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大鼠shRNA-SIfn1重组腺病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖的影响

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大鼠shRNA-SIfn1重组腺病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖...

作者：刘姿麟贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:构建带有增强型荧光蛋白(EGFP)标记的针对大鼠Slfn1(Schlafen1,睡眠因子1)的shRNA(发夹状RNA)干扰载体,并进行腺病毒包装,将其转染至原代培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)48h后,观察Slfn1的沉默表达对VSMCs增殖的影响。方法:1、根... 详细信息

目的:构建带有增强型荧光蛋白(EGFP)标记的针对大鼠Slfn1(Schlafen1,睡眠因子1)的shRNA(发夹状RNA)干扰载体,并进行腺病毒包装,将其转染至原代培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)48h后,观察Slfn1的沉默表达对VSMCs增殖的影响。方法:1、根据Rat Slfn1基因的转录本设计并合成3个干扰RNA靶点shRNA-Slfn1(1)、shRNA-Slfn1(2)、shRNA-Slfn1(3)和1个阴性对照序列NC-shRNA,并将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体(pDKD-CMV-U6-shRNA)的U6启动子下游,替换掉原来的ccdB基因;经菌落PCR筛选转化子,其阳性克隆进行测序验证,将正确的克隆进行高纯度质粒抽提;利用Admax系统,将3种目的穿梭质粒、1种阴性对照穿梭质粒分别与腺病毒骨架质粒共转染到HEK293细胞中重组获得病毒后进行小量扩增及病毒滴度测定;利用Slfn1过表达腺病毒质粒中目的基因携带Flag标签,通过Western Blot检测Slfn1过表达腺病毒质粒与靶点质粒共转染293T细胞中Flag的表达,观察靶点质粒对Slfn1表达的影响。2、通过组织块贴壁法原代培养VSMCs,应用倒置相差显微镜对不同培养时间的细胞进行形态学观察,使用免疫荧光法对培养细胞进行鉴定。3、使用最适感染复数的shRNA-Slfn1(1)重组腺病毒转染VSMCs 48h后,应用倒置荧光显微镜观察EGFP的表达情况,并使用流式细胞仪检测其转染效率,通过PCR检测Slfn1 mRNA的表达,最后使用CCK-8检测Slfn1的沉默表达对VSMCs增殖的影响。结果:1、经菌落PCR鉴定获得阳性克隆并进行测序验证正确,表明构建质粒成功;经腺病毒包装及病毒扩增与纯化后,shRNA-Slfn1(1)、shRNA-Slfn1(2)、shRNA-Slfn1(3)及NC-shRNA的病毒滴度分别为1.0x1011 ifu/ml,2.5x1011 ifu/ml,6.3x1010 ifu/ml,5.5x1010 ifu/ml。Western Blot证实shRNA-Slfn1(1)和shRNA-Slfn1(3)能显著降低293T细胞中Flag的表达,确定shRNA-Slfn1(1)及shRNA-Slfn1(3)为目的质粒。2、原代培养第4-6天时,部分组织块周围开始有长梭形细胞爬出;第7-9天时,组织块周围细胞爬出较少的呈网状生长,细胞爬出较多的呈漩涡状生长,致密排列呈束状;第10-14天时,细胞呈放射状、典型的“峰—谷”样结构,相互融合达80%左右即可传代,此时传代细胞相比原代细胞生长速度明显加快,细胞变大,折光性减弱。免疫荧光染色鉴定可见VSMCs特异性的α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)表达,表达的阳性细胞数在95%以上。3、shRNA-Slfn1(1)重组腺病毒转染VSMCs48h后,倒置荧光显微镜下的EGFP、流式细胞仪检测的转染效率均达80%以上;PCR结果显示:Slfn1干扰组与Slfn1干扰对照组相比,Slfn1 mRNA表达量明显减少;CCK-8结果显示:使用shRNA-Slfn1重组腺病毒载体降低VSMCs中Slfn1基因的表达后,与对照组相比促进VSMCs的增殖。结论:1、成功构建了大鼠shRNA-Slfn1的重组腺病毒载体。2、shRNA-Slfn1(1)重组腺病毒对原代大鼠VSMCs具有干扰作用且干扰效率较高,干扰VSMCs中Slfn1基因的表达促进VSMCs的增殖。

关键词： Slfn1 shRNA 腺病毒载体血管平滑肌细胞增殖

媒介融合视阈下短视频对突发事件新闻效果的影响研究

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电影评介 2020年第10期 103-106页

作者：刘姿麟贵州师范学院文学与传媒学院

年末岁初的新冠肺炎疫情是新中国成立以来传播速度最快、感染范围最广、防控难度最大的重大突发公共卫生事件。此次疫情的暴发具有极强的突发性、偶然性和影响力,严重威胁到了中国人民的生命安全和国家的经济发展,关系到整个民族的安危... 详细信息

年末岁初的新冠肺炎疫情是新中国成立以来传播速度最快、感染范围最广、防控难度最大的重大突发公共卫生事件。此次疫情的暴发具有极强的突发性、偶然性和影响力,严重威胁到了中国人民的生命安全和国家的经济发展,关系到整个民族的安危。而且,这次疫情和1998年抗洪、2008年汶川地震和北京奥运会等有很大的不同。与它们相比,此次疫情持续的时间更长,影响的人数更多,发生的范围更广,所以它对宣传动员的要求也更高、更深入。

关键词：感染范围传播速度突发事件新闻北京奥运会疫情短视频宣传动员媒介融合

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上杭县挂袍山公园规划与设计

上杭县挂袍山公园规划与设计

作者：刘姿麟中南林业科技大学

学位级别：硕士

我国山地面积广大,随着城市化进程的加快城市用地日益紧张,为了满足人们的需求,城市绿地空间的开发建设也逐渐转向山地,因此,山地公园的建设成为了一种趋势。山地公园与传统公园有共性,但因为山地地形的特殊性两者也存在差异。山地公园... 详细信息

我国山地面积广大,随着城市化进程的加快城市用地日益紧张,为了满足人们的需求,城市绿地空间的开发建设也逐渐转向山地,因此,山地公园的建设成为了一种趋势。山地公园与传统公园有共性,但因为山地地形的特殊性两者也存在差异。山地公园规划与设计理论尚不完善,在山地公园的景观营造中还存在地域文化缺失城市文脉断层等问题。本文以山地公园为研究对象,对上杭县挂袍山公园进行实践研究,取得成果如下:(1)通过相关文献研究与阅读,全面、系统地阐释了山地公园景观规划与设计方面的概念和基础理论知识,并探究了城市文脉在山地公园规划与设计中的表达,提炼出山地公园规划与设计手法,为上杭县挂袍山公园提供合理的借鉴意义。(2)通过实地调研和文献查找等方法,选取5个有关山地公园规划与设计以及城市文脉延续的优秀案例进行研究。从项目总体布局、规划与设计特色分析、地域文化的表达等方面进行分析与总结,为上杭县挂袍山公园规划与设计提供了实践借鉴与指导。(3)以上杭县挂袍山公园为设计实践,着眼于挂袍山以及上杭县当地文化背景,对上杭县挂袍山公园项目基地实地考察并进行现状分析,提出其景观的规划思路与理念、设计方法与策略,完成规划与设计方案,并对重要节点进行了初步设计。目前国内外对于山地公园规划与设计的理论尚不完善,可借鉴的案例也比较少,本文研究的主要目的就是利用山地公园规划与设计的相关理论,结合当地文化,对上杭县挂袍山公园进行设计实践,希望为山地公园的规划与设计以及城市文脉在山地公园景观营造中的表达提供一定参考价值。

关键词：山地公园景观规划与设计挂袍山城市文脉

探究中国原创音乐真人秀节目的创新与发展——以《中国好歌曲》为例

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探究中国原创音乐真人秀节目的创新与发展——以《中国好歌曲》为...

作者：刘姿麟厦门大学

学位级别：硕士

电视综艺中的音乐类节目经过起起伏伏的变化后现仍活跃在电视荧屏。自20世纪80年代初《CCTV青歌赛》开创我国电视音乐真人秀的先河,到2004年《超级女声》的火爆出现,最近这几年活跃在电视上的音乐真人秀都或多或少地引进海外同类优秀节... 详细信息

电视综艺中的音乐类节目经过起起伏伏的变化后现仍活跃在电视荧屏。自20世纪80年代初《CCTV青歌赛》开创我国电视音乐真人秀的先河,到2004年《超级女声》的火爆出现,最近这几年活跃在电视上的音乐真人秀都或多或少地引进海外同类优秀节目的模式。然而过多的引进海外模式和“拿来主义”潮流的与日俱增,也使得依赖性增强的同时削弱了我国电视节目的原创能力。《中国好歌曲》作为灿星制作自己研发的新模式,是初次聚焦原创歌曲、重塑音乐生命与原创精神的一档全新的原创类电视音乐真人秀。该节目不光为国内电视发展赋予新的创新力量,同时在2014年,英国国际传媒集团(ITV)收入了该节目模式并负责其国际发行权和英国播出权。这是中国电视音乐真人秀的新里程碑,该节目的原创精神也将推动国内其他同类节目的发展。因此,本文将结合大众文化与精英文化的特征,以及品牌娱乐节目的构成要素和特征,从《中国好歌曲》的原创模式、运营推广、影响效果等多方面对此案例进行分析,并针对《中国好歌曲》存在的不足之处提出一些建议,以求通过《中国好歌曲》这档原创音乐节目思考如何在中国音乐真人秀节目模式移植的浪潮下,从挖掘本土元素、把握大众喜好以及推动我国音乐产业发展等方面,为中国原创音乐真人秀节目的发展给出对策。

关键词：音乐真人秀《中国好歌曲》发展对策

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以美塑人:中小学教学体系中的影视育人研究

电影评介 2020年第14期 97-100页

作者：刘姿麟贵州师范学院文学与传媒学院

随着信息技术的不断变革,信息接收终端越发多元化,社会大众逐渐适应在不同平台接收各种形态的媒体内容,比如文字、图片、视频等。在融媒体时代,促使人类获取信息的方式和对社会的认知伴随着新媒体的广泛普及发生了巨大变化。科技的高速... 详细信息

随着信息技术的不断变革,信息接收终端越发多元化,社会大众逐渐适应在不同平台接收各种形态的媒体内容,比如文字、图片、视频等。在融媒体时代,促使人类获取信息的方式和对社会的认知伴随着新媒体的广泛普及发生了巨大变化。科技的高速发展催生了移动互联网时代,丰富了信息的传播渠道和传播内容,信息的传播变得空前迅速,文字语言的传播时代逐渐转变为视听语言时代。

关键词：中小学教学融媒体时代传播时代信息技术传播内容接收终端视听语言传播渠道

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社会管理的现状及新对策

科技与企业 2011年第13期 44-45页

作者：刘姿麟中国人民公安大学

改革的深化以及市场经济的发展,社会出现了许多新的情况:随着城市化进程的加快,大量的农村人口涌入城市,对这部分人进行有效的管理包括户籍管理提出了严峻的挑战;诸如土地买卖、房屋拆迁的群体性事件增多;对于网络这个虚拟社会的管理也... 详细信息

改革的深化以及市场经济的发展,社会出现了许多新的情况:随着城市化进程的加快,大量的农村人口涌入城市,对这部分人进行有效的管理包括户籍管理提出了严峻的挑战;诸如土地买卖、房屋拆迁的群体性事件增多;对于网络这个虚拟社会的管理也显得非常重要。上述这些问题都对公安机关新形势下在社会管理方面提出了挑战。本文从公安机关的性质职能、社会管理方面的特征等入手通过分析现阶段社会管理方面面临的问题及原因,提出了公安机关在社会管理方面的建议,以期能提高我国公安机关的管理效率,为和谐社会的建立提供一个良好的环境。

关键词：公安机关群体性事件流动人口网络技术

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火候未至，用心追梦

求学 2021年第2期 71-72页

作者：刘姿麟广西医科大学

上大学后,我时常会想起高中的那些日子,再看看现在的自己,发现一切都刚刚好。那时候走在高中校园里,我时常仰望天空,因为我不知道三年过后,我的这双腿会走到哪里。我的基础很差,为了能更好地学习,高二下学期的时候我转入了一所很好的高...

上大学后,我时常会想起高中的那些日子,再看看现在的自己,发现一切都刚刚好。那时候走在高中校园里,我时常仰望天空,因为我不知道三年过后,我的这双腿会走到哪里。我的基础很差,为了能更好地学习,高二下学期的时候我转入了一所很好的高中。转学生的压力不亚于复读生,因为你根本不知道你来的这一趟是否值得。即便我很认真、很努力学习,从来不敢松懈自己,但我的成绩还是没有什么进步,如同水面被激起涟漪后逐渐恢复平静。我的成绩跟班上那位每天睡觉的同学一样,排名都是班级倒数。那种压力感、挫折感、自我怀疑与否定每天都在我心里反复上演,

关键词：

贵州广播电视台动静MCN发展现状与升级路径探析

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贵州师范学院学报 2023年第8期39卷 78-84页

作者：刘姿麟贵州师范学院文学与传媒学院贵州贵阳550018

全媒体时代下,短视频快速兴起,MCN成为了广电实现全媒体转型的风口。有效结合现代新闻传播规律和新媒体的传播特点,实现信息、技术、人才、平台的深度互融互通成为了当今广电融媒体发展的重要使命。以贵州广播电视台动静MCN为研究对象,... 详细信息

全媒体时代下,短视频快速兴起,MCN成为了广电实现全媒体转型的风口。有效结合现代新闻传播规律和新媒体的传播特点,实现信息、技术、人才、平台的深度互融互通成为了当今广电融媒体发展的重要使命。以贵州广播电视台动静MCN为研究对象,分析其现阶段发展的优势和存在的问题、难题,运用创新扩散理论从创新扩散过程和影响采用率的创新特征有指向地对贵州广播电视台MCN进行具体分析,从内容运营、盈利模式、产业生态和服务媒体四个方面,通过对比研究和媒体市场分析,探究出贵州广电媒体利用MCN转型重构媒体影响力和商业生态过程中的有效路径及发展策略,旨在为贵州主流媒体实现全面升级提供参考借鉴。

关键词：主流媒体广电MCN 媒体转型

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新媒体时代下广播电视专业教学改革

新闻研究导刊 2020年第14期11卷 200-201页

作者：刘姿麟贵州师范学院贵州贵阳550001

随着市场经济的发展,媒体行业为了与时俱进,加快了改革的步伐,在全国的各大高校中先后进行了教学改革。传媒类的各大专业也面临着巨大的挑战,其中,广播电视专业面临着严峻的考验,只有加快革新的步伐,才能满足时代的要求。互联网时代的到... 详细信息

随着市场经济的发展,媒体行业为了与时俱进,加快了改革的步伐,在全国的各大高校中先后进行了教学改革。传媒类的各大专业也面临着巨大的挑战,其中,广播电视专业面临着严峻的考验,只有加快革新的步伐,才能满足时代的要求。互联网时代的到来,给新媒体带来了崭新的发展机会,促使广播电视加快专业建设。新媒体时代下,学生要夯实自身的专业基础,提升综合素养,其中,采访、策划、撰稿、剪辑等能力都是必不可少的。本文分析新媒体对广播电视专业产生的影响,提出教学改革的措施,希望可以为推动广播电视专业的教学改革作出贡献。

关键词：媒体广播电视专业融合新闻教学改革