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福州市60株霍乱弧菌基因组遗传特征分析

中国热带医学 2024年

作者：林文桢刘秀峰陈凡冰福州市疾病预防控制中心福建医科大学公共卫生学院福建医科大学附属福州市疾病预防控制中心

目的对2018—2023年福州市分离的霍乱弧菌进行全基因组测序，预测毒力基因、耐药基因、序列位点信息，分析不同菌株间遗传关系，为防治霍乱提供依据。方法对60株霍乱弧菌进行全基因组序列测定，运用生物信息学软件对测序数据进行质控... 详细信息

目的对2018—2023年福州市分离的霍乱弧菌进行全基因组测序，预测毒力基因、耐药基因、序列位点信息，分析不同菌株间遗传关系，为防治霍乱提供依据。方法对60株霍乱弧菌进行全基因组序列测定，运用生物信息学软件对测序数据进行质控、基因组装和预测，借助PubMLST、ResFinder、VFDB等数据库预测不同菌株的多位点序列分型、耐药基因和毒力基因情况，结合NCBI数据库，经核心SNP系统发育分析和去重组分析，采取最大似然法构建系统发育树。结果 60株霍乱弧菌基于7个管家基因分型，获得16种已知STs和38种新分配的STs，O1群临床分离株H339为ST75，O1群食品分离株H13、H363和H381均为ST175，NOVC分离株H263、H357均为ST1218，H293、H306均为ST1700，H311、H314、H316均为ST1699，其余分离株存在多样性。共预测29种耐药基因，包括喹诺酮类、叶酸通路拮抗剂类、氨基糖苷类和β-内酰胺等，大部分菌株携带喹诺酮类耐药基因。经过VFDB数据库预测，所有病原菌株均含有rtx、hlyA毒力因子，98.33%(59/60)菌株携带tlh基因，O1群分离株均携带tcp、zot、ace基因，O1群临床分离株携带ctxA基因。全基因组系统发育树进化分析将全部菌株分为20个分支，基因组高度分歧。结论新发现38种STs。O1群食品分离株之间存在遗传相关性，O1群临床分离株与O1群食品分离株之间、O1群与NOVC菌株之间亲缘关系较远，分离菌株存在多样性。此项研究能够为食源性疾病溯源提供数据支持。

关键词：霍乱弧菌全基因组测序多位点序列分型耐药基因毒力基因系统发育树

基于AMPK信号通路探讨黄芪甲苷对db/db小鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝病的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 72-79页

作者：周敏刘秀吴勇军向琴喻嵘湖南中医药大学长沙410208

目的:基于网络药理学和实验验证研究黄芪甲苷(ASⅣ)对db/db小鼠2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用机制。方法:通过随机将24只db/db小鼠分为4组:模型组、二甲双胍组、黄芪甲苷低、高剂量组。采用6只C57小鼠作为空白组。... 详细信息

目的:基于网络药理学和实验验证研究黄芪甲苷(ASⅣ)对db/db小鼠2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用机制。方法:通过随机将24只db/db小鼠分为4组:模型组、二甲双胍组、黄芪甲苷低、高剂量组。采用6只C57小鼠作为空白组。黄芪甲苷低、高剂量组分别予黄芪甲苷0.015、0.030 g·kg^(-1)灌胃,二甲双胍组予0.067 g·kg^(-1)灌胃,空白组和模型组予等体积蒸馏水灌胃。灌胃结束后,检测小鼠空腹血糖(FBG),进行口服葡萄糖耐量试验,检测血清血脂水平及肝组织病理情况。通过网络药理学预测黄芪甲苷治疗T2DM合并NAFLD的作用靶点及富集通路,并采用分子生物学技术验证其主要相关富集通路;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织AMPK、p-AMPK、甾醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、脂肪酸合成酶(FAS)蛋白表达。结果:与空白组比较,经ASⅣ治疗的小鼠体质量、肝质量系数、空腹血糖、血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平降低(P<0.05,P<0.01)。肝组织的病理学显示脂质蓄积情况明显改善,影像学结果显示经黄芪甲苷治疗后,脂肪肝的程度减轻。网络药理学预测结果表明血管内皮生长因子α(VEGFA),半乳糖凝集素3(LGALS3),蛋白激酶B2(Akt2),含Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1),蛋白激酶B1(Akt1),信号传导及转录激活蛋白(STAT3),间质表皮转化因子(MET)是“药物-疾病”中的关键靶点,京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集的结果显示AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)信号通路与T2DM合并NAFLD密切相关。Western blot结果显示,与空白组比较,模型组中p-AMPK/AMPK表达水平明显下调,SREBP-1、FAS蛋白表达水平明显上调(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组、黄芪甲苷高剂量组p-AMPK/AMPK表达水平明显上调,SREBP-1、FAS蛋白表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪甲苷通过激活AMPK信号通路来调控脂质类蛋白的表达,从而改善脂质代谢。

关键词：黄芪甲苷 2型糖尿病非酒精性脂肪性肝病 db/db小鼠网络药理学

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老年肿瘤患者的综合评估和诊治策略

医药导报 2024年第3期43卷 380-384页

作者：李慧刘秀峰东部战区总医院肿瘤内科南京210002

老年肿瘤患者常常合并多种基础疾病,且衰老可以改变药物的药动学和药效学,影响免疫效应,常规放射治疗(放疗)、化学治疗(化疗)、靶向治疗或免疫治疗等抗肿瘤治疗模式无法发挥最佳疗效。老年综合评估是一个多维度和多学科交叉的诊断过程,... 详细信息

老年肿瘤患者常常合并多种基础疾病,且衰老可以改变药物的药动学和药效学,影响免疫效应,常规放射治疗(放疗)、化学治疗(化疗)、靶向治疗或免疫治疗等抗肿瘤治疗模式无法发挥最佳疗效。老年综合评估是一个多维度和多学科交叉的诊断过程,目前被认为是老年肿瘤患者评估的核心。借助多种工具量表,综合评估老年肿瘤患者,尽早干预,指导合理治疗,可为部分老年肿瘤患者增加获益机会,提高生活质量,同时可以合理分配医疗资源、减轻社会经济负担。

关键词：肿瘤患者/老年综合评估诊治策略

脂质体共递送槲皮素与多柔比星通过调控上皮间质转化过程抑制视网膜母细胞瘤的研究

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3515-3525页

作者：林敏刘秀梅冯年平吕雅琪上海中医药大学中药学院上海201203

调控上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程是抑制肿瘤生长和转移的重要策略。该研究基于视网膜母细胞瘤的EMT过程,构建同时负载槲皮素(quercetin,QUE)与多柔比星(doxorubicin,DOX)的脂质体,用于研究QUE与DOX联用... 详细信息

调控上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程是抑制肿瘤生长和转移的重要策略。该研究基于视网膜母细胞瘤的EMT过程,构建同时负载槲皮素(quercetin,QUE)与多柔比星(doxorubicin,DOX)的脂质体,用于研究QUE与DOX联用对视网膜母细胞瘤的治疗作用及其机制。通过单因素考察对槲皮素与多柔比星双载脂质体(QD Lipo)进行处方工艺优化,最终得到球形,粒径(108.87±1.93)nm,PDI 0.13±0.02,Zeta电位(-34.83±1.92)mV的双载脂质体,其中QUE、DOX包封率分别为96.20%±4.40%、91.17%±4.41%。以人视网膜母细胞瘤Y79作为体外细胞模型,采用共聚焦显微镜证明QD Lipo能提高Y79对其摄取效率。采用CCK-8法证明QUE∶DOX在1∶1~1∶2时具有最佳联合治疗作用。流式细胞技术证明QD Lipo增强了诱导Y79细胞凋亡的能力。通过Western blot技术发现QD Lipo能显著降低EMT通路相关蛋白vimentin和α-SMA的表达,并且荧光法检测到治疗后的Y79细胞内ROS水平显著降低。以上结果显示,脂质体共递送QUE与DOX可提高药物向视网膜母细胞瘤的输送效率,通过下调ROS水平抑制视网膜母细胞瘤的EMT过程,同时增强DOX对视网膜母细胞瘤的杀伤作用。

关键词：视网膜母细胞瘤脂质体上皮间质转化槲皮素联合治疗

左心室质量指数及相对室壁厚度与高血压患者左心室舒张功能障碍的关系

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中华高血压杂志 2024年第1期32卷 83-86页

作者：刘秀平王瑾夏晓芬杭州市临安区第一人民医院超声科浙江杭州311300 浙江省人民医院超声医学科杭州市临安区第一人民医院心内科

目的探讨左心室质量指数(LVMI)、相对室壁厚度(RWT)与高血压患者左心室舒张功能的关系。方法采用便利抽样法选取2019年2月至2022年10月收治的高血压患者226例。患者均接受超声心动图检查。根据左心室舒张功能,分为舒张功能正常组(113例... 详细信息

目的探讨左心室质量指数(LVMI)、相对室壁厚度(RWT)与高血压患者左心室舒张功能的关系。方法采用便利抽样法选取2019年2月至2022年10月收治的高血压患者226例。患者均接受超声心动图检查。根据左心室舒张功能,分为舒张功能正常组(113例)和舒张功能障碍组(113例)。比较两组的一般资料及LVMI、RWT检测结果,分析组间的LVMI、RWT差异。结果舒张功能障碍组LVMI[(151.01±23.21)比(74.25±8.24)g/m^(2),t=33.130,P<0.001]、RWT(0.48±0.12比0.34±0.11,t=9.142,P<0.001)高于舒张功能正常组。左心室心肌构型正常组(对照组)的左心室舒张期峰值充盈率(PFR)高于向心性肥厚组、离心性肥厚组、向心性重构组;离心性肥厚组的舒张早期峰值流速(PVE)、舒张早期峰值流速/舒张晚期峰值流速(PVE/PVA)高于向心性肥厚组、向心性重构组、对照组;向心性重构组的舒张晚期峰值流速(PVA)高于向心性肥厚组、离心性肥厚组、对照组,收缩末期至PFR的时间(TPFR)低于向心性肥厚组、离心性肥厚组、对照组(均P<0.01)。结论高血压伴左心室舒张功能异常者与左心室舒张功能正常者的LVMI、RWT差异显著,LVMI、RWT可作为高血压伴左心室舒张功能异常的参考。

关键词：高血压超声心动图左心室质量指数相对室壁厚度左心室舒张功能

黄杨枝生物炭的特性表征及其对Cr(Ⅵ)的吸附机理研究

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水资源与水工程学报 2024年

作者：韩菲菲肖艺刘林刘秀云胥明上海农林职业技术学院上海临港奉贤经济发展有限公司

为提高园林废弃物资源化利用水平,寻找碳基吸附剂新材料,使用园林废弃物黄杨枝制备生物炭来探究其对水体中Cr（Ⅵ）的吸附机制。采取批量吸附试验研究溶液初始pH值、吸附温度和吸附时间等对生物炭吸附Cr（Ⅵ）的影响;通过BET-N2、SEM-ED... 详细信息

为提高园林废弃物资源化利用水平,寻找碳基吸附剂新材料,使用园林废弃物黄杨枝制备生物炭来探究其对水体中Cr（Ⅵ）的吸附机制。采取批量吸附试验研究溶液初始pH值、吸附温度和吸附时间等对生物炭吸附Cr（Ⅵ）的影响;通过BET-N2、SEM-EDS、FTIR和XPS等表征方式以及Cr（Ⅵ）价态变化对黄杨枝生物炭吸附前、后进行吸附机理分析。结果表明:黄杨枝生物炭去除Cr（Ⅵ）的最适pH值为2,最佳吸附温度为55℃,吸附时间为3.0 h时,Cr（Ⅵ）的去除效率接近100%;化学吸附是其主要吸附方式,吸附机理主要包括氧化还原反应、络合作用和静电作用;低温热解的黄杨枝生物炭是一种新型高效的碳基吸附材料,可在提高园林废弃物资源化水平的同时,用于重金属Cr（Ⅵ）的处理。

关键词：生物炭重金属 Cr(Ⅵ) 特性表征吸附机理

高产乙醇酿酒酵母单倍体的诱变选育及杂交育种

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食品与发酵工业 2024年

作者：胡荣根廖蓓陈晖刘秀继张彦邓张双三峡大学生物与制药学院中国轻工业功能酵母重点实验室安琪酵母股份有限公司农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室安琪酵母股份有限公司酵母功能湖北省重点实验室

乙醇作为一种可再生能源物质，其生产主要以酵母代谢为主，而高耐性高产乙醇菌株成为最终乙醇产率的关键。为选育高耐性高产乙醇酵母菌株，以6株现有单倍体酿酒酵母为出发菌株，通过常温常压等离子诱变(atmospheric and room temperatur... 详细信息

乙醇作为一种可再生能源物质，其生产主要以酵母代谢为主，而高耐性高产乙醇菌株成为最终乙醇产率的关键。为选育高耐性高产乙醇酵母菌株，以6株现有单倍体酿酒酵母为出发菌株，通过常温常压等离子诱变(atmospheric and room temperature plasma mutagenesis，ARTP)构建突变文库，经氯化三苯基四氮唑(2，3，5-triphenyltetrazolium chloride，TTC)显色初筛，40、41 ℃压力生长复筛，发酵筛选培养基定量分析。最终获得9株优势突变酿酒酵母单倍体菌株，经不同配型单倍体杂交，成功获得一株发酵效率高，耐温、耐酸，耐乙醇性能均优于亲本菌株的二倍体酿酒酵母菌株C6。结果显示，C6菌株35 ℃复合糖水发酵培养基发酵终点酒精度为14.6%，亲本菌株AE2和M则为12.82%和13.72%，酒精度分别提高13.8%和6.4%，C6菌株在30 ℃条件下，酒精度可达17.9%。耐温性能提高较为明显，40 ℃条件下生长，C6、AE2和M菌株平稳期OD680值分别为4.12、0.35和1.15，生物量增幅在1.2～12倍。C6菌株在乙醇生产领域具有较高的工业应用价值。

关键词：微生物酿酒酵母单倍体诱变选育发酵性能

福州市2018—2023年霍乱弧菌分离株基因组遗传特征

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中国热带医学 2024年第6期24卷 727-733页

作者：林文桢刘秀峰陈凡冰福建医科大学公共卫生学院福建福州350122 福州市疾病预防控制中心福建福州350212 福建医科大学附属福州市疾病预防控制中心福建福州350212

目的对2018—2023年福州市分离的霍乱弧菌进行全基因组测序,预测毒力基因、耐药基因和序列位点信息,分析不同菌株间遗传关系,为防治霍乱提供依据。方法对60株霍乱弧菌进行全基因组序列测定,运用生物信息学软件对测序数据进行质控、基... 详细信息

目的对2018—2023年福州市分离的霍乱弧菌进行全基因组测序,预测毒力基因、耐药基因和序列位点信息,分析不同菌株间遗传关系,为防治霍乱提供依据。方法对60株霍乱弧菌进行全基因组序列测定,运用生物信息学软件对测序数据进行质控、基因组装和预测,采用PubMLST、ResFinder、VFDB等数据库预测不同菌株的多位点序列分型、耐药基因和毒力基因情况,结合NCBI数据库,经核心基因组单核苷酸多态性(core genes Single Nucleotide Polymorphism,cgSNP)系统发育分析和去重组分析,采取最大似然法构建系统发育树。结果 60株霍乱弧菌基于7个管家基因分型,获得16种已知序列型(sequence type, ST)和38种新分配的ST,O_(1)群临床分离株H339为ST75,O_(1)群食品分离株H13、H363和H381均为ST175,非O_(1)/非O139群霍乱弧菌(non-O1/non-O139 Vibrio cholerae,NOVC)分离株H263、H357均为ST1218,H293、H306均为ST1700,H311、H314、H316均为ST1699,其余分离株存在多样性。共预测29种耐药基因,包括喹诺酮类、叶酸通路拮抗剂类、氨基糖苷类和β-内酰胺等,大部分菌株携带喹诺酮类耐药基因。经过VFDB数据库预测,所有病原菌株均含有rtx、hlyA毒力因子,96.7%(58/60)菌株携带tlh基因,O_(1)群分离株均携带tcp、zot、ace基因,O_(1)群临床分离株携带ctxA基因。全基因组系统发育树进化分析将全部菌株分为20个分支,基因组高度分歧。结论新发现38种STs。O_(1)群食品分离株之间存在遗传相关性,O_(1)群临床分离株与O_(1)群食品分离株之间、O_(1)群与NOVC菌株之间亲缘关系较远,分离菌株存在多样性。此项研究能够为食源性疾病溯源提供数据支持。

关键词：霍乱弧菌全基因组测序多位点序列分型耐药基因毒力基因系统发育树

miR-93靶向TLR4/NF-κB信号通路对动脉粥样硬化大鼠血管内皮炎症反应的影响

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中国老年学杂志 2024年第6期44卷 1498-1503页

作者：李丰玲刘云霞刘秀刘瑜潍坊医学院附属医院神经内一科山东潍坊261031 潍坊医学院附属医院浮烟山综合内科山东潍坊261031 滨州医学院烟台附属医院心血管内科潍坊医学院附属医院全科医学科

目的探究微小核RNA(miR)-93对Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB的调控作用及对动脉粥样硬化(AS)大鼠血管内皮炎症反应的影响。方法大鼠经高脂饲料喂养+腹腔注射维生素D3复制AS模型,随机分为正常对照组、模型组、miR-93模拟物(miR-... 详细信息

目的探究微小核RNA(miR)-93对Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB的调控作用及对动脉粥样硬化(AS)大鼠血管内皮炎症反应的影响。方法大鼠经高脂饲料喂养+腹腔注射维生素D3复制AS模型,随机分为正常对照组、模型组、miR-93模拟物(miR-93 agomir)组、agomir-NC组、RS09(TLR4激活剂)组、miR-93 agomir+RS09组,每组15只,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血脂[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]和炎症因子[白细胞介素(IL)-6、C反应蛋白(CRP)]水平;流式细胞术检测循环内皮细胞比例以评价血管内皮损伤状况;Movat染色观察动脉血管泡沫细胞聚集状况;油红O染色检测斑块面积;免疫组化法检测M1型巨噬细胞标记抗体(CD11)阳性表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-93表达;Western印迹法检测TLR4/核因子(NF)-κB通路蛋白、脂质沉积相关蛋白如三磷酸腺苷(ATP)结合盒转运体(ABC)A1、载脂蛋白(Apo)A1、巨噬细胞清道夫受体(ScR)-A、凝集素型氧化低密度脂蛋白受体(Lox)-1、M1型巨噬细胞极化相关蛋白[IL-1β、诱导型一氧化氮(iNOS)]、M2巨噬细胞极化相关蛋白[IL-10,几丁质酶-3样蛋白3(YM1)]表达。结果与正常对照组相比,模型组动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积严重,斑块面积比例、IL-6、CRP、循环内皮细胞比例、TG、TC、LDL-C水平、TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化、炎症应答活性均明显升高,HDL-C、miR-93表达明显降低(P<0.05)。外源性上调miR-93,可明显促进脂质转运相关蛋白ABCA1及ApoA1表达,明显抑制TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,缓解大鼠动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积,明显降低斑块面积及循环内皮细胞比例(P<0.05)。RS09可明显促进TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,并可拮抗miR-93 agomir发挥的上述作用(P<0.05)。结论外源性上调miR-93表达可能通过靶向抑制TLR4/NF-κB通路活化,发挥抗炎、抗M1型巨噬细胞极化、抗泡沫细胞聚集及抗脂质沉积作用,改善AS大鼠血管内皮损伤。

关键词：微小核糖核苷酸-93 动脉粥样硬化 Toll样受体4 核转录因子κB 炎症反应