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组合策略提高枯草芽孢杆菌中几丁二糖脱乙酰酶的胞外表达

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食品与发酵工业 2024年

作者：刘杨韬李阳阳贾士儒侯颖天津科技大学生物工程学院江南大学未来食品科学中心

几丁二糖脱乙酰酶（diacetylchitobiose deacetylase， Dac）能够将乙酰氨基葡萄糖（N-acetylglucosamine， GlcNAc）水解成生物活性物质氨基葡萄糖（glucosamine， GlcN），而高效生产Dac是实现该催化过程的关键。以一株表达Dac的Bacil... 详细信息

几丁二糖脱乙酰酶（diacetylchitobiose deacetylase， Dac）能够将乙酰氨基葡萄糖（N-acetylglucosamine， GlcNAc）水解成生物活性物质氨基葡萄糖（glucosamine， GlcN），而高效生产Dac是实现该催化过程的关键。以一株表达Dac的Bacillus subtilis BS-P43-NMK-T0为出发菌株，首先筛选了12种信号肽，其中，信号肽NprB引导Dac分泌能力最强，并且优化其功能区域后，重组菌株BS-P43-NMK-T4-N1的胞外酶活力达到69.83 U/mL；随后，筛选了3个诱导型启动子，其中启动子Pgrac100诱导表达效果最好，优化诱导条件后重组菌株BS-NMK-T4-N1-Pgrac的胞外酶活力提高至88.92 U/mL；当发酵条件为接种量4%、葡萄糖20 g/L（碳源）和营养肉汤10 g/L（氮源），胞外Dac酶活力达到127.59 U/mL，而在摇瓶中补加葡萄糖可以使Dac活性进一步提高至144.25 U/mL；最后，在3-L发酵罐中进行放大培养，胞外Dac活性为319.63 U/mL，是出发菌株胞外Dac活性的7.09倍。该研究为酶转化法制备GlcN的工业化生产提供基础研究。

关键词：几丁二糖脱乙酰酶枯草芽孢杆菌信号肽启动子发酵优化

基于Keap1/Nrf2/ARE通路探讨槲皮素对LPS诱导的急性肾损伤大鼠铁死亡影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：杨昊若于大君张昱杨斌中国中医科学院西苑医院天津中医药大学

目的：基于Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路，探讨槲皮素对脂多糖(LPS)诱导急性肾损伤大鼠铁死亡的影响及治疗作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、槲皮素高、低(... 详细信息

目的：基于Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路，探讨槲皮素对脂多糖(LPS)诱导急性肾损伤大鼠铁死亡的影响及治疗作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、槲皮素高、低(100、10 mg·kg-1)剂量组、铁死亡抑制剂(FER1)组(Ferrostatin 1，5 mg·kg-1)、槲皮素高剂量+Nrf2抑制剂(ML385)组(ML385，30 mg·kg-1)。除正常组外各组通过腹腔注射LPS(10 mg·kg-1)制备AKI大鼠模型。造模成功后，各给药组相应剂量药物干预，正常组、模型组给予等量生理盐水，干预周期为3周。生化检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)水平，考察大鼠肾功能；酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及白细胞介素(IL1-β、IL-6)；检测肾组织Fe2+、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平；苏木精-伊红染色(HE)、马松染色(Masson)及高碘酸希夫染色(PAS)法观察肾组织病理形态变化；透射电子显微镜观察线粒体形态变化；免疫荧光法(IF)检测肾组织ROS水平；免疫组化法(IHC)法及实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测Keap1、Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)、转铁蛋白受体(TFR1)、KIM-1蛋白及mRNA表达。结果:与正常组相比，模型组大鼠血清Scr、Bun、TNF-α、IL-1β、IL-6，肾组织Fe2+、MDA含量均显著升高，SOD、GSH含量明显降低(P<0.01)；大鼠肾组织病理损伤严重；线粒体铁死亡特征性损伤明显且数量减少；肾组织ROS水平明显上升；肾组织中Keap1、TFR1、KIM-1蛋白及mRNA表达明显升高，Nrf2、HO-1、Gpx4表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较，槲皮素各剂量组及FER1组血清Scr、Bun、TNF-α、IL-1β、IL-6，肾组织Fe2+、MDA水平呈现不同程度的降低，SOD、GSH含量显著增强(P<0.05)；大鼠肾组织病理损伤得到明显缓解；线粒体损伤好转且数量增多；肾组织ROS水平显著降低；肾组织Keap1、TFR1、KIM-1蛋白及mRNA水平明显降低，Nrf2、HO-1、Gpx4表达升高明显，其中槲皮素高剂量组损伤改善最明显(P<0.05)。与槲皮素高剂量组相比，ML385组可明显削弱槲皮素对AKI大鼠的保护作用(P<0.05)。结论：槲皮素可有效抑制AKI大鼠铁死亡，改善肾组织损伤、修复大鼠肾功能，其机制或与激活Keap1/Nrf2/ARE通路有关。

关键词：急性肾损伤槲皮素铁死亡 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路大鼠

染料木素滴丸的制备及在比格犬体内药动学考察

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中国医院药学杂志 2024年

作者：陈永顺杨斌商丘医学高等专科学校基础医学部广西医科大学药学院

目的：制备染料木素滴丸，提高染料木素口服吸收生物利用度。方法：选择PEG4000占基质百分比、基质与药物质量比及滴距作为主要影响因素，Box-Behnken效应面法筛选染料木素滴丸处方。X粉末衍射法分析染料木素在滴丸中存在状态，测定溶... 详细信息

目的：制备染料木素滴丸，提高染料木素口服吸收生物利用度。方法：选择PEG4000占基质百分比、基质与药物质量比及滴距作为主要影响因素，Box-Behnken效应面法筛选染料木素滴丸处方。X粉末衍射法分析染料木素在滴丸中存在状态，测定溶解度和溶出度等。以染料木素胶囊为对比，考察染料木素滴丸在比格犬体内药动学行为。结果：染料木素滴丸最佳处方工艺为：PEG4000占基质百分比为49.8%，基质与药物质量比为3.05:1，滴距为8.0 cm。染料木素在滴丸中转变为无定型状态，溶解度提高至13.58倍，在60 min累积溶出度达94.89%。药动学结果显示染料木素滴丸达峰时间(tmax)提前至（1.97±0.70）h，达峰浓度(Cmax)和生物利用度分别提高至2.87倍和2.49倍。结论：染料木素滴丸处方工艺简单，溶出度和生物利用度得到明显提高。

关键词：染料木素滴丸累积溶出度口服吸收药动学

社会学制度主义视角下职教高考改革的现实困境与突破路径

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教育与职业 2024年第7期1055卷 43-49页

作者：陈博旺刘杨华中师范大学教育学院湖北武汉430079 聊城市教育考试与教学研究院山东聊城252000

职教高考是为了培养应用型高技能人才而推出的一种考试招生形式。基于社会学制度主义,职教高考制度建设包括规制性要素、规范性要素、文化—认知要素,三者相互作用,是一个有机整体。当前我国职教高考改革面临以下困境:制度建设基础薄弱... 详细信息

职教高考是为了培养应用型高技能人才而推出的一种考试招生形式。基于社会学制度主义,职教高考制度建设包括规制性要素、规范性要素、文化—认知要素,三者相互作用,是一个有机整体。当前我国职教高考改革面临以下困境:制度建设基础薄弱,职教高考认同氛围欠缺;制度供给不规范,职教生向上通道难打通;制度标准不统一,职教高考的范围设定存在局限性;制度评价体系不健全,素质技能匹配性不足等。为此,应提供社会制度保障,营造良好文化氛围;培育和增强内生动力,打通向上通道和流通机制;发挥合力作用,促进职普融通;改革评价制度,推动纵深变革。

关键词：职教高考社会学制度主义现实困境突破路径

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脂肪间充质干细胞治疗急性肝损伤的分子机制

中国组织工程研究 2025年第23期29卷 5041-5050页

作者：杨娜刘杨郝慧琴山西中医药大学中西医结合基础实验室山西省晋中市030619

背景:急性肝损伤是由多种病因诱发的肝脏损害,如未及时治疗则会发展成急性肝衰竭,严重影响患者的生命安全。由于肝脏是人体最大的免疫器官和代谢器官,目前治疗急性肝损伤尚无最优方案。脂肪间充质干细胞因具有多向分化潜能和免疫调节活... 详细信息

背景:急性肝损伤是由多种病因诱发的肝脏损害,如未及时治疗则会发展成急性肝衰竭,严重影响患者的生命安全。由于肝脏是人体最大的免疫器官和代谢器官,目前治疗急性肝损伤尚无最优方案。脂肪间充质干细胞因具有多向分化潜能和免疫调节活性已逐渐成为治疗急性肝损伤的有效工具。目的:综述目前脂肪间充质干细胞及其经不同方式修饰后治疗急性肝损伤的进展和分子机制。方法:从PubMed、Web of Science与中国知网数据库中检索2000-2023年发表的相关文献,以“Acute liver injury,liver injury,Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell,liver Injury Repair,stem cell transplantation,stem cell repair,Cell surface engineering,stem cell modification”为英文检索词,以“急性肝损伤,肝损伤,脂肪间充质干细胞,肝损伤修复,干细胞移植,干细胞修复,干细胞修饰”为中文检索词,最终检索筛选出该领域最新研究进展的62篇文献进行归纳分析。结果与结论:(1)脂肪间充质干细胞作为一种具有多向分化潜能的干细胞治疗急性肝损伤具有生物学优势,较其他两种主要间充质干细胞类型——骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞具有来源丰富、获取便捷、医学伦理问题少的特点,且较骨髓间充质干细胞的自我更新能力强。(2)脂肪间充质干细胞可以通过降低免疫反应、分化为肝细胞、分泌生长因子和外泌体等多种途径,降低血清炎症因子表达,减少肝脏组织炎性细胞浸润,抑制细胞焦亡和自噬,发挥抗凋亡作用,促进肝窦内皮细胞和肝细胞再生等分子机制改善肝损伤;目前尚无研究表明何种机制为脂肪间充质干细胞治疗急性肝损伤的最佳机制,多数观点认为这些分子机制之间相互影响相互作用协同发挥治疗作用。(3)生物材料修饰和药物预处理等方式可以提升脂肪间充质干细胞治疗急性肝损伤的疗效:一方面,生物材料和药物修饰可以提升脂肪间充质干细胞自身的功能,如提高增殖迁移能力,上调其分泌的生长因子水平,增强抗炎能力等,从而促进脂肪间充质干细胞在损伤部位存活;另一方面,生物材料和药物修饰可以抑制损伤部位炎性细胞活化,促进血管生长,改善损伤部位环境从而提高移植成功率。(4)总之,脂肪间充质干细胞可以通过分泌生长因子和外泌体、发挥免疫调节作用及促进肝脏再生等途径在治疗急性肝损伤中发挥重要作用。随着科学技术的发展,生物材料与药物修饰可以提升脂肪间充质干细胞的自我更新能力,改善急性肝损伤的局部微环境,为进一步促进脂肪间充质干细胞治疗急性肝损伤的临床应用提供新的思路。

关键词：急性肝损伤脂肪间充质干细胞肝脏脂肪组织细胞移植细胞修饰细胞工程损伤修复

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CA125、CEA、CYFRA21-1、CA19-9、SCC-Ag对肺腺癌的诊断价值及术后复发的预测价值

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中国医师杂志 2024年第2期26卷 228-233页

作者：韩锦胜杨斌河北省沧州中西医结合医院综合外科沧州061000

目的探讨血清肿瘤标志物检测对肺腺癌的诊断价值及术后复发的预测价值。方法选取2018年12月至2020年12月河北省沧州中西医结合医院收治的100例肺腺癌患者(建模组)和100例肺部良性疾病患者(对照组)作为研究对象,另选取2016年12月至2017... 详细信息

目的探讨血清肿瘤标志物检测对肺腺癌的诊断价值及术后复发的预测价值。方法选取2018年12月至2020年12月河北省沧州中西医结合医院收治的100例肺腺癌患者(建模组)和100例肺部良性疾病患者(对照组)作为研究对象,另选取2016年12月至2017年12月收治的50例肺腺癌患者作为验证组,比较建模组和对照组患者血清糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白21片段(CYFRA21-1)、糖类抗原19-9(CA19-9)和鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估CA125、CEA、CYFRA21-1、CA19-9、SCC-Ag单独及联合检测对肺腺癌的诊断价值;单、多因素分析影响肺腺癌患者术后复发的危险因素;采用R软件构建预测肺腺癌患者术后复发的列线图模型,并构建危险分层系统。结果建模组患者CA125、SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1、CA19-9水平均明显高于对照组(均P<0.05)。ROC曲线显示CA125、CEA、CYFRA21-1、CA19-9、SCC-Ag联合检测对肺腺癌具有较高的诊断价值,其曲线下面积(AUC)为0.903(95%CI:0.865~0.954);CEA、CA125、CA19-9、CYFRA21-1水平升高是影响肺腺癌患者术后复发的独立危险因素(均P<0.05)。通过危险分层将患者分为极低风险组(总分<56分)、低风险组(56分≤总分<132分)、中风险组(132分≤总分<186分)和高风险组(总分≥186分),生存曲线结果表明,不同危险分层系统患者术后复发率间差异有统计学意义(P<0.05)。结论CA125、CEA、CYFRA21-1、CA19-9、SCC-Ag联合检测对肺腺癌具有较高的诊断价值,其中CA125、CEA、CYFRA21-1、CA19-9对患者术后复发具有一定的预测价值。

关键词：肺腺癌复发生物标记,肿瘤列线图

体重自我污名对青少年锻炼逃避行为的影响机制:基于压力与应对交互作用理论的实证分析

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北京体育大学学报 2024年第5期47卷 19-32页

作者：郭文盂小康刘杨湖南师范大学体育学院湖南长沙410012 湖南师范大学体适能与运动康复湖南省重点实验室湖南长沙410012 湖南师范大学湖南省体育公共服务研究基地湖南长沙410012

体重自我污名成为当前超重肥胖研究领域的热点命题。然而,现有研究局限于从体重认同威胁、内化社会态度、锻炼动机等认知视角,对体重自我污名影响大学生、成年人锻炼逃避行为的机制进行解释。研究基于压力与应对交互作用理论,从社交外... 详细信息

体重自我污名成为当前超重肥胖研究领域的热点命题。然而,现有研究局限于从体重认同威胁、内化社会态度、锻炼动机等认知视角,对体重自我污名影响大学生、成年人锻炼逃避行为的机制进行解释。研究基于压力与应对交互作用理论,从社交外貌焦虑情绪视角,对839名青少年进行调查,探讨体重自我污名对青少年锻炼逃避行为的影响机制。结果表明:1)体重自我污名对青少年锻炼逃避行为有显著的正向影响;2)负面外貌评价恐惧部分中介体重自我污名与青少年锻炼逃避行为的关系;3)社会情绪能力负向调节负面外貌评价恐惧与青少年锻炼逃避行为的关系;4)社会情绪能力调节体重自我污名通过负面外貌评价恐惧对青少年锻炼逃避行为影响的中介过程,起着有调节的中介效应。研究不仅拓展了体重自我污名的理论空间,而且也为政府、学校、家庭化解体重自我污名青少年锻炼逃避行为提供了实践对策。

关键词：青少年体重自我污名负面外貌评价恐惧社会情绪能力锻炼逃避行为

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喷射混凝土回弹量控制技术研究

公路 2024年第5期69卷 403-408页

作者：彭成炎李晓龙刘杨中交中南工程局有限公司长沙市410000

为了解决隧道施工中喷射混凝土回弹量过大的问题,通过室内试验结合现场试验的方式进行喷射混凝土配方及湿喷工艺参数的优化研究,提升喷射混凝土工作性能,降低回弹率。主要研究结论:(1)通过正交试验对影响混凝土工作性能的内因组分进行研... 详细信息

为了解决隧道施工中喷射混凝土回弹量过大的问题,通过室内试验结合现场试验的方式进行喷射混凝土配方及湿喷工艺参数的优化研究,提升喷射混凝土工作性能,降低回弹率。主要研究结论:(1)通过正交试验对影响混凝土工作性能的内因组分进行研究,确定配合比参数、矿物掺合料对喷射混凝土工作性能的影响程度,得到优化混凝土配方;(2)通过正交试验结合现场试验的方式,确定湿喷工艺对回弹率的影响程度,并结合优化成果在现场进行回弹抑制效果验证。

关键词：喷射混凝土回弹量工作性能喷射工艺

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国产依托红霉素片和颗粒质量分析

中国抗生素杂志 2024年第4期49卷 361-366页

作者：邹宇姚兰刘杨傅蓉辽宁省检验检测认证中心沈阳110036 辽宁省药品检验检测院沈阳110036

目的对国内上市的依托红霉素片和颗粒的质量进行评价。方法依据现行法定质量标准,对市场中的依托红霉素片、颗粒进行检验,统计分析依托红霉素片、颗粒的质量总体水平,比较不同企业产品的质量。根据专题调研和标准检验结果,结合文献分析... 详细信息

目的对国内上市的依托红霉素片和颗粒的质量进行评价。方法依据现行法定质量标准,对市场中的依托红霉素片、颗粒进行检验,统计分析依托红霉素片、颗粒的质量总体水平,比较不同企业产品的质量。根据专题调研和标准检验结果,结合文献分析,针对依托红霉素标准中组分及有关物质、溶出度、含量测定等的不足开展探索性研究。结果本次抽检涉及的4个生产企业的23批依托红霉素片和16个生产企业的154批依托红霉素颗粒按法定标准检验,有176批次符合规定,合格率为99.4%。探索性研究采用新建的组分和有关物质测定方法,对依托红霉素原料和制剂的组分和有关物质进行了考察;按新增和修订的溶出度检查法,对20家企业的样品的溶出曲线进行了考察;含量测定时,应根据产品的处方工艺情况选择水解条件,才能保证含量测定结果的准确性。结论依托红霉素片和颗粒质量状况较好,现行质量标准中项目和方法有待进一步完善。

关键词：依托红霉素片依托红霉素颗粒质量分析抽检