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中国荒诞戏剧是在对西方荒诞戏剧的借鉴、模仿中产生和发展起来的，中西荒诞戏剧有着事实上的影响关系，通过比较，很容易看到二者之间的异同，明晰中国荒诞戏剧从吸纳、误读到新变的发展轨迹。一、吸纳，这是中国当代戏剧面对日渐冷寂的舞台和剧场所做出的一次历史性选择。在对西方荒诞戏剧的搬演、模仿以及对西方荒诞戏剧理论的译介中，中国荒诞戏剧产生了。中西荒诞戏剧因为这种影响关系而在诸多方面呈现出趋同性：首先是“荒诞”概念下的“等待”主题，即“等待”、“虚空”、“无意义”这样的思想主题渗透到了中西荒诞戏剧的全部作品。其次，是非理性美学追求下的内向化品格，即淡化情节、冲突、性格，强化人物心灵的“当下”状态，以此反映出一种更深层次的真实，即“心灵的真实”。再者是“纯粹戏剧性”理论下的“反戏剧”表现形式，中西荒诞戏剧作家们都力求用荒诞的形式或舞台形象表现非理性的荒诞现实。西方荒诞剧在中国找到土壤并产生影响，有其历史和现实的原因与条件：文革及其给人们带来的“信仰危机”，改革开放初期西方哲学思潮的大量涌入，以及艺术家们求新求异的艺术旨趣，这一切便成为荒诞概念及其艺术精髓在中国得以移植的气候和土壤。二、中国荒诞戏剧在向西方荒诞戏剧学习靠拢的同时，误读也必然地产生了。这种误读具体表现为三个方面的移位。首先，是哲学立意上的移位。中国荒诞剧虽重在表现“等待”、“无意义”的荒诞主题，但立意上却又常常于失望中透出些许曙光，表现出一定程度的积极干预和入世的态度，而非西方荒诞剧所具有的世界末日般的绝望。其次，是美学判断上的移位。在西方戏剧艺术家们看来，表现荒诞，其实就是表现“生活本质的真实”，但在中国，许多人将“荒诞”与“荒谬”划等号，将荒诞理解为非现实、不真实，因此，常常呈现出荒诞的碎片，而忽视了生活的真实。再次，是审美形态的移位。荒诞的审美形态是“怪诞”、“陌生化”。西方荒诞剧的怪诞表现为反情节、反人物，尤其是反语言的非理性化原则。中国荒诞剧的怪诞则更倾向于细节的怪诞，而情节、 —— 人物、特别是语言却相对保持完整，因而尚未完全走到反戏剧化的道路上。产生以上各种误读的原因，当然也要归结于社会现实和民族文化的大背景。三、中国荒诞剧由模仿、借鉴开始，但并没有完全脱离民族文化的引力，而是从戏剧本体上发生了深度变异，将西方荒诞剧的伤感悲情逐一淡化，并最终形成了带有中国特色的荒诞喜剧。中国荒诞喜剧形态主要有搬演型、解构型、组装型和原创型四种。其审美特征则可归纳为：闹剧式混乱的舞台呈现;深刻而隐晦的思想表达模式;反讽的美学构成;喜剧的终极效果。中国荒诞戏剧，在所经过的20年不断吸纳、误读和寻求生存与发展的过程中，带给中国剧坛的启示是很多的，至少有一点可以形成共识，这就是：固守“国粹”与全盘西化都是没有前途的，只有接受新观念而又挖掘民族文化的宝贵资源，创造中国式的而又可以与世界“对话”的真正的中国现代戏剧，才是一条值得我们不断探索的戏剧之路。

关键词：荒诞戏剧中西比较吸纳误读新变

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香蕉枯萎病菌4号小种Focfb1和Foccak1的致病功能研究

香蕉枯萎病菌4号小种Focfb1和Foccak1的致病功能研究

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作者：成慧华南农业大学

学位级别：硕士

香蕉枯萎病由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum ***,Foc)侵染而引起,能破坏寄主的维管束系统,引起植株死亡,导致严重的产量损失。香蕉枯萎病菌1号生理小种(Foc1)主要危害粉蕉(Musa AAB),现在属于世界性分布,4号生理小种(Foc4)... 详细信息

香蕉枯萎病由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum ***,Foc)侵染而引起,能破坏寄主的维管束系统,引起植株死亡,导致严重的产量损失。香蕉枯萎病菌1号生理小种(Foc1)主要危害粉蕉(Musa AAB),现在属于世界性分布,4号生理小种(Foc4)几乎能危害所有香蕉种类,危害性最大。目前缺乏对香蕉枯萎病菌有效的防治措施,从分子水平上研究致病相关基因揭示其致病机理显得尤为重要。本研究室完成了在3种不同的碳源下(寄主蕉类细胞壁,葡萄糖,果胶)香蕉枯萎病菌Foc1和Foc4转录组的差异性的分析。在此基础上从Foc转录组(Foc4CW vs Foc1CW)结果中,将转录组结果与PHI(The Pathogen-Host Interaction Database)数据库BLAST比对,挑选细胞壁诱导下Foc4较Foc1相对表达量较高的基因,并预测致病相关基因,挑选出4个基因,comp184990,comp144330,comp 166170,comp 174730。其中comp184990是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶相关基因,comp144330是程序性死亡蛋白相关基因,comp 174730是蛋白激酶相关基因,comp 166170是F-Box蛋白基因。设计引物用实时荧光定量来验证这4个基因在香蕉枯萎病菌侵染香蕉过程中的表达量情况,选取三个时间点,分别是0 h,48 h,96 h。结果发现,comp 166170基因在Foc1中几乎不表达,而在Foc4中表达量高,与0h相比,48 h和96 h表达量显著上调,特别在48 h,表达量达到最高,是0 h的200倍。comp 174730基因在Foc1中虽有表达,但是表达量明显低于在Foc4中的表达量,在Foc4中与0 h相比,comp174730表达量一直处于较高水平。因此推测comp 166170和comp 174730基因跟香蕉枯萎病菌Foc4致病性相关。分别以Foc4总DNA和cDNA为模版进行克隆,获得comp 166170和comp174730的基因的DNA和cDNA片段,并将其送到生物公司测序,然后根据目的基因的序列进行生物信息分析。comp 166170的Foc1和Foc4的DNA扩增产物约为1080 bp,cDNA扩增产物1080bp,DNA编码358个氨基酸。2个小种的核苷酸分析,结果显示Foc1-comp 166170和Foc4-comp 166170无内含子,两个小种核苷酸的同源性为99.0%。编码的氨基酸同源性为99.2%。两个小种在氨基酸水平上存在着3个位点差异,分别是在96,202,322位点上。编码的核苷酸存在11个位点的差异。将comp 166170的氨基酸序列放在NCBI上进行BLAST比对,结果表明该基因没有检测到假定保守区域。comp174730的Foc1和Foc4的DNA扩增产物约为1444 bp,CDNA扩增产物都为1332bp,2个小种的comp174730核苷酸分析,结果显示Foc1-comp 174730和Foc4-comp174730有一个内含子,Foc1-comp174730DNA编码460个氨基酸,Foc4-comp174730DNA编码462个氨基酸。comp174730两个小种核苷酸的同源性为99.2%。编码的氨基酸同源性为97.8%。comp174730两个小种在氨基酸水平上存在着10个位点差异,编码的核苷酸存在12个位点的差异。将香蕉枯萎病菌comp174730的氨基酸序列放在NCBI上进行BLASTP比对,结果表明comp174730属于CCL1家族蛋白,100-281aa为其保守区域。在对四个基因进行生物信息分析后,对要敲除的comp174730和comp166170进行命名,comp174730命名为Foccak1,comp166170命名为Focfb1。通过TAIL-PCR获得了Foc4-Focfb1和Foc4-Foccak1基因的侧翼片段,采用ATMT方法获得Foc4-△Focfb1和Foc4-△Foccak1基因敲除突变体,并测定突变体的致病性。结果表明,Foc4-△Focfb1和Foc4-△Foccak1基因的敲除突变体较野生型Foc4生物学性状几乎没有改变。采用盆栽伤根淋灌接种方法,将野生型Foc4和敲除突变体Foc4-△Focfb1和Foc4-△Foccak1接种巴西蕉苗,孢子浓度分别为1.0×10个/mL,1.0×10个/mL,1.0×10个/mL每个处理接种10株,每个处理重复3次,接种40 d后观察发病情况。结果显示,Foc4-△Focfb1接种的巴西蕉病情指数较野生型Foc4的病情指数低10%左右,说明Focfb1基因的敲除对致病力有减弱的影响;Foc4-△Focc

关键词：香蕉枯萎病菌实时荧光定量PCR Focfb1 Foccak1 香蕉

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KLOTHO与Wnt10b在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及其相关性研究

KLOTHO与Wnt10b在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及其相关性研究

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作者：成慧兰州大学

学位级别：硕士

目的：通过在正常宫颈上皮组织、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)以及宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma, CSCC)中检测Klotho和Wnt10b表达,旨在探索宫颈癌发生、发展过程中两者所发挥的作用及... 详细信息

目的：通过在正常宫颈上皮组织、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)以及宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma, CSCC)中检测Klotho和Wnt10b表达,旨在探索宫颈癌发生、发展过程中两者所发挥的作用及二者之间的相关性。方法：(1)采用免疫组化SP法检测Klotho及Wnt10b在20例正常宫颈上皮组织、41例CIN组织及106例CSCC组织中的表达。(2)使用实时荧光定量法(real-time PCR;RT-PCR)检测5例正常宫颈组织、3例CIN组织以及7例CSCC组织中Klotho与Wnt10b的mRNA含量。结果：(1)Klotho在正常宫颈上皮组织中的表达明显高于CIN组织及CSCC组织,其在正常宫颈上皮组织、CIN组织及CSCC组织中的阳性表达率依次减低,差异有统计学意义(P0.05),与宫颈癌FIGO分期、组织学分化程度以及淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P0.05),与分化程度、FIGO分期及淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)Klotho mRNA在正常宫颈上皮组织中的表达显著高于CSCC组织,Wnt10b mRNA在CSCC组织中的表达显著高于正常宫颈组织。(4)在CSCC组织中,Klotho蛋白与Wnt10b的蛋白表达呈负相关(rs=-0.416,P<0.01)。结论：(1) Klotho蛋白在正常宫颈组织、CIN组织及CSCC组织中的阳性表达率逐步降低,与宫颈鳞癌的分化程度、FIGO分期以及淋巴结转移密切相关,这表明Klotho在抑制宫颈癌的发生发展过程中发挥重要作用。(2) Wnt10b在正常宫颈组织、CIN及CSCC组织中的阳性表达率依次增高,且与宫颈鳞癌的分化程度、FIGO分期以及淋巴结转移等具有相关性,提示Wnt10b在宫颈鳞癌的发生、发展、侵袭以及转移中有着重要的作用。(3)与正常宫颈粘膜组相比较,CSCC组织中Klotho mRNA含量减少,而Wnt10b mRNA含量增多,并且Klotho与Wnt10b蛋白表达呈负相关,提示Klotho和Wnt10b可能在宫颈癌的发生、发展过程中起重要作用,联合检测Klotho和Wnt10b有助于宫颈癌的早期诊断。

关键词：宫颈鳞状细胞癌 Klotho Wnt10b

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玉米小斑病菌真菌病毒的多样性及其双分体病毒BmPV1外壳蛋白与寄主因子的互作研究

玉米小斑病菌真菌病毒的多样性及其双分体病毒BmPV1外壳蛋白与寄...

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作者：成慧长江大学

学位级别：硕士

玉米是我国的主要粮食作物,其高产、稳产关系到国计民生。生产上,玉米病害是玉米减产的重要原因,最为常见的玉米叶部病害,如玉米小斑病、玉米大斑病、玉米锈病等。为探索玉米病害的绿色防控技术,论文通过ds RNA提取和高通量测序等方法... 详细信息

玉米是我国的主要粮食作物,其高产、稳产关系到国计民生。生产上,玉米病害是玉米减产的重要原因,最为常见的玉米叶部病害,如玉米小斑病、玉米大斑病、玉米锈病等。为探索玉米病害的绿色防控技术,论文通过ds RNA提取和高通量测序等方法检测了玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)中的真菌病毒多样性,验证了玉米小斑病菌真菌病毒种群中弱毒真菌病毒BmPV1(Bipolaris maydis partitivirus1)基因组核酸ds RNA2编码病毒的外壳蛋白。在此基础上,进一步通过酵母双杂交技术探索该病毒外壳蛋白与寄主因子的互作,为解析病毒引起弱毒现象的机理奠定了基础。具体研究结果如下:采集了武汉市汉南区玉米小斑病叶片样品,通过单胞分离法分离获得293个玉米小斑病菌菌株。菌株ds RNA提取结果显示该地区的玉米小斑病病菌种群中ds RNA条带呈现丰富的多样性,说明可能存在多种真菌病毒。选取ds RNA条带具代表性的25个菌株进行了高通量测序。测序结果显示这25个菌株中包含35种病毒,其中包含了9种ds RNA病毒、19种单链RNA病毒,这19种病毒分属8个科,以及7种未分类的病毒新株系。此外,35种病毒中,有12种可能为新病毒。制备BmPV1 ds RNA2可能编码蛋白P2的多克隆抗体,通过病毒粒子提取、SDS-PAGE、Western Blot等实验检测了P2蛋白的生物学功能。结果显示:在病毒粒子、含BmPV1菌株中均能检测到P2蛋白的存在,而在对照菌株(不含BmPV1菌株)、脱毒菌株中不能检测到P2蛋白的存在,说明P2蛋白即为病毒的外壳蛋白(Coat protein)。以BmPV1的P2作为诱饵,利用酵母双杂交技术筛选了玉米小斑病菌的c DNA文库,获得了150个阳性克隆。阳性克隆测序结果显示46个寄主因子可能与BmPV1的外壳蛋白互作。选择其中感兴趣的的10个基因,进行全长克隆和进一步酵母双杂交验证,结果显示10个寄主因子有2个与BmPV1的外壳蛋白互作,这两个寄主因子分别为烯醇化酶和前体m RNA加工因子。此外,鉴于弱毒真菌病毒BmPV1能引起玉米小斑病菌黑色素合成减少,通过酵母双杂交技术分析了玉米小斑病菌黑色素通路的9个关键因子与BmPV1外壳蛋白之间的互作关系。结果显示:病原菌黑色素通路9个关键因子中多铜氧化酶(Bz Mco1)能够与BmPV1外壳蛋白互作。这些互作关系,说明BmPV1的P2除作为病毒结构蛋白外,还可能在病毒侵染、寄主黑色素合成减少等过程中起到关键的作用。

关键词：玉米小斑病菌真菌病毒多样性蛋白互作

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