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牛腹泻病原实时荧光PCR高通量检测体系与RPA快速检测方法的建立及初步应用

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牛腹泻病原实时荧光PCR高通量检测体系与RPA快速检测方法的建立及...

作者：刘岳林河北农业大学

学位级别：硕士

牛腹泻性疾病是通常由病毒、细菌、寄生虫等多种病原体混合感染而引起的、伴有腹泻症状的肠道性疾病,临床上难以对其进行鉴别诊断,对我国养牛业造成巨大的经济损失。对牛腹泻病原的有效防控仍依赖于对患病牛的及时发现、及时隔离。因此... 详细信息

牛腹泻性疾病是通常由病毒、细菌、寄生虫等多种病原体混合感染而引起的、伴有腹泻症状的肠道性疾病,临床上难以对其进行鉴别诊断,对我国养牛业造成巨大的经济损失。对牛腹泻病原的有效防控仍依赖于对患病牛的及时发现、及时隔离。因此,建立一个快速、灵敏、准确、高通量的牛腹泻病原检测体系,可为牛腹泻病原的快速诊断提供技术支撑。本研究以常见的16种牛腹泻病原为研究对象,建立了一种基于TaqMan探针的实时荧光PCR高通量检测体系。结果显示,该检测体系能够对16种牛腹泻病原实现特异性检测,与其他腹泻病原无交叉反应;以重组质粒DNA、体外转录RNA和基因组DNA作为标准品,该检测体系对不同病原的最低检出限分别在1.0×101～1.0×102 copies/反应之间和1.0×10-1 pg/反应。对采集自河北省9个地区的202份牛腹泻粪便样品进行检测,结果显示,176份样品中均检测到腹泻病原,以产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)、牛 A 群轮状病毒(Bovinerotavirus A,BRVA)、牛冠状病毒(Bovinecoronavirus,BCoV)和隐孢子虫(Cryptosporidiumspp.)的检出率占前四位,分别为 65.8%(133/202)、43.6%(88/202)、27.7%(56/202)和 24.3%(49/202);样品中混合感染的检出率达到63.9%(129/202),最高可达九重感染;在河北省牛腹泻样品中首次检出牛嵴病毒(Bovine Kobuvirus,BKV),检出率为23.3%(47/202)。以临床上最为常见,可导致新生犊牛腹泻(Neonatal calf diarrhea,NCD)的BRVA、BCoV和Cryptosporidium spp.为研究对象,基于BRVA VP6基因、BCoV N基因和Cryptosporidium spp.18S rRNA基因设计并筛选特异性引物和探针,分别建立了实时荧光重组酶聚合酶扩增(real-time recombinase polymerase amplification,real-time RPA)和 RPA 结合侧流层析试纸条(RPA combined with lateral flow test strips,LFS RPA)的现场快速等温检测方法。结果显示,real-time RPA(或RT-RPA)和LFS RPA(或RT-RPA)方法均能实现特异性检测,与其他腹泻病原无交叉反应;BRVA、BCoV和Cryptosporidium spp.的real-time RPA(或RT-RPA)检测方法最低检出限分别为100 copies/反应、100 copies/反应和10 copies/反应,LFSRPA(或RT-RPA)检测方法最低检出限分别为10 copies/反应、100 copies/反应和10 copies/反应。对202份临床样品进行检测,结果显示,上述3种病原的RPA检测方法与real-time PCR检测体系具有相同检测性能,检测一致率分别达到100%(202/202)、99.0%(200/202)、98.0%(198/202)。本研究建立的实时荧光PCR高通量检测体系适用于规模化养殖场中牛腹泻病原的日常监测及鉴别诊断,为牛腹泻病原的快速鉴别提供了技术支撑;建立的BRVA、BCoV 和Cryptosporidium spp.real-time RPA(或 RT-RPA)和 LFS RPA(或 RT-RPA)现场快速等温检测方法,具有快速、高效、简便的优点,可以满足现场检测需求,对基层牛场疫病的快速诊断和防控具有重要的临床意义。

关键词：牛腹泻病原检测

ZnO/g-CN复合光催化剂的制备及光催化还原U(Ⅵ)

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材料工程 2022年 157-164页

作者：雷铭刘岳林谢水波葛玉杰刘迎九南华大学污染控制与资源化技术湖南省重点实验室南华大学土木工程学院湖南工业大学土木工程学院

以ZnO和三聚氰胺为原料,采用热聚合法制备ZnO/g-CN复合型光催化剂,并将其用于光催化还原U(Ⅵ)。通过SEM,XRD,XPS,PL,UV-Vis测试手段对样品的表面形貌、晶格结构、元素组成、光催化性能进行分析。结果表明:ZnO的掺杂降低光生电子与空穴...

以ZnO和三聚氰胺为原料,采用热聚合法制备ZnO/g-CN复合型光催化剂,并将其用于光催化还原U(Ⅵ)。通过SEM,XRD,XPS,PL,UV-Vis测试手段对样品的表面形貌、晶格结构、元素组成、光催化性能进行分析。结果表明:ZnO的掺杂降低光生电子与空穴的复合率,扩大材料对可见光的响应范围,使复合材料具有更高的光催化活性。在pH=5、投加量为0.5 g/L时,经过暗反应30 min和光反应30 min,对U(Ⅵ)的最高去除率可达97%。U(Ⅵ)可被还原为U(Ⅳ),光生电子e是实现将U(Ⅵ)还原为U(Ⅳ)的主要因素。

关键词：

g-CN-BiO/AlO复合材料光催化还原水中U(Ⅵ)

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化工环保 2022年

作者：袁亦雷谢水波刘岳林史艳丹刘迎九南华大学土木工程学院南华大学污染控制与资源化技术湖南省重点实验室

采用热聚合法制备了氮化碳-氧化铋-氧化铝(g-CN-BiO/AlO)光催化剂，并通过XRD、SEM、XPS等多种手段进行了表征，考察了该催化剂对模拟含铀废水中U(Ⅵ) 的光催化还原性能和重复利用性能，探讨了其光催化还原U(Ⅵ)的机理。结果表明，在g-C...

采用热聚合法制备了氮化碳-氧化铋-氧化铝(g-CN-BiO/AlO)光催化剂，并通过XRD、SEM、XPS等多种手段进行了表征，考察了该催化剂对模拟含铀废水中U(Ⅵ) 的光催化还原性能和重复利用性能，探讨了其光催化还原U(Ⅵ)的机理。结果表明，在g-CN-BiO/AlO投加量为0.5 g/L、废水初始pH为5、U(Ⅵ)质量浓度为10 mg/L的条件下，经暗反应30 min、光反应60 min后，废水中U(Ⅵ)去除率达到98%。g-CN-BiO/AlO重复使用5次后对U(Ⅵ)的去除率仍可达85%，表现出良好的稳定性和重复利用性能。g-CN-BiO/AlO光催化剂还原U(Ⅵ)的主要机理是光生电子(e)和超氧自由基(·O)的作用。

关键词：

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现代教育技术在高职舞蹈教学中的合理运用

中国文艺家 2022年第3期 146-148页

作者：刘岳林德州职业技术学院

在信息化大环境下,新兴技术逐渐融入教育领域中,促使教育改革不断深化,虚拟现实技术也是在这一背景下被提出,也做出了很多的尝试。至此,虚拟现实技术与教育的融合不止一次被提出,改革不能只限于文化课方向是教育全方面的改革,艺术领域... 详细信息

在信息化大环境下,新兴技术逐渐融入教育领域中,促使教育改革不断深化,虚拟现实技术也是在这一背景下被提出,也做出了很多的尝试。至此,虚拟现实技术与教育的融合不止一次被提出,改革不能只限于文化课方向是教育全方面的改革,艺术领域学科的改革也是至关重要的,高职舞蹈领域对新兴技术的使用和需求也更为迫切。因此,虚拟现实技术的发展和使用,也将对高职舞蹈教育产生至关重要的影响。

关键词：高职舞蹈教学虚拟现实技术教学应用

g-C_(3)N_(4)-Bi_(2)O_(3)/Al_(2)O_(3)复合材料光催化还原水中U(Ⅵ)

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化工环保 2022年第5期42卷 609-615页

作者：袁亦雷谢水波刘岳林史艳丹刘迎九南华大学土木工程学院湖南衡阳421001 南华大学污染控制与资源化技术湖南省重点实验室湖南衡阳421001

采用热聚合法制备了氮化碳-氧化铋-氧化铝(g-C_(3)N_(4)-Bi_(2)O_(3)/Al_(2)O_(3))光催化剂,并通过XRD、SEM、XPS等多种手段进行了表征,考察了该催化剂对模拟含铀废水中U(Ⅵ)的光催化还原性能和重复利用性能,探讨了其光催化还原U(Ⅵ)的... 详细信息

采用热聚合法制备了氮化碳-氧化铋-氧化铝(g-C_(3)N_(4)-Bi_(2)O_(3)/Al_(2)O_(3))光催化剂,并通过XRD、SEM、XPS等多种手段进行了表征,考察了该催化剂对模拟含铀废水中U(Ⅵ)的光催化还原性能和重复利用性能,探讨了其光催化还原U(Ⅵ)的机理。结果表明,在g-C_(3)N_(4)-Bi_(2)O_(3)/Al_(2)O_(3)投加量为0.5 g/L、废水初始pH为5、U(Ⅵ)质量浓度为10 mg/L的条件下,经暗反应30 min、光反应60 min后,废水中U(Ⅵ)去除率达到98%。g-C_(3)N_(4)-Bi_(2)O_(3)/Al_(2)O_(3)重复使用5次后对U(Ⅵ)的去除率仍可达85%,表现出良好的稳定性和重复利用性能。g-C_(3)N_(4)-Bi_(2)O_(3)/Al_(2)O_(3)光催化剂还原U(Ⅵ)的主要机理是光生电子(e-)和超氧自由基(·O_(2)-)的作用。

关键词： g-C_(3)N_(4) Bi_(2)O_(3) Al_(2)O_(3) 光催化还原 U(Ⅵ)

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我国公务员权利救济研究

我国公务员权利救济研究

作者：刘岳林湘潭大学

学位级别：硕士

公务员权利救济是公务员法律制度的重要方面,公务员权利救济制度的运行情况是一个国家公务员法制和法治政府建设状况的真实反映。长期以来,由于传统政治文化、特权关系以及干部管理机制等各项要素的影响,我国行政管理体制的关注重点始... 详细信息

公务员权利救济是公务员法律制度的重要方面,公务员权利救济制度的运行情况是一个国家公务员法制和法治政府建设状况的真实反映。长期以来,由于传统政治文化、特权关系以及干部管理机制等各项要素的影响,我国行政管理体制的关注重点始终放在如何加强对公务员群体的监督管理,确保这一群体能够严格按照制度要求行使其公权力,构建的法律制度存在明显的缺陷性,更多的集中在义务性规范层面,忽视了这一群体所应享受的权利性规范,没有为这一群体设立科学有效的权利救济制度。公务员权利救济制度的构建的关键,在于维护公共行政管理秩序和公务员权利保障二者之间有效平衡。对于这一问题,侧重点是放置在秩序上,并非道德层面的简单判断问题,而是与国家的经济发展水平、法治水平以及公民权利意识程度等要素直接相关。公务员权利救济制度历经了威权体制下的秩序中心主义、民权体制下的权利中心主义两项制度的演变,随着这一演变进程的循序渐进,能够充分显现出整个人类社会文明的发展印记。无论是英美法系还是大陆法系国家,特别权力关系理论逐渐被现代行政法中的正当程序原则、尊重人权原则所摒弃,逐渐形成了非诉讼救济和司法救济二者有效结合的公务员救济体系。本文主要利用比较分析法,对比分析域外法治先进国家的公务员权利救济制度,总结出对完善我国公务员权利救济制度的启示,并对我国公务员权利救济制度的运行情况进行梳理,并分析产生问题的根本原因,并从培养公务员群体的法治意识、完善我国公务员非诉救济制度、建立公务员行政处分错案责任追究制度、建立司法救济制度等方面入手,探究完善我国公务员权利救济制度的可行路径。

关键词：国家公务员权利救济公务员权利体系非诉救济

基于gB基因的IBRV微滴式数字PCR检测方法的建立及初步应用

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中国兽医学报 2023年第3期43卷 469-475页

作者：高雅欣刘立兵刘岳林王金凤王建昌李睿文河北农业大学动物医学学院河北保定071001 石家庄海关技术中心河北石家庄050035

为实现牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)精准的定量检测,以IBRV gB基因为靶基因,建立IBRV微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)定量检测方法,进行了ddPCR退火温度、引物和探针浓度的优化、特... 详细信息

为实现牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)精准的定量检测,以IBRV gB基因为靶基因,建立IBRV微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)定量检测方法,进行了ddPCR退火温度、引物和探针浓度的优化、特异性和灵敏性试验。结果显示,建立的ddPCR方法最佳退火温度为56.5℃;反应体系中最佳引物、探针浓度分别为900和250 nmol/L;能够实现IBRV的特异性检测,与其他常见的牛呼吸系统疫病病原无交叉反应;以重组质粒pMD19-T-gB为模板,ddPCR方法的检出限为1.8 copies/μL,是实时荧光PCR方法敏感性的10倍。对119份具有呼吸道症状的牛鼻拭子样本分别进行ddPCR方法和实时荧光PCR方法进行检测,结果显示,ddPCR方法和实时荧光PCR方法的检出率分别为(15.13%,18/119)和(12.60%,15/119)。本研究建立的ddPCR方法特异性强、灵敏度高,可作为牛呼吸道临床样品中IBRV精准定量检测的有效手段。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒微滴式数字PCR gB基因定量检测

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Cu2+对硫酸盐还原菌处理低浓度含铀废水的影响与机理试验研究

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Cu2+对硫酸盐还原菌处理低浓度含铀废水的影响与机理试验研究

作者：刘岳林南华大学

学位级别：硕士

含铀废水对水环境危害巨大,在使用传统工艺在处理含铀废水时存在着操作繁琐、运行成本高、易造成二次污染等缺点。近年来,微生物处理法以其高效低耗,便于操作等优点广泛受到各国研究人员关注。本试验采用硫酸盐还原菌(SRB)作为研究对象... 详细信息

含铀废水对水环境危害巨大,在使用传统工艺在处理含铀废水时存在着操作繁琐、运行成本高、易造成二次污染等缺点。近年来,微生物处理法以其高效低耗,便于操作等优点广泛受到各国研究人员关注。本试验采用硫酸盐还原菌(SRB)作为研究对象,将其从下水管道污泥中提取,富集培养,得到以SRB为优势菌种的混合菌液,并通过进一步纯化分离,得到纯种脱硫弧菌。考察了混合菌液与纯种脱硫弧菌对于U(Ⅵ)的去除效果,分析了SRB去除U(Ⅵ)的作用机理,研究了共存金属离子Cu对SRB去除U(Ⅵ)的抑制及其机理。结果表明,纯种脱硫弧菌菌液对U(Ⅵ)的去除效果不理想,去除率不到40%;混合SRB菌液对U(Ⅵ)的去除效果良好,7 d后去除率为95.1 %;电子传递还原途径为SRB去除U(Ⅵ)的主要途径,也是最为根本的一条途径,HS还原途径也是基于电子传递的途径的基础上而产生的HS,而EPS吸附途径对于U(Ⅵ)的去除几乎没有作用;较低浓度的Cu对于SRB去除U(Ⅵ)影响几乎可以忽略不计,主要是因为EPS对Cu有较强的吸附作用。当Cu浓度达到15 mg/L时,Cu与U(Ⅵ)相互竞争HS和乳酸电子,Cu在竞争中具有明显优势,因此对U(Ⅵ)的去除抑制作用较为显著。当Cu浓度高于25 mg/L时,Cu会破坏SRB细胞膜完整性,SRB对于U(Ⅵ)的去除将受到完全抑制。

关键词：铀硫酸盐还原菌(SRB) Cu2+ 作用机理

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我国证券市场半强式有效假说实证研究

我国证券市场半强式有效假说实证研究

作者：刘岳林湖南大学

学位级别：硕士

有效金融市场是指这样的市场，其中的证券价格总是可以充分体现可获得信息变化的影响。在提出价格准确迅速地反应信息变化的假说之后，法马(1970)提出的又一个主要观点是：无时效的信息不会创造利润。法马区分了三种类型的无时效信息，... 详细信息

有效金融市场是指这样的市场，其中的证券价格总是可以充分体现可获得信息变化的影响。在提出价格准确迅速地反应信息变化的假说之后，法马(1970)提出的又一个主要观点是：无时效的信息不会创造利润。法马区分了三种类型的无时效信息，也由此引出了EMH的三种类型：“弱态有效”、“半强态有效”和“强态有效”。在半强态有效市场上，投资者无法利用可得到的任何公开信息获得经过风险调整后的超额利润。资产重组往往涉及上市公司的产业转型资产结构改变和经营方向的调整，对公司的盈利能力和成长性有重要影响。与资产重组有关的信息是否能及时充分地披露和均匀地分布，是否能及时地被每一个投资者在同一时间等质等量地获得，决定着股价是否会被幕后操纵，是否能给投资者一个公平公开公正的投资环境。本文试图通过资产重组这一特定信息，运用事件研究法研究两个问题：第一从资产重组事件的市场反应来检验我国证券市场是否达到半强型有效;第二通过时序分析来研究近几年特别是证券法颁布前后中国股市的市场效率程度是否在逐步提高。通过本文的研究发现：就资产重组事件的公告效应而言，我国证券市场的效率水平时而有效时而无效，市场效率状况尚不稳定，具备新兴市场的特征。不同资产重组类别对公司价值的影响不同，其中股权转让和资产出售对公司价值的提高有促进作用;资产置换对公司价值的影响不明显;资产购买对公司价值有负的影响。从时序上看，投资者对资产重组的态度从表现出乐观到谨慎到悲观。证券法实施后我国股票市场的波动幅度有明显的减小迹象，这说明证券法的实施对抑制市场投机气氛，促进市场效率提高起到一定作用。

关键词：有效市场假说半强态有效资产重组事件研究法