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黑龙江省松树天牛高致病力虫生真菌的筛选与鉴定

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东北林业大学学报 2024年第5期52卷 112-118页

作者：张瑶宋小双张值荣刁桂萍李亚洲邓勋东北林业大学哈尔滨150040 黑龙江省森林保护研究所

以获取对松树天牛高致病的生防真菌为目标,从黑龙江省森林土壤中初步分离得到18株虫生真菌,分别采用爬行法测定其对松树天牛幼虫、成虫的致病力,同时测定高致病力菌株的菌丝生长速度和产孢量,对高致病力菌株进行种类鉴定。结果表明:18... 详细信息

以获取对松树天牛高致病的生防真菌为目标,从黑龙江省森林土壤中初步分离得到18株虫生真菌,分别采用爬行法测定其对松树天牛幼虫、成虫的致病力,同时测定高致病力菌株的菌丝生长速度和产孢量,对高致病力菌株进行种类鉴定。结果表明:18株虫生真菌对松树天牛幼虫、成虫均表现出不同程度的致病力。其中菌株M14-1、H_(2)表现出较强的致病力,在处理天牛幼虫、成虫的6 d,累计死亡率均达到了100%,菌株M14-1、H_(2)菌落生长速度快,产孢量大;在90 mm×15 mm(直径×深度)的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基的培养皿上培养15 d时,菌落直径分别为5.68、4.91 cm,产孢量分别为3.86×10^(8)、4.1×10^(8)个·板^(-1)。在孢子浓度为10^(7)个·mL^(-1)时,菌株M14-1、H_(2)对松树天牛成虫的半致死时间(LT_(50))分别为4.15、4.31 d。经形态学和分子生物学鉴定,菌株M14-1、H_(2)皆属于金龟子绿僵菌(Mertarhizium anisopliae)。

关键词：天牛金龟子绿僵菌致病力种类鉴定

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毛果杨YABBY基因家族生物信息学分析

分子植物育种 2023年第10期21卷 3245-3252页

作者：苗嘉琪黄颖宁蕊刁桂萍东北林业大学林学院哈尔滨150040

YABBY基因家族是仅存在于植物中的一类含有C2C2锌指结构域和YABBY结构域的转录调控因子,与植物的形态发育有关,在植物的茎、叶和花等器官的生长发育过程中起到重要的调控作用。本研究通过对毛果杨(Populus trichocarpa)YABBY基因家族生... 详细信息

YABBY基因家族是仅存在于植物中的一类含有C2C2锌指结构域和YABBY结构域的转录调控因子,与植物的形态发育有关,在植物的茎、叶和花等器官的生长发育过程中起到重要的调控作用。本研究通过对毛果杨(Populus trichocarpa)YABBY基因家族生物信息学分析,共筛选出12个YABBY家族成员,分别位于第1、2、3、6、8、9、10、14、16和18号染色体。这些成员结构域保守,且具有低亲水性的特点。通过亚细胞定位预测,所有成员都定位在细胞核中。基因组织表达分析表明,毛果杨YABBY家族成员在不同组织中的表达有明显不同,在雌花、雄花和芽中表达量较高。

关键词：毛果杨 YABBY基因家族生物信息学基因功能

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转基因山杨叶色及生长变异分析

分子植物育种 2023年

作者：董译阳王鑫宇孟南何蕊含周妍路美琪刁桂萍东北林业大学林学院

本实验采用的试验材料为PdGLK抑制表达山杨株系，获取的山杨叶片颜色呈黄绿色，通过测定叶绿素相关参数、苗高、地径等参数，为明确抑制表达山杨株系的叶色变异规律，探讨在生长过程转基因山杨株系在叶绿素含量降低的情况下生长特性是... 详细信息

本实验采用的试验材料为PdGLK抑制表达山杨株系，获取的山杨叶片颜色呈黄绿色，通过测定叶绿素相关参数、苗高、地径等参数，为明确抑制表达山杨株系的叶色变异规律，探讨在生长过程转基因山杨株系在叶绿素含量降低的情况下生长特性是否发生变化。结果表明，抑制表达株系叶绿素含量显著低于野生型株系(P<0.05)，L*值与b*值持续高于WT株系，达到显著水平(P<0.05)，叶片亮度高于WT株系。到试验截止期，抑制表达株系苗高均值与WT株系差异不显著，两者基本在同一时期进入到快速生长阶段。在测量周期内，两种参试株系在各个不同生长时期生长速率基本保持一致。因此山杨转PdGLK抑制表达株系可以作为丰富园林景观的储备植株

关键词：彩叶植物 GLK 山杨植物叶色

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欧美山杨杂种组培工厂化育苗技术研究

欧美山杨杂种组培工厂化育苗技术研究

作者：刁桂萍东北林业大学

学位级别：硕士

本研究以欧美杂种(Populus tremula×P. tremuloides)优良无性系为研究材料,通过对欧美山杨杂种组培繁殖技术的研究,优化组培系统,简化操作程序,降低试管苗成本。利用再生试管苗的幼化特性,结合试管外生根技术、扦插技术,达到大量繁殖... 详细信息

本研究以欧美杂种(Populus tremula×P. tremuloides)优良无性系为研究材料,通过对欧美山杨杂种组培繁殖技术的研究,优化组培系统,简化操作程序,降低试管苗成本。利用再生试管苗的幼化特性,结合试管外生根技术、扦插技术,达到大量繁殖优良材料的目的。探索适合欧美山杨杂种组培工厂化生产技术工艺体系,为欧美山杨杂种生产走上工厂化、产业化之路提供科学和技术依据。通过上述试验得到如下结论: 1.叶腋增殖途径组培快繁技术:诱导欧美山杨杂种快繁的最适培养基是NT+BA0.1mg/L+KT 0.5mg/L+2%蔗糖,分化率为100%,无性系平均再生新芽为6.9个;筛选出最适诱导欧美山杨杂种快速生根的培养基为WPM+NAA 0.3mg/L+IAA 0.05mg/L+2%蔗糖,无性系平均生根率在93%以上;组培苗移栽基质以泥炭土:沙=2:1为最佳;基质的灭菌处理以高温灭菌或代森锌加五氯硝基苯等量混合300倍液杀菌效果最好;移栽适宜温度为18～26℃,移栽后5天内湿度维持在60%以上,并且每天喷雾2次。通过试验,其优良处理的移栽成活率可达90%以上。 2.简化繁殖技术:培养基中的成分对诱导芽分化的影响程度由小到大依次为:自来水<肌醇<蔗糖<大量元素,各因素之间对芽分化的影响是相互独立的,无显著影响。分化培养基采用自来水进行配制,去除肌醇;采用微体扦插瓶外生根技术,无根试管苗以IBA浓度为20mg/L浸泡20 min和IBA浓度为100mg/L浸泡15 min生根效果最好,无性系的平均生根率均为77.3%;采用试管苗瓶外袋生根技术,无性系的平均生根率可达83.86%。 3.微插穗快繁技术:以移栽成活的组培苗作为采穗母株,剪取茎段后,再切成约1cm的小茎段,每小段留有一个叶片(一叶一芽结构);用于扦插的激素组合中以NAA+IBA浓度为20mg/L浸泡15 min、50mg/L浸泡10 min、100mg/L和150mg/L浸泡5 min中插穗生根效果好,其中以150mg/L浸泡5 min处理最优,其生根率最高达到93.75%;扦插最佳月份为5月份和6月份,7月份扦插的生根率及其成活率有所降低,到了8月份已不宜进行扦插。 4.成本核算:常规组培繁殖方法,估算出欧美山杨杂种单株苗木的成本为0.27元;若组培与瓶外生根技术、扦插技术相结合繁殖苗木,单株苗木的成本为0.19元,成本降低约为29.6%。

关键词：欧美山杨杂种组织培养扦插工厂化育苗

风箱果枯枝病原菌生物学特性及16种杀菌剂的毒力比较

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分子植物育种 2023年

作者：张思雨王秋宇遇文婧姚春华刘雪峰杨兴旺刁桂萍呼伦贝尔林业和草原局海拉尔分局东北林业大学林学院黑龙江省森林保护研究所森保重点实验室

为进一步防控风箱果枯枝病的发生提供有效的理论依据。在风箱果中分离获得一株枯枝病病原菌，鉴定为大单孢属新种(Aplosporella longipes)，本研究采用菌丝体生长法测定病原菌在不同培养基、不同pH值、不同碳源、不同氮源、不同光照条... 详细信息

为进一步防控风箱果枯枝病的发生提供有效的理论依据。在风箱果中分离获得一株枯枝病病原菌，鉴定为大单孢属新种(Aplosporella longipes)，本研究采用菌丝体生长法测定病原菌在不同培养基、不同pH值、不同碳源、不同氮源、不同光照条件下的主要的生物学特性，并选16种低毒杀菌剂进行毒力比较。风箱果枯枝病病原菌在PDA培养基上的生长状态最佳，培养9 d时生长速率为9.44 mm/d，菌落直径8.5 cm，风箱果煎汁、燕麦和玉米粉不利于其生长；pH值为6.2～7.0时病原菌生长状态最佳，培养9 d时生长速率为9.44 mm/d，菌落直径8.5 cm；葡萄糖为碳源时病原菌生长状态最佳，培养9 d时生长速率为7.07 mm/d，菌落直径8.5 cm；酵母浸粉为氮源时病原菌长势最好，培养8 d菌落直径8.5 cm，平均生长速率为10.63 mm/d；全黑暗处理的病原菌菌丝浓密，菌落暗黄色，培养8 d菌落直径8.5 cm，平均生长速率为10.63 mm/d；16种供试的杀菌药剂均对病原菌有抑制效果，其中50%多菌灵对该病原菌的防治效果最好，EC50为6.627 mg/L，其次是30%苯甲丙环唑、10%苯醚甲环唑、50%腐霉利，EC50值为10 ～ 20 mg/L。风箱果枯枝病原菌最适培养基是PDA，最适pH 6.2～7.0，葡萄糖为最佳碳源、酵母浸粉为最佳氮源，并且在全黑暗处理条件下可促进风箱果枯枝病原菌菌丝生长，病原菌对50%菌灵药敏感性最好，可作为田间防治的首选药剂。

关键词：风箱果濒危植物枯枝病病原菌生物学特性药剂筛选

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桦褐孔菌内生真菌的组成研究

西部林业科学 2023年第2期52卷 168-174页

作者：姚春华刘婉瑜安柳迪刁桂萍刘雪峰东北林业大学林学院墨龙江哈尔滨150040 云南理工职业技术学院云南昆明650304

为探求桦褐孔菌腐朽木不同腐朽区域内生真菌组成,2021年7月,以采自黑龙江省漠河市的桦褐孔菌腐朽木为研究对象,根据腐朽程度不同将腐朽木横截面从内向外依次划分为腐朽区(木材质地结构发生变化,木质素已基本被降解)、变色区(木质部细胞... 详细信息

为探求桦褐孔菌腐朽木不同腐朽区域内生真菌组成,2021年7月,以采自黑龙江省漠河市的桦褐孔菌腐朽木为研究对象,根据腐朽程度不同将腐朽木横截面从内向外依次划分为腐朽区(木材质地结构发生变化,木质素已基本被降解)、变色区(木质部细胞的细胞壁初步降解,颜色变深)、健康区和菌核区。通过真菌培养技术和高通量测序技术研究桦褐孔菌腐朽木内真菌组成。研究结果显示:桦褐孔菌在木材中扩展严重影响了白桦木不同区域内生真菌的种类组成与物种丰富度。在PDA培养基上从白桦树桦褐孔菌腐朽木不同区域分离出的内生真菌组成有较大差别,腐朽区分离到的内生真菌较多,菌核区域分离到种类最少;高通量测序分析结果表明,健康区的物种丰富度(Chaol)和物种数目(Observed species)指数都明显高于其他区域,说明健康区的物种丰富度较高。变色区内生真菌数量明显减少,腐朽区的内生真菌数量比变色区略有增加,菌核区真菌种类最少。

关键词：桦褐孔菌白桦腐朽木内生真菌高通量测序

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毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫能力分析

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北京林业大学学报 2021年第9期43卷 51-58页

作者：遇文婧杨帅黄颖刁桂萍东北林业大学林学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省林业科学院森林保护研究所黑龙江哈尔滨150040

【目的】研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫功能,为开发新型林木抗虫生物农药奠定基础。【方法】本研究通过研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子及其在舞毒蛾幼虫取食胁迫下的表达模式,分析PtrSPI基因功能;利用真... 详细信息

【目的】研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫功能,为开发新型林木抗虫生物农药奠定基础。【方法】本研究通过研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子及其在舞毒蛾幼虫取食胁迫下的表达模式,分析PtrSPI基因功能;利用真核重组蛋白PtrSPI饲喂舞毒蛾幼虫,观察记录幼虫的取食量、体质量和死亡率,并测定取食后的幼虫体内丝氨酸蛋白酶活性,探讨PtrSPI蛋白的抗虫能力。【结果】结果表明毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子区域共包含5个与植物抗病虫相关的元件;经舞毒蛾幼虫取食后,毛果杨叶片的PtrSPI基因呈先降后升的表达模式,且在取食30 h达到峰值,为空白对照的2.03倍;高质量浓度重组蛋白PtrSPI(300和500 mg/mL)对舞毒蛾幼虫的取食量和体质量有显著的抑制作用,而且分别在取食4和6 d后舞毒蛾幼虫死亡率均达到60%以上,而幼虫体内丝氨酸蛋白酶的活性在取食初期显著上升。【结论】本研究验证了毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫能力,可为进一步研发新型无公害抗虫生物农药提供理论基础和研究材料。

关键词：丝氨酸蛋白酶抑制子毛果杨抗虫功能生物农药舞毒蛾

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深绿木霉对山新杨生长及抗叶枯病能力的影响

东北林业大学学报 2019年第1期47卷 71-75页

作者：遇文婧杨帅刁桂萍东北林业大学哈尔滨150040

利用深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153菌株不同孢子悬浮液根施山新杨(Populus davidiana×P. alba var. pyramidlis)移栽苗,测定了山新杨根系土壤肥力、生物量、生理酶活性以及抗叶枯病能力,探讨了深绿木霉促进木本植物生长... 详细信息

利用深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153菌株不同孢子悬浮液根施山新杨(Populus davidiana×P. alba var. pyramidlis)移栽苗,测定了山新杨根系土壤肥力、生物量、生理酶活性以及抗叶枯病能力,探讨了深绿木霉促进木本植物生长和提高抗叶枯病的能力。结果表明:深绿木霉处理后的山新杨根系土壤p H呈弱酸性,有机质、水解氮和有效磷质量分数明显增加,土壤肥力增强;105、107个·mL^(-1)深绿木霉孢子悬浮液处理60 d的山新杨株高与对照相比分别增长了30.33%和32.91%,地茎、根长、叶片数、鲜质量和干质量都较高;105个·mL^(-1)的深绿木霉孢子悬浮液处理的山新杨抗氧化还原酶(SOD、POD、CAT)和防御酶(PAL和PPO)活性也明显升高;接种叶枯病病原菌后,105个·mL^(-1)的深绿木霉孢子悬浮液处理的山新杨叶片感病面积最小,为山新杨叶片的1.65%。

关键词：木霉促生作用抗病性生物菌肥生物防治

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兴安落叶松人工林经营决策分析

东北林业大学学报 2007年第1期35卷 33-36页

作者：张维刁桂萍夏德安东北林业大学哈尔滨150040

对南岔林业局兴安落叶松人工林的不同年龄采伐和更新的调查资料进行分析得出:对于人工落叶松近熟林,在其采伐后更新树种的选择上应以云杉、红松为主,不宜选择落叶松造林;在采伐方式上,对落叶松人工近熟林的经营宜采用大强度间伐,每公顷... 详细信息

对南岔林业局兴安落叶松人工林的不同年龄采伐和更新的调查资料进行分析得出:对于人工落叶松近熟林,在其采伐后更新树种的选择上应以云杉、红松为主,不宜选择落叶松造林;在采伐方式上,对落叶松人工近熟林的经营宜采用大强度间伐,每公顷保留400株为宜,不宜采用大面积皆伐和带状皆伐方式;落叶松人工林经济成熟年龄应定15～20 a;在一般公益林区,落叶松人工林数量成熟年龄应定在25-30 a为宜。

关键词：兴安落叶松人工林经营决策