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内生真菌—拂子茅共生体的生物学特性研究

内生真菌—拂子茅共生体的生物学特性研究

作者：刘宝虎南京农业大学

学位级别：硕士

Epichloae内生真菌在与其宿主植物经过长期的共同进化形成了稳定的互惠共生关系。目前为止,12个种的Epichloe属内生真菌及23个种和5个变种的Neotypkodium属内生真菌被报道。其中拂子茅属植物内已发现E. baconii、E. amarillans和N. stro... 详细信息

Epichloae内生真菌在与其宿主植物经过长期的共同进化形成了稳定的互惠共生关系。目前为止,12个种的Epichloe属内生真菌及23个种和5个变种的Neotypkodium属内生真菌被报道。其中拂子茅属植物内已发现E. baconii、E. amarillans和N. stromatolongum三个种。本研究采集安徽黄山风景区29株拂子茅属植物样本,样品无一产生子座,经镜检全部含菌。菌丝生长于宿主植物细胞间隙,直径约2μm,近乎平行细胞长轴,很少分叉,也不相互交叉,和其他Neotyphodium属真菌类似。分离获得9株菌株,在PDA平板上,这些菌株菌落圆形,质棉,正面白色、背面浅褐色;菌落生长速度为15.4～16.8mm/21d,25℃。分生孢子单个顶生,多数椭圆形,大小3.6-3.7×.3～2.6μm;分生孢子梗长17.1-19.7μm,基部宽2.1～2.6 μm,与N. stromatolongum差异较大。在基于tubB、 actG的系统发育树上,分离菌株高度聚类,并与N. stromatolongum聚为一枝;分离菌株的tefA基因与N. stromatolongum有一个碱基差异,在系统发育树上独立成为一个小的亚枝。以上描述说明黄山拂子茅分离菌株并非之前本课题组报道的***.内生真菌能够影响宿主植物的形态学和生理学特征,其带来的优良农艺学性状可被应用于农业生产。本研究测量拂子茅植株的叶片宽度、茎杆直径、叶片长度和株高,研究内生真菌对拂子茅植株生长特性的影响。结果显示,黄山含菌拂子茅(HEI)植株和南京开花无菌拂子茅(NIEF)植株相比：下位测量叶叶宽较窄,上位测量叶长度较长,茎秆较细,株高较高。南京含菌拂子茅(NEI)植株和南京开花无菌拂子茅(NIEF)植株相比：下位测量叶叶宽较窄,上位测量叶长度较长且宽度较细,茎秆较细,株高较矮。数据测量期间降水量丰富,研究推测,除内生真菌对宿主植物产生影响外,宿主基因型不同也可导致植物不同的生长特性。本文从宿主植物光合作用和体内碳水化合物含量两方面研究了内生真菌对宿主植物生理学影响。在植物开花前和开花后两个时期测定拂子茅植株的气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率和净光合速率等植物光合性能参数。NEI植株与NIEF植株之间的气孔导度、胞间C02浓度、蒸腾速率和净光合速率在植物开花前和开花后均无显著差异。除开花后HEI的蒸腾速度显著大于NIEF植株外,HEI植株和NIEF植株的光合性能等参数无显著差异。总体上分析,内生真菌对拂子茅的光合性能没有显著影响。在植物开花前、花期和开花后三个时期测定了宿主植物体内蔗糖、果糖等可溶性碳水化合物的含量。在开花前,HEI植株体内碳水化合物含量小于NIEF植株,在花期前者大于后者,但差异不显著;花后期两者体内碳水化合物含量无显著差异,说明内生真菌在开花前和花期对HEI植株体内碳水化合物的含量存在一定影响。总体上分析,内生真菌对NEI植株体内碳水化合物的积累及变化没有显著影响。NE1分离菌株N. stromatolongum在宿主茎秆可形成无生殖功能的子座,而本研究中分离自同一种宿主植物的菌株不能形成子座,而MAT基因被报道与真菌的生殖有关。本研究首先利用已知的***序列设计引物,之后对分离自6个不同属的禾本科植物共29株真菌菌株进行MAT基因的检测及分析。结果显示,21/25株Neotyphodium属内生真菌检测到MAT1-1-1基因,22/25株Neotyphodium属内生真菌检测到MAT1-2-1基因,4株Epichloe属内生真菌同时含有MAT1-1-1和MAT1-2-1基因。说明.MAT基因并不适用于确定中国本土Epichloe属内生真菌的交配类型,也不能区分Epichloe属和Neotyphodium属内生真菌。MAT1-1-1和MAT1-2-1的系统发育树显示,epichloae内生真菌的部分不同种聚为一枝,说明epichloae内生真菌之间存在复杂的交配关系。黄山分离菌株与N. stromatolongum菌株在MAT1-2-1基因的分布及系统发育上都显现出一定的差异。本研究从不产子座的黄山拂子茅中分离得到的内生真菌有别于本课题组之前报道的N. stromatolongum菌株。HEL、NEI和NIEF之间的形态学差异,可能是内生真菌导致,也可能是宿主自身的基因型决定。实验条件下总体上分析,内生真菌对宿主植物光合性能没有显著影响。在开花前和花期,内生真菌对HEI植株体内碳水化合物的积累有影响;内生真菌对NEI植株体内碳水化合物的积累没有影响。MAT基因的有无不适用于确定Epichloe属内生真菌的交配类型及区分Epichloe属和Neotyphodium属内生真菌。MAT1-2-1基因的分

关键词：拂子茅属植物 Neotyphodium属真菌生长特性统计分析碳水化合物光合作用 MAT基因分类

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脑损伤后意识障碍预后评估的研究进展

中国康复医学杂志 2021年第5期36卷 605-610页

作者：刘宝虎郭彤彤吴东宇中国中医科学院望京医院康复二科北京100102 天津中医药大学

医学急救体系的不断完善和重症治疗水平的提高使得更多的脑损伤患者得以幸存,但这些患者多数存在不同程度的意识障碍(disorders of consciousness,DOC)。DOC患者的预后判断不但直接关系到患者家属及临床医师的医疗决策,而且也是进一步... 详细信息

医学急救体系的不断完善和重症治疗水平的提高使得更多的脑损伤患者得以幸存,但这些患者多数存在不同程度的意识障碍(disorders of consciousness,DOC)。DOC患者的预后判断不但直接关系到患者家属及临床医师的医疗决策,而且也是进一步神经功能康复的基础,因此,客观准确的预后判断显得尤为重要。目前,临床上对于DOC患者的预后评估主要依靠量表和临床表现,但上述方法具有主观性强及准确性差等缺点。因此,亟待建立更加客观准确的预后评估方法,使有希望恢复意识的患者得到及时有效的救治。

关键词：意识障碍医疗决策脑损伤患者神经功能康复预后评估临床医师患者家属预后判断

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郑魁山教授针灸治疗痹症临床心识

中国针灸 2015年第6期35卷 600-602页

作者：刘宝虎郑嘉太郭永明天津中医药大学实验针灸学研究中心天津300193 天津中医药大学针灸推拿学院天津300193

郑魁山教授从事针灸教育和临床60余载,治学严谨,医术精湛,善用"温通针法"治疗风寒湿邪所致的痹症。临证遣方选穴重视辨证,强调配伍;取穴精当,注重手法;不仅能够明显缓解症状,而且可以改善机能状态,真正达到标本兼治。本文从理、法、方... 详细信息

郑魁山教授从事针灸教育和临床60余载,治学严谨,医术精湛,善用"温通针法"治疗风寒湿邪所致的痹症。临证遣方选穴重视辨证,强调配伍;取穴精当,注重手法;不仅能够明显缓解症状,而且可以改善机能状态,真正达到标本兼治。本文从理、法、方、穴、术五方面介绍郑魁山教授针灸治疗痹症的临床经验,深入分析郑教授的针灸临床治疗思路与方法。

关键词：名医经验痹症针刺郑魁山

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制一枝蒿中总生物碱精制工艺优化

中国新药杂志 2009年第13期18卷 1274-1276页

作者：王汝卫王丽朱会琴刘宝虎宁夏煤炭总医院石嘴山市753000 宁夏自治区药品检验所银川市750001 宁夏宝利民族医药有限公司中卫市755000

目的:优选大孔吸附树脂精制制一枝蒿乌头类总生物碱的工艺条件。方法:应用正交设计。以酸性染料比色法测定总生物碱含量、比较并筛选不同工艺条件对乌头类总生物碱的精制效果。结果:不同浓度的乙醇对乌头类总生物碱的洗脱效果有显著影响... 详细信息

目的:优选大孔吸附树脂精制制一枝蒿乌头类总生物碱的工艺条件。方法:应用正交设计。以酸性染料比色法测定总生物碱含量、比较并筛选不同工艺条件对乌头类总生物碱的精制效果。结果:不同浓度的乙醇对乌头类总生物碱的洗脱效果有显著影响,应用本法乌头类总生物碱的转移率为84.5%,杂质的去除率为81.8%。结论:该工艺条件可用于制一枝蒿中总生物碱的精制。

关键词：制一枝蒿大孔吸附树脂工艺条件

“双减”政策下小学科学高效课堂教学策略探讨

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求知导刊 2023年第14期 26-28页

作者：刘宝虎山东省枣庄市薛城区双语实验小学

在“双减”政策背景下,小学科学教学要在减轻学生负担的同时提高教学质量,就要打造高效课堂教学模式。小学科学教师要及时更新教育理念,运用学生感兴趣的方法,激发学生的课堂参与意识,促使学生主动投入学习活动中。营造良好的科学学习环... 详细信息

在“双减”政策背景下,小学科学教学要在减轻学生负担的同时提高教学质量,就要打造高效课堂教学模式。小学科学教师要及时更新教育理念,运用学生感兴趣的方法,激发学生的课堂参与意识,促使学生主动投入学习活动中。营造良好的科学学习环境,能有效帮助学生提高学习能力,文章重点研究“双减”政策下小学科学高效课堂教学的策略。

关键词：小学科学 “双减”政策高效课堂教学

基于核心素养的体育与健康教学设计——以《正面双手垫球》为例

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中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2021年第7期 278-278,280页

作者：刘宝虎大连市普兰店区第十八中学辽宁大连116200

文章围绕如何提高学生体育与健康核心素养,对《正面双手垫球》这节课的准备部分、基本部分和结束部分进行了具体设计。2016年9月13日,《中国学生发展核心素养》研究成果在京发布。核心素养以培养“全面发展的人”为核心,分为文化基础、... 详细信息

文章围绕如何提高学生体育与健康核心素养,对《正面双手垫球》这节课的准备部分、基本部分和结束部分进行了具体设计。2016年9月13日,《中国学生发展核心素养》研究成果在京发布。核心素养以培养“全面发展的人”为核心,分为文化基础、自主发展、社会参与三个方面,综合变现为人文底蕴、科学精神、学会学习、健康生活、责任担当、实践创新的素养。

关键词：核心素养教学设计正面双手垫球

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初中足球教学现状以及对策研究

中国科技经济新闻数据库教育 2023年第6期 80-83页

作者：刘宝虎广河县回民第七中学甘肃临夏731300

足球是世界头号运动,除了被世界各地的球迷所垂涎之外,它在中学生的体育教育中也发挥着越来越重要的作用。将足球纳入中学体育教育不仅有助于将学生从繁忙的学校日程中解放出来,而且还支持体育活动,促进身心健康发展。然而,目前看来,中... 详细信息

足球是世界头号运动,除了被世界各地的球迷所垂涎之外,它在中学生的体育教育中也发挥着越来越重要的作用。将足球纳入中学体育教育不仅有助于将学生从繁忙的学校日程中解放出来,而且还支持体育活动,促进身心健康发展。然而,目前看来,中学体育中的“校园足球”教学还存在一些问题,限制了体育教学的发展和进步。因此,本文研究了中学体育教学中“校园足球”教学存在的问题和解决办法,旨在为足球体育教学提供一些参考。

关键词：初中体育必要性现状问题解决策略

内关、中脘单穴与配伍应用对肿瘤患者化疗后恶心呕吐疗效的比较研究

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内关、中脘单穴与配伍应用对肿瘤患者化疗后恶心呕吐疗效的比较研...

世界中医药学会联合会老年医学专业委员会2021年学术年会暨中国中西医结合学会慢病防治与管理专业委员会第四次学术年会

作者：刘宝虎中国中医科学院望京医院康复二科

目的:评价内关、中脘单穴与配伍应用防治肿瘤患者化疗后恶心呕吐的临床疗效。为临床合理配穴提供依据。方法:本研究采用单中心、盲法、随机对照试验设计。纳入160例符合标准的化疗患者,随机分对照组、内关组、中脘组和内关+中脘组。对... 详细信息

目的:评价内关、中脘单穴与配伍应用防治肿瘤患者化疗后恶心呕吐的临床疗效。为临床合理配穴提供依据。方法:本研究采用单中心、盲法、随机对照试验设计。纳入160例符合标准的化疗患者,随机分对照组、内关组、中脘组和内关+中脘组。对照组给予标准化抗止吐药物治疗,其余3组运用标准化治疗+电针治疗。电针从化疗第1天开始,连续治疗4天。在化疗前1天及化疗第1-5天,对各组患者恶心呕吐的发生情况、频次和胃肠道恶心呕吐的分级进行评价,并在化疗第21天对上述情况进行随访。结果:化疗第2-5天,内关组发生恶心和呕吐的病例数和频次均低于同时间点其他三组。结论:化疗第1-5天及化疗第21天随访,电针内关单穴在防治化疗后恶心呕吐方面疗效最佳。4组间疗效比较有如下趋势:内关组>对照组>双穴组>中脘组。

关键词：化疗后恶心呕吐腧穴配伍针刺

来源： cnki会议评论

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不含花序的禾本科植物样品的鉴定

南京农业大学学报 2014年第1期37卷 60-67页

作者：张红侠纪燕玲陆涛王永刘宝虎王志伟南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

2011年9月,从内蒙古科尔沁地区采集长有真菌子座、却不长花序的禾本科植物26株。提取植物基因组DNA,合成引物扩增植物叶绿体DNA中的trnT-trnL基因间间隔序列。结果表明:内蒙古带子座植物样品与羊草的目的片段长度均为740 bp,仅4个碱基... 详细信息

2011年9月,从内蒙古科尔沁地区采集长有真菌子座、却不长花序的禾本科植物26株。提取植物基因组DNA,合成引物扩增植物叶绿体DNA中的trnT-trnL基因间间隔序列。结果表明:内蒙古带子座植物样品与羊草的目的片段长度均为740 bp,仅4个碱基的差异;而新麦草属的Psathyrostachys fragilis目的片段长度为1 750 bp,与带子座样品及羊草的碱基差异较大。系统发育树分析表明带子座植物样品与羊草聚为一支,自展值95%。利用组织透明法观察植物的叶表皮微形态,内蒙古带子座植物样品同样与羊草叶表皮微形态一致。结合植物学形态特征、trnT-trnL基因片段分析及叶表皮微形态,内蒙古带子座禾本科植物被鉴定为羊草(Leymus chinensis Trin.)。野外条件下,具有宿主特异性的内生真菌能在羊草植株上形成子座,国际上还未见相关报道,也显示羊草植株的特异性。

关键词：羊草鉴定子座 trnT-trnL 组织透明