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HIV-1表面抗原的改造和广谱中和性抗体2F5、4E10的原核表达

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HIV-1表面抗原的改造和广谱中和性抗体2F5、4E10的原核表达

作者：刘秀侠西北农林科技大学

学位级别：硕士

1981年，美国发现首例由人类免疫缺陷病毒引发的具有严重传染性的艾滋病。至今仍然没有研究出有效的疫苗，却发现了几种具有广谱中和活性的单克隆抗体(monoclonalantibody, mAb)，例如b12、VRC01、2F5、4E10和10E8等。中和性抗体2F5和4... 详细信息

1981年，美国发现首例由人类免疫缺陷病毒引发的具有严重传染性的艾滋病。至今仍然没有研究出有效的疫苗，却发现了几种具有广谱中和活性的单克隆抗体(monoclonalantibody, mAb)，例如b12、VRC01、2F5、4E10和10E8等。中和性抗体2F5和4E10识别的表位为大小约30个氨基酸残基的gp41MPER区域，此区域在宿主细胞膜和病毒的融合过程中起到了非常重要的作用。对不同假病毒、重组病毒的中和试验表明，中和性抗体2F5和4E10可以中和大多数病毒。近些年，基于MPER区域的疫苗设计成为HIV-1研究的热点。本研究构建了含有MPER区域的真核重组质粒pAcVSVGTM-gp120OD(MPER)和pAcVSVGTM-gp120OD(MPER)-Fc，进行了融合蛋白的表达及鉴定。重组质粒与Bacmid共转染Sf9昆虫细胞，用Sf9细胞表达经改造的病毒的MPER抗原表位。Western blotting结果显示重组蛋白MPER在昆虫细胞正确表达。为检测gp120OD(MPER)-Fc抗原的活性而构建了特异性识别HIV病毒MPER区域的2F5和4E10单链抗体的重组质粒，进行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。2F5和4E10单链抗体在原核细胞BL21(DE3)和Rosetta-gami2(DE3)pLysS中以包涵体形式表达，利用镍离子螯合层析方法对包涵体蛋白进行纯化，经复性后获得可溶性单链抗体。用具有活性的OD(2F5)-Fc抗原检测原核细胞表达得到的单链抗体2F5-scFv，用原核表达的GST-MPER抗原检测单链抗体2F5-scFv和4E10-scFv，ELISA结果显示2F5-scFv和4E10-scFv均具有结合活性。其次，利用2F5-scFv和4E10-scFv检测真核细胞表达的重组蛋白gp120OD(MPER)-Fc， ELISA结果显示gp120OD(MPER)-Fc具有特异性结合活性。由此表明MPER区域已经暴露在gp120OD结构域上，这为以后利用多抗原表位重组蛋白免疫小鼠或家兔获得中和性抗体准备了材料。本研究在体外合成了编码MPER抗原的基因，用杆状病毒/昆虫细胞表达系统表达了MPER抗原。具有多个中和性表位的OD结构域的成功构建，可以作为候选免疫原用于研究HIV包膜蛋白Env的免疫原性，也可以作为抗原用于新的中和性抗体的筛选，为HIV重组疫苗的设计奠定基础。

关键词： 2F5 4E10 MPER HIV-1

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大型齿轮塑性成形新工艺研究

大型齿轮塑性成形新工艺研究

作者：刘秀侠燕山大学

学位级别：硕士

齿轮是机械传动中应用最为广泛的基础零件之一。目前国内外应用广泛的齿轮齿形的加工方式有切削法和塑性成形法。切削法虽然加工精度高,但切削量大、生产效率低而且生产成本高。塑性成形法加工的齿轮具有金属流线沿齿形轮廓分布、齿轮... 详细信息

齿轮是机械传动中应用最为广泛的基础零件之一。目前国内外应用广泛的齿轮齿形的加工方式有切削法和塑性成形法。切削法虽然加工精度高,但切削量大、生产效率低而且生产成本高。塑性成形法加工的齿轮具有金属流线沿齿形轮廓分布、齿轮强度高、材料利用率高及生产效率高等优点,因此已广泛应用到小型齿轮的生产中。但由于塑性成形法加工齿轮时在成形后期成形载荷陡增,因而一般需要的设备吨位较大,无法加工模数和尺寸较大的齿轮。本文以直径大于一米的大型齿轮为研究对象,设计研究了一种大齿轮塑性成形新工艺。本文以模数为20,齿数为60的圆柱直齿轮为例进行研究。坯料形状为圆柱或圆环状,外径介于成形齿轮的齿顶圆与齿根圆之间。首先利用电磁感应加热对坯料的外圈进行局部加热,然后将其置于凸模与齿形垫板之间,三者被同步压入凹模型腔。在凸模、齿形垫板和凹模型腔的作用下,坯料外圈发生塑性变形而逐渐形成齿形,同时芯部不发生形变。利用有限元分析软件DEFORM-3D对感应加热过程及锻造过程进行了仿真模拟,通过不断优化模具结构参数与工艺参数找到了成形质量佳,且成形载荷小的最优工艺。分析了大齿轮在成形过程中的应力应变场、金属流动规律、载荷位移曲线,探索了加热温度、加热层厚度、摩擦因子、凹模结构参数等因素对成形质量以及成形载荷的影响。研究表明,该工艺可以有效降低成形载荷90%5%,且最适加热层厚度为齿高的1.4～1.7倍。最后,为了验证有限元模拟结果的正确性与该工艺的可行性,设计了验证性试验。试验结果与有限元结果基本吻合,为工艺优化和实际生产提供了指导依据。

关键词：大型齿轮塑性成形法局部感应加热局部加载成形载荷模具结构

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关于事业单位财政税收的问题及对策分析

纳税 2017年第28期 7-7页

作者：刘秀侠吉林省辽源市粮油卫生检验监测站

事业单位是指为社会公众提供有关教育、文化、卫生、科技等各方面公共服务的国家机关或社会公益组织,其日常运行不以获利为目的,且运行所需资金一般来自国家财政拨款或社会捐助。由于事业单位区别于普通企业的特殊性质,事业单位的财政... 详细信息

事业单位是指为社会公众提供有关教育、文化、卫生、科技等各方面公共服务的国家机关或社会公益组织,其日常运行不以获利为目的,且运行所需资金一般来自国家财政拨款或社会捐助。由于事业单位区别于普通企业的特殊性质,事业单位的财政税收也更加的复杂、分散。随着社会主义市场经济的发展,国家对于事业单位的财政拨款越来越少。在这种社会经济环境下,事业单位的运营状况越来越严峻。本文针对事业单位在财政税收方面出现的问题,提出了几点具体的解决措施,希望能够引起相关事业单位注意。

关键词：事业单位财政税收问题对策

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海河流域产业用水量变化驱动因素分析

资源科学 2024年第3期46卷 621-634页

作者：秦明慧刘秀丽中国科学院数学与系统科学研究院北京100190 中国科学院大学北京100049 中国科学院预测科学研究中心北京100190 中国科学院大学数字经济监测预测预警与政策仿真教育部哲学社会科学实验室北京100190

【目的】为制定海河流域产业节水策略提供参考依据,亟需系统辨识海河流域经济系统中细分产业用水量变化的主要驱动因素并量化其驱动作用。【方法】本文首先编制了2007、2012、2017年海河流域49个部门可比价水资源投入占用产出时间序列表... 详细信息

【目的】为制定海河流域产业节水策略提供参考依据,亟需系统辨识海河流域经济系统中细分产业用水量变化的主要驱动因素并量化其驱动作用。【方法】本文首先编制了2007、2012、2017年海河流域49个部门可比价水资源投入占用产出时间序列表,以此为数据基础,构建了包含11个驱动因素指标的海河流域细分产业用水量结构分解分析模型。【结果】(1)2007-2017年,经济发展水平提高是促进海河流域用水总量增加的最主要原因,但其驱动作用随时间减弱。生产用水强度降低和部门产品最终需求结构变化分别是2007-2012年和2012-2017年流域用水总量降低的最主要原因。(2)灌溉用水强度和部门产品最终需求结构分别是2007-2012年和2012-2017年农产品部门用水量降低的最主要因素。(3)生产用水强度对工业部门用水量变化的驱动作用随时间减弱,对各工业部门产品最终需求的增长不断驱动工业部门用水量增加。(4)生产技术水平和最终需求总量结构变化对服务业部门用水量增加的驱动作用相较对农业部门和工业部门的驱动作用更强。【结论】2007-2017年,海河流域用水量的减少呈现由生产用水强度驱动为主转向最终需求结构驱动为主的变化趋势。从产业间对比来看,不同产业用水量变化的主要驱动因素存在明显产业特质性,建议基于产业用水量变化的主要驱动因素区别制定各产业节水措施。

关键词：驱动因素用水量结构分解分析投入占用产出表海河流域

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消毒剂在养殖业上的应用

中国饲料 2015年第10期 12-14,23页

作者：刘秀侠穆熙军孙学森谷巍山东宝来利来生物工程股份有限公司山东泰安271000

本文就消毒剂的种类及其在畜禽养殖生产中的应用作一综述。

关键词：畜禽养殖消毒剂协同复配

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新理念下语文阅读教学

中国教育技术装备 2011年第34期 177-178页

作者：刘秀侠河北省迁安市蔡园镇蔡园初级中学

阅读是语文教学过程中的一个重要环节,阅读是人们从文本中获取知识的一个重要渠道,是领悟教材内容的得力助手。根据新课标的具体要求,笔者结合多年来的语文阅读教学的经验,总结出新理念背景下语文阅读教学的一些肤浅做法。

关键词：阅读教学语文教学过程教材内容

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中国共产党创造全过程人民民主的生成逻辑

江苏社会科学 2024年第1期 127-135页

作者：刘秀玲吉林省社会科学院马克思主义研究所

全过程人民民主是百年来中国共产党立足国情、契合民族特质不断探索、实践和发展民主的光辉典范,是对中国民主政治发展规律的新认识和新表述。从历史逻辑上看,中国共产党百年来带领人民进行了长期持续的民主实践探索,为全过程人民民主... 详细信息

全过程人民民主是百年来中国共产党立足国情、契合民族特质不断探索、实践和发展民主的光辉典范,是对中国民主政治发展规律的新认识和新表述。从历史逻辑上看,中国共产党百年来带领人民进行了长期持续的民主实践探索,为全过程人民民主的孕育与形成积淀了深厚的历史底蕴。从理论逻辑上看,全过程人民民主以马克思主义人民民主理论的中国化时代化发展为基石,是在系统总结社会主义民主发展经验过程中所提出的全新民主形态,从根本上超越了西方民主理论,实现了人类民主的新飞跃。从实践逻辑上看,中国共产党在政治实践中探索出党的领导、人民当家作主和依法治国有机统一的中国民主主旨要义,建构了人民当家作主的制度体系,并通过人民代表大会和人民政协确保实现人民当家作主。

关键词：中国共产党全过程人民民主人民当家作主人民代表大会人民政协

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基于融合Lasso的非参数加性分位数回归模型

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模式识别与人工智能 2024年第1期37卷 58-72页

作者：付漫侠周水生西安电子科技大学数学与统计学院西安710126

加性分位数回归为非线性关系的建模提供一种灵活、鲁棒的方法.拟合加性分位数模型的方法通常使用样条函数逼近分量,但需要先验的选择节点,计算速度较慢,并不适合大规模数据问题.因此文中提出基于融合Lasso的非参数加性分位数回归模型(No... 详细信息

加性分位数回归为非线性关系的建模提供一种灵活、鲁棒的方法.拟合加性分位数模型的方法通常使用样条函数逼近分量,但需要先验的选择节点,计算速度较慢,并不适合大规模数据问题.因此文中提出基于融合Lasso的非参数加性分位数回归模型(Nonparametric Additive Quantile Regression Model Based on Fused Lasso,AQFL),是在融合Lasso罚和l_(2)罚之间折衷的可对加性分位数回归模型进行估计和变量选择的模型.融合Lasso罚使模型能快速计算,并在局部进行自适应,从而实现对所需分位数甚至极端分位数的预测.同时结合l_(2)罚,在高维数据中将对响应影响较小的协变量函数值压缩为零,实现变量的选择.此外,文中给出保证收敛到全局最优的块坐标ADMM算法(Block Coordinate Alternating Direction Method of Multipliers,BC-ADMM),证明AQFL的预测一致性.在合成数据和碎猪肉数据上的实验表明AQFL在预测准确性和鲁棒性等方面较优.

关键词：分位数回归加性模型融合Lasso罚 l 2罚

改进秃鹰搜索和K均值混合迭代的点云简化算法

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西安交通大学学报 2024年第2期58卷 172-183页

作者：牛宏侠李富丽兰州交通大学自动化与电气工程学院兰州730070 兰州交通大学甘肃省高原交通信息工程及控制重点实验室兰州730070 兰州交通大学光电技术与智能控制教育部重点实验室兰州730070

针对激光雷达的固有特性和复杂环境易造成点云噪声和冗余点云,以及传统点云简化算法忽略了点云固有特征等问题,提出了一种基于改进秃鹰搜索和K均值聚类(KMC)混合迭代的点云简化算法(IBESSA)。首先,通过秃鹰搜索(BES)算法迭代阶段的竞争... 详细信息

针对激光雷达的固有特性和复杂环境易造成点云噪声和冗余点云,以及传统点云简化算法忽略了点云固有特征等问题,提出了一种基于改进秃鹰搜索和K均值聚类(KMC)混合迭代的点云简化算法(IBESSA)。首先,通过秃鹰搜索(BES)算法迭代阶段的竞争融合(CFBES),提高其收敛速度和优化精度;其次,通过CFBES和KMC算法的混合迭代,实现了点云数据的聚类;然后,在k近邻(k-NN)实现点云簇密度估计的基础上,结合香农熵实现点云信息量化;最后,删除信息量化值小于阈值的聚类簇,完成点云数据简化。使用UCI国际标准数据集和斯坦福点云数据集分别对CFBES-KMC算法的聚类效果及点云的简化效果进行验证,结果表明:与改进飞蛾扑火的K均值交叉迭代、K-means++、模糊C均值聚类算法的聚类效果相比,CFBES-KMC算法的聚类准确率分别提高了1.02%、12.31%、14.72%;在斯坦福点云数据集上,IBESSA算法在有效滤除冗余点云的基础上保留了原本点云的细节和形状特征,不失为一种高效的点云简化算法。

关键词：秃鹰搜索算法竞争融合 K均值聚类混合迭代香农熵点云简化