检索结果-南通市图书馆

原位杂交结合半薄切片对石鳖贝壳发育相关细胞的观察研究

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海洋科学 2024年第1期48卷 68-74页

作者：夏玉秀郇聘刘保忠中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室山东青岛266071 中国科学院大学北京100049

多板纲软体动物(石鳖)生有8片重复排列的贝壳,与其他类群如腹足类、双壳类等有显著的区别,这些差异蕴含着重要的发育和演化意义。前期研究发现,红条毛肤石鳖(Acanthochitona rubrolineata)幼虫贝壳发育组织的细胞排列欠规则,在普通显微... 详细信息

多板纲软体动物(石鳖)生有8片重复排列的贝壳,与其他类群如腹足类、双壳类等有显著的区别,这些差异蕴含着重要的发育和演化意义。前期研究发现,红条毛肤石鳖(Acanthochitona rubrolineata)幼虫贝壳发育组织的细胞排列欠规则,在普通显微镜下不易识别单个细胞结构。本研究首先利用整装原位杂交手段鉴定出一些参与贝壳发育的细胞群体,发现表达engrailed的细胞分布于贝壳发育区中央区域的突起部位(脊)和边缘区域,其中脊区域的表达呈条纹状,边缘区域的表达则与贝壳发育区的外周吻合,但是对这些细胞的形态和排列模式等细节无法开展深入观察。接下来对石鳖幼虫进行了半薄切片,发现可以识别出壳板发育区细胞及脊细胞的大致轮廓和分布模式,但分辨率仍然受限。为了进一步提升分辨能力,结合了整装原位杂交实验及半薄切片技术,对表达engrailed基因的贝壳发育相关细胞开展了观察研究。结果显示,对整装原位杂交后的幼虫进行半薄切片,组织细胞结构保持完整,细胞轮廓清晰,能够清楚区分engrailed阳性细胞。观察表明,这些细胞具有较高的核质比,总体呈V形排列,且贝壳发育区中央部位与边缘部位的engrailed阳性细胞在形态和排列上存在区别。这些结果证明,将原位杂交与半薄切片结合,可提升对细胞结构观察的分辨率,实现同时从分子和细胞学层面研究石鳖贝壳发育相关细胞。本研究对进一步从细胞水平研究石鳖的贝壳发育过程、解析相关贝壳发育相关基因的功能有重要的支撑作用。研究结果对揭示更多贝壳起源的信息,理解软体动物贝壳的起源和演化有重要意义。

关键词：半薄切片原位杂交红条毛肤石鳖贝壳发育

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复合外掺料对机制砂混凝土性能影响的分析

混凝土 2023年第6期 180-182页

作者：刘保忠巩天真山西职业技术学院建筑工程系山西太原030006 山西大学电力与建筑学院山西太原030013

研究了研制的复合外掺料添加含量对机制砂混凝土工作性能和力学性能的影响,并对比了同比例含量下复合外掺料与粉煤灰对混凝土性能的影响。试验结果表明,采用复合外掺料配制混凝土的工作性能和力学性能要优于粉煤灰混凝土,且混凝土的工... 详细信息

研究了研制的复合外掺料添加含量对机制砂混凝土工作性能和力学性能的影响,并对比了同比例含量下复合外掺料与粉煤灰对混凝土性能的影响。试验结果表明,采用复合外掺料配制混凝土的工作性能和力学性能要优于粉煤灰混凝土,且混凝土的工作性能和力学性能随着复合外掺料含量的增加而逐渐增大,至15%添加含量时接近饱和,继续增加含量,力学性能略有降低。

关键词：复合外掺料混凝土坍落度抗压强度抗折强度

Cloning and expression patterns of two Smad genes during embryonic development and shell formation of the Pacific oyster Crassostrea gigas

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Chinese Journal of Oceanology and Limnology 2014年第6期32卷 1224-1231页

作者：刘刚郇聘刘保忠 Institute of Oceanology Chinese Academy of Sciences University of Chinese Academy of Sciences

Increasing evidence indicates that transforming growth factor β （TGF-β） signaling pathways play many important roles in the early development of mollusks. However, limited information is known concerning their detailed mechanisms. Here, we describe the identification, cloning and characterization of two Smad genes, the key components of TGF-β signaling pathways, from the Pacific oyster Crassostrea gigas. Sequence analysis of the two genes, designated as cgi-smad1/5/8 and cgi-smad4, revealed conserved functional characteristics. The two genes were widely expressed in embryos and larvae, suggesting multiple roles in the early development of C. gigas. The mRNA of the two genes aggregated in the D quadrant and cgi-smad4 was highly expressed on the dorsal side of the gastrula, indicating that TGF-β signaling pathways may be involved in dorsoventral patterning in C. gigas. Furthermore, high expression levels of the two genes in the shell fields of embryos at different stages suggested important roles for TGF-β signaling pathways in particular phases of shell development, including the formation of the initial shell field and the biomineralization of larval shells. The results of this study provide fundamental support for elucidating how TGF-β signaling pathways participate in the early development of bivalve mollusks, and suggest that further work is warranted to this end.

关键词： calcification mollusk shell field whole mount in situ hybridization Smad transforming growthfactor β (TGF-β)

文蛤(Meretrix meretrix)幼虫发育过程中细胞凋亡和Caspase功能分析

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海洋与湖沼 2009年第2期40卷 181-186页

作者：王晓梅刘保忠相建海中国科学院海洋研究所青岛266071 中国科学院研究生院北京100049

以文蛤为研究对象,利用TUNEL技术(Terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP Nick End Labeling)检测了文蛤各发育阶段的幼虫中细胞凋亡的部位,利用Caspase原位标记分析了有活性的Caspase在幼虫中的分布情况,用Caspase抑制剂Z-VAD-FMK处理受精后4天和5天的变态前幼虫,同时以抑制剂的有机溶剂DMSO(Dimethyl sulfoxide)作对照,根据其对幼虫变态的影响,分析Caspase在文蛤幼虫变态中的作用。细胞凋亡检测结果显示,幼虫发育过程中发生细胞凋亡的部位主要在壳顶幼虫的面盘,说明细胞凋亡可能是文蛤幼虫变态过程中面盘退化的主要机制;在担轮幼虫至壳顶幼虫中都检测到有活性的Caspase,说明整个幼虫形态变化过程中都有Caspase的参与;用Caspase特异性抑制剂处理变态前幼虫,发现处理组幼虫变态率均显著低于对照组(P<0.05),说明Caspase在变态早期和晚期都有重要作用,同时发现DMSO对幼虫变态有诱导作用,可以在生产中加以利用。

关键词：文蛤幼虫细胞凋亡 Caspase 发育变态

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从赵姨娘形象的塑造看作者思想的局限性

延安大学学报（社会科学版） 1990年第2期12卷 83-88页

作者：刘保忠

一《红楼梦》描写了一些属于姨娘身份的人物,她们虽然被冠以“姨娘”的名号,然而在家庭生活中却没有独立的地位,不过是貴族家庭主子们的奴婢而已。这主要表现在三个方面: 第一,出身经历都极其悲惨。在《红楼梦》所描写的这一类人物中。

关键词：封建社会赵姨娘统治阶级红楼梦阶层人身依附奴婢经济地位奴隶嫡庶

文蛤浮游期发病幼虫细菌群落分析和致病菌的分离鉴定

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水产学报 2023年第6期47卷 156-164页

作者：隋炜金王鸿霞刘保忠中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室中国科学院大学

为研究文蛤育苗过程中幼虫病害及其主要致病菌，实验通过构建细菌16S rDNA克隆文库、病原菌分离纯化、人工感染和药敏实验等方法对育苗场发病的浮游期文蛤壳顶幼虫样品进行了系统分析。结果显示，发病的文蛤壳顶幼虫细菌群落多样性低，... 详细信息

为研究文蛤育苗过程中幼虫病害及其主要致病菌，实验通过构建细菌16S rDNA克隆文库、病原菌分离纯化、人工感染和药敏实验等方法对育苗场发病的浮游期文蛤壳顶幼虫样品进行了系统分析。结果显示，发病的文蛤壳顶幼虫细菌群落多样性低，地中海弧菌占比高达75%以上，推断其可能为引发此次幼虫发病的主要致病菌。从发病幼虫的匀浆组织中分离获得该优势菌株，测序及系统发育鉴定为地中海弧菌。人工感染实验确定了其致病性，菌株US2-01在1.0×106CFU/mL的菌液浓度下浸泡感染文蛤浮游幼虫，96 h累计死亡率为84%。药敏实验表明，地中海弧菌菌株US2-01在12种抗生素的测试中对常用的青霉素、氨苄西林、红霉素等抗生素具有一定的耐药性，对四环素和多西环素中度敏感，对头孢他啶、庆大霉素、卡那霉素等其余7种抗生素呈现高度敏感。本研究首次报道了地中海弧菌为文蛤浮游期幼虫致病的一种潜在病原，研究结果可为文蛤幼虫疾病研究及贝类苗种培育过程中的病害防控提供科学依据。

关键词：文蛤幼虫地中海弧菌 16S rDNA克隆文库药敏实验

海湾扇贝样品不同保存条件下DNA的提取及RAPD扩增比较

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海洋科学 2001年第3期25卷 51-53页

作者：刘保忠宋林生相建海中国科学院海洋研究所青岛266071

以海湾扇贝为材料 ,研究了鲜活样品以及采用冷冻保存、70 %乙醇固定和10 %福尔马林固定等方法保存的闭壳肌样品用于DNA提取的不同效果 ,并分析了不同保存条件下所提得DNA用于RAPD扩增的结果。研究表明 ,鲜活样品以及采用冷冻保存和70 %... 详细信息

以海湾扇贝为材料 ,研究了鲜活样品以及采用冷冻保存、70 %乙醇固定和10 %福尔马林固定等方法保存的闭壳肌样品用于DNA提取的不同效果 ,并分析了不同保存条件下所提得DNA用于RAPD扩增的结果。研究表明 ,鲜活样品以及采用冷冻保存和70 %乙醇固定的样品可以得到很好的DNA ,其质量和得率没有显著差异 ,利用上述DNA模板进行RAPD分析 ,可以获得到一致性很好的扩增结果。10 %福尔马林固定样品则没有得到可用的DNA模板。采用70 %乙醇固定保存海洋动物组织 ,是用于DNA提取及相关的分子生物学研究的快速。

关键词：海湾扇贝 DNA提取 RAPD

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日本蟳捕食栉孔扇贝机制的初步研究

海洋科学 2010年第12期34卷 62-66页

作者：于宗赫杨红生刘保忠邢坤许强张立斌中国科学院海洋研究所山东青岛266071 中国科学院研究生院北京100049

在现场和室内条件下研究了日本蟳(Charybdis japonica)对栉孔扇贝(Chlamys farreri)的捕食机制。现场实验表明,成年日本蟳可以捕食壳高小于5.0 cm的栉孔扇贝,其捕食强度随着水温的升高而增大,而壳高大于5.9 cm的栉孔扇贝则可以免遭日本... 详细信息

在现场和室内条件下研究了日本蟳(Charybdis japonica)对栉孔扇贝(Chlamys farreri)的捕食机制。现场实验表明,成年日本蟳可以捕食壳高小于5.0 cm的栉孔扇贝,其捕食强度随着水温的升高而增大,而壳高大于5.9 cm的栉孔扇贝则可以免遭日本蟳的捕食;相对于栉孔扇贝,日本蟳更倾向于捕食贻贝;室内实验表明水温低于10℃时,日本蟳对大规格扇贝的捕食作用不明显。相同温度条件下,室内实验日本蟳的捕食强度要低于现场,但其温度系数(Q10)差别不大。在上述实验基础上,本文提出了提高底播栉孔扇贝成活率的方法,即选择大规格的扇贝在水温较低的秋、冬季进行底播,同时添加一部分贻贝作为牺牲诱饵以减少日本蟳对扇贝的捕食。

关键词：日本蟳(Charybdi sjaponica) 栉孔扇贝(Chlamys farreri) 捕食水温

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液晶彩电软件故障的维修

家电检修技术 2014年第5期 53-55页

作者：刘保忠

***数据出错、丢失的原因及处理方法一般情况下，EEPROM中的数据是不易出错和丢失的，但在以下几种情况下，EEPROM中的数据极易出错和丢失：（1）液晶彩电周围有电磁干扰或内部有打火现象。（2）有雷电进入彩电，或彩电工作时附近有电... 详细信息

***数据出错、丢失的原因及处理方法一般情况下，EEPROM中的数据是不易出错和丢失的，但在以下几种情况下，EEPROM中的数据极易出错和丢失：（1）液晶彩电周围有电磁干扰或内部有打火现象。（2）有雷电进入彩电，或彩电工作时附近有电焊机操作。（3）彩电遥控器按键连极，也会导致EEPROM出错或丢失数据。

关键词：液晶彩电软件故障 EEPROM 维修彩电遥控器数据出错打火现象电磁干扰