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抗体芯片技术的建立及其对肝癌血清标志物的筛选

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世界华人消化杂志 2010年第31期18卷 3378-3383页

作者：吴彩霞刘琼明赵信利王斐许丹科何为甘肃省肿瘤医院甘肃省兰州市730050 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心北京市102206 南京大学化学化工学院教育部生命分析化学重点实验室江苏省南京市210093

目的:建立一种可以诊断肝癌的血清标志通量化筛选分析的抗体芯片技术.方法:以14种肝癌潜在标志物为研究对象并制备相应的抗体芯片,采用对血清样本进行生物素标记的抗体芯片分析策略,通过Wilcoxon非参数检验方法分析14种潜在蛋白标志物... 详细信息

目的:建立一种可以诊断肝癌的血清标志通量化筛选分析的抗体芯片技术.方法:以14种肝癌潜在标志物为研究对象并制备相应的抗体芯片,采用对血清样本进行生物素标记的抗体芯片分析策略,通过Wilcoxon非参数检验方法分析14种潜在蛋白标志物在44例肝癌患者和46名健康者的临床血清标本中的差异表达情况.结果:建立了针对生物素标记血清标本的抗体芯片分析技术,抗体芯片检测分析结果具有较好的重复性和准确性.HSP70、CK19、GPC3、PTMA、AFU、GP73、HBxAg、CA125等8种潜在标志的蛋白表达水平在44例肝癌与46例健康者血清中存在统计学差异(P<0.01).结论:本研究所建立的基于血清标本生物素标记的抗体芯片分析技术可以初步筛选出具有临床诊断价值的肝癌血清标志.

关键词：抗体芯片血清学标志肝癌

大肠杆菌外膜表达金属硫蛋白增强重金属镉吸附能力

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军事医学科学院院刊 2004年第4期28卷 391-393页

作者：周绪斌刘琼明邢瑞云吕星军事医学科学院放射医学研究所北京100850

随着工农业的不断发展,重金属污染日益严重,尤其是土壤和水源中重金属可在农作物和水生动植物中产生累积效应,对人类健康构成潜在威胁.与其他污染物有所不同的是重金属不能被化学或生物降解,因此对它的治理更加困难和复杂.传统上对重金... 详细信息

随着工农业的不断发展,重金属污染日益严重,尤其是土壤和水源中重金属可在农作物和水生动植物中产生累积效应,对人类健康构成潜在威胁.与其他污染物有所不同的是重金属不能被化学或生物降解,因此对它的治理更加困难和复杂.传统上对重金属污染的治理主要采用物理、化学或机械的方法,这些方法不仅造成人力、物力和财力上的极大消耗,而且效果也不明显.随着生物工程技术的发展,生物治理重金属污染具有极大的潜力和广阔的应用前景,越来越引起人们的广泛关注.……

关键词：大肠杆菌金属硫蛋白吸附

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光谱测定法检测蛋白质S-亚硝基化修饰

军事医学科学院院刊 2003年第1期27卷 49-50页

作者：周绪斌吕星邢瑞云刘琼明军事医学科学院放射医学研究所北京100850

目的 :探讨用光谱测定法对蛋白质的S_亚硝基化修饰进行检测。方法 :以牛血清白蛋白 (BSA)作目标蛋白 ,在酸性条件下用亚硝酸盐使BSA发生S_亚硝基化修饰 ,Hg2 + 离子解离亚硝基化蛋白的NO基团 ,所生成的NO与磺胺形成的重氮化物 ,再与乙... 详细信息

目的 :探讨用光谱测定法对蛋白质的S_亚硝基化修饰进行检测。方法 :以牛血清白蛋白 (BSA)作目标蛋白 ,在酸性条件下用亚硝酸盐使BSA发生S_亚硝基化修饰 ,Hg2 + 离子解离亚硝基化蛋白的NO基团 ,所生成的NO与磺胺形成的重氮化物 ,再与乙二胺形成显色产物 ,其光密度值在一定的范围内与NO基团的浓度成线性关系 ,用亚硝酸盐所制作的标准曲线可定量检测目标蛋白的S_亚硝基化修饰。结果与结论 :亚硝酸盐在 4 .0× 10 _3～ 6× 10 _2mmol L浓度范围与显色产物的光密度值存在良好线性关系 ,在总体蛋白中可检测到的S_亚硝基化蛋白的比率为 1 10。

关键词： S-亚硝基化光谱测定法蛋白质类

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氧化还原信号转导的分子机制

生命的化学 2005年第1期25卷 1-4页

作者：刘琼明张令强贺福初军事医学科学院放射医学研究所北京100850

氧化还原调控参与多种生物学过程,包括细胞增殖、分化和凋亡等的细胞信号转导和基因表达调控,因而在细胞生命活动中扮演着非常重要的角色。细胞内各种氧化还原介质,如活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)和活性氮(reactivenitrogenspecie... 详细信息

氧化还原调控参与多种生物学过程,包括细胞增殖、分化和凋亡等的细胞信号转导和基因表达调控,因而在细胞生命活动中扮演着非常重要的角色。细胞内各种氧化还原介质,如活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)和活性氮(reactivenitrogenspecies,RNS)等,能对多种蛋白质在半胱氨酸残基上进行可逆性修饰。ROS或RNS对靶蛋白的氧化还原修饰方式主要有巯基/二硫键转换反应、S-亚硝基化及谷胱甘肽化等,这些修饰方式构成了胞内氧化还原信号转导的主要机制。

关键词： RNS 细胞信号转导 ROS 分子机制靶蛋白细胞内氧化还原二硫键基因表达调控生命活动

GSTpull-down联合质谱鉴定BAG结构域相互作用蛋白

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中国生物工程杂志 2015年第4期35卷 1-10页

作者：刘冬梅孙佳楠邹佳凝刘明伟孙璐刘琼明沈阳药科大学药学院沈阳110016 国家蛋白质组学重点实验室北京蛋白质组研究中心北京102206 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的:BAG结构域(BAG domain,BD)为BAG家族蛋白的基本功能结构域,通过对BAG家族蛋白6个成员的9个BDs的相互作用蛋白进行分析,以探明不同BD相互作用蛋白的异同点并为研究BAG家族蛋白多样性生物功能的分子机制提供理论依据。方法:构建p-GEX... 详细信息

目的:BAG结构域(BAG domain,BD)为BAG家族蛋白的基本功能结构域,通过对BAG家族蛋白6个成员的9个BDs的相互作用蛋白进行分析,以探明不同BD相互作用蛋白的异同点并为研究BAG家族蛋白多样性生物功能的分子机制提供理论依据。方法:构建p-GEX-4T2-BDs重组子并转化*** BL21(DE3)经IPTG诱导表达GST-BDs融合蛋白并纯化。采用GST pulldown技术联合高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)的策略对BDs相互作用蛋白进行定性定量分析。最后,用DAVID(The Database for Annotation,Visualization and Intergrated Discovery)和cytoscape对BDs相互作用蛋白进行GO(Gene Ontology)功能分析及KEGG(Kyoto Enyoolpedia of Genes and Genomes)通路分析。结果:在Hela细胞的胞浆蛋白中总共鉴定到370个潜在的BDs相互作用蛋白,主要为核糖体蛋白(ribosomal proteins)、翻译起始因子(Eukaryotic translation initiation factors)、翻译延长因子(Eukaryotic translation elongation factors)、泛素化-蛋白酶体相关蛋白(ubiquitin-proteasome associated proteins)及HSP40家族蛋白。GO功能富集分析结果显示,BDs相互作用蛋白涉及多种生物学功能,包括细胞内蛋白质质量控制(protein quality control)、糖代谢(glycolysis)、免疫调控(immune response)、应激反应(stress response)、细胞周期(cell cycle)等。KEGG通路分析结果表明BDs相互作用蛋白参与多条细胞内重要的信号通路,包括FGF信号通路(FGF signaling pathway)、EGF受体信号通路(EGF receptor signaling pathway)、PDGF信号通路(PDGF signaling pathway)、Ras通路(Ras pathway)等。结论:BAG家族蛋白不同成员的BD所介导的蛋白-蛋白相互作用既有共性又有特异性,BAG家族蛋白通过BDs介导多种蛋白相互作用并参与细胞内多条重要的信号通路来调控细胞内蛋白质稳态、糖代谢、免疫反应、应激反应、细胞周期等过程。

关键词： BAG家族蛋白 BAG 结构域(BDs) GST pull-down LC-MS/MS

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美国的乌克兰危机叙事与霸权护持

亚太安全与海洋研究 2025年

作者：刘琼外交学院

近年来，随着国际力量对比变化，关于霸权衰落的讨论层出不穷。面对日渐式微的霸权地位，美国通过多种途径积极护持霸权，并利用国际事件巩固全球领导力。在2022年乌克兰危机升级前后，美国利用自身优势和联盟网络，积极运用作为美国霸... 详细信息

近年来，随着国际力量对比变化，关于霸权衰落的讨论层出不穷。面对日渐式微的霸权地位，美国通过多种途径积极护持霸权，并利用国际事件巩固全球领导力。在2022年乌克兰危机升级前后，美国利用自身优势和联盟网络，积极运用作为美国霸权护持核心机制的叙事力和传播力，企图加强其全球霸权地位。叙事力通过背景设定、身份塑造和情节编排，赋予美国行动“合法性”；传播力则通过情感动员、规则限制和信息操控，协助美国设置议程、引导舆论。两者共同塑造美国的物质性、网络性和观念性权力，旨在维护美国霸权地位。分析美国叙事有助于洞悉其叙事的方式和策略，深化对安全与危机叙事的理解，也为中国更好地建构自身叙事、传播相应政策主张提供启示。

关键词：叙事力传播力霸权护持美国霸权乌克兰危机

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一种短杆状耐辐射菌的分离与鉴定

微生物学报 2003年第3期43卷 301-307页

作者：吕星邢瑞云周绪斌刘琼明郑晖军事医学科学院放射医学研究所北京100850 中国科技大学研究生院北京100039

从北京地区公园湖岸土壤中分离到一株橙红色杆状耐辐射菌 ,细胞壁革兰氏染色为阴性 ,电镜显示菌体大小为 0 6μm～ 1 6μm ,略大于日本学者报道的Deinobactergrandis菌 ,过氧化氢酶的含量和分子量不同于D .radioduransR1菌 ,分离菌的 ... 详细信息

从北京地区公园湖岸土壤中分离到一株橙红色杆状耐辐射菌 ,细胞壁革兰氏染色为阴性 ,电镜显示菌体大小为 0 6μm～ 1 6μm ,略大于日本学者报道的Deinobactergrandis菌 ,过氧化氢酶的含量和分子量不同于D .radioduransR1菌 ,分离菌的 (G +C)mol%含量为 70 7% ,1 6SrDNA序列分析表明 ,分离到的杆状耐辐射菌 (RR5 33 2 ) 1 6SrRNA基因序列与Deinobactergrandis菌高度同源 ,提示RR5 33 2归于Deinobacter菌属 ,并可能是该菌属中的一个新种。

关键词：短杆状耐辐射菌鉴定细菌分离辐射

嗜热烟曲霉SOD的性质表征及对毕赤酵母菌耐受性的影响

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中国食品学报 2025年

作者：崔保宇卢海强王玉印刘琼田洪涛谷新晰河北农业大学食品科技学院北京盛拓达生物技术有限公司

基于毕赤酵母的密码子偏好性及高效表达规律，对嗜热烟曲霉来源的超氧化物歧化酶afSOD基因进行优化，使GC含量由59%降至41%，CAI值由0.69优化为0.96，优化前、后基因序列一致性为73.8%。经测定，重组菌株诱导72 h，酶活力可达213.78 U/m... 详细信息

基于毕赤酵母的密码子偏好性及高效表达规律，对嗜热烟曲霉来源的超氧化物歧化酶afSOD基因进行优化，使GC含量由59%降至41%，CAI值由0.69优化为0.96，优化前、后基因序列一致性为73.8%。经测定，重组菌株诱导72 h，酶活力可达213.78 U/mL。该重组酶AfSOD在pH 8.0和40 ℃条件下，具有最高催化活力，在中性环境和40～50 ℃稳定。金属离子Cu2+对该酶活性的促进作用尤为显著，5 mmol/L的Cu2+酶活提高80%，而Fe2+则表现出明显的抑制效应。重组酶AfSOD对DPPH和羟自由基具有明显的清除作用，分别达到（97.65±1.46）%和（89.48±2.53）%。此外，重组酶AfSOD的高效表达可显著增强酵母菌株对温度、渗透压、盐、乙酸和乙醇的耐受性。本研究不仅为超氧化物歧化酶高效制备提供了一定的技术支撑，也为增强酵母菌生产耐受性提供理论参考。

关键词：超氧化物歧化酶密码子优化高效表达酶学性质耐受性

温郁金连作及轮作田菁对土壤细菌和真菌群落的影响

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热带农业科学 2025年

作者：徐朗管艳辉王波刘琼光金自学海南回元堂药业有限公司华南农业大学植物保护学院海南渊源农业科技有限公司

为探究温郁金连作和轮作状态下根际土壤微生物的种群差异，揭示温郁金连作障碍机制。采用PacBio Sequel微生物3代测序手段，对连作、与田菁轮作及未种植温郁金的3种土壤进行真菌、细菌种群及多样性分析。结果表明，在温郁金田菁轮作土... 详细信息

为探究温郁金连作和轮作状态下根际土壤微生物的种群差异，揭示温郁金连作障碍机制。采用PacBio Sequel微生物3代测序手段，对连作、与田菁轮作及未种植温郁金的3种土壤进行真菌、细菌种群及多样性分析。结果表明，在温郁金田菁轮作土壤中，绿弯菌门Chloroflexi细菌的丰度增加，大量未归类鉴定的细菌属Norank和未归类的细菌主成分增加，且酸菌属Acidothermus和鞘脂单胞菌属Sphingomonas等细菌数量增加。在温郁金连作土壤中，各种病原真菌的种属数量增加；而在轮作的土壤中，一些具有生防功能的真菌如聚孢霉属clonostachys，木霉属Trichoderma等数量增加。本研究对于利用微生物菌剂克服温郁金连作障碍具有参考价值。

关键词：温郁金连作田菁轮作土壤微生物多样性分析