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转Mad1基因球孢白僵菌工程菌株的构建及鉴定

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转Mad1基因球孢白僵菌工程菌株的构建及鉴定

作者：刘艳微哈尔滨师范大学

学位级别：硕士

在全球关注绿色无公害农业的大前提下,微生物农药得到了广泛的关注和长足的发展,虽然存在着寄主范围广、致病力强、对人畜无害等优点,不过缺点也是显而易见的,如致病潜伏期长,杀虫时效性较差、对环境条件要求高等缺点,使得微生物杀虫剂... 详细信息

在全球关注绿色无公害农业的大前提下,微生物农药得到了广泛的关注和长足的发展,虽然存在着寄主范围广、致病力强、对人畜无害等优点,不过缺点也是显而易见的,如致病潜伏期长,杀虫时效性较差、对环境条件要求高等缺点,使得微生物杀虫剂的推广仍然受到限制。因此利用基因工程等技术手段改造真菌,获得具有更高杀虫力并适应市场需求的微生物杀虫剂将具有重要的应用价值。球孢白僵菌（Beauveria bassiana）作为重要的昆虫病原真菌在害虫的生物防治中发挥着重要作用。目前许多球孢白僵菌的基因工程研究主要集中在毒力直接相关基因的转化和表达,如蛋白酶基因、几丁质酶基因、毒素基因等,存在着一定的生物安全性问题,本研究所导入的外源基因来自于金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae）,并且该基因非直接毒素基因,而是通过空气表达增加虫生真菌黏着性,促进孢子对昆虫体壁的吸附,从而增加毒力,缩短作用时间,对未来白僵菌基因工程菌株的选育提供了材料。本研究克隆了来源于生防真菌绿僵菌的黏着蛋白基因Mad1,构建到遗传转化载体上。采用溶壁酶和β-巯基乙醇裂解白僵菌细胞壁,得到的原生质体浓度达到108sp/mL,再生培养基上培养经计算其再生率为15%。使用抗杀菌剂萎锈灵基因Carboxin做为抗性筛选标记,经抗性浓度筛选确定其抗性终浓度为180ng/mL。利用PEG介导的原生质体遗传转化体系导入受体球孢白僵菌菌株,获得转化子,经过继代培养及分子检测,获得遗传稳定的基因工程菌株。利用蝗虫内翅及洋葱表皮进行吸附试验进行了工程菌株的生物学功能鉴定。研究结果表明,野生型和工程菌的分生孢子对于洋葱表皮的吸附量并无明显差异,而工程菌的分生孢子对蝗虫翅膀的吸附则显著高于野生型,表明Mad1基因的导入能够增加球孢白僵菌对昆虫组织的吸附,而对植物表皮组织不存在吸附能力;对亚洲玉米螟幼虫室内毒力测定结果表明转化后的工程菌株LT50值（3.278±0.346天）要比野生型（4.972±0.147天）缩短1天。杀虫率方面转化后的工程菌株杀虫校正死亡率在第七天时达到82.88%,而野生菌株为69.27%,杀虫效率显著提高。

关键词：球孢白僵菌黏着蛋白MAD1 遗传转化工程菌株

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含钴燃料电池阴极材料的电导弛豫研究

含钴燃料电池阴极材料的电导弛豫研究

作者：刘艳微哈尔滨工业大学

学位级别：硕士

燃料电池是一种在等温条件下直接将燃料的化学能转变成电能的装置。从原理上说,燃料电池不受卡诺循环的限制,用于转化电能的化学能来自燃料和氧化剂气体的反应能,具有能量转化率高和环境友好等传统热机无法比拟的优点。固体氧化物燃料... 详细信息

燃料电池是一种在等温条件下直接将燃料的化学能转变成电能的装置。从原理上说,燃料电池不受卡诺循环的限制,用于转化电能的化学能来自燃料和氧化剂气体的反应能,具有能量转化率高和环境友好等传统热机无法比拟的优点。固体氧化物燃料电池是一种全固态燃料电池,具有无泄漏、寿命长等优点,是最理想的燃料电池类型之一。但迄今SOFC自身仍然有许多基础研究问题尚未得到妥善解决。人们越来越意识到降低操作温度(600-800oC)的重要性。但随着工作温度的降低,电解质欧姆电阻和电极极化电阻增大,而阴极的极化电阻增大尤为明显。因而,阴极性能成为人们所关心的问题之一。本文就是以发展中温固体氧化物燃料电池为应用背景,围绕中温阴极材料做了如下一些工作: 首先研究了LaSrCoFeO样品的制备、热学、电学性质。对样品分别进行了XRD、热膨胀、电导率以及电导弛豫等测试。研究发现,测试的热膨胀曲线在较高温度下偏离线性变化而变得陡峭以及电导率先增后减600°C时达到极值,这都是因为晶格氧的缺失以及氧空位的形成。另外对样品在中温区进行了电导弛豫测试,结果发现,随着测量温度的增加,样品的弛豫速度增加,达到平衡所需的时间也明显减少。T=720°C的弛豫时间是T=770°C的两倍。相应的化学扩散系数在7×10-8-1×10-7cm·S之间。计算出的氧化学扩散的活化能约为Ea=40.8±3.6kJ·mol。然后我们又对另一种中温阴极材料SmSrCoO样品进行了研究,测试了其晶体结构、热膨胀、电导率以及电导弛豫性能。研究发现,热膨胀曲线也在较高温度时偏离线性变化而变得陡峭,电导率先增后减450°C时达到极值,与上面的分析相同这都是因为晶格氧的缺失以及氧空位的形成。另外

关键词： SOFC 化学扩散电导弛豫 La0.6Sr0.4Co0.2Fe0.8O3-δ(LSCF) Sm0.5Sr0.5CoO3-δ(SSC)

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橡胶沥青混凝土在绥青线中的应用

辽宁省交通高等专科学校学报 2011年第1期13卷 21-24页

作者：刘艳微葫芦岛鑫达监理公司辽宁葫芦岛125000

以绥青线为研究对象,阐述了橡胶沥青混凝土的配合比设计和施工。通过绥青线工程实践证明,橡胶沥青混凝土的应用是成功的。可为我市今后其它工程提供一种有意义经验性的参考。

关键词：橡胶沥青混凝土配合比设计施工

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苏云金芽胞杆菌一新菌株的鉴定及其杀虫活性

植物保护学报 2015年第3期42卷 410-417页

作者：孟鑫睿路杨刘艳微徐文静冯树丹张正坤哈尔滨师范大学生命科学与技术学院哈尔滨150025 吉林省农业科学院植物保护研究所公主岭136100

为分离并鉴定对亚洲玉米螟具有高毒力的苏云金芽胞杆菌菌种,通过棋盘式采集法从吉林省农业科学院试验田土壤中分离获得野生菌株,进行了形态、生化特性、伴孢晶体观察及基因型鉴定,并测定了其对3种鳞翅目害虫的室内生物活性。结果显示:... 详细信息

为分离并鉴定对亚洲玉米螟具有高毒力的苏云金芽胞杆菌菌种,通过棋盘式采集法从吉林省农业科学院试验田土壤中分离获得野生菌株,进行了形态、生化特性、伴孢晶体观察及基因型鉴定,并测定了其对3种鳞翅目害虫的室内生物活性。结果显示:该菌株在LB培养基上为圆形、暗白色菌落,边缘不整齐,革兰氏染色阳性,产生的伴孢晶体形状多为不规则形。16S r DNA序列与苏云金芽胞杆菌属的NBRC 13865同源性达99%;该菌株为cry2+cry9复合基因型,编码氨基酸序列与Cry2Ab和Cry9Ea蛋白同源性分别为94%和99%,鉴定为苏云金芽胞杆菌,命名为JN001。该菌株对亚洲玉米螟具有较高毒性,以1.0×109个/m L菌体浓度接种3龄幼虫72 h后,其校正死亡率为95.06%,致死中浓度(LC50)为4.12×103个/m L菌体,而对斜纹夜蛾和粘虫毒性较弱,接种72 h后校正死亡率分别为12.88%和7.34%。表明该菌株是1株对亚洲玉米螟具有较强毒力的苏云金芽胞杆菌新菌株,具有较好的开发利用潜力。

关键词：菌株鉴定微生物杀虫剂亚洲玉米螟

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大学物理实验线上线下混合模式教学探讨

中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2021年第8期 225-226页

作者：姜伟陈志刚刘艳微李滨黑龙江工程学院黑龙江哈尔滨150050

随着教育的不断发展,其教育模式也在随着时代的潮流进行不断的变革,对于教学方式的探讨也在不断的进行,线上教学和线下教学的混合教学模式一直备受关注,其具体的教育成果也存在许多争议,但是在2020年我国无论是小学还是大学都广泛采用... 详细信息

随着教育的不断发展,其教育模式也在随着时代的潮流进行不断的变革,对于教学方式的探讨也在不断的进行,线上教学和线下教学的混合教学模式一直备受关注,其具体的教育成果也存在许多争议,但是在2020年我国无论是小学还是大学都广泛采用了这类教学模式,并且目前也在持续推动过程中,其具体成果也逐渐被大众所认同。本文从大学物理实验线上线下的混合教育模式进行切入,通过具体的分析来进一步阐述该模式存在的问题以及相对于的措施,为我国教育事业的发展添加多元化的建议。

关键词：大学物理实验线上线下混合教学模式探讨

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浅谈工程质量监督

北方交通 2011年第7期01卷 73-74页

作者：陈久东刘艳微王志强葫芦岛市绥中县道路桥梁公司葫芦岛125000 葫芦岛鑫达公路工程监理咨询有限责任公司葫芦岛125000 葫芦岛市交通工程质量监督站葫芦岛125000

介绍了工程质量监督的内容,分析了目前工程质量监督过程中存在的问题及应采取的相关监督措施。

关键词：工程质量质量监督政府监督

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应用型本科院校电子科学与技术专业建设初探

林区教学 2013年第1期 97-98页

作者：刘艳微李林军贺泽龙马成黑龙江工程学院电气与信息工程学院哈尔滨150050 黑龙江工程学院光电技术研究所哈尔滨150050

对应用型本科院校电子科学与技术专业的专业建设进行研究，在立足地方经济需求的背景下综合学校资源优势准确进行了专业定位，结合黑龙江工程学院应用型本科院校的实际情况，对理论和实践教学体系分不同的层面进行构建和优化。

关键词：电子科学与技术应用型教学体系

Tm^(3+)/Ho^(3+)共掺YAG晶体的光谱研究

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黑龙江工程学院学报 2017年第3期31卷 42-43,51页

作者：孙福军杨曦凝刘艳微国网黑龙江省电力有限公司黑龙江哈尔滨150001 黑龙江工程学院材料与化学工程学院黑龙江哈尔滨150050 黑龙江工程学院电气与信息工程学院黑龙江哈尔滨150050

研究以800nm二极管激光器激发Tm^(3+)/Ho^(3+)共掺YAG晶体的上转换发光谱,观察到Tm:~1 D_(2-)~3 H_6、Tm:~1 D_2-~3F_4和Ho:~5S_2-~5I_8的上转换发光跃迁。测量吸收光谱并应用Judd-Ofelt理论计算分析晶体中Ho^(3+)离子的强度参数Ωt(t=2,4,6)、自发辐射跃迁几率A和积分辐射截面。结果显示:Tm^(3+)/Ho^(3+)共掺YAG晶体中Ho^(3+)离子的~5I_7-~5I_8能级跃迁对应2μm辐射,其具有较长的能级寿命及合适的积分辐射截面,适合用于产生2μm激光。

关键词： Ho^3+ Judd-Ofelt理论 2μm激光

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沉淀法合成NiO及NiO-YSZ阳极性能

电源技术 2006年第11期30卷 901-903页

作者：陈孔发吕喆黄喜强艾娜刘艳微王瑞芳苏文辉哈尔滨工业大学物理系凝聚态科学与技术研究中心黑龙江哈尔滨150001

用硝酸盐-氨水沉淀法合成了NiO纳米粉体,X-射线粉末衍射结果表明样品为面心立方结构,颗粒的平均粒径为23nm。以此纳米NiO为原料,制备NiO-YSZ阳极,阳极的高温烧结收缩比YSZ电解质小6%。高温H2还原电阻测量表明该阳极在700℃时10min完成还... 详细信息

用硝酸盐-氨水沉淀法合成了NiO纳米粉体,X-射线粉末衍射结果表明样品为面心立方结构,颗粒的平均粒径为23nm。以此纳米NiO为原料,制备NiO-YSZ阳极,阳极的高温烧结收缩比YSZ电解质小6%。高温H2还原电阻测量表明该阳极在700℃时10min完成还原,电导率为570S/cm。在NiO-YSZ阳极上用离心沉积方法制备了一层厚12μmYSZ薄膜,扫描电子显微镜测试结果表明阳极和电解质薄膜之间的接触良好。采用Sm0.2Ce0.8O1.9浸渍的La0.7Sr0.3MnO3阴极,单电池在750℃时的最大比功率为0.52W/cm2,测试结果还表明该阳极具有合理的孔隙率:说明采用硝酸盐-氨水沉淀法合成的NiO可以应用于制备固体氧化物燃料电池的阳极。

关键词： NiO NiO—YSZ阳极烧结曲线还原 YSZ薄膜