检索结果-南通市图书馆

科技和产业 2002年第7期2卷 45-59页

作者：童光志仇华吉王柳王云峰刘胜旺蔡雪辉周艳君韩凌霞薛强袁秀芳中国科协学会学术部

童光志博士领导的研究小组近十年来一直坚持不懈地从分子生物学水平对动物病毒病进行广泛而深入的研究,取得了丰硕的成果。他本人曾两次赴美留学都如期而归,扎根于我国畜牧兽医科研领域,其精神难能可贵。在学术方面。

关键词：创新研究群体研究方向动物病毒分子生物学预防兽医学

传染性支气管炎病毒诱导Vero细胞发生自噬促进病毒的复制

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中国兽医科学 2024年

作者：杨雪晴孙军峰李慧昕韩宗玺刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽呼吸道传染病创新团队黑龙江八一农垦大学动物科技学院

为探究禽传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus，IBV）能否诱导细胞自噬及其对病毒复制的影响，本研究利用IBV细胞适应株CEA接种DF-1和Vero细胞，通过Western-blot、透射电镜和激光共聚焦显微镜检测自噬通路关键蛋白LC3和P6... 详细信息

为探究禽传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus，IBV）能否诱导细胞自噬及其对病毒复制的影响，本研究利用IBV细胞适应株CEA接种DF-1和Vero细胞，通过Western-blot、透射电镜和激光共聚焦显微镜检测自噬通路关键蛋白LC3和P62的表达和分布以及自噬小体的形成情况，并通过自噬抑制剂和诱导剂处理评估了自噬对IBV复制的影响。结果显示，IBV不能在DF-1细胞中诱导LC3的转化，但能够诱导Vero细胞中LC3-II和P62的水平升高，并能在Vero细胞中诱导形成自噬小体以及LC3-II向自噬体中的聚集，表明IBV能够诱导Vero细胞发生完整自噬。用自噬抑制剂渥曼青霉素和氯喹处理细胞能够抑制IBV诱导的自噬以及病毒的复制，而用自噬激活剂雷帕霉素处理则能够促进病毒的复制。综上所述，IBV能够在Vero细胞中诱导自噬的发生，从而促进病毒的复制。

关键词：禽传染性支气管炎病毒自噬病毒复制

Rho GTP酶和肌动蛋白细胞骨架对新城疫病毒在细胞间传播的影响

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中国兽医科学 2024年

作者：张智颖孙军峰师乾凯赵冉王芳芳李慧昕韩宗玺刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽呼吸道传染病创新团队

为探究Rho GTP酶及肌动蛋白细胞骨架对新城疫病毒（NDV）诱导的细胞间膜融合以及病毒复制和扩散的影响，本研究利用特异性针对Rho GTP酶和肌动蛋白细胞骨架的抑制剂处理细胞，评估其对NDV复制以及细胞间膜融合的影响，结果显示，抑制剂... 详细信息

为探究Rho GTP酶及肌动蛋白细胞骨架对新城疫病毒（NDV）诱导的细胞间膜融合以及病毒复制和扩散的影响，本研究利用特异性针对Rho GTP酶和肌动蛋白细胞骨架的抑制剂处理细胞，评估其对NDV复制以及细胞间膜融合的影响，结果显示，抑制剂处理能够显著抑制NDV在细胞中的复制滴度以及病毒引起的细胞间膜融合。激光共聚焦观察结果显示，NDV的融合蛋白（F）与细胞的肌动蛋白存在共定位分布。通过反向遗传技术构建了表达绿色荧光蛋白的重组NDV，并通过共感染培养试验证实了Rho GTP酶和肌动蛋白细胞骨架参与了NDV在细胞间的扩散和传播。本研究结果为深入探索Rho GTP酶和肌动蛋白细胞骨架在NDV感染生活周期中的作用奠定了基础。

关键词：新城疫病毒 Rho GTP酶肌动蛋白细胞骨架细胞间传播

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中国传染性支气管炎病毒的流行和疫苗

中国科学：生命科学 2023年第12期53卷 1733-1744页

作者：李慧昕韩宗玺刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室哈尔滨150069

鸡传染性支气管炎病毒在中国流行了近半个世纪,引起的传染性支气管炎是危害养禽业的重要疫病之一,造成了严重的经济损失.本文简单介绍了传染性支气管炎病毒的历史、特点和危害,着重对传染性支气管炎病毒在中国的流行现状、病毒基因型及... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒在中国流行了近半个世纪,引起的传染性支气管炎是危害养禽业的重要疫病之一,造成了严重的经济损失.本文简单介绍了传染性支气管炎病毒的历史、特点和危害,着重对传染性支气管炎病毒在中国的流行现状、病毒基因型及其特点以及中国传染性支气管炎疫苗进行了回顾和总结,为更好地防控鸡传染性支气管炎提供参考.

关键词：鸡传染性支气管炎传染性支气管炎病毒流行特点基因型防控

鸡腺病毒血清8a型毒株的分离鉴定及致病特点

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中国农业科学 2023年第16期56卷 3226-3240页

作者：李慧昕宋文平韩宗玺刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室

【目的】鸡腺病毒（fowl adenovirus, FAdV）在鸡群中流行广泛且血清型众多，不同血清型毒株对鸡的致病能力尚不完全清楚。通过对FAdV-8a型分离株的致病特点进行研究，为了解血清8a型毒株的致病能力、进而对鸡群中不同血清型FAdV的防控... 详细信息

【目的】鸡腺病毒（fowl adenovirus, FAdV）在鸡群中流行广泛且血清型众多，不同血清型毒株对鸡的致病能力尚不完全清楚。通过对FAdV-8a型分离株的致病特点进行研究，为了解血清8a型毒株的致病能力、进而对鸡群中不同血清型FAdV的防控提供科学依据。【方法】2017年，从发病鸡群采集肝脏组织，组织匀浆后无菌处理，接种鸡胚分离病毒，经PCR鉴定，初步确定分离毒株为鸡腺病毒。为确定分离株的分类情况，对病毒的全基因组进行测序及序列分析，经基因组序列比对及hexon基因遗传演化分析，从分子水平确定病毒的种/血清型。为了解分离株的致病特点和致病能力，30只10日龄SPF鸡随机分成2组，经滴鼻和点眼途径人工感染。从临床发病（发病率和死亡率）、病毒血症、排毒、循环抗体消长规律及其与中和抗体相关性、感染后5 d鸡剖检症状及病理组织学检测、病毒的组织分布及组织嗜性等方面评价分离株JL/170408对10日龄SPF鸡的致病性。【结果】对分离株的全基因组序列进行测定和分析，表明基因组序列与FAdV-8a型参考毒株TR59株同源性最高，基因组结构和编码基因特点与该毒株高度一致。基于全基因组序列进行遗传演化分析，分离株处于FAdV-E种的进化分支内，与TR59株亲缘关系较近。同时对分型基因hexon基因进行遗传演化分析，分离株划分为8a血清型。综合分离株基因组特征及遗传演化分析，确定分离株JL/170408为FAdV-E种、血清8a型毒株。分离株感染10日龄SPF鸡，感染后3—13 d是临床发病高峰期，但不引起鸡只死亡。感染后3 d开始出现病毒血症并经呼吸道和消化道排毒，病毒血症持续时间长达51 d之久，此时感染鸡的抗体未全部转为阳性且循环抗体滴度较低（平均S/P2），有效清除感染鸡体内病毒，表现为病毒血症消失和排毒明显下降。对感染后5 d的鸡剖检和病理组织学检测，未见明显病理组织学变化，但是荧光定量PCR可检测到15个组织中有不同程度的病毒载量，病毒的组织嗜性广泛且对肌胃有一定的偏嗜性。对循环抗体监测发现，感染鸡抗体阳转出现的较晚，感染后15 d部分鸡只抗体阳性，感染后24—51 d，循环抗体处于相对平稳状态，但此时感染鸡抗体未全部阳性。感染后54d出现了循环抗体滴度的高峰，提示鸡只可能发生再次感染，到感染后63 d，循环抗体滴度开始下降，有2只鸡的抗体转为阴性。对感染后63 d的血清进行中和抗体测定，并与循环抗体相比较，两者之间无明显相关性。【结论】FAdV-8a型分离株JL/170408可单独致10日龄SPF鸡发病，但不引起死亡，为低致病力毒株。JL/170408的组织嗜性广泛，对肌胃具有偏嗜性，感染后鸡只排毒时间长，排毒具有反复性。

关键词：鸡腺病毒血清8a型基因组特征致病性

药理激活p38/MAPK体外抗传染性喉气管炎病毒效应的检测

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中国预防兽医学报 2023年

作者：崔露刘柘一张宇韩宗玺刘胜旺李海中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽呼吸道传染病创新团队

鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)是一种严重危害我国和世界养禽业的重要病原。本研究以ILTV-LJS09株感染鸡LMH细胞系作为研究模型，开展了全基因组转录谱分析，发现MAPK通路是ILTV感染后最显著激活的通... 详细信息

鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)是一种严重危害我国和世界养禽业的重要病原。本研究以ILTV-LJS09株感染鸡LMH细胞系作为研究模型，开展了全基因组转录谱分析，发现MAPK通路是ILTV感染后最显著激活的通路。进一步应用Western blot鉴定，结果显示ILTV感染可以显著激活宿主细胞p38/MAPK。本研究同时采用脱氢紫堇碱(Dehydrocorydaline,DHC)和佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)作为p38/MAPK激活剂，采用病毒特异性定量PCR检测病毒基因组拷贝数，通过测定病毒的组织半数感染量检测病毒滴度，应用实时荧光定量PCR检测代谢相关基因的表达水平，使用高内涵成像技术结合Annexin V-FITC/碘化丙啶双染检测细胞凋亡，从而探究药理激活p38/MAPK对ILTV感染的影响。病毒特异性定量PCR检测结果显示，DHC和PMA均显著降低ILTV基因组的复制(P<0.05)。组织半数感染量检测结果显示，DHC和PMA还显著抑制了ILTV感染性病毒粒子的增殖(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示，无论DHC还是PMA对感染细胞代谢基因的总体表达均没有明显影响。高内涵检测结果显示，DHC和PMA显著加剧ILTV感染细胞的凋亡(P<0.05)。综上所述，本研究结果显示DHC和PMA均能够在不影响感染细胞代谢基因表达的情况下，通过加剧ILTV感染细胞的凋亡有效抑制ILTV感染。本研究在ILTV体外感染模型中证明药理激活p38/MAPK具有高效的抗病毒作用，为治疗ILTV感染提供了新的思路，对其它疱疹病毒的防治研究也具有借鉴意义。

关键词：传染性喉气管炎病毒 p38丝裂原活化蛋白激酶转录谱凋亡

鸡传染性喉气管炎病毒gG蛋白间接竞争ELISA方法的建立及初步应用

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中国预防兽医学报 2023年第7期45卷 704-709,728页

作者：郭鹏宇赵妍刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽呼吸道传染病创新团队黑龙江哈尔滨150069

鸡传染性喉气管炎是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起鸡的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。为建立检测该病毒g G蛋白的间接竞争ELISA方法,本研究以原核系统表达ILTV g G蛋白,并采用切胶纯化该重组g G蛋白(rg G)后经western blot检... 详细信息

鸡传染性喉气管炎是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起鸡的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。为建立检测该病毒g G蛋白的间接竞争ELISA方法,本研究以原核系统表达ILTV g G蛋白,并采用切胶纯化该重组g G蛋白(rg G)后经western blot检测纯化的rg G (P-rg G)与本研究室制备的g G蛋白单克隆抗体(MAb) 3C8的反应原性。将MAb 3C8采用Protein G亲和层析柱纯化后与HRP偶联(HRP-3C8),利用间接ELISA法测定纯化HRP-3C8的效价。结果显示,P-rg G与MAb 3C8发生了特异性反应,在30 ku处出现特异性条带。纯化的HRP-3C8效价达1∶51 200。以P-rg G作为包被抗原,以纯化的HRP-3C8作为检测抗体,通过对各反应条件优化后初步建立了ILTV g G蛋白间接竞争ELISA (ic-ELISA)检测方法。条件优化结果显示,P-rg G包被量为12.5 ng/孔,HRP-3C8抗体稀释度为1∶10 000,将待检样品与HRP-3C8抗体在37℃孵育40 min后加入ELISA板再反应20 min,TMB底物反应10 min。将待检样品的抑制率(PI)≥31.08%判为阳性;采用该方法分别检测ILTV、新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡痘病毒(FPV),通过计算PI,评估该方法的特异性;按照Reed-Muench法测定ILTV K317株的鸡胚半数感染量(EID_(50)),再将该病毒2倍倍比稀释(1∶10~1∶2 560)后,以该ic-ELISA方法检测,评估该方法的敏感性;利用同批次和不同批次P-rg G分别包被ELISA板,采用该ic-ELISA方法检测ILTV阳性及阴性样品,评估该方法的重复性。结果显示,该方法除了能检测ILTV外,其余相关病毒均为阴性结果;将ILTV稀释至1∶320时检测结果仍为阳性,相当于75 EID_(50)/0.1 m L;批内、批间重复性试验的变异系数均小于10%。利用该方法及荧光定量PCR (q PCR)分别检测50份临床ILTV、IBV和FPV感染鸡的口咽拭子和喉头组织、10份ILTV活疫苗,该方法检测结果显示,阳性检测率为73.3%(44/60),阴性率为26.7%(16/60)。q PCR的检测结果显示,阳性检测率为81.7%(49/60),阴性率为18.3%(11/60),二者的阴、阳性符合率分别为90.9%和87.8%,总符合率为88.3%。本研究建立的ILTV g G蛋白ic-ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于检测实验室和临床ILTV感染的不同样品,为ILTV及其疫苗的检测提供了新的技术手段。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒 gG蛋白单克隆抗体间接竞争ELISA

IGH EtherCAT主站分布式时钟机制的应用与研究

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机械设计与制造 2022年第1期371卷 262-265,270页

作者：马平刘胜旺苏攀杰蒋峰广东工业大学机电工程学院广东广州510006

针对实时以太网通信协议EtherCAT的分布式时钟机制,提出将其通信机制使用到工业机器人的伺服驱动器的解决方法,用来提高工业机器人的同步能力。论文最初重点研讨EtherCAT分布式时钟的系统时间和从站时钟的同步机制,并完成此过程的分布... 详细信息

针对实时以太网通信协议EtherCAT的分布式时钟机制,提出将其通信机制使用到工业机器人的伺服驱动器的解决方法,用来提高工业机器人的同步能力。论文最初重点研讨EtherCAT分布式时钟的系统时间和从站时钟的同步机制,并完成此过程的分布时钟同步的补偿算法。具体分析了DC机制的流程实现;论文末尾阐述开源IGH EtherCAT主站环境和分布时钟同步性能测试平台的搭建,且得出的测试结果表明系统的从时钟和参考时钟的同步均达到了纳秒级,满足了工业需求。

关键词： EtherCAT 分布时钟机制工业机器人

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石油多种经营与选择性开发

天然气工业 1997年第3期17卷 77-78页

作者：刘胜旺江汉油田八达集团预制厂

石油多种经营与选择性开发刘胜旺（江汉油田八达集团预制厂）石油多种经营在其快速发展的过程中，由于不重视选择性开发而盲目上项目、铺摊子，出现了低档次产品多、市场竞争力差、企业占用大量资金、物资，从而造成资产闲置和浪费等状... 详细信息

石油多种经营与选择性开发刘胜旺（江汉油田八达集团预制厂）石油多种经营在其快速发展的过程中，由于不重视选择性开发而盲目上项目、铺摊子，出现了低档次产品多、市场竞争力差、企业占用大量资金、物资，从而造成资产闲置和浪费等状况，石油多种经营要加快发展就要有效...

关键词：石油多种经营选择性开发

鸡腺病毒血清4型和11型Penton蛋白的表达及交叉反应性评价

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中国兽医科学 2022年第6期52卷 704-711页

作者：秦亚平刘亮亮刘胜旺李慧昕中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为了了解不同血清型鸡腺病毒(fowladenovirus,FAdV)表面蛋白的交叉反应性,本研究对FAdV-4(HN/151025株)和FAdV-11(LN/1507株)型病毒的衣壳蛋白之一的Penton蛋白分别进行原核表达以及真核表达,并分别与FAdV-11和FAdV-4型血清进行交叉反应... 详细信息

为了了解不同血清型鸡腺病毒(fowladenovirus,FAdV)表面蛋白的交叉反应性,本研究对FAdV-4(HN/151025株)和FAdV-11(LN/1507株)型病毒的衣壳蛋白之一的Penton蛋白分别进行原核表达以及真核表达,并分别与FAdV-11和FAdV-4型血清进行交叉反应,评价FAdV-4与FAdV-11型毒株Penton蛋白的交叉反应性。Western-blot检测结果显示,FAdV-4型的Penton蛋白与同型血清有良好的反应性,但与FAdV-11型的血清无交叉反应性;FAdV-11型的Penton蛋白与同型血清有良好的反应性,同时与FAdV-4型的血清有微弱的交叉反应。上述结果表明,FAdV-4型血清可同时识别FAdV-4型和FAdV-11型病毒的Penton蛋白。对2株病毒Penton蛋白的氨基酸序列进行比对,结果显示,两种血清型毒株的Penton蛋白的N端差异较大,这个差异区可能与蛋白的主要抗原表位区相关,进而影响血清学交叉反应性及交叉反应的强度,这可能是造成两种血清型毒株Penton蛋白交叉反应差的原因之一。

关键词：鸡腺病毒血清4型血清11型 Penton蛋白交叉反应