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圆红冬孢酵母自主复制序列分离和利用游离型质粒进行基因敲除

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微生物学报 2024年第3期64卷 882-892页

作者：郭霄史硕博北京化工大学生命科学与技术学院软物质科学与工程高精尖创新中心北京100029

【目的】与整合型表达载体相比,游离型表达载体通常具有更高的拷贝数以实现目标基因的高强度表达,并且对于DNA操作应用更加方便和灵活。然而,目前的研究尚未确定适用于圆红冬孢酵母的游离型质粒,该酵母外源基因的表达或者基于CRISPR/Cas... 详细信息

【目的】与整合型表达载体相比,游离型表达载体通常具有更高的拷贝数以实现目标基因的高强度表达,并且对于DNA操作应用更加方便和灵活。然而,目前的研究尚未确定适用于圆红冬孢酵母的游离型质粒,该酵母外源基因的表达或者基于CRISPR/Cas9的基因组编辑都需要通过整合方式来完成,这也是对其遗传改造进展缓慢的一个重要原因。本研究目的是构建圆红冬孢酵母的游离型质粒,使得其外源基因的表达和基因组编辑更方便省时。【方法】首先对圆红冬孢酵母苯丙氨酸氨裂解酶基因(phenylalanine ammonia-lyase gene,PAL)中可能存在的自主复制序列(autonomously replicating sequences,ARSs)进行挖掘和表征,将该基因及其上下游序列进行分段扩增,构建到带有β-异丙基苹果酸脱氢酶基因(β-isopropyl malate dehydrogenase gene,LEU2)的质粒中,通过电转化的方法导入LEU2基因缺陷的圆红冬孢酵母中,根据转化效率高低鉴定了该酵母的一个ARS。其次,以编码香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)的BTS1基因为敲除靶点,将其gRNA构建到基于ARS的游离型质粒中,通过转化子直观的颜色变化来验证该游离型质粒是否成功应用于圆红冬孢酵母的CRISPR/Cas9体系。【结果】本工作鉴定了圆红冬孢酵母的ARS,构建了基于ARS元件的游离型质粒,并将该质粒应用于圆红冬孢酵母CRISPR/Cas9体系,成功实现了基于游离型质粒的基因敲除。【结论】本研究丰富了圆红冬孢酵母现有的工具库,为圆红冬孢酵母的合成生物学应用提供了良好的研究基础和技术支持。

关键词：圆红冬孢酵母自主复制序列游离型质粒

顶椎位置对退变性脊柱后凸患者矢状面形态及生活质量的影响

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中国脊柱脊髓杂志 2024年第8期34卷 794-800页

作者：梁邦恒李劼徐辉范昌盛蔡银琦朱泽章邱勇刘臻南京鼓楼医院骨科脊柱外科南京医科大学鼓楼临床医学院南京市210008 南京大学医学院附属鼓楼医院骨科脊柱外科南京市210008

目的:分析后凸顶椎(kyphotic apical vertebra,KAV)位置对退变性脊柱后凸(degenerative kyphosis,DK)患者矢状面特征和生活质量的影响。方法:回顾分析2010年2月~2022年12月在南京鼓楼医院骨科住院治疗的68例DK患者的临床及影像学资料。... 详细信息

目的:分析后凸顶椎(kyphotic apical vertebra,KAV)位置对退变性脊柱后凸(degenerative kyphosis,DK)患者矢状面特征和生活质量的影响。方法:回顾分析2010年2月~2022年12月在南京鼓楼医院骨科住院治疗的68例DK患者的临床及影像学资料。男性8例,女性60例,年龄46~76岁(60.6±6.5岁)。根据KAV位置不同将患者分为两组:KAV位于L1及以上的38例患者纳入G1组;KAV位于L1以下的30例患者纳入G2组。在术前站立位全脊柱侧位X线片上测量胸椎后凸角(thoracic kyphosis,TK)、腰椎前凸角(lumbar lordosis,LL)、矢状面垂直轴(sagittal vertical axis,SVA)、骨盆入射角(pelvic incidence,PI)、骨盆倾斜角(pelvic tilt,PT)、骶骨倾斜角(sacral slope,SS)、T1骨盆角(T1-pelvic angle,TPA)、最大后凸Cobb角(global kyphosis,GK),计算PI-LL。采用国际脊柱侧凸研究学会(Scoliosis Research Society,SRS)-22量表、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)量表、疼痛视觉模拟量表(visual analog scale,VAS)评分以及SF-36量表评估患者生活质量。采用独立样本t检验比较两组患者的矢状面参数和生活质量问卷评分的差异,采用Pearson相关性分析研究矢状面参数与生活质量评分的相关性。结果:两组患者的年龄和性别比无显著性差异(P>0.05),具有可比性。G1组GK、LL、TK、SVA、PI、PT、SS、TPA、PI-LL分别为61.3°±20.0°、26.9°±18.9°、32.3°±19.0°、53.5±48.1mm、40.4°±13.4°、24.8°±12.6°、17.0°±11.7°、23.0°±13.5°和21.6°±15.6°,G2组分别为38.8°±16.0°、14.4°±13.7、10.8±9.8°、96.5±67.8mm、44.8°±16.2°、30.1°±10.8°、14.7°±11.5°、32.6°±14.5°和33.8°±18.3°,G1组的GK、LL、TK显著性大于G2组(P<0.05),SVA、TPA、PI-LL显著性小于G2组(P<0.05);G1组VAS评分、ODI、SF-36生理功能总分(physical component score,PCS)、SF-36心理功能总分(mental component score,MCS)和SRS-22评分(功能情况、疼痛、自我形象、心理状况和亚总分)分别为4.2±1.6分、(37.9±15.2)%、45.8±11.3、48.6±12.7、(17.6±4.6、18.6±4.3、17.7±4.5、17.8±4.9、71.7±9.3),G2组分别为5.8±1.7分、(48.6±20.0)%、38.2±12.9、44.2±13.1、(15.6±4.5、16.0±3.6、16.6±4.9、17.1±4.3、65.4±11.1),G1组VAS评分、ODI显著性低于G2组(P<0.05);G1组SRS-22量表亚总分、疼痛评分、SF-36 PCS评分显著性高于G2组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示两组SVA与VAS评分和ODI均正相关(G1组r=0.437,P=0.006和r=0.356,P=0.028,G2组r=0.405,P=0.027和r=0.408,P=0.025),与SF-36 PCS评分均负相关(G1组r=-0.365,P=0.024,G2组r=-0.410,P=0.024);TPA与VAS评分均正相关(G1组r=0.343,P=0.035,G2组r=0.369,P=0.045)。G2组SVA与SRS-22量表亚总分负相关(r=-0.391,P=0.033),PI-LL与VAS评分正相关(r=0.390,P=0.033)。结论:KAV位置会显著影响DK患者的骨盆-脊柱矢状面形态,KAV位于L1以下的患者SVA、TPA、PL-LL明显大于KAV位于L1及以上的患者,且与患者的生活质量下降显著性相关。

关键词：退变性脊柱后凸畸形后凸顶椎生活质量矢状面形态

典型农业流域不同类型池塘水体CO_(2)排放特征

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湖泊科学 2024年第1期36卷 88-98页

作者：陈嘉宁肖启涛刘臻婧肖薇谢晖罗菊花邱银国胡正华段洪涛南京信息工程大学气象灾害预报预警与评估协同创新中心南京210044 中国科学院南京地理与湖泊研究所中国科学院流域地理学重点实验室南京210008 湖南省气候中心长沙410118

内陆水体是大气CO_(2)收支估算的重要组成部分。农业流域分布着大量池塘景观水体,且具备蓄洪抗旱、消纳污染、水产养殖等多种功能。但是,农业流域不同功能的小型池塘CO_(2)排放特征尚不清楚。本研究以极具农业流域代表性的烔炀河流域为... 详细信息

内陆水体是大气CO_(2)收支估算的重要组成部分。农业流域分布着大量池塘景观水体,且具备蓄洪抗旱、消纳污染、水产养殖等多种功能。但是,农业流域不同功能的小型池塘CO_(2)排放特征尚不清楚。本研究以极具农业流域代表性的烔炀河流域为研究对象,选取流域中用于水产养殖(养殖塘)、生活污水承纳(村塘)、农业灌溉(农塘)、蓄水(水塘)的4个功能不同的景观池塘,基于为期1年的野外实地观测,以明确农业流域小型池塘CO_(2)排放特征。结果表明,不同功能池塘水体CO_(2)排放差异显著,受养殖活动、生活污水输入和农田灌溉等人类活动影响,养殖塘((80.37±100.39)mmol/(m^(2)·d))、村塘((48.69±65.89)mmol/(m^(2)·d))和农塘((13.50±15.81)mmol/(m^(2)·d))是大气CO_(2)的热点排放源,其CO_(2)排放通量分别是自然蓄水塘((4.52±23.26)mmol/(m^(2)·d))的18、11和3倍。统计分析也表明,该流域池塘CO_(2)排放变化总体上受溶解氧、营养盐等因素驱动。4个不同景观池塘CO_(2)排放通量全年均值为(37.31±67.47)mmol/(m^(2)·d),是不容忽视的CO_(2)排放源,其中养殖塘和村塘具有较高的CO_(2)排放潜力,在未来研究中需要重点关注。

关键词：农业流域池塘 CO_(2)通量影响因子

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我市打造19个高标准“司机之家”

我市打造19个高标准“司机之家”

德州日报

作者：刘臻英波

本报讯（记者刘臻通讯员英波）“以前累了困了只能在车上凑合一晚，现在我可以来‘司机之家’休息，看电影、打台球，还能免费住宿。”10月10日，在位于庆云县中庆国际智慧物流园内的“司机之家”，从天津来到德州送货的长途货运司... 详细信息

本报讯（记者刘臻通讯员英波）“以前累了困了只能在车上凑合一晚，现在我可以来‘司机之家’休息，看电影、打台球，还能免费住宿。”10月10日，在位于庆云县中庆国际智慧物流园内的“司机之家”，从天津来到德州送货的长途货运司机姜平武对记者说。德州地处南北交通要道......

关键词：高标准

来源： cnki报纸评论

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基础激励下磁悬浮转子振动响应研究

振动工程学报 2024年第8期37卷 1281-1289页

作者：张越周瑾沈权张一博南京航空航天大学机电学院

应用于移动载体上的磁悬浮转子会受到基础运动的激励作用产生振动，甚至会造成转、定子碰摩与系统失稳。为了探究基础激励下磁悬浮转子的振动响应，进行了数值仿真和试验验证。考虑磁悬浮轴承的闭环控制，建立了基础激励下的磁悬浮转子... 详细信息

应用于移动载体上的磁悬浮转子会受到基础运动的激励作用产生振动，甚至会造成转、定子碰摩与系统失稳。为了探究基础激励下磁悬浮转子的振动响应，进行了数值仿真和试验验证。考虑磁悬浮轴承的闭环控制，建立了基础激励下的磁悬浮转子动力学模型，基础激励对转子的作用以附加广义力形式引入转子运动微分方程。通过数值仿真分析了基础简谐激励幅值和频率、基础冲击激励加速度与脉宽、磁悬浮轴承控制参数对转子振动响应的影响。进行了基础激励试验，试验结果与仿真结果吻合，验证了基础激励下磁悬浮转子模型的准确性。结果表明，转子简谐响应幅值与基础简谐激励频率的平方和激励幅值成正比，转子冲击响应峰值与基础冲击激励的加速度成正比，适当增大磁悬浮轴承控制器的比例系数和微分系数可以抑制基础激励引起的转子振动。

关键词：磁悬浮转子基础激励振动响应试验研究

直播间虚拟礼物的流动:关系、权力与资本的再生产

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现代传播（中国传媒大学学报） 2024年第3期46卷 161-168页

作者：苏凡博广州大学新闻与传播学院国际传播安全治理研究中心

人类学视野中,礼物流转基础上的总体呈献体系是古代社会文化的基石。在互联网场域下,实体礼物的流动演变为线上虚拟礼物的流动,建构了网络平台中人与人、人与物、人与技术、人与社会结构的关系。在秀场直播平台中,用户通过购买虚拟礼物... 详细信息

人类学视野中,礼物流转基础上的总体呈献体系是古代社会文化的基石。在互联网场域下,实体礼物的流动演变为线上虚拟礼物的流动,建构了网络平台中人与人、人与物、人与技术、人与社会结构的关系。在秀场直播平台中,用户通过购买虚拟礼物的方式进行打赏,从“打赏”到“刷礼物”的转换唤醒了用户的礼物文化传统,构成了在秀播平台上人与人相遇时的交往法则。虚拟礼物的流动遵循着互惠逻辑、竞技逻辑和诱导逻辑,从本质上分别对应着关系的再生产、权力的再生产和资本的再生产。秀播平台从展演平台转变为以礼物流动为核心的线上社会关系网络,上演着一场场由礼物交往形成的关系再生产为前提、礼物竞技构建的权力再生产为基础、礼物诱导实现的资本再生产为目的的永无止境的当代版“夸富宴”

关键词：秀场直播虚拟礼物再生产扎根理论

从达标到排名：绩效考核模式转变何以扭转组织绩效？——基于行政数据归集工作的案例研究

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公共管理学报 2024年第4期 52-64+169页

作者：陈启博清华大学公共管理学院

达标考核和排名考核是政府治理实践中常用的两种绩效考核模式。本文基于行政数据归集案例发现：中央的绩效考核模式从达标考核转换为排名考核后，地方政府行政数据归集工作绩效出现了显著改善。进一步基于委托方-管理方-执行方的三级科... 详细信息

达标考核和排名考核是政府治理实践中常用的两种绩效考核模式。本文基于行政数据归集案例发现：中央的绩效考核模式从达标考核转换为排名考核后，地方政府行政数据归集工作绩效出现了显著改善。进一步基于委托方-管理方-执行方的三级科层组织模型构建分析框架，对A省数据归集工作进行过程追踪和深描，揭示了纵向政府间绩效考核模式转变扭转组织绩效的机制：在达标考核中，管理方与执行方间的信息不对称使得管理方无法确定共同不确定因素是否影响了执行方的达标结果，导致达标考核的激励机制失效。而排名考核通过相对排名消除了共同不确定因素对排名结果的影响，使得执行方难以卸责。本质上，排名考核通过提供多个排名者的绩效信息减少了管理方与执行方间的信息不对称，使得考核结果更能反映执行方的个体努力水平。该结论有益于我们进一步理解政府组织中不同绩效考核模式的激励机制差异以及适用场景。

关键词：政府绩效考核排名考核达标考核信息不对称共同不确定因素

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数据要素化对共同富裕程度的影响研究

软科学 2024年

作者：张辽胡忠博杭州电子科技大学经济学院

从实现全体人民共同富裕的目标出发，构建了包含“共享”与“富裕”两个维度的共同富裕程度评价指标体系，采用熵权TOPSIS法测度了我国省际层面的共同富裕程度，理论分析并实证检验了数据要素化对共同富裕产生的直接影响及间接作用机制... 详细信息

从实现全体人民共同富裕的目标出发，构建了包含“共享”与“富裕”两个维度的共同富裕程度评价指标体系，采用熵权TOPSIS法测度了我国省际层面的共同富裕程度，理论分析并实证检验了数据要素化对共同富裕产生的直接影响及间接作用机制。研究发现，数据要素化能显著推动共同富裕目标的实现，并且这一结果在使用工具变量缓解内生性后依然稳健。机制分析结果表明，数据要素化能通过做大社会财富“蛋糕”与分好社会财富“蛋糕”这两种途径来促进共同富裕的实现。进一步分析发现，数字经济发展水平的差异导致数据要素化对共同富裕的影响有所不同，表现为数据要素在数字经济发展水平较高环境中赋能共同富裕目标实现更加明显。

关键词：共同富裕数据要素化熵权TOPSIS法数字经济

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耦合等离激元体系的复频率分析（特邀）

光学学报 2024年第10期 309-314页

作者：曾可博张霜香港大学物理系新基石科学实验室

耦合等离激元体系在光场调控、光学传感、光学成像及光电器件等领域中有着广泛应用。目前，阻碍耦合等离激元进一步实用化发展的关键问题是金属材料具有较大的损耗。结合数值仿真方法，从理论上研究了耦合等离激元的损耗机理，并进一步... 详细信息

耦合等离激元体系在光场调控、光学传感、光学成像及光电器件等领域中有着广泛应用。目前，阻碍耦合等离激元进一步实用化发展的关键问题是金属材料具有较大的损耗。结合数值仿真方法，从理论上研究了耦合等离激元的损耗机理，并进一步分析复频率光源激励对耦合等离激元体系的作用，提出了通过合成复频率波的方法来补偿损耗，从而恢复被削弱的耦合共振信号。所提优化手段具有泛用性高且无需额外成本的优势，研究结果对耦合等离激元体系在各个领域中的研究发展具有借鉴意义，有利于挖掘该体系的潜在应用价值。

关键词：物理光学纳米光学等离激元复频率波光学传感