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白头翁(Pulsatilla chinensis)实时荧光定量PCR内参基因的筛选与评价

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分子植物育种 2023年

作者：刘先菊姜金铸刘安中国中医科学院中药研究所中药鉴定与安全性评估北京市重点实验室

为筛选可在白头翁(Pulsatilla chinensis)不同组织部位中稳定表达的基因作为内参基因，供实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法分析白头翁不同组织部位中基因相对表达水平时使用，为后续白头翁中活性成分生物合成途径及分子调控机制解析提供基...

为筛选可在白头翁(Pulsatilla chinensis)不同组织部位中稳定表达的基因作为内参基因，供实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法分析白头翁不同组织部位中基因相对表达水平时使用，为后续白头翁中活性成分生物合成途径及分子调控机制解析提供基础。本研究从已有转录组数据中选取Actin2、EF1γ、GAPDH、PGK和TUB 5个植物中常用的内参基因作为候选基因，使用RT-qPCR法检测候选基因在白头翁不同组织部位(根，根状茎，叶片及叶柄)中的表达水平，并使用geNorm、NormFinder、BestKeeper和Delta Ct 4种方法计算候选基因在样本中表达稳定性；最后使用RefFinder在线软件对候选基因表达稳定性进行综合评价。结果显示GAPDH和Actin2相对于其他内参基因在所试样本中表达较高，PGK次之，EF1γ与TUB基因的表达相对较低。geNorm分析结果表明PGK与GAPDH在四个不同的组织部位中表达最为稳定，且发现两个基因共同作为内参使用即可达到较好的效果；NormFinder、Delta Ct与BestKeeper分析结果均显示PGK的稳定性最好，且TUB基因稳定性最差；最后通过RefFinder对候选基因稳定性进行综合评价发现候选基因的稳定性PGK > EF1γ > GAPDH > Actin2 > TUB；因此PGK基因是最适合用于分析白头翁不同组织部位基因表达量的内参基因。

关键词：

葡萄辅助因子VvVQ10负调白藜芦醇生物合成分子机理研究

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中外葡萄与葡萄酒 2023年

作者：刘先菊刘安姜金铸中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性评估北京市重点实验室

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制，通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明，葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达，紫外光处理呈上调表达... 详细信息

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制，通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明，葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达，紫外光处理呈上调表达，而伤害与霜霉菌侵染处理则显著下调；在山葡萄叶片中瞬时沉默VvVQ10，白藜芦醇及其糖苷（虎杖苷）含量显著升高；酵母双杂交分析表明，VvVQ10蛋白可与VvWRKY8蛋白互作，且结合位点在VvWRKY8的N段或包含DNA结合区的C段。以上结果表明，VvVQ10可通过与VvWRKY8蛋白互作的方式负调控葡萄白藜芦醇的生物合成。

关键词：葡萄辅助因子白藜芦醇 VQ蛋白负调控

脱落酸对‘京香玉’葡萄果实单萜物质合成的影响

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园艺学报 2023年第2期50卷 237-249页

作者：王晓晨聂子页刘先菊段伟范培格梁振昌中国科学院植物研究所葡萄科学与酿酒技术北京市重点实验室中国科学院北方资源植物重点实验室中法葡萄与葡萄酒联合实验室北京100093 国家植物园北京100093 中国科学院大学北京101400

为探究脱落酸(Abscisic acid,ABA)对葡萄果实中单萜物质合成的影响,以玫瑰香型鲜食葡萄品种‘京香玉’为试材,在果实始熟前1周和始熟期用300 mg·L^(-1)ABA浸泡果实2次,测定处理后7、14、21、28和35 d果实中游离态单萜化合物含量以及AB... 详细信息

为探究脱落酸(Abscisic acid,ABA)对葡萄果实中单萜物质合成的影响,以玫瑰香型鲜食葡萄品种‘京香玉’为试材,在果实始熟前1周和始熟期用300 mg·L^(-1)ABA浸泡果实2次,测定处理后7、14、21、28和35 d果实中游离态单萜化合物含量以及ABA合成和信号转导通路、单萜合成通路中相关基因的表达量。在果实中共检测到28种单萜类化合物,并随果实的发育成熟不断积累。外源ABA处理的成熟果实中游离态单萜含量比对照提高45.20%。通过实时荧光定量PCR发现,ABA合成基因(VvNCED1、VvGT)在处理后7 d表达量明显高于对照,VvβG1相对表达量在处理后持续上升;ABA信号受体基因VvPYL1、信号转导相关基因VvPP2C2、VvSnRK2.1、VvABI5的转录水平分别在处理后21和35d明显高于对照;单萜合成通路上游关键酶基因(VvDXS2、VvDXS3、VvDXR、VvGPPS)以及单萜合酶基因VvPNLinNer的表达水平在处理后7d明显高于对照。根据以上结果,推测外源ABA处理可增强果实内部ABA信号的转导,进而引起单萜合酶底物水平的提升,加快向单萜类化合物的转变,改善玫瑰香型葡萄的品质。

关键词：葡萄玫瑰香型脱落酸单萜基因表达

颅脑损伤合并动眼神经麻痹47例临床观察分析

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眼外伤职业眼病杂志 1990年第3期12卷 161-162页

作者：户良高刘先菊湖北省当阳市人民医院脑外科湖北省当阳市人民医院五官科

颅脑损伤合并动眼神经麻痹,临床上并非少见。我院自1985—1986年两年间共见47例,占同期颅脑损伤的8.26％,现将其发病机理、诊断及治疗分析报告如下。

关键词：颅脑损伤眼神经麻痹

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避孕疫苗发展中若干问题

国外医学（计划生育分册） 1995年第3期14卷 152-156页

作者：宋济范刘先菊国家计划生育委员会科学技术研究所

本文概述了避孕疫苗发展中的若干问题。阐明了疫苗发展的必要条件,避孕疫苗与传统疫苗的差别;介绍了避孕疫苗研究现状;并讨论了抗原释放系统和粘膜免疫在避孕疫苗发展中的地位,同时还论述了疫苗产品开发的条件与存在问题。

关键词：避孕疫苗疫苗抗原粘膜免疫

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颅脑损伤的处理第1版

颅脑损伤的处理

葡萄辅助因子VvVQ10负调控白藜芦醇生物合成分子机理研究

1998年

作者：卢良高刘先菊李清编译

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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中外葡萄与葡萄酒 2023年第3期 18-23页

作者：刘先菊刘安姜金铸中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性评估北京市重点实验室北京100700

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制,通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明,葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达,紫外光处理呈上调表达,而... 详细信息

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制,通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明,葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达,紫外光处理呈上调表达,而伤害与霜霉菌侵染处理则显著下调;在山葡萄叶片中瞬时沉默VvVQ10,白藜芦醇及其糖苷(虎杖苷)含量显著升高;酵母双杂交分析表明,VvVQ10蛋白可与VvWRKY8蛋白互作,且结合位点在VvWRKY8的N段或包含DNA结合区的C段。以上结果表明,VvVQ10可通过与VvWRKY8蛋白互作的方式负调控葡萄白藜芦醇的生物合成。

关键词：葡萄辅助因子白藜芦醇 VQ蛋白负调控

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中药胎宝抑制抗精子抗体的实验研究

中国中西医结合杂志 1997年第6期17卷 360-362页

作者：赖安妮宋济范刘先菊李俊芳刘莉董彬林育樵中国中医研究院西苑医院国家计划生育委员会科学技术研究所

目的：测定中药胎宝对生殖免疫的作用。方法：将人精子膜抗原注入雌性小鼠腹腔，测定精子抗体为阳性者确定为免疫不育动物模型。分别灌胃中药胎宝高剂量（４６．８ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）、低剂量（３１．２ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），并... 详细信息

目的：测定中药胎宝对生殖免疫的作用。方法：将人精子膜抗原注入雌性小鼠腹腔，测定精子抗体为阳性者确定为免疫不育动物模型。分别灌胃中药胎宝高剂量（４６．８ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）、低剂量（３１．２ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），并以强的松（６ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）和生理盐水作对照，观察胎宝抑制实验小鼠抗精子抗体、促进妊娠的作用。结果：生理盐水组受孕率３８．８９％，强的松组４７．０６％，胎宝高、低剂量组分别为７０．００％、７５．００％。胎宝低剂量组与生理盐水组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。胎宝低剂量组孕鼠平均着床数（１０．９３±２．９１）明显高于强的松组（６．７５±４．５９）。酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和微量细胞毒试验测定抗精子抗体，显示胎室组精子抗体下降，胎宝高剂量组和强的松组细胞毒性百分率均显著低于生理盐水组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。结论：中药胎宝对生殖免疫有调节作用，能抑制精子细胞毒抗体，从而促进免疫不育小鼠生育力。

关键词：免疫性不育抗精子抗体受孕率中药胎宝

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探究党校教学在党建工作中的作用

丝路视野 2020年第30期 75-75,77页

作者：刘先菊中共大悟县委党校湖北大悟432800

党校的教学工作是以党为核心开展教学,对学员思想进行再教育,为培养社会主义发展需要的人才提供保障。党校教学体现了党的核心价值,贯彻马列主义毛泽东思想,对学员开展有计划的教学,从而对学员起到端正思想以及工作作风等作用,为日后做... 详细信息

党校的教学工作是以党为核心开展教学,对学员思想进行再教育,为培养社会主义发展需要的人才提供保障。党校教学体现了党的核心价值,贯彻马列主义毛泽东思想,对学员开展有计划的教学,从而对学员起到端正思想以及工作作风等作用,为日后做好党的工作奠定良好的基础。在党校教学中通过对科学教学方法的应用,能够促进党建工作更好地开展。本文对党校教学方法和在党建工作中的积极作用进行了分析。

关键词：党校教学党建工作作用