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解聚复肾宁对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞表达血小板衍生生长因子-B的影响

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中国老年学杂志 2011年第1期31卷 65-68页

作者：彭爽曹文富刘占术李慧重庆医科大学附属第一医院中西医结合科重庆400016

目的观察解聚复肾宁(JJFSN)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)表达血小板衍生生长因子-B(PDGF-B)的影响。方法制备厄贝沙坦(Irb)和不同剂量JJFSN含药血清,加入到高糖诱导的体外培养的GMCs中。采用ELISA检测不同时间(24、48、72 h)... 详细信息

目的观察解聚复肾宁(JJFSN)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)表达血小板衍生生长因子-B(PDGF-B)的影响。方法制备厄贝沙坦(Irb)和不同剂量JJFSN含药血清,加入到高糖诱导的体外培养的GMCs中。采用ELISA检测不同时间(24、48、72 h)细胞培养上清液中PDGF-B含量,分别采用RT-PCR法、W estern印迹检测48 h细胞PDGF-B mRNA及其蛋白表达。结果与正常对照组比较,高糖组PDGF-B分泌增加、PDGF-B mRNA及其蛋白表达上调(P<0.001)。与高糖组比较,Irb和JJFSN两种含药血清均能逆转上述变化,后者的抑制作用强于前者(P<0.05),且抑制作用呈一定的时间、剂量依赖关系。结论高糖可致GMCs分泌PDGF-B增加、PDGF-B mRNA及其蛋白表达上调,JJFSN可减少PDGF-B分泌,下调PDGF-B mRNA及其蛋白表达,从而有利于延缓糖尿病肾病肾小球硬化(GS)的进展。

关键词：解聚复肾宁肾小球系膜细胞血小板衍生生长因子-B

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ITP患者巨核细胞存在自噬异常的初步研究

国际检验医学杂志 2019年第A1期40卷 171-173页

作者：刘占术重庆医科大学附属永川医院血液内科重庆永川402160

目的初步研究ITP患者巨核细胞自噬异常的情况。方法收集14例ITP初诊患者,并设立对照,采集骨髓并进行涂片,采集外周血离心后获得血浆,应用瑞氏-吉姆萨染色液对骨髓涂片染色,然后镜检,进行巨核细胞分类计数,同时拍照。结果ITP患者巨核细... 详细信息

目的初步研究ITP患者巨核细胞自噬异常的情况。方法收集14例ITP初诊患者,并设立对照,采集骨髓并进行涂片,采集外周血离心后获得血浆,应用瑞氏-吉姆萨染色液对骨髓涂片染色,然后镜检,进行巨核细胞分类计数,同时拍照。结果ITP患者巨核细胞总数与正常对照组相比,无统计学意义;与对照组比较,ITP患者前期巨核细胞数目明显增高,且具有显著差异(P<0.01),而ITP患者后期巨核细胞数目明显降低,也具有统计差异(P<0.05)。ITP患者颗粒巨核细胞胞浆量较少,胞浆中的颗粒细小且稀疏,而正常对照组颗粒巨核细胞胞浆量丰富,胞浆中的颗粒较粗大且浓密;ITP患者巨核细胞胞核染色质较疏松,而正常对照组染色质致密。结论通过对骨髓涂片分析及临床资料统计初步得知ITP患者巨核细胞存在自噬异常。

关键词： ITP 自噬凋亡巨核细胞

κ轻链水平与骨髓瘤患者骨痛程度的相关性分析

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现代医药卫生 2019年第14期35卷 2110-2112页

作者：刘占术重庆医科大学附属永川医院血液内科

目的探讨κ轻链型骨髓瘤与其患者骨痛的相关性分析。方法选取2018年1-6月在重庆医科大学附属永川医院血液内科确诊并治疗的多发性骨髓瘤(MM)患者28例,分为κ轻链组(16例)和非κ轻链组(12例)。同时选取同期健康人员15例作为正常对照组,... 详细信息

目的探讨κ轻链型骨髓瘤与其患者骨痛的相关性分析。方法选取2018年1-6月在重庆医科大学附属永川医院血液内科确诊并治疗的多发性骨髓瘤(MM)患者28例,分为κ轻链组(16例)和非κ轻链组(12例)。同时选取同期健康人员15例作为正常对照组,分别于以硼替佐米为主的联合化疗进行κ轻链测定及骨痛评分,然后通过Spearman进行相关性分析,对比分析治疗前后疗效。结果与正常对照组比较,非κ轻链组κ轻链水平差异无统计学意义(P>0.05),但κ轻链组κ轻链水平较非κ轻链组明显增高,κ轻链组骨痛评分明显高于非κ轻链组,差异均有统计学意义(P<0.01);κ轻链组κ轻链水平与其骨痛评分呈显著正相关(P<0.01);经过以硼替佐米为主的联合化疗后,κ轻链组κ轻链水平、骨痛评分较治疗前均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论硼替佐米通过抑制核因子-κB(NF-κB)通路,进而减少轻链的生成,导致破骨细胞活性减弱,进而溶骨损害减轻,从而缓解骨痛。

关键词：硼替佐米多发性骨髓瘤 κ轻链骨痛

苦参碱诱导Raji细胞凋亡及其对Bcl-2表达的影响

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重庆医科大学学报 2010年第2期35卷 189-191页

作者：黄曦陈建斌郭启帅杨泽松刘占术黄宗干重庆医科大学附属第一医院血液内科重庆医科大学基础医学院核医学教研室重庆400016

目的:观察苦参碱(Matrine,Mat)对体外人淋巴瘤Raji细胞增殖及细胞凋亡的影响,探讨Mat诱导Raji细胞凋亡的作用机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mat对Raji细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡率;免疫细胞化学技术检测Mat对Raji细... 详细信息

目的:观察苦参碱(Matrine,Mat)对体外人淋巴瘤Raji细胞增殖及细胞凋亡的影响,探讨Mat诱导Raji细胞凋亡的作用机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mat对Raji细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡率;免疫细胞化学技术检测Mat对Raji细胞株Bcl-2蛋白表达的影响;RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA表达。结果:不同浓度的Mat对Raji细胞均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系;Mat能明显诱导Raji细胞凋亡;免疫细胞化学结果显示Bcl-2在实验组中的表达显著低于对照组。RT-PCR显示Bcl-2 mRNA表达明显减弱,且随剂量增加越明显。结论:Mat能抑制人淋巴瘤Raji细胞的增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2表达有关。

关键词：苦参碱 Raji细胞细胞增殖细胞凋亡

苦参碱对Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Fas/FasL表达的影响

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第四军医大学学报 2009年第22期30卷 2561-2564页

作者：刘占术陈建斌汤为学杨泽松黄曦黄宗干重庆医科大学附属第一医院血液内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:探讨中药苦参碱对人Burkitts淋巴瘤Raji细胞凋亡的作用及其可能机制.方法:应用MTT法测定苦参碱对Raji细胞生长的抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;WesternBlot检测Fas,FasL,Caspase-3蛋白的表达量.结果:苦参碱0.2～... 详细信息

目的:探讨中药苦参碱对人Burkitts淋巴瘤Raji细胞凋亡的作用及其可能机制.方法:应用MTT法测定苦参碱对Raji细胞生长的抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;WesternBlot检测Fas,FasL,Caspase-3蛋白的表达量.结果:苦参碱0.2～1.6g/L作用Raji细胞24,48,72h后,对Raji细胞生长具有增殖抑制作用,且呈明显的量效和时效关系,48h半数抑制浓度(IC50)为1.34g/L.苦参碱0.4,0.8,1.6g/L组作用48h后,Raji细胞总凋亡率分别为15.10%,27.88%,48.08%,与对照组8.78%相比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).WesternBlot检测结果显示Fas,FasL,Caspase-3蛋白表达水平随苦参碱浓度的提高而增加.结论:一定浓度苦参碱可诱导Raji细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与上调Fas,FasL蛋白的表达以及激活Caspase-3有关.

关键词：苦参碱 Raji细胞 Fas FasL Caspase-3 凋亡

生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为

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医用生物力学 2022年第3期37卷 425-432页

作者：张天聪陈丹廖娟邓素容米永华刘占术何菲胡煜琳李远重庆医科大学附属永川医院中心实验室重庆402160

目的研究生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)-玻璃微通道芯片。将抗凝人外周全血以300、1500 s^(-1)壁剪切率流过微通道芯片,倒置荧光显微镜拍摄荧光标记... 详细信息

目的研究生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)-玻璃微通道芯片。将抗凝人外周全血以300、1500 s^(-1)壁剪切率流过微通道芯片,倒置荧光显微镜拍摄荧光标记血小板在微通道玻璃表面形成的血小板聚集体荧光图像,通过图像分析得到血小板聚集体数量、平均尺寸、表面覆盖率和平均荧光强度。分别对玻璃表面进行亲水性处理、牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)封闭和胶原纤维蛋白修饰处理,调整血液样品红细胞比容(hematocrit,Hct),用抗血小板制剂处理血液样品,观察上述条件下血小板在玻璃表面的聚集行为;比较分析健康人群和糖尿病患者的血小板聚集情况。结果流动条件下,血小板在玻璃表面发生聚集形成三维血小板聚集体;血小板聚集依赖于壁剪切率大小、玻璃表面亲疏水性和Hct;血小板聚集主要由血小板膜糖蛋白GPIIb/IIIa-纤维蛋白原和ADP-P2Y_(12)受体通路调控;血小板在玻璃表面的聚集能够反映糖尿病患者血小板的高活化状态。结论在300、1500 s^(-1)流动条件下,血小板在玻璃表面的聚集与剪切率、蛋白吸附、血小板相关受体和血小板自身活化状态相关。本文建立了一种无需额外黏附蛋白修饰的微流控血小板功能分析的新模型,可用于临床血小板功能评估。

关键词：玻璃-血小板相互作用血小板聚集剪切率抗血小板药物糖尿病

显微三维成像技术分析替罗非班抑制血小板黏附聚集的量效关系

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分析化学 2022年第2期50卷 244-255页

作者：何菲张天聪陈丹丁玲邓素容米永华刘占术李远重庆医科大学附属永川医院中心实验室重庆市血液中心永川分中心

建立了一种显微三维成像技术用于定性和定量评价替罗非班(血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂)抑制血小板黏附聚集的量效关系。在健康志愿者富血小板血浆(PRP)中加入0～50μg/mL替罗非班进行处理,将处理后的PRP分别滴加在胶原纤维蛋... 详细信息

建立了一种显微三维成像技术用于定性和定量评价替罗非班(血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂)抑制血小板黏附聚集的量效关系。在健康志愿者富血小板血浆(PRP)中加入0～50μg/mL替罗非班进行处理,将处理后的PRP分别滴加在胶原纤维蛋白和玻璃表面上,诱导血小板活化聚集,通过激光显微三维成像技术观察不同条件下血小板聚集体的显微三维形态学图像,并量化血小板聚集体的体积、面积覆盖率、血小板黏附数量和活化血小板数量比例。结果表明,利用激光显微三维成像技术可直观地观察到胶原纤维蛋白和玻璃表面形成的血小板聚集体的三维显微形态。胶原纤维蛋白表面形成的血小板聚集体呈薄片状,玻璃表面形成的血小板聚集体呈山丘状。对于胶原纤维蛋白表面,替罗非班终浓度为1.56～12.5μg/mL时,随其浓度增加,血小板聚集体体积和面积覆盖率显著降低;当替罗非班浓度增加至25和50μg/mL,仅见血小板在胶原纤维蛋白上发生黏附,血小板黏附数量和活化血小板比例随浓度增加而显著降低。在玻璃表面,经1.56μg/mL替罗非班处理,血小板聚集体体积和面积覆盖率降低;3.15～50μg/mL替罗非班可完全抑制血小板聚集,并且血小板黏附数量和活化血小板比例随替罗非班浓度增加而显著降低。综上,3.15～12.5μg/mL替罗非班既可完全抑制血小板在玻璃表面的聚集,又保留了部分血小板在胶原纤维蛋白表面上的聚集能力。采用显微三维成像技术定性和定量分析替罗非班抑制血小板在胶原纤维蛋白和玻璃表面的黏附聚集的量效关系,可为临床合理选择替罗非班的剂量提供新的分析方法。

关键词：血小板聚集显微三维形态胶原纤维玻璃替罗非班量效关系

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苦参碱对Raji细胞凋亡的影响及其机制

中药材 2011年第4期34卷 576-579页

作者：刘占术罗章琴谢波薛乾富肖悦杨泽松陈建斌重庆医科大学附属永川医院血液内科重庆402160 重庆医科大学附属第一医院血液内科重庆400016

目的:探讨活化的p38MAPK在苦参碱(Matrine,Mat)诱导人Burkitt′s淋巴瘤Raji细胞凋亡过程中对Fas/FasL的影响。方法:选用Raji细胞进行体外培养,用苦参碱(终浓度为0.4、0.8、1.6 mg/mL)和在此基础上加入SB203580(p38 MAPK抑制剂)作用48 h... 详细信息

目的:探讨活化的p38MAPK在苦参碱(Matrine,Mat)诱导人Burkitt′s淋巴瘤Raji细胞凋亡过程中对Fas/FasL的影响。方法:选用Raji细胞进行体外培养,用苦参碱(终浓度为0.4、0.8、1.6 mg/mL)和在此基础上加入SB203580(p38 MAPK抑制剂)作用48 h后,分别采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率和Western blot检测P-p38MAPK、Fas、FasL蛋白表达的变化。结果:终浓度为0.4、0.8、1.6 mg/mL苦参碱对Raji细胞总凋亡率显著高于SB203580组及对照组(P<0.05或P<0.01);Western blot显示P-p38MAPK、Fas、FasL蛋白表达水平随苦参碱浓度的提高而增加,并且在加入SB203580后降低。P-p38MAPK与Fas、FasL具有明显相关性。结论:苦参碱可能通过活化p38MAPK来上调Fas、FasL的表达,从而促进Raji细胞凋亡。

关键词：苦参碱 Raji细胞 P-p38 MAPK Fas/FasL 凋亡

地塞米松对特发性血小板减少性紫癜骨髓涂片中巨核细胞形态学的影响

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中国现代医学杂志 2012年第8期22卷 55-57页

作者：刘占术罗章琴谢波薛乾富肖悦米永华重庆医科大学附属永川医院血液科重庆永川402160 重庆医科大学附属永川医院检验科重庆永川402160

目的了解地塞米松(D X M)对特发性血小板减少性紫癜(ITP)骨髓涂片中巨核细胞的形态学改变。方法收集42例ITP初诊患者作为ITP组和22名健康人作为对照组,其中ITP组标本分别在大剂量D X M治疗前和治疗两周后采样,即D X M治疗前和D X M治疗... 详细信息

目的了解地塞米松(D X M)对特发性血小板减少性紫癜(ITP)骨髓涂片中巨核细胞的形态学改变。方法收集42例ITP初诊患者作为ITP组和22名健康人作为对照组,其中ITP组标本分别在大剂量D X M治疗前和治疗两周后采样,即D X M治疗前和D X M治疗后。然后分别采集上述分组对象的骨髓并涂片,与对照组骨髓片一并在显微镜下对巨核细胞进行分类,并记录D X M治疗前、D X M治疗后以及对照组的血小板数目。结果 D X M治疗前比值与D X M治疗后比值、对照组比值相比较,差异均具有统计学意义(P0.05);同时,D X M治疗后外周血小板数较治疗前明显升高(P<0.01),但与对照组相比仍较低(P<0.01)。结论 D X M在治疗ITP过程中,可直接或间接促使巨核细胞凋亡,从而使血小板生成增加。

关键词：地塞米松特发性血小板减少性紫癜巨核细胞骨髓涂片