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刑事诉讼法实务与案例评析

作者：刘新仿黄刚

来源：南通市图书馆图书评论

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拟南芥吲哚-3-甘油磷酸合酶免疫分析

Acta Botanica Sinica 1999年第7期41卷 751-756页

作者：刘新仿欧阳剑何奕昆李家洋中国科学院遗传研究所

吲哚３甘油磷酸合酶（ＩＧＳ，ｉｎｄｏｌｅ３ｇｌｙｃｅｒｏｌｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＥＣ４．１．１．４８）在色氨酸与吲哚乙酸的生物合成途径中，催化生成吲哚３甘油磷酸。研究该基因的表达调控，对于阐... 详细信息

吲哚３甘油磷酸合酶（ＩＧＳ，ｉｎｄｏｌｅ３ｇｌｙｃｅｒｏｌｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＥＣ４．１．１．４８）在色氨酸与吲哚乙酸的生物合成途径中，催化生成吲哚３甘油磷酸。研究该基因的表达调控，对于阐明高等植物是如何调控色氨酸及生长素合成是十分重要的。利用已克隆的ＩＧＳｃＤＮＡ，构建了谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ，ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＣ２．５．１．１８）与吲哚３甘油磷酸合酶融合蛋白的表达质粒，并将其导入到在异丙基βＤ硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导下能高效表达的ＩＧＳ基因缺陷菌株ｔｒｐＣ９８００λＫＣ大肠杆菌中。高表达的融合蛋白通过谷胱甘肽琼脂糖（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅａｇａｒｏｓｅ）亲和层析和ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化后，用以免疫兔子制备抗血清。免疫印迹法分析表明拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ（Ｌ．）Ｈｅｙｎｈ．）四种常用生态型只合成一种分子量约为４０ｋＤ的吲哚３甘油磷酸合酶蛋白。在Ａｇ＋、紫外线等逆境条件下，ＩＧＳ含量都有较大幅度的增加，这说明ＩＧＳ可能与植物的防御反应紧密相关。

关键词：甘油磷酸合酶免疫印迹法拟南芥

拟南芥色氨酸生物合成途径中PAI基因编码区5′端序列对基因表达的影响

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中国科学（C辑） 1999年第3期29卷 303-309页

作者：何奕昆刘新仿李家洋中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室 DeMontfort大学NormanBorlauy植物研究所中国中心北京100101

将 3个非等位PAI基因的启动子与其编码区 5′端序列及GUS报告基因拼接成表达质粒 ,并转化拟南芥 .GUS活性分析表明 ,PAI基因编码区 5′端序列对维持PAI启动子所驱动的GUS活性是必须的 ,有无该序列对GUS活性影响极大 ,在PAI1和PAI3中相差... 详细信息

将 3个非等位PAI基因的启动子与其编码区 5′端序列及GUS报告基因拼接成表达质粒 ,并转化拟南芥 .GUS活性分析表明 ,PAI基因编码区 5′端序列对维持PAI启动子所驱动的GUS活性是必须的 ,有无该序列对GUS活性影响极大 ,在PAI1和PAI3中相差 6 0～ 1 0 0倍 ,PAI2中相差 1倍左右 .GUS组织化学定位有相似结果 ,具 5′端序列时 ,PAI启动子所驱动的GUS在植株的不同组织器官中有不同程度的表达 ,在叶片的叶肉细胞、保卫细胞中表达 ,但在无叶绿体的表皮细胞中不表达 .因此认为PAI基因的 5′端片段所编码的多肽确有PTP的功能 ,PAI基因产物主要在质体 (叶绿体 )中表现出活性 .

关键词：色氨酸生物合成 PAI基因基因表达拟南芥

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水稻散生突变体的遗传和基因定位研究

科学通报 2003年第21期48卷 2271-2274页

作者：李培金曾大力刘新仿徐聃谷岱李家洋钱前国家植物基因研究中心中国科学院遗传与发育生物学例究所北京100101 中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室杭州310006

分蘖角度是构成水稻理想株型和高产育种的重要农艺性状之一.通过对水稻散生突变体的遗传学分析认为,该散生表型受一隐性核基因控制,与已报道的水稻散生突变体la等位,故将此突变体命名为la-2,而原突变体被重新命名为la-1.利用la-2与w11... 详细信息

分蘖角度是构成水稻理想株型和高产育种的重要农艺性状之一.通过对水稻散生突变体的遗传学分析认为,该散生表型受一隐性核基因控制,与已报道的水稻散生突变体la等位,故将此突变体命名为la-2,而原突变体被重新命名为la-1.利用la-2与w11和浙福802分别杂交产生的F2群体对LA位点进行遗传定位,发现其与第11号染色体上的微卫星标记RM202和RM229连锁,遗传距离分别为10.0和8.0 cM.通过进一步在两标记间发展的6个新的分子标记,将该基因精确地定位于约0.4 cM的区间.为进一步克隆LA基因和探讨水稻分蘖角度的控制机制奠定了良好的基础.

关键词：水稻分蘖角度散生突变体la-2 精细定位遗传基因定位遗传学分析认株型

Expression of. Arabidopsis tryptophan biosynthetic pathway genes: effect of the 5' coding region of phosphoribosylanthranilate isomerase gene

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Science China(Life Sciences) 1999年第3期42卷 274-280,337-338页

作者：何奕昆刘新仿李家洋 1. Plant Biotechnology Laboratory Institute of Genetics Chinese Academy of Sciences China 2. Chinese Center De Montfort University Norman Borlaug Institute for Plant Science Reseach 100101 Beijing China

There are three non-allelic isogenes encoding phosphoribosylanthranilate isomerase (PAI) in Arabidopsis thaliana. The expression plasmids were constructed by fusion of the GUS reporter gene to the three PAI promoters with or without the 5' region encoding PAI N-terminal polypeptides and transferred into Arabidopsis plants by Agrobacterium tumefaciens. Analysis of GUS activity revealed that the PAI 5' coding region was necessary for high expression of GUS activity. GUS activity in transgenic plants transformed with the expression plasmids containing the 5' coding region of PAH or PAD was 60-100-fold higher than that without the corresponding 5' region. However, the effect of 5' coding region of PAI2 gene on the GUS activity was very small (only about 1 time difference) . The GUS histochemical staining showed a similar result as revealed by GUS activity assay. It was expressed in the mesophyll cells and guard cells, but not in the epidermic cells, indicating that the N-terminal polypeptides encoded by the 5' region of PAI genes have the function of PTP.

关键词： phosphoribosylanthranilate isomerase (PAI) tryptophan biosynthetic pathway gene expression and regulation plastid targeting peptide (PTP) Arabidopsis thaliana.

拟南芥突变体mod1:脂肪酸合成受阻引起细胞死亡

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 148-149页

作者：牟中林何奕昆戴亚刘新仿李家洋中国科学院遗传研究所北京100101

植物功能基因组研究:分子生物学与遗传学对策

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 36-37页

作者：李家洋牟中林胡玉欣付志明包方戴亚刘新仿徐卫辉中国科学院遗传研究所北京100101

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抑制衰老的嵌合基因在水稻中的转化

科学通报 1998年第18期43卷 1963-1967页

作者：付永彩丁月云刘新仿孙传清曹守云王东江何锶洁王象坤李良材田文忠中国科学院遗传研究所中国农业大学植物遗传育种系北京100094 中国农业大学植物遗传育种系

利用基因枪法把带有特异衰老基因SAG12 启动子的IPT基因导入水稻 ,经PCR、点杂交以及Southern杂交分析 ,证明外源基因已整合到水稻基因组中 .通过GUS活性、细胞分裂素含量的分析以及T1代转基因植株成熟期的形态观察 ,证明此抑制衰老的... 详细信息

利用基因枪法把带有特异衰老基因SAG12 启动子的IPT基因导入水稻 ,经PCR、点杂交以及Southern杂交分析 ,证明外源基因已整合到水稻基因组中 .通过GUS活性、细胞分裂素含量的分析以及T1代转基因植株成熟期的形态观察 ,证明此抑制衰老的自我调节系统在部分转基因水稻中表达。

关键词：水稻基因枪转化衰老基因叶片嵌合基因

农杆菌介导的抑制衰老的嵌合基因转化籼稻的研究

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农业生物技术学报 2000年第1期8卷 28-32页

作者：付永彩孙传清李自超刘新仿曹守云王象坤李良材田文忠中国农业大学植物遗传育种系!北京100094 中国科学院遗传研究所!北京100101

农杆菌介导的转化法是一种天然的遗传工程,具有诸多优越性.1993年Chan等首次利用农杆菌法成功地将外源基因转入水稻.随后又有一些实验室进行了农杆菌转化水稻的研究,并获得了较高的转化频率.但大部分的实验都是采用标记基因进行的,有用... 详细信息

农杆菌介导的转化法是一种天然的遗传工程,具有诸多优越性.1993年Chan等首次利用农杆菌法成功地将外源基因转入水稻.随后又有一些实验室进行了农杆菌转化水稻的研究,并获得了较高的转化频率.但大部分的实验都是采用标记基因进行的,有用基因转化的报道则较少.同时,籼稻优良品种的转化也较困难.本实验采用抑制衰老的嵌合基因进行转化,以我国生产上的优良籼稻圭630为转化受体,力求获得有应用价值的转基因植株,为生产服务.

关键词：农杆菌转化法转化频率籼稻水稻继代培养基介导