检索结果-南通市图书馆

mFⅦ/Fc融合基因慢病毒载体的构建及转染hMSCs的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

mFⅦ/Fc融合基因慢病毒载体的构建及转染hMSCs的实验研究

作者：刘胜来南昌大学

学位级别：硕士

研究背景：组织因子（tissue factor,TF）是生理性凝血级联反应的始动者之一。不仅广泛分布于血液循环系统,近年来发现还存在于肿瘤细胞及肿瘤新生血管内皮细胞系统中,在前列腺癌等实体肿瘤中更为明显。且TF的表达与活化和多种恶性... 详细信息

研究背景：组织因子（tissue factor,TF）是生理性凝血级联反应的始动者之一。不仅广泛分布于血液循环系统,近年来发现还存在于肿瘤细胞及肿瘤新生血管内皮细胞系统中,在前列腺癌等实体肿瘤中更为明显。且TF的表达与活化和多种恶性肿瘤的生长、侵袭转移及血管新生密切相关。凝血因子Ⅶ（FⅦ）是TF最常见的配体,具有与TF较强的亲和力及识别特性,我们可利用这些特性将目的片段通过FⅦ携带到高表达TF的肿瘤局部而产生高效的生物效应。目的：扩增人FⅦ基因片段及IgG1Fc基因片段,并构建融合基因的pGC-FU线性载体;将包含融合基因mFⅦ/Fc线性载体包装为慢病毒载体;包装的慢病毒载体（Lenti-mFⅦ/Fc）:转染人骨髓间充质干细胞（hMSCs）,获取融合基因稳定表达载体,为前列腺癌的基因治疗奠定基础。方法：体外克隆人凝血因子Ⅶ（FⅦ）,点突变技术在基因水平将341部位Lys突变为Ala后,与免疫球蛋白IgG1Fc片段的基因融合,构建融合基因mFⅦ/Fc线性pGC-FU质粒载体。经鉴定阳性克隆后,送公司进行序列测定。将成功构建的pGC-FU载体转染293T细胞包装为Lenti-mFⅦ/Fc,通过观察GFP荧光蛋白表达情况并进行Western bolt检测,确定包装成功。采用实时定量PCR（Real-time quantitative PCR, RTq-PCR）检测慢病毒的滴度。分别以不同的感染复数（Multiplicity of infection, MOI值）将Lenti-mFⅦ/Fc及空载GFP的慢病毒（Lenti-GFP）转染第三代hMSCs,荧光共聚焦显微镜下观察其表达情况,并确定最佳MOI值。以最佳MOI值将Lenti-mFW/Fc转入hMSCs,分别在转染后的24h、48h、72h、96h、120h收集上清液行酶联免疫吸附剂测定（Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）,并在转染效率较高时收集细胞行RT-PCR检测,分别从蛋白水平及mRNA水平检测mFⅦ/Fc融合基因的表达情况。结果： 1、全骨髓法分离培养的hMSCs,生长态势良好,48小时后贴壁生长,细胞呈团簇集落生长,随着不断传代,细胞纯度升高;取第三代细胞进行流式细胞术检测,显示CD29+（98.08%）、CD44+（97.63%）、CD34+（0.31%）、CD45+（0.58%）,符合MSCs特征。 2、所构建融合基因经基因测序及PCR检测与GenBank ID:AF272774对比,（除同义变异）完全相符;包装后的重组慢病毒载体经RTq-PCR检测滴度为2×108TU/ml;转染第三代hMSCs后,得出MOI=50为最佳值。 3、慢病毒转染后共聚焦荧光显微镜观察,转染24小时后未见明显荧光表达,随着时间变化,荧光表达逐渐增强;转染72小时后荧光表达最强,经ELISA及RT-PCR证实转染mFⅦ/Fc基因的hMSCs有蛋白水平的表达和mRNA的转录。结论：通过定点突变技术与基因融合技术可成功构建碱基对为2000左右的mFⅦ/Fc线性pGC-FU融合基因载体;线性pGC-FU融合基因载体转染293T细胞,经鉴定可成功包装为慢病毒表达载体;使用慢病毒载体将融合基因转入hMSCs不仅具有较高的转染效率,还可获得稳定表达的真核细胞表达载体。

关键词： mFⅦ/Fc 组织因子骨髓间充质干细胞融合基因

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

变刚度梁挠度曲线的Green函数法求解

力学与实践 2017年第5期39卷 445-448,444页

作者：刘胜来清华大学土木工程系北京100084

在变刚度梁的线弹性问题中,求解梁受静力荷载的挠度曲线常用解法有积分法与单位荷载法.本文从变刚度梁挠度曲线的微分方程出发,给出了变刚度梁挠度曲线的Green函数法解答,并分析了该解法的优点.从推导结果可以看到,本文提出的公式具有... 详细信息

在变刚度梁的线弹性问题中,求解梁受静力荷载的挠度曲线常用解法有积分法与单位荷载法.本文从变刚度梁挠度曲线的微分方程出发,给出了变刚度梁挠度曲线的Green函数法解答,并分析了该解法的优点.从推导结果可以看到,本文提出的公式具有统一、精确、简洁、适合电算的特点,在编制杆系结构计算软件中将具有重要应用价值.

关键词：变刚度梁挠度曲线 Green函数法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

从数学推导过程讨论能量法的适用条件

力学与实践 2014年第4期36卷 497-499页

作者：刘胜来李全旺清华大学土木工程系北京100084

在结构力学的计算中,通常的方法有能量法、解析法等.能量法在结构计算中有广泛的应用,它适用于线弹性或非线性条件.该文从数学的角度讨论能量法结构计算的原理,通过对虚功原理、卡氏第二定理、极小势能原理的证明推导,明确了虚功原理是... 详细信息

在结构力学的计算中,通常的方法有能量法、解析法等.能量法在结构计算中有广泛的应用,它适用于线弹性或非线性条件.该文从数学的角度讨论能量法结构计算的原理,通过对虚功原理、卡氏第二定理、极小势能原理的证明推导,明确了虚功原理是平衡微分方程和变形协调方程的结合体,与材料应力应变关系无关,适用于线性和非线性问题;卡氏第二定理只在线弹性条件下成立;极小势能原理应用的前提条件之一是材料应力应变关系是严格增函数,可以是线弹性也可以是非线性.

关键词：能量法虚功原理卡氏第二定理极小势能原理数学推导

医用纳米银涂层输尿管支架体内及体外抗菌效果

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2010年第12期27卷 1953-1954页

作者：罗保华陈捷王共先刘胜来余刚薛金雄深圳市龙岗区人民医院泌尿外科 518172 南昌大学第一附属医院泌尿外科

近年来，我国尿石症的发病率有增加的趋势，泌尿系结石是一种全球性的疾病，其人群患病率为1％～5％，严重威胁着人们健康。尿路内支架管（如输尿管支架、导尿管）在泌尿系结石治疗中的临床应用越来越多，但其在体内留置短时间内表面便... 详细信息

近年来，我国尿石症的发病率有增加的趋势，泌尿系结石是一种全球性的疾病，其人群患病率为1％～5％，严重威胁着人们健康。尿路内支架管（如输尿管支架、导尿管）在泌尿系结石治疗中的临床应用越来越多，但其在体内留置短时间内表面便可形成细菌生物膜，发生尿路感染的风险按每天3％～7％的速率增加，

关键词：输尿管支架抗菌效果体内纳米银泌尿系结石体外涂层医用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中药制药工程中现代工艺与技术的应用

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第9期 159-162页

作者：刘胜来华润三九医药股份有限公司广东深圳518110

中药是我国独特的药物体系,在疾病治疗中发挥着重要作用。传统的中药制药工艺与技术已无法满足现代化中药制药工程的需求,为此需要灵活应用现代工艺与技术,提高中药制药效率与质量。本文利用调查法、文献资料法等方法对中药制药工程中... 详细信息

中药是我国独特的药物体系,在疾病治疗中发挥着重要作用。传统的中药制药工艺与技术已无法满足现代化中药制药工程的需求,为此需要灵活应用现代工艺与技术,提高中药制药效率与质量。本文利用调查法、文献资料法等方法对中药制药工程中现代工艺与技术的应用进行了研究与探讨,在探究过程中发现我国出现了一些新的中药剂型,对制药工艺与技术提出了更高的要求。因此,需要灵活应用现代提取、分离、浓缩与干燥工艺技术,从而满足中药制药需求。

关键词：中药制药工艺制药技术

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

制药分离技术分析

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第10期 148-151页

作者：刘胜来华润三九医药股份有限公司广东深圳518110

研究制药分离技术分析。不同药品能够有效治疗多种疾病,药品的生产质量与人们的健康息息相关。在生产药物时所采用的制药分离技术是否恰当,直接决定药品质量。制药分离技术能够把原料药中的杂质去除,提升药物性能,因此在制药时若想保证... 详细信息

研究制药分离技术分析。不同药品能够有效治疗多种疾病,药品的生产质量与人们的健康息息相关。在生产药物时所采用的制药分离技术是否恰当,直接决定药品质量。制药分离技术能够把原料药中的杂质去除,提升药物性能,因此在制药时若想保证药物具有极高的质量,需要掌握较多制药分离技术,并做到灵活应用。本文将对制药分离技术进行分析。

关键词：制药分离技术操作流程药物质量

Foley导尿管球囊加压止血用于mPCNL术后迟发性肾出血效果观察

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

山东医药 2014年第10期54卷 61-63页

作者：刘胜来陈捷海洋石油总医院天津300452 南昌大学第一附属医院

目的：探讨Foley导尿管球囊加压对微创经皮肾输尿管镜取石术（ mPCNL）后迟发性肾出血的防治效果。方法对463例患者行mPCNL，术后行Foley导尿管球囊加压止血：以16号Foley导尿管修剪后做肾造瘘管，常规注水3 mL将球囊扩张固定。对术后... 详细信息

目的：探讨Foley导尿管球囊加压对微创经皮肾输尿管镜取石术（ mPCNL）后迟发性肾出血的防治效果。方法对463例患者行mPCNL，术后行Foley导尿管球囊加压止血：以16号Foley导尿管修剪后做肾造瘘管，常规注水3 mL将球囊扩张固定。对术后出现迟发性出血（术后12～360 h）者间断向球囊内注水加压止血。结果35例出血成功控制，加压注水量为（3．20±1．93）mL，其中27例予球囊加压后出血明显减少，在3 h内尿液颜色明显转清，8例出血量减少但尿液未转清，继续加压后在11 h内尿液转清；2例因出血迅速行高选择肾动脉栓塞术。无转行开放肾切除手术者。随访6～24个月患肾功能良好。结论 Foley导尿管球囊加压止血可使mPCNL术后迟发出血早期得到控制，且较为安全。

关键词：微创经皮肾镜取石术迟发性肾出血 Foley导尿管加压止血

PAK6、ZNF217、G蛋白偶联受体48基因在膀胱癌演进过程中的表达变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

广东医学 2021年第12期42卷 1494-1498页

作者：蒋利明田大伟刘胜来张羽天津医科大学中新生态城医院外科天津300467 天津医科大学第二医院泌尿外科天津300211

目的探究P21活化激酶6(PAK6)、锌指蛋白217(ZNF217)、G蛋白偶联受体48(GPR48)基因在膀胱癌演进过程中的表达变化。方法选取收治的行手术治疗的膀胱癌患者138例,取癌组织、癌旁组织,检测组织中PAK6、ZNF217、GPR48表达情况,分析PAK6、ZNF... 详细信息

目的探究P21活化激酶6(PAK6)、锌指蛋白217(ZNF217)、G蛋白偶联受体48(GPR48)基因在膀胱癌演进过程中的表达变化。方法选取收治的行手术治疗的膀胱癌患者138例,取癌组织、癌旁组织,检测组织中PAK6、ZNF217、GPR48表达情况,分析PAK6、ZNF217、GPR48在癌组织、癌旁组织中的表达及在膀胱癌演进过程中的表达变化,三者相关性采用Pearson相关分析。结果与癌旁组织相比,癌组织中PAK6表达量显著降低,ZNF217、GPR48表达量显著升高,差异有统计学意义(P0.05);PAK6、ZNF217、GPR48表达与膀胱癌患者的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移、浸润深度、复发情况有关,与中高分化、T_(a)~T_(1)期、无淋巴结转移、非肌层浸润、未复发患者相比,低分化、T_(2)~T_(4)期、有淋巴结转移、肌层浸润、复发患者的PAK6表达量降低,ZNF217、GPR48表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,PAK6与ZNF217、GPR48均呈负相关,ZNF217、GPR48之间呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PAK6在膀胱癌组织中低表达,ZNF217、GPR48在膀胱癌组织中高表达,与患者的分化程度、临床分期、淋巴结转移、浸润深度、复发有关,参与膀胱癌的演进。

关键词： P21活化激酶6 锌指蛋白217 G蛋白偶联受体48基因膀胱癌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大银鱼的移植、增殖及人工繁殖技术

黑龙江水产 1997年第4期16卷 12-14页

作者：张洪贵刘胜来董笑野天津市塘沽区淡水开发养殖公司

银鱼是一种名贵的经济鱼类,它具有适应性广、食物链短、生长快,繁殖力强等特点,在七十年代,天津地区的北塘河口及海河曾盛产银鱼,后因环境污染及其它因素的影响,天津大银鱼濒临绝迹仅在沿海附近一些水库有零星分布,后经科技人员的努力,1... 详细信息

银鱼是一种名贵的经济鱼类,它具有适应性广、食物链短、生长快,繁殖力强等特点,在七十年代,天津地区的北塘河口及海河曾盛产银鱼,后因环境污染及其它因素的影响,天津大银鱼濒临绝迹仅在沿海附近一些水库有零星分布,后经科技人员的努力,1993年首先在北塘水库增殖成功。经过移植现大银鱼已在我市塘沽、汉沽、东丽、西青、武清等区县9座水库形成捕捞产量。尤其塘沽区三座中型水库效果最好,1993～1997年捕捞大银鱼286吨,创产值2500万元,年加工大银鱼受精卵2.0亿粒以上,是天津市和水利部确定的大银鱼移植推广定点基地。

关键词：大银鱼人工繁殖技术浮游动物大银鱼受精卵天津大银鱼水库增殖太湖新银鱼生物学效凶猛鱼类饵料生物