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鱼源抗菌肽“CF-14”的抑菌机制及应用性研究

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鱼源抗菌肽“CF-14”的抑菌机制及应用性研究

作者：刘权伟渤海大学

学位级别：硕士

本论文以课题组前期从鲶鱼体表黏液中分离纯化的抗菌肽“CF-14”(RIVELTLPRVSVRL-NH)为研究对象。利用生物信息学对CF-14氨基酸序列基本性质进行预测,通过合成鱼源抗菌肽CF-14,对其基本性质进行表征,以腐败希瓦氏菌和大肠杆菌为靶标菌,... 详细信息

本论文以课题组前期从鲶鱼体表黏液中分离纯化的抗菌肽“CF-14”(RIVELTLPRVSVRL-NH)为研究对象。利用生物信息学对CF-14氨基酸序列基本性质进行预测,通过合成鱼源抗菌肽CF-14,对其基本性质进行表征,以腐败希瓦氏菌和大肠杆菌为靶标菌,深入探究CF-14的抑菌机理。最后,成功制备PLA/CF-14纳米纤维膜,并对纺丝膜性质及抑菌效果进行表征和验证。主要研究结果如下:1.利用生物信息学对鱼源抗菌肽CF-14氨基酸序列分析得出,CF-14在抗菌肽数据库中相似度最高的仅为40%,且具有阳离子性、两亲性及热稳定性;结构分析显示CF-14中部及两端呈现无规则卷曲,其余部分为延伸链,且延伸链和无规则卷曲方式各占50%;跨膜性预测CF-14不会在膜上形成跨膜离子通道,也不会插入细菌细胞膜使其破坏,预测其可能不是膜作用型肽;毒性及溶血性分析显示CF-14没有毒性且不会使红细胞发生溶血。另外,CF-14氨基酸序列抑菌性研究发现,增强电荷性和酰胺化修饰对抗菌肽抑菌活性影响较大,肽链中部的脯氨酸及两端的氨基酸对抗菌肽抑菌性至关重要。2.根据CF-14氨基酸序列对其进行合成,并通过质谱检测对合成肽的准确性进行验证。体外抑菌试验及相关理化性质研究得出,CF-14对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有较强抑制作用,对腐败希瓦氏菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为62.5μg/mL和31.3μg/mL;溶血性和毒性实验表明,CF-14对绵羊红细胞无明显溶血现象,且在1 mg/mL浓度下仍然不会对293T细胞的存活率产生影响;通过检测抗菌肽在不同环境下抑菌性的变化,得出CF-14在高温和强酸性环境下活性会遭到一定程度破坏且对酶的敏感性较强。3.以腐败希瓦氏菌和大肠杆菌为靶标菌,对CF-14抑菌机理进行探究。核酸泄露检测发现,CF-14可以使细菌核酸发生泄露;扫描电镜发现,开始阶段细胞膜表面出现轻微的穿孔现象,但细胞整体保持完整形态,12 h后CF-14处理的细胞出现明显的破裂崩塌;圆二色谱检测,当CF-14处于模拟细胞膜环境时,其α-螺旋结构明显增加;激光共聚焦显微镜观察证实了CF-14能够进入细菌细胞并在细胞质中累积,暗示了抗菌肽可能存在胞内作用靶点;核酸电泳结果表明,高浓度的抗菌肽可以与细菌DNA结合;分子对接实验表明,CF-14竞争性地结合在DnaK的常规底物结合位点,从而抑制了细菌细胞内未成熟的肽链与DnaK结合,并最终影响细菌。4.通过静电纺丝技术成功制备PLA/CF-14纳米纤维膜。加入CF-14后,PLA纺丝纤维直径减小且更加均匀,纤维方向随机相互交叉成网络结构;红外光谱检测发现,共纺纤维中同时出现CF-14和PLA的特征峰,且两者为物理性结合;X射线衍射分析发现,CF-14的加入使PLA纤维结晶度减小,分子链的成核能力下降,最终导致聚合物的结晶能力变弱;拉伸测试得出,CF-14加入会使纳米纤维膜抵抗拉伸的能力增强,延伸能力下降,韧性变差;另外,PLA/CF-14纳米纤维膜仍然具有很好的抑菌活性,可以明显抑制腐败希瓦氏菌的生长。

关键词：抗菌肽腐败希瓦氏菌大肠杆菌抑菌机制静电纺丝

壳聚糖/香兰素/聚乙烯醇共纺纳米纤维膜的性质及其在大菱鲆保鲜中的应用

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食品科学 2021年第5期42卷 221-227页

作者：梅佳林刘权伟李婷婷励建荣牟伟丽郭晓华渤海大学食品科学与工程学院辽宁锦州121013 大连民族大学生命科学学院辽宁大连116600 蓬莱京鲁渔业有限公司山东烟台265600 山东美佳集团有限公司山东日照276815

本研究以壳聚糖(chitosan,CS)、香兰素(vanillin,V)和聚乙烯醇(polyethylene alcohol,PVA)为原料,采用单轴静电纺丝工艺制备CS/V/PVA共纺纳米纤维膜,通过场发射扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱、X射线衍射、差示扫描量热分析和热重... 详细信息

本研究以壳聚糖(chitosan,CS)、香兰素(vanillin,V)和聚乙烯醇(polyethylene alcohol,PVA)为原料,采用单轴静电纺丝工艺制备CS/V/PVA共纺纳米纤维膜,通过场发射扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱、X射线衍射、差示扫描量热分析和热重分析对CS/V/PVA共纺纳米纤维膜的形貌和结构进行表征,并以大菱鲆优势腐败菌——腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)为靶标菌,对其抑菌活性进行测定,并考察CS/V/PVA共纺纳米纤维膜应用于大菱鲆的保鲜效果。结果表明:CS/V/PVA共纺纳米纤维膜的微观结构良好,纤维直径均匀分布在200~350 nm之间;纤维膜各组分之间存在相互作用,香兰素分子中的醛基能与CS分子中的氨基反应形成席夫碱键,且CS、香兰素、PVA分子间有氢键形成,降低了膜的初始熔融温度。此外,CS/V/PVA共纺纳米纤维膜对腐败希瓦氏菌具有较强的抑制作用,4℃大菱鲆保鲜实验结果表明CS/V/PVA共纺纳米纤维膜能有效延长大菱鲆鱼片的货架期。

关键词：静电纺丝大菱鲆壳聚糖香兰素腐败希瓦氏菌

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脑血栓42例中医辨证治疗效果观察

内蒙古中医药 2018年第8期37卷 18-19页

作者：刘权伟广东省河源市东源南方中西医门诊部广东河源517000

目的:探究中医辨证治疗脑血栓的临床效果。方法:将我院2017年1月~2018年1月收治的84例脑血栓患者作为研究对象,随机分为西医治疗的对照组(n=42)与中医辨证治疗的观察组(n=42),对比分析两组临床效果及患者满意度。结果:(1)两组干预后运... 详细信息

目的:探究中医辨证治疗脑血栓的临床效果。方法:将我院2017年1月~2018年1月收治的84例脑血栓患者作为研究对象,随机分为西医治疗的对照组(n=42)与中医辨证治疗的观察组(n=42),对比分析两组临床效果及患者满意度。结果:(1)两组干预后运动能力、神经恢复能力、语言能力、生活自理能力均优于治疗前,观察组在干预后评分比对照组高(P<0.05);(2)经统计分析,观察组全血黏度、血浆黏度、红细胞压积以及红细胞聚集指数等血液流变学指标均比治疗前与对照组好(P<0.05);(3)观察组治疗的总有效率为92.86%,显著高于对照组的76.19%,观察组满意度90.48%要比对照组71.43%高(P<0.05)。结论:中医辨证治疗脑血栓的临床效果显著,能提高治疗的总有效率,有助于提高生活质量,提高患者满意度,值得临床推广。

关键词：脑血栓中医辨证总有效率患者满意度

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探讨中医辨证治疗慢性支气管炎的效果

中医临床研究 2018年第28期10卷 108-110页

作者：刘权伟广东省河源市东源南方中西医门诊部广东河源517000

目的:探讨中医辨证治疗慢性支气管炎的效果。方法:以我院2016年5月-2017年5月收治的慢性支气管炎患者60例作为观察研究对象,随机分为常规治疗的对照组(n=30)以及中医辨证治疗的观察组(n=30),统计分析两组患者咳嗽消失时间、喘息消失时... 详细信息

目的:探讨中医辨证治疗慢性支气管炎的效果。方法:以我院2016年5月-2017年5月收治的慢性支气管炎患者60例作为观察研究对象,随机分为常规治疗的对照组(n=30)以及中医辨证治疗的观察组(n=30),统计分析两组患者咳嗽消失时间、喘息消失时间、咳痰消失时间、住院天数,并统计分析两组患者治疗的总有效率及不良反应发生率。结果:(1)经过统计分析,观察组患者咳嗽消失时间[(5.3±1.6)d]、喘息消失时间[(3.2±0.5)d]、咳痰消失时间[(8.7±1.9)d]、住院时间[(7.5±1.7)d]均低于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论:中医辨证治疗治疗慢性支气管炎的总有效率更高,复发率低,并发症少,高效安全,值得临床推广。

关键词：中医辨证治疗慢性支气管炎总有效率复发率

氨氯地平联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的临床效果

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第5期 132-135页

作者：刘权伟河北省河间市景和镇卫生院河北沧州062450

探讨氨氯地平联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的临床效果。方法:将72例高血压合并冠心病患者随机均分两组,接受氨氯地平治疗的为对照组,在其基础上联合阿托伐他汀钙片治疗的为研究组,对比临床治疗效果、血压和血脂水平、免疫功... 详细信息

探讨氨氯地平联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的临床效果。方法:将72例高血压合并冠心病患者随机均分两组,接受氨氯地平治疗的为对照组,在其基础上联合阿托伐他汀钙片治疗的为研究组,对比临床治疗效果、血压和血脂水平、免疫功能指标、血管内皮功能指标、炎性因子水平。结果:研究组临床治疗效果、血压和血脂水平、免疫功能指标、血管内皮功能指标以及炎症因子水平均优于对照组(P<0.05)。结论:氨氯地平联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的临床效果较好,可明显降低炎性因子水平,改善患者血压和血脂水平,优化免疫功能指标以及血管内皮功能指标。

关键词：氨氯地平阿托伐他汀钙片高血压冠心病临床效果

清热化痰汤联合西药治疗化脓性扁桃体炎(痰热郁结)随机平行对照研究

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实用中医内科杂志 2018年第8期32卷 52-55页

作者：刘权伟河源市东源南方中西医门诊部广东河源517000

[目的]观察清热化痰汤联合西药治疗化脓性扁桃体炎(痰热郁结)疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将126例患者按就诊顺序号方法简单随机分为两组。对照组63例,先物理降温,布洛芬,1粒/次,2次/d;阿奇霉素0.5g+0.9%氯化钠250mL,静滴,1次/d,... 详细信息

[目的]观察清热化痰汤联合西药治疗化脓性扁桃体炎(痰热郁结)疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将126例患者按就诊顺序号方法简单随机分为两组。对照组63例,先物理降温,布洛芬,1粒/次,2次/d;阿奇霉素0.5g+0.9%氯化钠250mL,静滴,1次/d,时间>60min,3d;阿奇霉素0.5g/次,1~2次/d,口服。治疗组63例清热化痰汤(忍冬藤、板蓝根、金荞麦各30g,枳壳15g,白芍、薏苡仁各30g,桔梗、藿香各15g,葛根30g,黄芩20g,麻黄10g,细辛3g),煎煮10min,加鱼腥草30g,水煎150mL,1剂/d,早晚温服;西药治疗同对照组。连续治疗7d为1疗程。观测临床表现、退热时间、咽痛消失时间、脓性分泌物消失时间、C反应蛋白、白细胞介素6、血清降钙素原、白细胞计数、不良反应。治疗1疗程(7d),判定疗效。[结果]治疗组临床痊愈25例,有效34例,无效4例,总有效率93.65%;对照组临床痊愈11例,有效36例,无效16例,总有效率74.60%;治疗组疗效优于对照组(P<0.01)。退热时间、咽痛消失时间、脓性分泌物消失时间治疗组均短于对照组(P<0.01)。IL-6、CRP、PCT、白细胞两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.01)。[结论]清热化痰汤联合西药治疗化脓性扁桃体炎(痰热郁结),疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

关键词：急性化脓性扁桃体炎乳蛾痰热郁结清热化痰汤物理降温布洛芬阿奇霉素退热时间咽痛消失时间脓性分泌物消失时间 C反应蛋白白细胞介素6 血清降钙素原白细胞计数中药复方随机平行对照研究

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坐骨神经痛辨证体会

江西中医药 1995年第S1期26卷 83-84页

作者：刘权伟黄卓英广东省广州市合金钢厂医院中医科

坐骨神经痛辨证体会刘权伟，黄卓英（广东省广州市合金钢厂医院中医科５１０４２５）关键词坐骨神经痛，中医药疗法，针刺疗法我院中医种先后治疗坐骨神经痛５０例，疗效得到显著提高。现将我们的粗浅体会介绍如下：１辩证论治由茯苓、... 详细信息

坐骨神经痛辨证体会刘权伟，黄卓英（广东省广州市合金钢厂医院中医科５１０４２５）关键词坐骨神经痛，中医药疗法，针刺疗法我院中医种先后治疗坐骨神经痛５０例，疗效得到显著提高。现将我们的粗浅体会介绍如下：１辩证论治由茯苓、赤芍、当归、川芎、党参、黄芪、熟地...

关键词：坐骨神经痛中医药疗法针刺疗法

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HPLC测定妇炎康浓缩丸中的丹参素钠

光谱实验室 2012年第4期29卷 2186-2190页

作者：韦品清邵兵黄萍刘权伟吴君广州中医药大学中药学院广州市中医院广州市510130 万健门诊广州市510060 山东中医药高等专科学校山东省烟台市264100

建立测定妇炎康片中丹参素钠含量的高效液相色谱方法。采用Waters Symmetry C18色谱柱（3.9mm×150mm,粒径5μm）;乙腈-0.15%磷酸溶液（3：97,V/V）为流动相,检测波长280nm,流速：1mL/min;柱温为25 C。丹参素钠的回归方程为y=7.4413X 10... 详细信息

建立测定妇炎康片中丹参素钠含量的高效液相色谱方法。采用Waters Symmetry C18色谱柱（3.9mm×150mm,粒径5μm）;乙腈-0.15%磷酸溶液（3：97,V/V）为流动相,检测波长280nm,流速：1mL/min;柱温为25 C。丹参素钠的回归方程为y=7.4413X 10^5x＋1.599×10^4,相关系数r=0.9996,线性范围为0.1008—0.2688mg/mL。平均回收率为97.96%,RSD为0.95%。该法操作简单、精密度高、重复性好、检测快速、定量准确,可用于妇炎康浓缩丸的质量控制。

关键词：妇炎康浓缩丸丹参素钠高效液相色谱法

港区市场监管分局多维度为国庆长假“护航” 003

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