检索结果-南通市图书馆

国外医学（微生物学分册） 1997年第5期20卷 4-6页

作者：刘朝奇中国协和医科大学基础医学院

人巨细胞病毒(HCMV)属于DNA肿瘤病毒,有3个可导致细胞恶性转化的形态转化区,另有病毒即刻早期(IE)基因的编码产物对细胞生长进行调控。本文最后探讨了病毒导致细胞恶性转化的可能机制。

关键词：巨细胞病毒转化作用研究进展肿瘤病因

annexinA2基因片段的克隆、表达、纯化及多克隆抗体的制备

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中国免疫学杂志 2012年第1期28卷 67-70页

作者：聂纪芹汪龚泽刘朝奇三峡大学分子生物学研究所宜昌443002

目的:构建人源annexinA2基因片段的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法:从GenBank(BC093056.1)中获得人源annexinA2基因的cDNA序列并根据不含信号肽的编码序列设计引物,用PCR的方法扩增编码an-nexinA2基因部分序列,将其... 详细信息

目的:构建人源annexinA2基因片段的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法:从GenBank(BC093056.1)中获得人源annexinA2基因的cDNA序列并根据不含信号肽的编码序列设计引物,用PCR的方法扩增编码an-nexinA2基因部分序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达annexinA2的蛋白。表达的蛋白产物利用切胶回收的方法纯化,用His抗体进行Western blot鉴定。用纯化的目的蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得annexinA2的抗血清,通过ELISA测定兔多克隆抗体的滴度。在CaSki细胞内采用细胞免疫荧光(CIF)和流式细胞术(FCM)检测内源annexinA2蛋白的表达,用于鉴定制备的多克隆抗体特异性。结果:通过双酶切及测序证实原核表达质粒pET28a(+)-annexinA2构建成功,可在大肠杆菌*** BL21(DE3)中诱导高表达,得到相对分子质量约28 000的annexinA2蛋白。纯化的蛋白免疫日本大白兔后,产生特异的高滴度的抗体(ELISA滴度达1∶640 000)。CIF和FCM结果显示抗血清与肿瘤细胞表达的annexinA2有高度特异的结合活性。结论:构建了annexinA2的原核表达质粒并获得高纯度的蛋白,免疫动物后,获得了特异、高效价的多克隆抗体,为人源annexinA2蛋白的生物学功能及肿瘤治疗的研究提供了实验基础。

关键词：人源annexinA2基因片段原核表达蛋白纯化多克隆抗体

竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脂肪组织炎症的改善作用

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中成药 2019年第2期41卷 436-440页

作者：刘正泰刘朝奇何毓敏张长城袁丁袁成福三峡大学医学院湖北宜昌443002

目的探讨竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脂肪组织炎症的改善作用。方法 48只2月龄大鼠随机分成自然衰老组及竹节参总皂苷低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg),每组12只,待大鼠长至18月龄后,再取12只2月龄大鼠作为正常对照组,竹节参总皂苷... 详细信息

目的探讨竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脂肪组织炎症的改善作用。方法 48只2月龄大鼠随机分成自然衰老组及竹节参总皂苷低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg),每组12只,待大鼠长至18月龄后,再取12只2月龄大鼠作为正常对照组,竹节参总皂苷组大鼠从18月龄开始灌胃给药,连续4个月,每星期停药1 d。HE染色观察脂肪组织形态学变化,RT-PCR法检测脂肪组织白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达,Western blot检测脂肪组织IL-1β、TNF-α、Toll样受体4 (TLR4)、NF-κB、p NF-κB蛋白表达。结果自然衰老组大鼠脂肪细胞排列紊乱,炎症细胞浸润明显增加,坏死及变大的脂肪细胞增多,经竹节参总皂苷处理后上述病理变化得到明显改善。与自然衰老组比较,竹节参总皂苷组IL-6、IL-1β、MCP-1、TNF-αmRNA表达,以及IL-1β、TNF-α、TLR4、NF-κB、p NF-κB蛋白表达均有一定程度下调,以中、高剂量组更显著(P<0. 05)。结论竹节参总皂苷可改善自然衰老大鼠脂肪组织炎症,其机制可能涉及TLR4/NF-κB信号通路。

关键词：竹节参总皂苷自然衰老脂肪组织炎症

人IL-6基因的克隆及其在原核生物中表达及条件的优化

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生物技术通报 2010年第5期26卷 135-140页

作者：史继静刘朝奇杨凡杨祖伟三峡大学分子生物学研究所宜昌443002

构建人白细胞介素6(IL-6)的原核表达载体并优化其表达条件,为IL-6的高效表达提供试验依据。以人T细胞cDNA为模板通过PCR方法扩增IL-6基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,酶切及测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌BL21... 详细信息

构建人白细胞介素6(IL-6)的原核表达载体并优化其表达条件,为IL-6的高效表达提供试验依据。以人T细胞cDNA为模板通过PCR方法扩增IL-6基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,酶切及测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,产物用Western blotting及人IL-6检测试剂盒分析鉴定。在保持菌种不改变的前提下,分别改变IPTG的浓度、培养时间、卡那霉素浓度、培养温度等来优化IL-6表达条件。结果显示,原核表达载体pET28 a(+)-IL-6成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约22 kD的IL-6蛋白,经Western blotting鉴定正确,经人IL-6试剂盒检测显示具有较高的免疫活性。在IPTG浓度400μmol/mL,卡那霉素浓度50μg/mL,40℃培养6 h的条件下,目的蛋白表达量最高,可占总蛋白表达量的40%。成功构建人IL-6原核表达载体且获高效表达,为研究IL-6生物学活性及产品开发提供了试验基础。

关键词： IL-6 原核表达条件优化

蜈蚣提取物对小鼠宫颈肿瘤生长的影响及其作用机制的实验研究

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中药材 2011年第6期34卷 859-864页

作者：周永芹韩莉刘朝奇杜开春李可英三峡大学医学院免疫学重点学科湖北宜昌443000 三峡大学人民医院湖北宜昌443000

目的:研究蜈蚣提取物在体内对宫颈肿瘤生长的影响及其作用机制。方法:观察不同浓度、不同蜈蚣提取物对荷瘤小鼠的生存期、抑瘤率、免疫功能等方面的影响以研究其体内抗肿瘤效应,并探索其作用机制。结果:两种蜈蚣提取物(CE、CA)处理荷瘤... 详细信息

目的:研究蜈蚣提取物在体内对宫颈肿瘤生长的影响及其作用机制。方法:观察不同浓度、不同蜈蚣提取物对荷瘤小鼠的生存期、抑瘤率、免疫功能等方面的影响以研究其体内抗肿瘤效应,并探索其作用机制。结果:两种蜈蚣提取物(CE、CA)处理荷瘤鼠,实验中无一死亡,抑瘤率分别可达52.85%、33.65%;光镜观察实体瘤组织发现盐水对照组瘤组织浸润横纹肌组织中生长旺盛,而药物处理组则普遍可见大量坏死和凋亡;电子透射显微镜观察超微结构发现实验组大量核固缩、边聚的凋亡肿瘤细胞;免疫组化结果显示CE和CA使Bax表达量明显增高,Bc l-2和Survivin表达量降低,但Sm ac的表达无显著差异;CE和CA对VEGF的含量影响不大;胸腺指数和脾脏指数无显著改变;CE组小鼠CD3+的T细胞总数无明显改变,CD4+/CD8+比值、CD19+的B细胞数下降;CA组CD3+以及CD4+细胞下降显著;肝、肾组织切片发现CE、CA在本文实验浓度范围内无明显毒副作用。结论:两种蜈蚣提取物(CE、CA)均可在小鼠体内抑制宫颈肿瘤的生长,通过Bax和Caspase-3介导的线粒体信号转导途径诱导肿瘤组织凋亡机制可能参与了其体内抗肿瘤效应。

关键词：蜈蚣提取物抗瘤活性宫颈肿瘤U14 凋亡免疫功能

超声介导载紫杉醇微泡对小鼠H22皮下移植瘤抑制作用的实验研究

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中国超声医学杂志 2016年第9期32卷 833-836页

作者：于姣姣赵云刘朝奇胡兵黄晶晶赵苗三峡大学医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室三峡大学第二临床医学院超声科

目的探讨超声介导自制载紫杉醇微泡对小鼠H22皮下移植瘤的抑制效果。方法 (1)自制载紫杉醇微泡,并检测其一般特性。(2)建立小鼠H22皮下移植瘤模型,给予紫杉醇微泡+超声处理。绘制肿瘤生长曲线,计算各组抑瘤率,肿瘤行病理组织学检查,免... 详细信息

目的探讨超声介导自制载紫杉醇微泡对小鼠H22皮下移植瘤的抑制效果。方法 (1)自制载紫杉醇微泡,并检测其一般特性。(2)建立小鼠H22皮下移植瘤模型,给予紫杉醇微泡+超声处理。绘制肿瘤生长曲线,计算各组抑瘤率,肿瘤行病理组织学检查,免疫组织化学法检测微血管密度(MVD),Western Blotting检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 (1)微泡呈圆形,表面光滑,平均粒径2.07μm,载药量10.13%,包封率89.58%。(2)紫杉醇微泡+超声组肿瘤生长明显减慢,肿瘤体积和质量明显下降(P<0.05),肿瘤组织HE染色呈现不同程度变性坏死,MVD表达减少,Bax的表达上调,Bcl-2的表达下调(P<0.05)。结论超声介导载紫杉醇微泡可明显抑制小鼠H22皮下移植瘤的生长,并可降低肿瘤组织MVD的表达,促进肿瘤细胞的凋亡。

关键词：超声载紫杉醇微泡 H22皮下移植瘤

超声微泡介导微RNA治疗肝细胞癌的研究进展

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中国医学影像技术 2021年第7期37卷 1082-1085页

作者：邹云雷刘小慧赵云刘朝奇刘爱华三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443000 重庆市梁平区妇幼保健院超声科重庆405200

基因治疗正逐渐成为肝细胞癌(HCC)、尤其晚期HCC的治疗方案。足够剂量的特定微RNA(miRNA)可抑制HCC细胞生长,超声微泡介导基因和药物递送治疗策略可促使miRNA于肿瘤区域靶向释放,从而达到治疗效果。本文对超声微泡介导miRNA治疗HCC研究... 详细信息

基因治疗正逐渐成为肝细胞癌(HCC)、尤其晚期HCC的治疗方案。足够剂量的特定微RNA(miRNA)可抑制HCC细胞生长,超声微泡介导基因和药物递送治疗策略可促使miRNA于肿瘤区域靶向释放,从而达到治疗效果。本文对超声微泡介导miRNA治疗HCC研究进展进行综述。

关键词：癌,肝细胞微泡基因,肿瘤微RNAs 超声检查

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DNA条形码鉴定药用植物的研究进展

时珍国医国药 2015年第1期26卷 181-183页

作者：向婷婷周志勇刘朝奇袁丁三峡大学医学院湖北宜昌443002

DNA条形码是利用基因组中标准的、相对较短的DNA片段来进行物种鉴定的分子诊断新技术,已成为生物分类和鉴定的研究热点。近年来,DNA条形码技术鉴定药用植物的研究发展迅速并日趋成熟。文章简述了DNA条形码技术鉴定药用植物的原理并重点... 详细信息

DNA条形码是利用基因组中标准的、相对较短的DNA片段来进行物种鉴定的分子诊断新技术,已成为生物分类和鉴定的研究热点。近年来,DNA条形码技术鉴定药用植物的研究发展迅速并日趋成熟。文章简述了DNA条形码技术鉴定药用植物的原理并重点介绍了DNA条形码鉴定药用植物的应用,展望其在今后广泛应用于药用植物的鉴定。

关键词： DNA条形码药用植物鉴定

竹节参总提物对H_2O_2诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

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第三军医大学学报 2014年第2期36卷 143-143,169页

作者：杨莉袁丁代艳文狄国杰张长城刘朝奇王婷三峡大学医学院中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

神经退行性疾病是一类严重危害人类健康的常见病。氧化应激存神经退行性疾病的发病中发挥着再要作用。

关键词：竹节参总提物 H2O2 氧化应激凋亡

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重组人多胺氧化酶的原核表达及抗体制备

中国生物工程杂志 2008年第S1期28卷 56-60页

作者：曹春雨王艳林韩钰任玉珊刘朝奇三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所宜昌443002

目的:采用基因重组技术获得有酶活性的重组人多胺氧化酶(polyamine oxidase,PAO)并制备兔抗人多胺氧化酶多克隆抗体。方法:采用RT-PCR法从人非小细胞肺腺癌A549细胞株总RNA中克隆人多胺氧化酶cDNA,构建PAO原核表达质粒pET-15b/PAO并转化... 详细信息

目的:采用基因重组技术获得有酶活性的重组人多胺氧化酶(polyamine oxidase,PAO)并制备兔抗人多胺氧化酶多克隆抗体。方法:采用RT-PCR法从人非小细胞肺腺癌A549细胞株总RNA中克隆人多胺氧化酶cDNA,构建PAO原核表达质粒pET-15b/PAO并转化***的BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达的重组PAO经Ni-NTA亲和层析纯化和透析复性后,化学荧光法测定酶活性。用制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化的重组人PAO蛋白,皮内接种日本大耳白兔以制备多克隆抗体。以ELISA、Western blot和免疫细胞化学法分别检测兔血清中抗体滴度和抗原特异性。结果:纯化并透析复性后的重组人PAO蛋白具备快速氧化特异性底物的酶活性。用此基因重组蛋白制备的抗体具有高抗体滴度和针对人PAO的特异性。结论:本试验建立了人PAO原核表达、纯化系统,获得了有酶活性的高纯度人PAO蛋白并成功制备了兔抗人PAO的多克隆抗体,为以PAO为靶点的抗肿瘤基础和临床研究提供了有力的研究工具。

关键词：多胺氧化酶原核表达抗体制备