtLS RNA干扰