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小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1产生30kD的MCP-1类趋化因子

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实验生物学报 1998年第3期31卷 245-250页

作者：刘祝公陈慰峰 Jo Van Damme 北京医科大学免疫学系北京100083 Rega Institute Katholieke University LeuvenBelgium

髓质型小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1自发分泌趋化因子(Chemokines),细胞培养上清先经CPG珠(Controlled-pore glass beads)初步浓缩纯化,再依次经肝素-Sepharose柱亲和层析、阳离子交换FPLC及RP-HPLC分离纯化,得到了一个30kD的蛋白质分子,对... 详细信息

髓质型小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1自发分泌趋化因子(Chemokines),细胞培养上清先经CPG珠(Controlled-pore glass beads)初步浓缩纯化,再依次经肝素-Sepharose柱亲和层析、阳离子交换FPLC及RP-HPLC分离纯化,得到了一个30kD的蛋白质分子,对淋巴细胞和单核巨噬细胞均有趋化活性。此蛋白分子N端封闭,因而先经甲酸水解得到蛋白片段,分析了其中24个氨基酸的序列,发现其与小鼠MCP-1/JE(Monocyte Chemoattractant Pro-tein-1)完全相同。以上结果说明,MTEC1产生的是mMCP-1/JE类趋化因子。

关键词：趋化因子胸腺革质细胞 MCP-1 糖基化

小鼠胎肝基质细胞系MFLC克隆的建立、鉴定及细胞因子分泌

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中华微生物学和免疫学杂志 1997年第1期17卷 43-46页

作者：刘倩刘祝公张国荣陈慰峰北京医科大学免疫学系

用体外长期培养的方法建立了小鼠胎肝基质细胞系ＭＦＬＣ，此细胞系是以上皮细胞为主的混合细胞系，能分泌多种细胞因子。为精确分析胎肝基质细胞在Ｔ细胞发育中的作用，对此细胞系进行了克隆化培养，共获得１１个克隆。对这些克隆进行... 详细信息

用体外长期培养的方法建立了小鼠胎肝基质细胞系ＭＦＬＣ，此细胞系是以上皮细胞为主的混合细胞系，能分泌多种细胞因子。为精确分析胎肝基质细胞在Ｔ细胞发育中的作用，对此细胞系进行了克隆化培养，共获得１１个克隆。对这些克隆进行角蛋白染色、倍增时间测定、染色体检查以及ＩＬ－６、趋化因子分泌水平的检测，结果表明，这些克隆在细胞学特性以及细胞因子的分泌上均有差异。

关键词：胎肝基质细胞细胞系白细胞介素6 克隆干细胞

IL-1诱导小鼠胸腺上皮细胞(MTEC1)克隆分泌化学趋化因子

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实验生物学报 2000年第1期33卷 35-40页

作者：董巍陈慰峰刘祝公庞学文苏树芸中国医学科学院试验动物研究所北京100020 北京医科大学免疫学系北京100083

通过将本室所建小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1进行克隆,获得由单一细胞来源的12个MTEC1-DW细胞克隆,检测各克隆分泌IL-1,IL-6及CF活性,分析诱导MTEC1-DW细胞克隆分泌CF的因素。选择不分泌IL-1及CF的MTEC1-DW克隆,于细胞培养中加入外源IL-1或/... 详细信息

通过将本室所建小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1进行克隆,获得由单一细胞来源的12个MTEC1-DW细胞克隆,检测各克隆分泌IL-1,IL-6及CF活性,分析诱导MTEC1-DW细胞克隆分泌CF的因素。选择不分泌IL-1及CF的MTEC1-DW克隆,于细胞培养中加入外源IL-1或/及IL-6,分析其细胞培养液中CF活性;选择分泌高活性IL-1及CF的MTEC1-DW克隆,于细胞培养中加入抗IL-1mAb,阻断IL-1活性,分析其细胞培养液中CF活性。结果显示:IL-1能诱导MTEC1-DW细胞克隆分泌CF,IL-6的这种作用则很微弱。

关键词：胸腺上皮细胞 IL-1 细胞克隆化学趋化因子分泌

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小鼠骨髓基质细胞系BMSC1的建立及鉴定

科学通报 1996年第8期41卷 744-748页

作者：刘倩张平夏刘祝公吴江声陈慰峰北京医科大学免疫学系北京100083

对T细胞发育的研究表明:胸腺是T细胞发育的主要场所,来源于骨髓的pro-T细胞进入胸腺,在胸腺微环境的作用下,经阳性和阴性选择逐渐发育为成熟的T细胞输出胸腺。但目前对T细胞在骨髓内是如何由造血干细胞分化成pro-T细胞的发育过程还不太... 详细信息

对T细胞发育的研究表明:胸腺是T细胞发育的主要场所,来源于骨髓的pro-T细胞进入胸腺,在胸腺微环境的作用下,经阳性和阴性选择逐渐发育为成熟的T细胞输出胸腺。但目前对T细胞在骨髓内是如何由造血干细胞分化成pro-T细胞的发育过程还不太清楚,骨髓微环境与此过程密切相关。现在的研究表明骨髓造血微环境主要是由骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal Cell,BMSC)及其分泌的细胞外基质、细胞因子三者共同组成,影响着造血细胞的粘附、增殖和分化。其中骨髓基质细胞是关键成分,主要包括成纤维细胞、脂肪细胞、巨噬细胞、内皮细胞和上皮细胞等。各种基质细胞网状分隔构成微环境支架,造血细胞在此微环境支架中与基质细胞相互作用并接受基质细胞分泌的造血因子的刺激而增殖分化。研究T细胞在骨髓内发育途径及分化机理,须分析BMSC类型、功能及其与发育中的T细胞的相互作用效应,其体外培养可以仔细分析骨髓微环境的作用。为此,我们继建成了小鼠胸腺基质细胞系以后,开始建立小鼠骨髓基质细胞系,本文报道所建骨髓基质细胞系BMSC1,并对其进行了细胞学鉴定分析。

关键词：骨髓基质细胞系上皮细胞角蛋白张力丝 BMSC

小鼠胎肝基质细胞系MFLC自发分泌多种细胞因子

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实验生物学报 1997年第4期30卷 355-361页

作者：刘倩刘祝公陈慰峰张平夏庞学文钱晓萍北京医科大学免疫学系北京100083

在无外源刺激条件下,我室所建小鼠胎肝基质细胞系MFLC可自发分泌多种类型细胞因子,其中IL-6及化学趋化因子水平较高,GM-CSF水平较低,但未检测到IL-3及IL-7活性。此细胞上清对小鼠骨髓造血干细胞有明显的促集落形成效应,并呈现剂量依赖关... 详细信息

在无外源刺激条件下,我室所建小鼠胎肝基质细胞系MFLC可自发分泌多种类型细胞因子,其中IL-6及化学趋化因子水平较高,GM-CSF水平较低,但未检测到IL-3及IL-7活性。此细胞上清对小鼠骨髓造血干细胞有明显的促集落形成效应,并呈现剂量依赖关系,所形成的集落以CFU-GMM及CFU-GM为主;此细胞上清还促进5-Fu耐受小鼠骨髓造血干细胞的集落形成,提示上清中存在SCF样活性成份。上述结果表明,MFLC的建立有利于分析干细胞在胎肝内如何向pro-T细胞分化发育的机理并有利于阐明细胞因子网络调节在其中的作用。

关键词：胎肝基质细胞自发分泌细胞因子集落

小鼠胸腺树突状细胞系自发分泌多种类型细胞因子

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实验生物学报 1994年第1期27卷 91-101页

作者：刘祝公陈慰峰曹良弦庞学文张平夏余青北京医科大学免疫学教研室北京100083

建成小鼠胸腺基质细胞系,命名为MTSC4,经鉴定分析认为是DC来源。在无外来刺激条件下,MTSC 4细胞可自发分泌多种类型细胞因子,已检测到的有IL-1,IL-6,IL-7,CSF,IFN及趋化因子(CF)等。其中IL-6,IFN为较高水平分泌量,IL-1,CF为中等水平,IL-... 详细信息

建成小鼠胸腺基质细胞系,命名为MTSC4,经鉴定分析认为是DC来源。在无外来刺激条件下,MTSC 4细胞可自发分泌多种类型细胞因子,已检测到的有IL-1,IL-6,IL-7,CSF,IFN及趋化因子(CF)等。其中IL-6,IFN为较高水平分泌量,IL-1,CF为中等水平,IL-7、CSF为较低水平分泌量。MTSC4不能自发分泌IL-3及TNF_α。MTSC4的建立有利于分析胸腺选择特别是阴性选择的机理,及细胞因子在其中的作用,也可用于研究自分泌因子的网络调节。

关键词：胸腺树突状细胞细胞因子分泌

八株小鼠胸腺基质细胞系产生白细胞介素1及白细胞介素6的水平

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中国免疫学杂志 1993年第6期9卷 328-331页

作者：庞学文钱晓萍刘祝公陈慰峰北京医科大学免疫教研室北京100083

应用IL-1诱导LBRM33-IA5细胞产生IL-2、及支持IL-6依赖细胞系KD-83细胞的增殖,分别测定了本室所建8株小鼠胸腺基质细胞系自发分泌IL-1及IL-6的能力.8株MTSC 分泌IL-1水平不同,>100U/ml者,1株;30～40U/ml 者,2株.8株细胞均能产生IL-6,其... 详细信息

应用IL-1诱导LBRM33-IA5细胞产生IL-2、及支持IL-6依赖细胞系KD-83细胞的增殖,分别测定了本室所建8株小鼠胸腺基质细胞系自发分泌IL-1及IL-6的能力.8株MTSC 分泌IL-1水平不同,>100U/ml者,1株;30～40U/ml 者,2株.8株细胞均能产生IL-6,其中7株的分泌水平>80U/ml;1株为38U/ml.比较各株分泌IL-1及IL-6的水平,本文显示,在MTSC 各系中,尚存在IL-1非依赖性IL-6分泌途径.本文尚比较了两种测定IL-1活性的方法,支持胸腺细胞增殖法测得者,实为IL-1+IL-6的效应,不能反映IL-1的实际水平.

关键词：胸腺基质细胞系白细胞介素1

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小鼠胸腺树突状细胞系的克隆化及基本鉴定

中国免疫学杂志 1999年第6期15卷 257-259页

作者：裴丽红刘祝公陈慰峰北京医科大学免疫学系

目的：应用单细胞培养系统，对本室建成的胸腺基质细胞系ＭＴＳＣ４进行细胞克隆化并鉴定。方法：在单个细胞培养中，扩增由一个细胞长成的克隆，并使之稳定生长后，进行表面标志分子和倍增时间检查，并以其分泌的细胞因子测定其生物学... 详细信息

目的：应用单细胞培养系统，对本室建成的胸腺基质细胞系ＭＴＳＣ４进行细胞克隆化并鉴定。方法：在单个细胞培养中，扩增由一个细胞长成的克隆，并使之稳定生长后，进行表面标志分子和倍增时间检查，并以其分泌的细胞因子测定其生物学特性及功能。结果：获得１４个细胞克隆，它们均表达树突状细胞抗原和ＭＨＣⅡ类分子，均无角蛋白，表明各克隆均为树突状细胞，起始的ＭＴＳＣ４也是树突状细胞系。检测了细胞倍增时间和ＩＬ６、趋化因子等细胞因子，从倍增时间和因子产生能力看，各克隆差异很大。结论：从ＭＴＳＣ４细胞系克隆出性状及功能都均一的细胞克隆来看，各克隆间的细胞特性有明显区别。

关键词：胸腺细胞克隆细胞因子树突状细胞

小鼠胸腺基质细胞系(MTEC1)在裸鼠体内生物学特性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 1996年第3期16卷 171-175页

作者：张平夏张国荣肖士云刘祝公陈慰峰北京医科大学免疫系 100083

通过流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、组织学染色和免疫组化的方法研究了脾内注射的小鼠胸腺上皮细胞系ＭＴＥＣ１和初代培养的小鼠胸腺基质细胞在裸鼠脾脏内存活状态及功能特性。结果发现ＭＴＥＣ１细胞不仅能够在脾脏内存活，而且在ＭＴＥＣ... 详细信息

通过流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、组织学染色和免疫组化的方法研究了脾内注射的小鼠胸腺上皮细胞系ＭＴＥＣ１和初代培养的小鼠胸腺基质细胞在裸鼠脾脏内存活状态及功能特性。结果发现ＭＴＥＣ１细胞不仅能够在脾脏内存活，而且在ＭＴＥＣ１细胞周围有大量不成熟的淋巴细胞。初代培养的小鼠胸腺基质细胞则不能在脾脏内存活。

关键词：胸腺基质细胞脾脏淋巴细胞生物学特性