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作者：刘堰凤天津农学院

学位级别：硕士

瓜类细菌性果斑病(bacterial fruit blotch,BFB)为害瓜类作物,是目前瓜类生产上的主要细菌性病害,其病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli,Ac)(高杜娟2011;王健超2013)。目前化学防治中常用铜制剂来预防瓜类细菌性果斑病,就可能导致... 详细信息

瓜类细菌性果斑病(bacterial fruit blotch,BFB)为害瓜类作物,是目前瓜类生产上的主要细菌性病害,其病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli,Ac)(高杜娟2011;王健超2013)。目前化学防治中常用铜制剂来预防瓜类细菌性果斑病,就可能导致西瓜噬酸菌的铜抗性增强。本研究以西瓜噬酸菌野生型菌株Aac-5中与铜代谢相关的两个基因copZ和cusA为对象,通过同源重组双交换法(李晶2016),分别构建copZ、cusA基因缺失突变菌株和互补菌株ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp。对以上菌株进行铜抗性、生长能力、生物膜形成能力、致病性等相关表型测定(田二渊2020);采用RT-q PCR技术对铜代谢、生物膜形成、致病性相关基因等进行表达量分析,以探究copZ和cusA在西瓜噬酸菌中铜抗性等方面生物学功能,结果如下:1.获取了西瓜噬酸菌野生型Aac-5菌株copZ和cusA的相关生物学信息基因copZ编码的蛋白Cop Z具有HMA结构域。HMA结构域是保守的蛋白质结构域,能够参与重金属转运或蛋白质排毒。HMA结构域包含两个能与金属离子发生结合的半胱氨酸。Cop Z蛋白不存在跨膜结构,是非跨膜蛋白。基因cusA编码的蛋白Cus A具有ACR-tran结构域,与药物外排有关。Cus A蛋白含有12个跨膜结构,是较为典型的跨膜蛋白。2.构建了西瓜噬酸菌Aac-5菌株的copZ和cusA基因缺失突变株及ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp互补菌株通过构建自杀性重组质粒p K18-copZ和p K18-cusA,利用同源重组双交换的原理,成功构建了西瓜噬酸菌基因copZ和cusA突变体菌株。将含有目的基因的载体p BBR-copZ和p BBR-cusA分别导入到突变体菌株中,成功构建互补菌株。经多次继代培养,突变菌株和互补菌株经验证都能稳定遗传。3.测定了野生型菌株Aac-5,ΔcopZ和ΔcusA及互补菌株ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp在不同铜浓度下的生长能力、生物膜形成能力、运动性,还有致病性和烟草过敏性反应等生物学表型(1)与野生型Aac-5菌株进行比较发现,ΔcopZ菌株在1.25 mmol/L Cu SO浓度下生长能力显著降低,互补菌株ΔcopZ-comp与野生型Aac-5相比生长能力基本一致;ΔcusA菌株在2.5 mmol/L Cu SO浓度下生长能力显著降低,ΔcusA-comp与野生型Aac-5相比显著下降。(2)在没有进行铜处理的情况下,ΔcopZ菌株运动能力与野生型菌株Aac-5相比,差异不显著,ΔcusA菌株运动能力与野生型菌株Aac-5相比运动能力基本一致;在1.25mmol/L Cu SO和2.5 mmol/L Cu SO浓度下,野生型菌株Aac-5、ΔcopZ和ΔcusA及互补菌株ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp均不发生运动,丧失运动能力。(3)各菌株在没有铜处理的情况下的生物膜形成能力结果显示,突变菌株ΔcopZ、ΔcusA较Aac-5的生物膜形成能力显著降低。在分别添加1.25 mmol/L Cu SO和2.5mmol/L Cu SO后,ΔcopZ、ΔcusA与野生型菌株Aac-5相比,生物膜形成能力均显著降低,ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp部分恢复到野生型菌株Aac-5一致。随着Cu SO浓度的升高,所有菌株的生物膜形成能力均降低。(4)基因copZ和cusA对西瓜噬酸菌Aac-5菌株致病力均没有影响。西瓜幼苗分别接种西瓜噬酸菌野生型菌株Aac-5、突变菌株ΔcopZ和ΔcusA和互补菌株ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp后,均观察到水侵状病斑,病情指数无显著差异;将西瓜子叶注射接种野生型Aac-5、突变菌株ΔcopZ和ΔcusA和互补菌株ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp 48 h后均观察到有轻微发病症状,菌量无显著差异。将野生型菌株Aac-5,ΔcopZ和ΔcusA及互补菌株ΔcopZ-comp和ΔcusA-comp注射烟草叶片,都能使非寄主烟草发生过敏性反应。结果说明copZ和cusA基因缺失不影响西瓜噬酸菌Aac-5菌株在西瓜上的致病力,不会影响非寄主烟草产生过敏性反应。4.测定了copZ和cusA基因对不同铜处理的西瓜噬酸菌野生型菌株Aac-5铜抗性、生物膜形成能力以及致病性相关基因表达的影响基因copZ、基因cusA的缺失对均野生型Aac-5铜代谢相关基因的表达量有影响。其中cue R编码的Cue R蛋白是Mer R转录调控因子,基因cop A编码的Cop A蛋白是重金属转运P型-ATP酶。试验发现,基因cue R在1.25 mmol/L Cu SO处理的突变菌株ΔcopZ和ΔcusA中大量表达

关键词：抗铜瓜类细菌性果斑病菌 copZ cusA

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西瓜噬酸菌铜代谢相关基因copZ功能分析

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植物病理学报 2022年第3期52卷 377-387页

作者：刘堰凤关巍王铁霖李展鸿杨玉文刘慧芹赵廷昌天津农学院园艺园林学院天津300384 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 中国中医科学院中药资源中心/道地药材国家重点实验室培育基地北京100700

瓜类细菌性果斑病(Bacterial fruit blotch,BFB)病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli,Ac),主要为害西瓜、甜瓜等葫芦科作物,是瓜类生产上主要细菌性病害。目前生产上对该病害的防治手段主要以化学防治为主,其中铜制剂的防治效果较... 详细信息

瓜类细菌性果斑病(Bacterial fruit blotch,BFB)病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli,Ac),主要为害西瓜、甜瓜等葫芦科作物,是瓜类生产上主要细菌性病害。目前生产上对该病害的防治手段主要以化学防治为主,其中铜制剂的防治效果较为显著。本研究以西瓜噬酸菌野生型菌株Aac-5中铜代谢相关基因copZ为对象,探究copZ基因缺失对西瓜噬酸菌抗铜性、生长能力等表型的影响;采用RT-qPCR技术测定在不添加和添加外源铜离子条件下,基因copZ缺失后对其他铜代谢相关基因表达量的影响。成功构建了西瓜噬酸菌copZ基因缺失突变菌株ΔcopZ和互补菌株ΔcopZ-comp。结果表明,野生型菌株Aac-5与ΔcopZ-comp菌株在添加1.25 mmol·L^(-1)CuSO_(4)的生长能力与不添加CuSO_(4)相似,而ΔcopZ菌株的生长能力减弱;当添加CuSO_(4)至2.50 mmol·L^(-1)时,野生型菌株Aac-5、ΔcopZ菌株和ΔcopZ-comp菌株的生长能力均减弱。基因copZ缺失在不含铜和含铜条件下均能使西瓜噬酸菌生物膜形成能力减弱;在不含铜条件下基因copZ不影响西瓜噬酸菌的运动能力,在含有1.25 mmol·L^(-1)CuSO_(4)的运动性培养基中各菌株运动能力丧失。ΔcopZ菌株在西瓜子叶内的生长能力相较于野生型菌株Aac-5显著增强,但在西瓜幼苗上的致病力差异不显著,仍具有引起烟草过敏性反应的能力。在不同铜浓度处理后,铜代谢相关基因cueR、copA表达量在野生型菌株中的变化趋势与ΔcopZ菌株存在差异;基因cusA、hylD在野生型菌株中表达量变化趋势与ΔcopZ菌株一致。这表明基因copZ在西瓜噬酸菌铜代谢过程中具有重要作用。

关键词：抗铜西瓜噬酸菌 copZ 基因功能分析

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韭菜根际真菌和内生真菌种群多样性分析

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华北农学报 2018年第A1期33卷 246-252页

作者：付静刘堰凤梅眉黄永红青岛农业大学园艺学院山东青岛266109 青岛市胶州市现代农业发展服务中心山东胶州266300

在前期研究发现,韭菜处理可以减轻香蕉枯萎病和根结线虫病害的发生,推测韭菜中含有能抑制病原菌及致死根结线虫的生防菌。对韭菜根际真菌和内生(叶片和根系)真菌的种群结构及多样性进行比较分析,以期为分离鉴定韭菜中抑菌和杀根结线虫... 详细信息

在前期研究发现,韭菜处理可以减轻香蕉枯萎病和根结线虫病害的发生,推测韭菜中含有能抑制病原菌及致死根结线虫的生防菌。对韭菜根际真菌和内生(叶片和根系)真菌的种群结构及多样性进行比较分析,以期为分离鉴定韭菜中抑菌和杀根结线虫的生防真菌提供理论依据。通过Illumina平台对韭菜根际真菌和内生(叶片和根系)真菌样品中的18S rRNA序列进行测序,并进行生物信息学分析。结果表明:从韭菜根际土壤、根系、叶片中获得348 484高质量序列和123个操作分类单元(OTU)。根际真菌的Chao、ACE、Shannon指数显著高于内生真菌(叶片和根系),而Simpson指数则显著小于内生真菌。根际真菌群落主要由子囊菌门(Ascomycota)(67. 20%)和担子菌门(Basidiomycota)(24.44%) 2个菌门组成;而内生真菌主要由子囊菌门组成,在叶片和根系中含量分别为91. 39%和96. 60%。在检测到的5个菌门中,内生真菌中子囊菌门显著高于根际土壤,其他菌门则显著低于根际土壤。叶片和根系中内生真菌稍有不同,但是差异并不显著。该研究表明,韭菜根际真菌和内生真菌的种群结构存在显著差异,根际真菌的多样性及丰富性显著高于内生真菌。该研究为分离鉴定韭菜中抑制植物病原菌及致死根结线虫的生防真菌提供参考。

关键词：韭菜真菌多样性 Illumina测序内生菌根际土壤

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行业比较优势的显现与维持——基于知识溢出和政策干预视角

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系统工程理论与实践 2024年第4期44卷 1129-1148页

作者：许永洪梁佩凤厦门大学经济学院厦门361005

新行业比较优势如何出现以及优势行业如何维持是探究经济增长路径的根本问题.本文使用2010–2020年各省133万家企业注册大数据研究了知识溢出和政策干预对比较优势显现和维持的影响,并从行业特征和省份特征层面进行了多种异质性探讨.研... 详细信息

新行业比较优势如何出现以及优势行业如何维持是探究经济增长路径的根本问题.本文使用2010–2020年各省133万家企业注册大数据研究了知识溢出和政策干预对比较优势显现和维持的影响,并从行业特征和省份特征层面进行了多种异质性探讨.研究发现,知识溢出促进了新行业比较优势的出现,但只有省份内部关联行业之间的知识溢出有利于已有比较优势的维持.全国层面的产业政策没有提升被扶持行业比较优势出现的概率,但增加了重点发展行业的份额.发展比较优势方面,高知识含量和高地理集中度的行业在知识溢出中得到的收益较低;中西部省份和专业化程度高的省份在行业发展时更依赖于省份间知识溢出.进一步分析发现,发达的公路系统有助于增强省份之间知识溢出对行业发展的促进作用,人口净流入高的省份充当知识外溢的角色.省份之间的知识溢出对重点行业发展政策的发挥有正向调节作用.本文的研究为提升行业多样性提供了经验证据.

关键词：发展比较优势维持比较优势知识溢出政策干预

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热压印成型复合微透镜阵列的微光学照明特性

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光学精密工程 2024年第9期32卷 1371-1383页

作者：胡满凤李磊谢晋广州铁路职业技术学院电气工程学院广东广州511300 华南理工大学机械与汽车工程学院广东广州510641

在LED照明中,光线分布不均产生的眩光及光线中的紫外光、蓝光成分容易造成视觉疲劳和眼睛损伤,目前主要是以调节光源为主,纳米级光波段调节的表面结构加工成本较高。因此,利用热压印快速成型技术开发了一种微米尺度的复合微透镜阵列导光... 详细信息

在LED照明中,光线分布不均产生的眩光及光线中的紫外光、蓝光成分容易造成视觉疲劳和眼睛损伤,目前主要是以调节光源为主,纳米级光波段调节的表面结构加工成本较高。因此,利用热压印快速成型技术开发了一种微米尺度的复合微透镜阵列导光板,探究健康照明的复合微透镜尺度效应。首先分析微棱镜表面小微透镜的深宽比与反射电场分布的关系,然后研究导光板的微结构参数对漫反射率、镜面反射率和透射率的影响。最后,对比市面上丝网印刷微点、微棱镜阵列等结构导光板,研究复合微透镜微米尺度对照度、均匀度等微光学性能的影响。分析表明:当小微透镜深宽比在0.6~1内时,紫外光和蓝光的反射面有更小的反射电场变异系数,说明其漫反射大。实验结果表明:热压印技术可以在4 s内将微透镜高5~30μm和微棱镜高10~80μm的复合微透镜阵列导光板加工成型;照度均匀度随着小微透镜深宽比的增大而增大,照度分别比微棱镜和丝网印刷微点阵列提高45%和83%;与微棱镜相比,紫外光和蓝光的漫反射率分别提高8%和18%,镜面反射率下降80%~83%。控制复合微透镜的深宽比可以减少照明眩光,抑制紫外光和蓝光。

关键词：复合微透镜阵列热压印微成型微光学性能健康照明

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追索“感情的本来面目”:中国现代文论知识生成的一种路径——以姜亮夫《文学概论讲述》为例

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文艺理论研究 2024年第2期044卷 74-82页

作者：黄凤凤武汉大学文学院湖北省武汉市430072

姜亮夫在1930—1933年出版的《文学概论讲述》是中国现代文学理论早期教材的代表之一,集中体现了通过追索“感情的本来面目”来转化传统文论资源和生成现代文论知识这一路径。在这本教材中,姜亮夫明确了“性”与“情”的分野,使“情感... 详细信息

姜亮夫在1930—1933年出版的《文学概论讲述》是中国现代文学理论早期教材的代表之一,集中体现了通过追索“感情的本来面目”来转化传统文论资源和生成现代文论知识这一路径。在这本教材中,姜亮夫明确了“性”与“情”的分野,使“情感”这一理论术语更具本土内涵和时代特色,并以此为基础,从主观因素和可感形式角度探讨传统经典中“感情的本来面目”。而后,姜亮夫以追索文学情感的本质为由,关注传统文体中的“民间源头”与“南方属性”,尝试进行文学传统的“再发明”,促进新的文学知识的生成。这种将“古典文学经验”转化为“现代知性形式”的做法,有利于激活本民族文学传统,帮助建设文学理论学科。

关键词：文学概论情感形式文学传统

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全球消除疟疾的生物学挑战Ⅰ抗疟药耐药性

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第3期36卷 233-238页

作者：陆凤扬州大学医学院(转化医学研究院) 江苏扬州225001

疟疾是严重威胁人类健康的传染病之一,目前疟疾防控仍以药物治疗为主。然而,抗疟药耐药性问题日益严峻,给疟疾防控尤其是恶性疟治疗带来了严峻挑战。为应对这一挑战,需推动新型抗疟药物开发和治疗策略创新,并加强抗疟药耐药性监测与研... 详细信息

疟疾是严重威胁人类健康的传染病之一,目前疟疾防控仍以药物治疗为主。然而,抗疟药耐药性问题日益严峻,给疟疾防控尤其是恶性疟治疗带来了严峻挑战。为应对这一挑战,需推动新型抗疟药物开发和治疗策略创新,并加强抗疟药耐药性监测与研究。本文梳理了当前抗疟药主要类别及使用原则,总结了抗疟药耐药性现状、监测手段及应对策略,旨在为抗疟药使用及耐药性应对提供科学参考、助力全球消除疟疾。

关键词：疟疾消除抗疟药耐药性抗性治理

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两类抗生素药剂对‘纽荷尔’脐橙黄龙病菌的抑制作用及根际细菌群落结构的影响

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植物保护 2021年第6期47卷 83-92页

作者：黄洋关巍王铁霖晏建红田二渊刘堰凤刘博杨玉文赵廷昌中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 道地药材国家重点实验室培育基地中国中医科学院中药资源中心北京100700

为探究磺胺二甲氧嘧啶钠盐(sulfadimethoxine sodium salt,SDM)和氨苄青霉素(ampicillin,AMP)对柑橘黄龙病(citrus Huanglongbing,HLB)的防效以及对柑橘根际细菌群落结构的影响,本试验以‘纽荷尔’脐橙为研究对象,采用0.5 g/L SDM和1 g/... 详细信息

为探究磺胺二甲氧嘧啶钠盐(sulfadimethoxine sodium salt,SDM)和氨苄青霉素(ampicillin,AMP)对柑橘黄龙病(citrus Huanglongbing,HLB)的防效以及对柑橘根际细菌群落结构的影响,本试验以‘纽荷尔’脐橙为研究对象,采用0.5 g/L SDM和1 g/L AMP进行灌根,使用Taq Man qPCR技术监测病树叶内黄龙病菌菌量的动态变化,并利用宏基因组技术分析根际细菌群落结构的变化。结果显示,AMP连续处理后病树叶片内黄龙病菌菌含量在一定程度上受到抑制,初步判断AMP对黄龙病有一定的抑制效果,SDM处理对黄龙病菌菌含量抑制效果较差;2类抗生素处理组中根际主要优势类群结构和相对丰度在门、属分类水平上均发生改变,解磷细菌中慢生根瘤菌属Bradyrhizobium细菌的相对丰度在处理后有明显变化,pstA、pstC等部分磷循环功能基因相对丰度发生改变,表明2类抗生素药剂均影响了‘纽荷尔’脐橙病树根际细菌群落结构。

关键词：柑橘黄龙病根际细菌宏基因组抗生素抑制作用

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西瓜噬酸菌调控因子aryR的基因功能分析

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中国瓜菜 2020年第2期33卷 8-16页

作者：田二渊关巍王铁霖黄洋刘堰凤刘博杨玉文赵廷昌吉林农业大学长春130118 植物病虫害生物学国家重点实验室·中国农业科学院植物保护研究所北京100193 道地药材国家重点实验室培育基地·中国中医科学院中药资源中心北京100700

瓜类细菌性果斑病是危害葫芦科作物的世界性病害,其病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)。以西瓜噬酸菌野生型菌株Aac-5为研究对象,构建了转录调控因子aryR的全基因缺失突变株,并构建了互补菌株。测定了野生型、突变株和互补菌株... 详细信息

瓜类细菌性果斑病是危害葫芦科作物的世界性病害,其病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)。以西瓜噬酸菌野生型菌株Aac-5为研究对象,构建了转录调控因子aryR的全基因缺失突变株,并构建了互补菌株。测定了野生型、突变株和互补菌株的致病性、致敏性、生物膜形成能力和运动能力等生物学特性。同时,使用qRT-PCR定量检测了鞭毛基因fliR和fliC以及III型分泌系统功能基因hrpE和hrcN的表达水平。结果显示,aryR的缺失降低了Aac-5对西瓜的致病力和运动能力,增强了生物膜形成能力,对非寄主烟草仍具有致敏性。hrpE、hrcN、fliR、fliC基因在突变株中的表达量下调,表明aryR对hrpE、hrcN、fliR、fliC基因均为正调控。综上所述,基因aryR在Aac-5致病过程、运动能力和其他表型中起着重要的调控作用。

关键词：西瓜噬酸菌转录调控因子 aryR 致病性运动能力

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结合正态分布变换与线面ICP的弹性激光SLAM算法

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武汉大学学报（信息科学版） 2024年第4期49卷 672-680页

作者：王彬章浙涛何秀凤河海大学地球科学与工程学院江苏南京211100

激光雷达(light detection and ranging,LiDAR)同时定位与建图(simultaneous localization and mapping,SLAM)中的位姿估计依赖于高精度和高可靠性的扫描匹配算法。针对实时LiDAR里程计与建图(LiDAR odometry and mapping in real-time,LOAM)框架中的点到线和点到面的迭代最近点算法(iterative closest point,ICP)在非结构化场景中退化的问题,提出了用于识别非结构化场景的环境特征值(environmental feature values,EFV),并根据EFV弹性地选择用正态分布变换(normal distributions transform,NDT)进行粗配准,实现了一种基于扫描匹配的弹性实时激光SLAM算法NDT-LOAM。实验结果表明,EFV可以有效区分非结构化场景,并给出了EFV阈值的调试方法。定位与建图实验分析表明,所提算法相比LOAM等经典的纯激光SLAM算法,在精度以及可靠性上均有较大提升,室外定位精度可从米级提升至分米级,在面对手持数据时也不会建图失败,能够得到全局一致性地图。因此此算法具有很好的环境适应性,丰富和发展了面向复杂环境的SLAM方法。

关键词： LiDAR SLAM 扫描匹配 NDT 线面ICP 弹性系统

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