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改良LPD液、硝普钠对犬肺缺血/再灌注损伤内皮素-1的影响

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重庆医科大学学报 2013年第7期38卷 755-757页

作者：刘公哲王磊齐海李元明高双庆马爱国新疆医科大学第二附属医院胸外科乌鲁木齐830000

目的:采用犬单肺原位常温缺血/再灌注模型,探讨及研究改良LPD液(low potassium dextra glucose,LPD),改良LPD液+硝普钠2种保护液对犬肺缺血/再灌注损伤时血浆及肺组织匀浆中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的影响有无差异。方法:选用健康... 详细信息

目的:采用犬单肺原位常温缺血/再灌注模型,探讨及研究改良LPD液(low potassium dextra glucose,LPD),改良LPD液+硝普钠2种保护液对犬肺缺血/再灌注损伤时血浆及肺组织匀浆中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的影响有无差异。方法:选用健康成年杂交犬12只,随机分成2组,每组6只,A组以常温LPD液行左肺灌洗,灌注量50～60 ml/kg,灌注压力0.05),肺湿/干比重比较有变化(P<0.05)。结论:改良的LPD液可能通过减少ET-1的表达水平,降低肺湿/干比重,减轻肺缺血/再灌注损伤,但在改良的LPD液基础上加上硝普钠,对ET-1的表达水平及肺湿/干比重无明显影响。

关键词：改良LPD液硝普钠肺缺血再灌注损伤内皮素-1 肺

转化“问题学生”的有效方法探析--以学生小Y的转化为例

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广西教育 2022年第1期 38-40页

作者：刘公哲南宁市三美学校

本文通过研究相关教育文献,并结合自身教育经验,系统分析“问题学生”的成因,重点运用案例分析的方式,从学校教育、家庭教育两个维度总结出一些转化“问题学生”的实际方法。

关键词：问题学生转化策略家校合作沟通交流

柚皮素通过Notch1/Hes1通路抑制肺癌干细胞增殖、迁移和分化

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基因组学与应用生物学 2019年第3期38卷 1448-1453页

作者：孙振峰刘公哲朱应超王继振济南市人民医院济南271100

为探讨柚皮素对肺癌干细胞增殖、迁移和分化的分子机制,本研究应用免疫磁珠法分选肺癌干细胞(A549-CSCs),并通过流式细胞术进行表面分子的鉴定;通过CCK8法检测不同浓度的柚皮素(25μg/m L,50μg/mL, 100μg/mL)对肺癌干细胞(A549-CSCs)... 详细信息

为探讨柚皮素对肺癌干细胞增殖、迁移和分化的分子机制,本研究应用免疫磁珠法分选肺癌干细胞(A549-CSCs),并通过流式细胞术进行表面分子的鉴定;通过CCK8法检测不同浓度的柚皮素(25μg/m L,50μg/mL, 100μg/mL)对肺癌干细胞(A549-CSCs)活力的影响,Transwell检测柚皮素对A549-CSCs细胞迁移能力的影响,Q-PCR检测柚皮素对肺癌干细胞分化相关因子Sox2和Oct4 m RNA表达的影响,Western blotting法检测柚皮素对细胞内Notch1和Hes1蛋白表达的影响。流式细胞术检测结果显示,A549-CSCs细胞表面分子CD133呈阳性表达,符合肺癌干细胞特征。CCK8结果显示,与对照组(control)比较,25μg/m L、50μg/mL、100μg/mL柚皮素处理A549-CSCs 24 h,细胞活力显著降低(p<0.05);Transwell检测结果显示,与对照组比较,不同浓度柚皮素处理组A549-CSCs迁移能力显著降低(p<0.05);定量PCR (real-time polymerase chain reaction, Q-PCR)结果显示,与对照组比较,柚皮素处理组细胞Sox2和Oct4 m RNA表达水平显著降低(p<0.05);蛋白质印迹法(Western blotting)结果显示,与对照组相比柚皮素处理组细胞Notch1和Hes1蛋白表达水平均降低。本研究发现柚皮素可能通过抑制Notch1/Hes1通路抑制肺癌干细胞增殖、迁移和分化。这为柚皮素治疗肺癌提供临床依据。

关键词：柚皮素肺癌干细胞细胞迁移 Notch/Hes1通路

心脏瓣膜病中线粒体凋亡调控因子与microRNA的相互作用

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基因组学与应用生物学 2019年第9期38卷 4314-4318页

作者：尹波李翠翠朱应超刘公哲济南市人民医院

为了揭示心脏瓣膜病中线粒体凋亡调控因子与microRNA的相互作用,本研究检测了心脏瓣膜病患者瓣膜组织病变部位和周围健康组织中的线粒体凋亡调控因子PUMA、Drp1和ARC的表达,并分析了病变部位的ROS水平和SOD活性,同时考察了miR-214和miR-... 详细信息

为了揭示心脏瓣膜病中线粒体凋亡调控因子与microRNA的相互作用,本研究检测了心脏瓣膜病患者瓣膜组织病变部位和周围健康组织中的线粒体凋亡调控因子PUMA、Drp1和ARC的表达,并分析了病变部位的ROS水平和SOD活性,同时考察了miR-214和miR-15a对凋亡因子PUMA和ARC的影响。研究显示,PUMA和Drp1在病变组织中表达水平显著升高,而ARC表达显著降低(p<0.05)。病变组织中ROS水平显著升高,而SOD活性显著降低(p<0.05)。瓣膜组织病变部位的miR-214表达水平显著升高,而miR-15a显著降低(p<0.05)。应用miRNA抑制剂下调miR-214和miR-15a后,PUMA和ARC的表达水平被显著上调(p<0.05)。本研究表明在心脏瓣膜病患者中,miR-214和miR-15a分别靶向ARC和PUMA。

关键词：心脏瓣膜病凋亡 miR-214 miR-15a ARC PUMA

血清外泌体微小RNA-338在食管癌中的表达及临床意义

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中华实验外科杂志 2022年第2期39卷 362-365页

作者：王敏刘雪娜刘公哲李大宏山东第一医科大学附属济南人民医院检验科 271199 山东第一医科大学附属济南人民医院心胸外科 271199

目的观察血清外泌体微小RNA-377(miR-377)在食管癌(EC)中的表达水平,并探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OE33、Eca9706细胞株、5例EC癌组织中miR-377表达水平。选取2016年4月至2019年3月经山东第一医科... 详细信息

目的观察血清外泌体微小RNA-377(miR-377)在食管癌(EC)中的表达水平,并探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OE33、Eca9706细胞株、5例EC癌组织中miR-377表达水平。选取2016年4月至2019年3月经山东第一医科大学附属济南人民医院确诊并住院治疗的EC患者40例作为观察组,另选取同期本院体检健康者40例作为对照组,RT-qPCR检测血清外泌体中miR-377表达水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平;采用χ^(2)检验分析EC患者血清外泌体中miR-377、血清VEGF水平与临床病理特征的关系;Pearson法分析EC患者血清外泌体中miR-377、血清VEGF表达相关性;受试者工作特征(ROC)曲线预测miR-377、VEGF表达水平对EC的诊断价值。结果与正常食管上皮细胞株HEEC细胞中miR-377表达水平(1.07±0.20)比较,OE33、Eca9706癌细胞中miR-377表达水平(0.74±0.21和0.68±0.19)显著降低(F=6.604,P<0.05);与癌旁组织中miR-377表达水平(1.10±0.23)比较,癌组织中miR-377表达水平(0.69±0.18)显著降低(t=3.319,P<0.05);观察组血清外泌体中miR-377表达水平(0.76±0.22)明显低于对照组血清外泌体中miR-377表达水平(1.04±0.25,t=5.318,P<0.05),血清VEGF表达水平[(22.79±4.79)pg/ml]明显高于对照组血清VEGF表达水平(16.71±3.44)pg/ml,t=6.521,P<0.05;EC患者血清外泌体中miR-377及血清VEGF表达水平与TNM分期、分化程度和淋巴结转移均有关(miR-377:χ^(2)=6.172、8.780、13.864,P<0.05;VEGF:χ^(2)=6.839、5.402、6.114,P<0.05);EC患者血清外泌体中miR-377与血清VEGF表达呈负相关(r=-0.641,P<0.05);血清外泌体中miR-377诊断EC的ROC曲线下面积为0.835(95%CI:0.684~0.933),灵敏度为69.50%,特异性为88.20%;血清VEGF诊断EC的ROC曲线下面积为0.909(95%CI:0.775~0.977),灵敏度为89.65%,特异性为76.50%;miR-377联合VEGF诊断EC的ROC曲线下面积为0.949(95%CI:0.829~0.994),灵敏度为95.70%,特异性为88.21%。

关键词：食管癌血清外泌体微小RNA-377 诊断价值

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木犀草素调控食管癌细胞生物学行为及其机制

中华实验外科杂志 2022年第2期39卷 287-290页

作者：孙振峰刘公哲朱应超李大宏许凝山东第一医科大学附属济南人民医院胸心外科 271199 大连医科大学附属大连市中心医院胸外科 116033

目的探讨木犀草素对食管癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法分别用0 μmol/L(对照组)、25 μmol/L(低剂量木犀草素组)、50 μmol/L(中剂量木犀草素组)及100 μmol/L(高剂量木犀草素)浓度木犀草素处理EC9706细胞3 d。分别转染anti-微... 详细信息

目的探讨木犀草素对食管癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法分别用0 μmol/L(对照组)、25 μmol/L(低剂量木犀草素组)、50 μmol/L(中剂量木犀草素组)及100 μmol/L(高剂量木犀草素)浓度木犀草素处理EC9706细胞3 d。分别转染anti-微小核糖核酸(miR)-NC、anti-miR-718、miR-NC及miR-718 mimics至EC9706细胞, 转染anti-miR-NC及anti-miR-718细胞分别标记为anti-miR-NC组及anti-miR-718组。用100 μmol/L浓度木犀草素孵育转染miR-NC(高剂量木犀草素+miR-NC组)及转染miR-718 mimics(高剂量木犀草素+miR-718组)至EC9706细胞。溴化-3-(4, 5-二甲基-2-噻唑)-2, 5-二苯基四氮唑(MTT)检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭及迁移;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-718表达水平;蛋白质印迹法检测蛋白表达。两组间比较行t检验, 多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用SNK检验。结果低、中、高剂量木犀草素组细胞增殖活力显著低于对照组(分别1.34±0.06、0.97±0.05、0.54±0.04比1.53±0.08), 差异有统计学意义(F=53.311, P<0.05)。低、中、高剂量木犀草素组迁移细胞数、侵袭细胞数、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP)-2、MMP-9及B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)表达显著低于对照组[迁移细胞数分别为(116.73±5.09)、(87.74±3.14)、(51.46±3.46)个比(136.67±6.13)个, 侵袭细胞数分别为(103.29±4.45)、(65.17±2.92)、(29.34±1.16)个比(121.48±5.89)个, Cyclin D1分别为0.71±0.04、0.49±0.03、0.24±0.02比0.79±0.05, MMP-2分别为0.66±0.04、0.49±0.03、0.31±0.02比0.75±0.05, MMP-9分别为0.57±0.04、0.41±0.02、0.23±0.02比0.69±0.04, bcl-2分别为0.61±0.03、0.46±0.03、0.25±0.02比0.69±0.05], 凋亡率、p21及B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(bax)表达显著高于对照组[凋亡率分别为(7.89±0.92)%、(15.82±1.19)%、(24.61±1.56)%比(5.83±0.51)%, p21分别为0.42±0.03、0.59±0.04、0.83±0.05比0.31±0.02, bax分别为(0.29±0.03、0.48±0.03、0.71±0.06比0.19±0.02), 差异有统计学意义(F=64.295、104.645、58.793、44.683、35.804、30.089、35.530、32.702、38.778, P<0.05)]。低、中、高剂量木犀草素组细胞miR-718表达显著低于对照组(分别为0.89±0.05、0.67±0.04、0.41±0.03比1.01±0.07), 差异有统计学意义(F=26.443, P<0.05)。高剂量木犀草素+miR-718组细胞迁移细胞数、侵袭细胞数、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、bcl-2表达显著高于高剂量木犀草素+miR-NC组, 凋亡率、p21及bax表达显著低于anti-miR-NC组, 差异有统计学意义(t=8.172、14.002、7.023、10.201、6.330、7.093、9.799、6.988、9.381, P<0.05)。结论木犀草素可通过下调miR-718表达而抑制食管癌EC9706细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡。

关键词：木犀草素食管癌生物学行为机制

单孔全胸腔镜下肺叶切除治疗周围型非小细胞肺癌的安全性和有效性

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现代肿瘤医学 2018年第10期26卷 1544-1547页

作者：王继振刘公哲李大宏莱芜市人民医院胸心外科山东莱芜271100

目的:探讨单孔全胸腔镜下肺叶切除治疗周围型非小细胞肺癌的安全性和有效性。方法:自2016年1月至2017年1月,前瞻性收集我院收治的周围型非小细胞肺癌患者94例,随机分为观察组和对照组,每组各47例。观察组采用单孔胸腔镜治疗,对照组采用... 详细信息

目的:探讨单孔全胸腔镜下肺叶切除治疗周围型非小细胞肺癌的安全性和有效性。方法:自2016年1月至2017年1月,前瞻性收集我院收治的周围型非小细胞肺癌患者94例,随机分为观察组和对照组,每组各47例。观察组采用单孔胸腔镜治疗,对照组采用多孔胸腔镜治疗。比较两组患者手术情况、术后应激反应、术后康复情况和术后并发症。结果:两组患者术前应激激素血管紧张素(AngⅡ)和C-反应蛋白(CRP)比较差异均无统计学差异(P>0.05)。术后72 h,与对照组比较,观察组患者AngⅡ显著降低[(69.49±15.92)vs(82.91±17.53)pg/ml,P=0.000];CRP也显著降低[(12.92±3.65)vs(14.62±3.84)mg/L,P=0.030]。与对照组比较,观察组患者肛门排气时间显著缩短[(64.55±9.65)vs(70.71±9.93)h,P=0.003];住院时间显著缩短[(10.81±1.78)vs(11.95±1.79)d,P=0.003];引流时间显著缩短[(63.87±12.92)vs(70.12±13.85)h,P=0.026]。与对照组比较,观察组患者手术时间显著延长[(183.57±26.95)vs(171.87±28.14)min,P=0.042]。两组患者术后并发症比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单孔全胸腔镜下肺叶切除治疗周围型非小细胞肺癌虽轻度延长手术时间,但可降低患者术后应激反应,加速术后康复。

关键词：单孔全胸腔镜非小细胞肺癌肺叶切除应激反应

血管生成素1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响

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中华实验外科杂志 2022年第3期39卷 472-474页

作者：王继振刘公哲邹峰赵永强马文慧亓磊山东第一医科大学附属人民医院胸心外科济南271199 济南市中西医结合医院脾胃肝胆科济南271199 山东大学齐鲁医院胸外科济南250012

目的探讨血管生成素1(ANGPT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响。方法收集40例NSCLC患者肿瘤组织及癌旁组织、NSCLC细胞系(A549、HCC827、H460和H1299)和人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)行研究检测。转染ANGPT1... 详细信息

目的探讨血管生成素1(ANGPT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响。方法收集40例NSCLC患者肿瘤组织及癌旁组织、NSCLC细胞系(A549、HCC827、H460和H1299)和人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)行研究检测。转染ANGPT1真核表达质粒至A549细胞(pc-ANGPT1组),设定空载表达质粒转染空载组(pcDNA组)和空白对照组(Control组)。反转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测ANGPT1基因信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达。细胞计数(CCK-8)检测细胞吸光度,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移及侵袭。两组间比较行t检验,多组间比较采用单因素方差分析(组间比较采用SNK检验)。结果NSCLC患者肿瘤组织ANGPT1基因mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织(mRNA表达为0.17±0.04比1.03±0.05,蛋白表达为0.27±0.06比0.83±0.07),差异有统计学意义(t=24.145、19.381,P<0.05)。A549、HCC827、H460和H1299细胞ANGPT1基因mRNA和蛋白表达显著低于BEAS-2B细胞(mRNA表达为0.11±0.03、0.32±0.06、0.28±0.03、0.37±0.06比1.05±0.08,蛋白表达为0.23±0.02、0.29±0.05、0.27±0.04、0.35±0.05比0.79±0.06),差异有统计学意义(F=15.447、13.516,P<0.05)。pc-ANGPT1组A549细胞ANGPT1基因mRNA和蛋白表达、细胞凋亡率显著高于pcDNA和Control组[ANGPT1基因mRNA为4.24±0.13比1.01±0.05、1.02±0.04,ANGPT1基因蛋白为1.14±0.08比0.25±0.04、0.24±0.04,细胞凋亡率为(19.27±3.65)%比(3.89±0.78)%、(3.82±0.81)%],48、72、96 h细胞吸光度、细胞迁移数及侵袭数显著低于pcDNA和Control组[48 h吸光度值为0.36±0.05比0.49±0.07、0.52±0.06,72 h吸光度值为0.47±0.07比0.73±0.08、0.79±0.07,96 h吸光度值为0.61±0.08比0.97±0.11、1.03±0.09,细胞迁移数为(60.34±9.42)个比(122.73±12.59)、(121.25±14.16)个,细胞侵袭数为(29.84±5.37)个比(75.31±8.65)、(78.29±8.90)个],差异有统计学意义(F=34.166、21.542、29.942、8.929、11.375、13.983、31.135、24.567,P<0.05)。结论ANGPT1基因在NSCLC中呈低表达,可促进NSCLC细胞凋亡并抑制增殖、迁移及侵袭。

关键词：非小细胞肺癌血管生成素1 生物学行为

lncRNA MIR205HG通过调控miR-122-5p促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭

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现代肿瘤医学 2021年第19期29卷 3325-3330页

作者：王继振孙振峰赵永强刘公哲马文慧亓磊山东第一医科大学附属济南人民医院胸心外科山东济南271199 济南市中西医结合医院脾胃肝胆科山东济南271199 山东大学齐鲁医院胸外科山东济南250012

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法:RT-PCR检测食管鳞状细胞癌组织以及癌旁组织中MIR205HG的表达量;CCK-8实验检测MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞Eca-109和TE-10增殖的影响... 详细信息

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法:RT-PCR检测食管鳞状细胞癌组织以及癌旁组织中MIR205HG的表达量;CCK-8实验检测MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞Eca-109和TE-10增殖的影响;Western blot实验检测侵袭相关蛋白MMP-1和MMP-9以及血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平。结果:结果显示,MIR205HG在食管鳞状细胞癌组织中的表达量显著高于癌旁组织的表达量(P<0.05);与转染对照si-RNA相比,当细胞转染si-MIR205HG时,MIR205HG的表达量显著被抑制(P<0.05);干扰MIR205HG显著抑制食管鳞状细胞癌细胞Eca-109和TE-10的增殖和侵袭(P<0.05);此外,si-MIR205HG促进miR-122-5p的表达,且MIR205HG与miR-122-5p表达量呈负相关(P<0.05);进一步的研究结果表明,抑制miR-122-5p逆转si-MIR205HG对TE-10细胞增殖和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论:MIR205HG能够促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭,其作用机制是通过调控miR-122-5p来实现的,这一结果能够为食管鳞状细胞癌的临床治疗和诊断提供分子基础。

关键词： MIR205HG 食管鳞状细胞癌 miR-122-5p 增殖侵袭