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兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2012年第4期40卷 21-24,30页

作者：哲名家张淼涛云涛王玢瑸刘光清西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021

【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组... 详细信息

【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化***21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45ku;表达的重组FUT2蛋白可与His标签抗体发生抗原抗体反应。【结论】成功克隆了兔岩藻糖基转移酶基因,获得了分子质量约为45ku的FUT2蛋白。

关键词：兔病毒性出血症病毒岩藻糖基转移酶原核表达

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综合题新编选登

数学通讯（教师阅读） 2004年第4M期18卷 38-39页

作者：廖湘楚曹大方刘光清湖南省衡东县一中 421400 江苏盐城师院附中 224002 湖北省南漳县第一中学 441500

题100 已知集合A={(x,y)|x2+y2-4x-14y+45＜0},B={(x,y)|y≥|x-m|+7}.

关键词：数学思想数学试题试题解析中学思维能力

兔出血症病毒感染性cDNA真核表达载体的构建与鉴定

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2009年第10期37卷 7-11页

作者：赵伟刘光清倪征云涛陈柳余斌张淼涛西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

【目的】构建操作更简便的兔出血症病毒(RHDV)感染性cDNA真核表达载体。【方法】在前期构建的RHDV感染性克隆基础上,将其全长cDNA分子分为3段,利用单一的限制性内切酶将其依次克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建RHDV感染性cDNA真核... 详细信息

【目的】构建操作更简便的兔出血症病毒(RHDV)感染性cDNA真核表达载体。【方法】在前期构建的RHDV感染性克隆基础上,将其全长cDNA分子分为3段,利用单一的限制性内切酶将其依次克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建RHDV感染性cDNA真核表达质粒,将该质粒转染BHK-21细胞,传3代后,对产生明显细胞病变的细胞冻融液进行RT-PCR检测。【结果】RHDV感染性cDNA真核表达载体构建成功。构建质粒转染的BHK-21细胞出现明显细胞病变,RT-PCR检测结果表明,RHDV拯救成功。【结论】利用真核表达载体可以很方便地拯救出RHDV。

关键词：兔出血症病毒感染性cDNA pcDNA3.1(+) BHK-21细胞

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对S_k（n）＝m^k的研究

长春地质学院学报 1994年第3期24卷 355-356页

作者：刘光清齐明清高益明长春地质学院通化市商业学校东北师范大学

对Ｓ_ｋ（ｎ）＝ｍ~ｋ的研究刘光清，齐明清，高益明（长春地质学院）（通化市商业学校）（东北师范大学）文［１］中把（ｎ，ｋ都是正整数）简称为“幂和”，并用组合数学方法证明了“幂和”公式的一般性质如下：若则有其中Ｐ＿ｉ（... 详细信息

对Ｓ_ｋ（ｎ）＝ｍ~ｋ的研究刘光清，齐明清，高益明（长春地质学院）（通化市商业学校）（东北师范大学）文［１］中把（ｎ，ｋ都是正整数）简称为“幂和”，并用组合数学方法证明了“幂和”公式的一般性质如下：若则有其中Ｐ＿ｉ（ｋ，ｘ）；１≤ｉ≤２为ｘ的ｋ次有理...

关键词：整数幂和递推公式

口蹄疫病毒OH/CHA/99株全长基因组感染性克隆的构建

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科学通报 2004年第9期49卷 858-862页

作者：刘光清刘在新陈应理包慧芳刘湘涛谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学开放实验室兰州730046

以构建的口蹄疫病毒OH/CHA/99株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA.用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应.对收获的病毒分别用RT-PCR,乳鼠毒力试验以及免疫电子... 详细信息

以构建的口蹄疫病毒OH/CHA/99株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA.用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应.对收获的病毒分别用RT-PCR,乳鼠毒力试验以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定,结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒.同时用空斑实验法观察了拯救病毒及其亲本毒株的生长特性,结果表明二者在致病性上没有明显差异,这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础.

关键词：口蹄疫病毒全长cDNA 转录物RNA OH/CHA/99株克隆

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中学教师奖励需求的调查

中小学管理 1988年第6期 35-40页

作者：刘光清北京一二三中

一、研究目的奖励是对人的某种行为的肯定和评价,同时也是催人上进,鼓舞士气的一种激励因素。教师获得奖励的需求,是教师获得社会承认、尊重和自我实现需求的一种表现,是一种较高层次的需求。对教师进行奖励,尽可能地满足各种不同性别... 详细信息

一、研究目的奖励是对人的某种行为的肯定和评价,同时也是催人上进,鼓舞士气的一种激励因素。教师获得奖励的需求,是教师获得社会承认、尊重和自我实现需求的一种表现,是一种较高层次的需求。对教师进行奖励,尽可能地满足各种不同性别,不同年龄,不同学历,不同政治面貌……的教师的不同需求,以激发广大教师

关键词：中学教师统计表中学老师统计资料汇总奖励制度物质奖励需求

彩色多普勒超声引导射频消融治疗转移性肝肿瘤23例分析

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同方期刊数据库

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重庆医学 2012年第18期41卷 1854-1856页

作者：刘光清张建辉黄利曾江正海南医学院附属医院超声科海口570102 海南医学院附属医院肿瘤内科海口570102

目的探讨彩色多普勒超声引导下射频消融治疗转移性肝肿瘤的近期疗效。方法回顾性分析2008年3月至2010年6月该院收治的转移性肝肿瘤患者23例,在彩色多普勒超声引导下行经皮穿刺射频消融治疗。结果完全灭活率为92.11%,2年内肿瘤复发率为13... 详细信息

目的探讨彩色多普勒超声引导下射频消融治疗转移性肝肿瘤的近期疗效。方法回顾性分析2008年3月至2010年6月该院收治的转移性肝肿瘤患者23例,在彩色多普勒超声引导下行经皮穿刺射频消融治疗。结果完全灭活率为92.11%,2年内肿瘤复发率为13.1%,1年存活率为78.2%。无围术期死亡和严重并发症发生。结论彩色多普勒超声引导下经皮穿刺射频消融治疗可对转移性肝肿瘤进行有效治疗,并发症少,具有较好的近期疗效。

关键词：肿瘤转移肝肿瘤超声检查,多普勒,彩色射频消融

纯电动汽车故障诊断系统功能的研究与设计——评《电动汽车结构原理与故障诊断》

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摩擦学学报 2020年第6期40卷 I0003-I0004页

作者：张义廖春丽高炳易刘光清苏明南充职业技术学院机电工程系四川南充637131

电动汽车不仅是交通工具更是电动产业,也是能源信息的新体系。汽车未来的发展方向不仅是电动化、轻量化,更能够共享以及智能。陈清泉院士在第四届汽车与环境创新论坛上发表演讲,称中国在未来十年内有望成为电动机车的强国。汽车的发展... 详细信息

电动汽车不仅是交通工具更是电动产业,也是能源信息的新体系。汽车未来的发展方向不仅是电动化、轻量化,更能够共享以及智能。陈清泉院士在第四届汽车与环境创新论坛上发表演讲,称中国在未来十年内有望成为电动机车的强国。汽车的发展具有悠久的历史,未来三十年内汽车的发展会产生更加巨大的变化,随着时代的发展和能源的告急,针对汽车能源的革命正在悄无声息地展开。

关键词：创新论坛电动汽车能源信息电动化陈清泉汽车能源电动机车交通工具

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口蹄疫病毒全长cDNA克隆的快速构建

中国兽医科技 2004年第5期34卷 7-10页

作者：方先珍刘光清刘在新李平花谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所

利用RT PCR和 3′cDNA末端快速扩增 (RACE)技术分别扩增出包含口蹄疫病毒(FMDV)全基因组的 2个重叠cDNA片段 ,将其分别插入到载体 pcDNA3.1zeo(+)和pGEM T Easy中 ,然后利用片段本身单一酶切位点将FMDV全长cDNA克隆至 pcDNA3.1zeo(+)载... 详细信息

利用RT PCR和 3′cDNA末端快速扩增 (RACE)技术分别扩增出包含口蹄疫病毒(FMDV)全基因组的 2个重叠cDNA片段 ,将其分别插入到载体 pcDNA3.1zeo(+)和pGEM T Easy中 ,然后利用片段本身单一酶切位点将FMDV全长cDNA克隆至 pcDNA3.1zeo(+)载体 ,经PCR扩增、酶切鉴定和序列测定。结果表明 ,重组质粒 (pcDNA3.1/FMDV)

关键词：口蹄疫病毒 cDNA 克隆 cDNA末端快速扩增 RACE 全基因组