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血清剥夺法分离U87细胞系中的胶质瘤干细胞

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第1期14卷 6-10页

作者：刘于海牛朝诗李冬雪安徽医科大学附属省立医院神经外科安徽省立体定向神经外科研究所安徽省合肥市230001

背景:细胞周期分析已证实,90%以上的干细胞处于G0静止状态,因此采用不含任何生长因子和其他相关营养添加剂的血清剥夺培养基更适合筛选分离肿瘤干细胞。目的:应用血清剥夺法培养胶质瘤U87细胞,并筛选鉴定该细胞系中的胶质瘤干细胞。方法... 详细信息

背景:细胞周期分析已证实,90%以上的干细胞处于G0静止状态,因此采用不含任何生长因子和其他相关营养添加剂的血清剥夺培养基更适合筛选分离肿瘤干细胞。目的:应用血清剥夺法培养胶质瘤U87细胞,并筛选鉴定该细胞系中的胶质瘤干细胞。方法:将U87细胞培养在只含有DMEM和L-谷氨酰胺的培养基中培养6d,筛选出胶质瘤干细胞,接着更换为神经干细胞培养基,观察细胞肿瘤球的形成过程;将肿瘤球接种于血清培养基,观察其在体外的分化特点;免疫荧光鉴定血清剥夺后尚存的细胞、增殖形成的肿瘤球细胞和分化细胞。结果与结论:应用血清剥夺的方法成功地筛选出了表达CD133的肿瘤干细胞,并能增殖形成肿瘤球;肿瘤球可多向分化,子代细胞表达胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶。说明U87细胞系中存在具有自我更新及多向分化能力的胶质瘤干细胞。

关键词：胶质瘤血清剥夺 U87细胞系癌干细胞细胞鉴定

MicroRNA与胶质母细胞瘤的相关性研究

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国际神经病学神经外科学杂志 2009年第5期36卷 412-416页

作者：刘于海牛朝诗安徽医科大学附属省立医院神经外科安徽合肥230001

MicroRNA(miRNA)是小的非编码RNAs,是各种生物进程的关键调节因子,能够负性调节转录后水平的基因表达。最新的研究证据表明,miRNA在人类恶性肿瘤发展过程中起到了非常重要的作用。近年来,miRNA与脑胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是小的非编码RNAs,是各种生物进程的关键调节因子,能够负性调节转录后水平的基因表达。最新的研究证据表明,miRNA在人类恶性肿瘤发展过程中起到了非常重要的作用。近年来,miRNA与脑胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)的相关性研究已经取得了很大的进展,如细胞的增殖入侵、胶质瘤干细胞的性能和血管生成等。同时miRNA的发现为治疗提供了新的干预措施,为诊断和判断预后提供了新的工具。本文就GBM中相关miRNA的研究进展进行综述。

关键词： MicroRNA 胶质母细胞瘤作用机制

脑胶质瘤中Nanog与CD133、GFAP的共表达及其相关性研究

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中华神经医学杂志 2011年第4期10卷 377-381页

作者：刘于海牛朝诗李冬雪安徽医科大学附属省立医院神经外科、安徽省立体定向神经外科研究所合肥230001

目的研究人脑胶质瘤中Nanog基因与脑肿瘤干细胞标记物CD133、胶质瘤分化标记物神经胶质纤维酸性蛋白fGFAP）之间表达的关系，并探讨Nanog的表达在脑胶质瘤发生发展中的意义。方法取安徽医科大学附属省立医院神经外科自2009年1月至2009月... 详细信息

目的研究人脑胶质瘤中Nanog基因与脑肿瘤干细胞标记物CD133、胶质瘤分化标记物神经胶质纤维酸性蛋白fGFAP）之间表达的关系，并探讨Nanog的表达在脑胶质瘤发生发展中的意义。方法取安徽医科大学附属省立医院神经外科自2009年1月至2009月9月手术切除的人脑胶质瘤组织标本60例，其中组织学分级Ⅱ级19例，Ⅲ级23例，Ⅳ级18例，采用免疫组织化学双重染色检测Nanclg／CD133和Nano/GFAP的表达，比较不同级别胶质瘤Nanog＋细胞、CD133＋细胞、GFAP＋细胞、Nanog＋／CD133＋细胞和Nanog＋/TGFAP＋细胞所占百分比并分析其相关性。结果不同级别胶质瘤中Nanog＋细胞、CD133＋细胞、Nanclg／CD133细胞百分比差异均有统计学意义（P〈0．05），Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中Nanog＋细胞、CD133＋细胞、Nanog＋／CDl33’细胞表达高于Ⅱ级，差异有统计学意义（P〈O．05）；Nano对表达和CD133＋表达呈正相关关系（r=0.904，P=0．0001，Nanog＋／CD133＋表达亦与表达呈正相关关系（r=0．823，P=-0．000）；不同级别胶质瘤GFAP＋细胞百分比差异有统计学意义（P〈0．05），Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中GFAP’细胞表达低于Ⅱ级，差异有统计学意义（P〈0．05）；不同级别胶质瘤Nanog＋／GFAP＋细胞百分比差异无统计学意义（p〉0．05）。结论Nanog与干细胞标记物CD133之间具有明显的相关性，在细胞水平上存在显著的共表达。Nanog可能成为胶质瘤干细胞标记物的一个指标，并在维持肿瘤干细胞未分化的状态中起到至关重要的作用。

关键词：神经胶质瘤免疫组织化学 Nanog CD133 GFAP

高压氧联合镜像疗法对脑卒中偏瘫患者运动功能、神经功能及自理能力的影响

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中华航海医学与高气压医学杂志 2023年第6期30卷 731-735页

作者：刘于海李冰陈阳李鑫秦金燕蔡菁临沂市人民医院脑血管病外科临沂276000 临沂市人民医院高压氧科临沂276000

目的探讨高压氧联合镜像疗法对脑卒中偏瘫患者运动功能、神经功能及生活自理能力的影响。方法选取2019年4月至2021年6月临沂市人民医院神经外科收治的脑卒中偏瘫患者90例作为研究对象。根据治疗方式将患者分为对照组(基础治疗, n=28)、... 详细信息

目的探讨高压氧联合镜像疗法对脑卒中偏瘫患者运动功能、神经功能及生活自理能力的影响。方法选取2019年4月至2021年6月临沂市人民医院神经外科收治的脑卒中偏瘫患者90例作为研究对象。根据治疗方式将患者分为对照组(基础治疗, n=28)、高压氧组(基础治疗+高压氧治疗, n=29)、联合组(基础治疗+高压氧联合镜像疗法, n=33)。运用简化Fugl-Meyer运动功能量表(FMA)、Berg平衡量表(BBs)、偏瘫步行能力评定量表(Hwars)评估并比较3组患者治疗前后的运动功能;运用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、Bathel指数评定量表(BI)评估并比较3组患者治疗前后的神经功能及生活自理能力;比较3组患者的临床疗效。结果治疗后联合组患者的FMA、BBs、BI评分及Hwars分级明显高于或优于对照组与高压氧组, NIHSS评分显著低于对照组与高压氧组, 差异有统计学意义(P<0.05);治疗后3组患者的治疗总有效率分别为50.00%、68.96%、87.87%, 差异有统计学意义(P<0.01)。结论高压氧联合镜像疗法可促进脑卒中偏瘫患者的神经功能恢复, 提高患者的运动能力及生活自理能力。

关键词：脑卒中高压氧镜像疗法运动功能神经功能

Nanog基因在脑肿瘤干细胞中的表达及意义

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中华神经外科杂志 2011年第2期27卷 125-130页

作者：李冬雪牛朝诗刘于海李静汤深凤傅先明安徽医科大学附属省立医院神经外科安徽省脑立体定向神经外科研究所合肥230001

目的探讨Nanog基因在脑肿瘤干细胞（BTSCs）的表达以及生物学意义.方法无血清悬浮培养法从U87胶质瘤细胞株分离培养BTSCs.免疫细胞化学染色和RT-PCR方法检测U87肿瘤细胞及其BTSCs中Nanog的表达,双重免疫细胞化学染色法检测Nanog/CD13... 详细信息

目的探讨Nanog基因在脑肿瘤干细胞（BTSCs）的表达以及生物学意义.方法无血清悬浮培养法从U87胶质瘤细胞株分离培养BTSCs.免疫细胞化学染色和RT-PCR方法检测U87肿瘤细胞及其BTSCs中Nanog的表达,双重免疫细胞化学染色法检测Nanog/CD133共表达情况.结果在U87胶质瘤细胞株中成功分离培养出BTSCs,Nanog蛋白在U87肿瘤细胞和BTSCs中的阳性率分别为（64.1±18.2）%和（97.2±1.8）%,且Nanog＋/CD133＋细胞共表达于部分细胞中;Nanog mRNA相对含量在U87肿瘤细胞和BTSCs中分别为0.3851±0.0771和0.6032±0.1223,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 U87细胞株中存在***在U87细胞株中高表达,在BTSCs中表达水平高于U87肿瘤细胞且Nanog与CD133存在共表达,表明Nanog与BTSCs关系密切.

关键词：神经胶质瘤基因表达 Nanog 肿瘤干细胞

PEX基因修饰人骨髓间质干细胞体外培养鉴定的研究

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中国微侵袭神经外科杂志 2009年第8期14卷 361-363页

作者：高歌牛朝诗董永飞张俊李冬雪刘于海李明武汤深凤安徽医科大学附属省立医院神经外科安徽省立体定向神经外科研究所安徽合肥230001

目的构建PEX基因真核表达载体并转染人骨髓间质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hMSC),探讨PEX修饰hMSC的可行性。方法采用全贴壁细胞分离法培养hMSC,流式细胞技术鉴定其表面标记物;分子克隆技术构建PEX基因真核表达载... 详细信息

目的构建PEX基因真核表达载体并转染人骨髓间质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hMSC),探讨PEX修饰hMSC的可行性。方法采用全贴壁细胞分离法培养hMSC,流式细胞技术鉴定其表面标记物;分子克隆技术构建PEX基因真核表达载体,重组质粒转染hMSC,验证真核表达载体在hMSC中的表达。结果成功培养hMSC并成功构建PEX基因真核表达载体,PEX在转染的hMSC中高表达。结论构建的PEX基因真核表达载体可用于转染hMSC,为进一步探讨其在胶质瘤治疗中的作用奠定了基础。

关键词：神经胶质瘤间质干细胞基质金属蛋白酶转染

基于Proteus的温湿度监测系统仿真实现

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电子世界 2012年第20期 27-28页

作者：程伟顾国良刘于海陈江盐城市电子设备厂

介绍了温湿度传感器SHT7x的工作原理、通信协议和使用方法,给出温湿度监测系统的程序流程.在Proteus仿真平台上以SHT7x和单片机为核心,为节约了输入输出口线,选择MAXIM公司的多功能串行LED显示驱动器MAX7219驱动8位LED显示器,实现了温... 详细信息

介绍了温湿度传感器SHT7x的工作原理、通信协议和使用方法,给出温湿度监测系统的程序流程.在Proteus仿真平台上以SHT7x和单片机为核心,为节约了输入输出口线,选择MAXIM公司的多功能串行LED显示驱动器MAX7219驱动8位LED显示器,实现了温湿度监测系统的设计,给出了仿真结果.这种仿真实现对于工业控制领域中的计算机控制系统的设计有很好的参考价值。

关键词： Proteus 温湿度 SHT7X 单片机测量

基于离子交换技术的电解锰废水自动化处理系统

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工业控制计算机 2012年第12期25卷 29-29,44页

作者：程伟顾国良刘于海陈江盐城电子设备厂江苏盐城224051

电解锰工业生产过程产生严重的环境污染与生态问题,国内电解锰废水处理技术相对落后。与中国环境科学研究院合作,基于离子交换原理,采用先进的工业控制技术设计了一套电解锰废水自动化处理系统,实现了电解锰废水自动化处理与重金属资源... 详细信息

电解锰工业生产过程产生严重的环境污染与生态问题,国内电解锰废水处理技术相对落后。与中国环境科学研究院合作,基于离子交换原理,采用先进的工业控制技术设计了一套电解锰废水自动化处理系统,实现了电解锰废水自动化处理与重金属资源化利用,现场运行表明该系统满足排放标准,实现了电解锰清洁化生产。

关键词：电解锰废水离子交换自动化组态监控

LVIS支架治疗后不完全栓塞颅内动脉瘤中期随访时治愈的影响因素分析

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中华神经医学杂志 2019年第12期18卷 1229-1235页

作者：郇林春孙运帅张浩于建军郭锋蔡菁刘于海王诗良临沂市人民医院神经外科 276000 潍坊医学院临床学院潍坊261000

目的观察LVIS支架栓塞术后即刻未能达到完全栓塞的颅内动脉瘤患者随访期间的动脉瘤的影像学变化,分析影响动脉瘤治愈的危险因素。方法选择临沂市人民医院神经外科自2014年12月至2018年12月应用LVIS支架栓塞术治疗的颅内动脉瘤患者161例... 详细信息

目的观察LVIS支架栓塞术后即刻未能达到完全栓塞的颅内动脉瘤患者随访期间的动脉瘤的影像学变化,分析影响动脉瘤治愈的危险因素。方法选择临沂市人民医院神经外科自2014年12月至2018年12月应用LVIS支架栓塞术治疗的颅内动脉瘤患者161例(总计193个动脉瘤),患者术后即刻行DSA检查,根据Raymond分级标准评估动脉瘤的栓塞程度。对比患者术后8个月随访时及术后即刻动脉瘤的栓塞程度,统计动脉瘤的治愈(Raymond分级1级)情况。采用单因素Logistic回归分析及多因素Logistic回归分析(向前最大似然比法)筛选影响不完全栓塞动脉瘤治愈的危险因素。结果术后即刻动脉瘤的栓塞程度为Raymond分级1级78个、2级54个、3级61个,动脉瘤完全栓塞78个(40.41%)、动脉瘤不完全栓塞115个(59.59%)。随访结果显示193个动脉瘤中Raymond分级1级171个、2级10个、3级12个,动脉瘤完全栓塞171个(88.60%),动脉瘤不完全栓塞22个(11.40%)。术后即刻不完全栓塞的115个动脉瘤中随访时治愈94个,治愈率为81.74%(94/115)。单因素Logistic回归分析发现高血压、糖尿病、后循环动脉瘤、夹层动脉瘤、体颈比及术后即刻栓塞程度是动脉瘤治愈的危险因素(P<0.05);多因素Logistic回归分析发现后循环动脉瘤(OR=7.551,95%CI:2.354~24.222)、糖尿病(OR=5.562,95%CI:1.446~21.393)为动脉瘤治愈的独立危险因素(P<0.05)。其回归模型的受试者工作特征曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)为0.755,说明回归模型的预测效能中等。结论LVIS支架栓塞术治疗颅内动脉瘤效果显著,即使术后即刻不完全栓塞的患者在中期随访时也具有较高的治愈率。动脉瘤位于后循环及合并糖尿病会影响动脉瘤的治愈。

关键词：颅内动脉瘤血管内治疗 LVIS支架栓塞