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LTQ-FT-MS技术结合生物信息学筛选与HBV Polymerase存在潜在相互作用的宿主蛋白

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病毒学报 2014年第6期30卷 636-644页

作者：凌梦婷宫君原李君武周天鸿暨南大学生命科学技术学院广州510632

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是慢性肝病的一个主要致病因素,易导致肝炎、肝硬化,并最终导致肝癌。乙型肝炎病毒聚合酶(HBV Polymerase,Pol)在HBV复制过程中起着关键作用,并有可能参与肝癌的发生。Pol的这些生理功能很有可能是... 详细信息

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是慢性肝病的一个主要致病因素,易导致肝炎、肝硬化,并最终导致肝癌。乙型肝炎病毒聚合酶(HBV Polymerase,Pol)在HBV复制过程中起着关键作用,并有可能参与肝癌的发生。Pol的这些生理功能很有可能是通过与蛋白质之间的相互作用来行使的。本文通过免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation)结合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术,筛选、鉴定与Pol存在潜在相互作用的蛋白。用构建好的pcDNA3.1-POL-flag重组质粒转染HeLa细胞,LC-MS/MS技术筛选能与融合flag标签的Pol发生免疫共沉淀的蛋白,共得到45个蛋白,其中11个蛋白被报道能与Pol发生相互作用。Ingenuity Pathway Analysis(IPAR○)软件进一步分析45个蛋白与Pol的功能及相应的细胞网络,发现这些蛋白涉及三个大分子网络,其中4个蛋白可能参与协助Pol在细胞网络中行使其生理功能,对这4个蛋白的进一步研究将有助于为攻克乙型肝炎病提供线索。

关键词： LTQ-FT-MS 乙型肝炎病毒聚合酶相互作用

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养殖模式对固始鸡氨基酸及其组成的影响研究

饲料工业 2018年第6期39卷 26-31页

作者：王卫刘文龙凌梦婷张娇吉莉莉陈林成都大学肉类加工四川省重点实验室四川成都610106 成都大学药学与生物工程学院四川成都610106

分别采用无抗舍养、无抗放养、有抗舍养和有抗放养四种方式对固始鸡进行养殖,测定不同养殖阶段鸡腿肉、胸肉和肝脏中的氨基酸含量,以研究不同养殖模式对鸡肉品质的影响。结果显示,在舍养条件下,有抗养殖与无抗养殖比较,随着养殖时间的延... 详细信息

分别采用无抗舍养、无抗放养、有抗舍养和有抗放养四种方式对固始鸡进行养殖,测定不同养殖阶段鸡腿肉、胸肉和肝脏中的氨基酸含量,以研究不同养殖模式对鸡肉品质的影响。结果显示,在舍养条件下,有抗养殖与无抗养殖比较,随着养殖时间的延长,无抗养殖的总氨基酸含量略高于有抗养殖,而呈鲜味、必需氨基酸含量有抗养殖略高;放养条件下有抗养殖与无抗养殖比较,总氨基酸、呈鲜味氨基酸、必需和非必需氨基酸,无抗养殖均略高。对不同养殖模式的总体比较,氨基酸总量放养条件时较高;必需和非必需氨基酸以及呈鲜味氨基酸放养条件时显著提高。有抗养殖与无抗养殖总体比较,总氨基酸、必需和非必需氨基酸有抗养殖较高,呈鲜味氨基酸差异不显著。经分析可知,无抗养殖有助于提高鸡肉中氨基酸、必需氨基酸和呈鲜味氨基酸的含量。在放养条件下,无论是有抗养殖还是无抗养殖,鸡腿、鸡胸和肝脏中的氨基酸总量总体水平均高于舍养,其中天门冬氨酸和谷氨酸相对较高。

关键词：固始鸡养殖模式鸡肉氨基酸组成

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乙肝病毒聚合酶Pol功能的相关研究

乙肝病毒聚合酶Pol功能的相关研究

乙肝病毒聚合酶PoI与细胞蛋白hnRNPK相互作用及对PoI功能的影响

中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：官君原凌梦婷李月琴李君武周天鸿暨南大学生命科学技术学院

HBV长期感染是肝癌发生的原因之一。Pol作为HBV DNA聚合酶住病毒基因组复制,核农壳的组装等生活周期中发挥至关重要的作用。本论文研究乙肝病毒Pol对肿瘤的产生以及相关的机制如细胞凋亡及细胞周期,细胞增殖,细胞癌基因表达的影响。在Tr... 详细信息

HBV长期感染是肝癌发生的原因之一。Pol作为HBV DNA聚合酶住病毒基因组复制,核农壳的组装等生活周期中发挥至关重要的作用。本论文研究乙肝病毒Pol对肿瘤的产生以及相关的机制如细胞凋亡及细胞周期,细胞增殖,细胞癌基因表达的影响。在Trail诱导下,转染pCDNA3.1-Pol-FLAG至Hela细胞,检测Pol的对细胞凋亡和细胞周期的影响,并在caspase3活化情况下验证Pol的对细胞凋亡的影响。利用MTT检测在DOX抑制增殖的情况下Pol对细胞增殖的影响。荧光定量PCR技术检测13个癌症相关基因的mRNA表达情况。实验结果显示在Hela细胞中通过Pl染色、Hoechst3325染色法和caspase3活化情况检测剑Pol在Trail诱导的凋亡途径中有抗凋亡作用;MTT技术发现Pol在DOX抑制增殖的情况下有促增殖作用;荧光定量PCR技术发现了Pol上调ROCK、VEGFC、MMP9三个癌症相关基因mRNA表达。痛症的发生、细胞调亡、细胞增殖、细胞周期等与病毒的感染相关,HBV的Pol蛋白能在Trail诱导的凋亡途径中,起抗凋亡作用,推测此作用有可能在病毒感染过程中起维持病毒的作用;DOX是一种抗肿瘤药物。住DOX抑制下,Pol有促进细胞增殖的作用,显示了Pol很可能与HBV感染引起的癌变有关。有文献报道,ROCK、VEGFC、MMP9三个癌基因与癌症的迁移和侵袭有关,当它们高表达时可以促进癌症的迁移利侵袭,所以HBV的Pol在体内与肿瘤的发生具有了相关的途径关系。以上对HBV的POL研究新结果提示进一步提示了POL的多功能效应。

关键词： HBV DNA聚合酶凋亡细胞增殖癌基因

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乙肝病毒聚合酶PoI与细胞蛋白hnRNPK相互作用及对PoI功能的影响

乙肝病毒聚合酶Pol与细胞蛋白hnRNPK相互作用及对PoI功能的影响

中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：宫君原凌梦婷李月琴张欣李君武周天鸿暨南大学生命科学技术学院

Pol作为HBV DNA聚合酶具有多功能的性质。它可与宿主细胞内多利,蛋白相互作用,影响病毒和细胞的生物学机制。本文利用LTQ质谱方法寻找与Pol相互作用的宿主蛋白,筛选到与Pol潜在相互作用的45个蛋白,并通过CO-IP技术结合最终确定hnRNPK、S... 详细信息

Pol作为HBV DNA聚合酶具有多功能的性质。它可与宿主细胞内多利,蛋白相互作用,影响病毒和细胞的生物学机制。本文利用LTQ质谱方法寻找与Pol相互作用的宿主蛋白,筛选到与Pol潜在相互作用的45个蛋白,并通过CO-IP技术结合最终确定hnRNPK、SQSTMl、hnRNPL、EEFlA2四个蛋白与Pol有相互作用。由于POL具有影响细胞凋亡,细胞增殖,细胞癌基因表达的影响,本文研究主要集中于hnRNPK与Pol的相互作用及对上述功能影响的研究。Pol对hnRNPK的磷酸化水平和表达最没有影响。利用超表达和siRNA沉默技术,以Hoechst33258染色和检测caspase3和caspase7活化,发现Pol在Trail诱导的非线粒体依赖的凋亡途径中起抗凋亡作用是依赖于hnRNPK蛋白;免疫荧光技术检测发现hnRNPK能够影响Pol在细胞内的定位,hnRNPK能够使Pol迁移至细胞核中,并且这个迁移作用,随着Pol表达时间的增长而增强;DOX抑制增殖时,hnRNPK通过AKT、ERK途径促进细胞增殖,但是Pol的促增殖作用,并不是受AKT、ERK磷酸化调控。我们认为Pol存Trail诱导下的抗凋亡作用依赖于hnRNPK这一途径,对这一通路的阻断,有可能为治疗乙肝病毒的药物研发提供新的思路

关键词： HBV hnRNPK DNA聚合酶凋亡细胞增殖

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乙肝病毒聚合酶Pol与细胞蛋白hnRNPK相互作用及对PoI功能的影响

藤黄酸下调蛋白C受体表达杀伤三阴性乳腺癌干细胞的作用机制

中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：宫君原凌梦婷李月琴张欣李君武周天鸿暨南大学生命科学技术学院

Pol作为HBVDNA聚合酶具有多功能的性质。它可与宿主细胞内多种蛋白相互作用,影响病毒和细胞的生物学机制。本文利用LTQ质谱方法寻找与Pol相互作用的宿主蛋白,筛选到与Pol潜在相互作用的45个蛋白,并通过CO-IP技术结合最终确定hnRNPK、SQS... 详细信息

Pol作为HBVDNA聚合酶具有多功能的性质。它可与宿主细胞内多种蛋白相互作用,影响病毒和细胞的生物学机制。本文利用LTQ质谱方法寻找与Pol相互作用的宿主蛋白,筛选到与Pol潜在相互作用的45个蛋白,并通过CO-IP技术结合最终确定hnRNPK、SQSTM1、hnRNPL、EEF1A2四个蛋白与Pol有相互作用。由于POL具有影响细胞凋亡,细胞增殖,细胞癌基因表达的影响,本文研究主要集中于hnRNPK与Pol的相互作用及对上述功能影响的研究。Pol对hnRNPK的磷酸化水平和表达量没有影响。利用超表达和siRNA沉默技术,以Hoechst33258染色和检测caspase3和caspase7活化,发现Pol在Trail诱导的非线粒体依赖的凋亡途径中起抗凋亡作用是依赖于hnRNPK蛋白;免疫荧光技术检测发现hnRNPK能够影响Pol在细胞内的定位,hnRNPK能够使Pol迁移至细胞核中,并且这个迁移作用,随着Pol表达时间的增长而增强;DOX抑制增殖时,hnRNPK通过AKT、ERK途径促进细胞增殖,但是Pol的促增殖作用,并不是受AKT、ERK磷酸化调控。我们认为Pol在Trail诱导下的抗凋亡作用依赖于hnRNPK这一途径,对这一通路的阻断,有可能为治疗乙肝病毒的药物研发提供新的思路

关键词： HBV hnRNPK DNA聚合酶凋亡细胞增殖

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4888-4898页

作者：李溯王清华达梦婷杨蕊陈道桢南京医科大学附属无锡妇幼保健院优生优育医学遗传研究所江苏省无锡市214002 江南大学附属妇产医院优生优育医学遗传研究所江苏省无锡市214002 青海大学附属医院乳腺疾病诊疗中心青海省西宁市810000 青海省海东市第二人民医院院长办公室青海省海东市810600

背景:藤黄酸对乳腺癌具有很强的细胞毒性,可有效杀伤三阴性乳腺癌干细胞,但潜在的机制尚不清楚。目的:探讨藤黄酸对三阴性乳腺癌干细胞的杀伤作用及可能的机制。方法:使用PharmMapper数据库预测藤黄酸的靶点蛋白,使用String网站构建各... 详细信息

背景:藤黄酸对乳腺癌具有很强的细胞毒性,可有效杀伤三阴性乳腺癌干细胞,但潜在的机制尚不清楚。目的:探讨藤黄酸对三阴性乳腺癌干细胞的杀伤作用及可能的机制。方法:使用PharmMapper数据库预测藤黄酸的靶点蛋白,使用String网站构建各药物靶点蛋白互作网络关系,使用Cytoscape软件构建活性成分-作用靶点网络,通过R语言软件对潜在靶点进行KEGG信号通路富集分析。采用CCK-8法检测不同浓度藤黄酸对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231活力的影响,筛选适宜的作用浓度。采用细胞球培养法富集MDA-MB-231细胞干细胞,经过不同浓度(0,0.5,1.0,2.0μmol/L)藤黄酸作用24 h,TUNEL荧光染色与流式细胞仪检测干细胞凋亡,qPCR与Western blot检测蛋白C受体表达,Western blot检测p-PI3K、p-AKT、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白表达;将干细胞分4组培养:空白对照组(干细胞不做任何处理)、siRNA-NC组、siRNA-蛋白C受体组和siRNA-蛋白C受体+PI3K激动剂组,培养36 h后,采用Western blot法检测p-PI3K、p-AKT、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白表达。结果与结论:(1)网络药理学发现,三阴性乳腺癌干细胞标志物蛋白C受体是藤黄酸的作用靶点之一;KEGG富集分析涉及细胞凋亡、上皮生长因子受体、RAS和PI3K-AKT信号通路等;(2)CCK-8检测结果显示,藤黄酸可抑制MDA-MB-231细胞活力,半数抑制浓度IC50值为(1.18±0.34)μmol/L,因此后续实验选择浓度0.5,1.0,2.0μmol/L;(3)TUNEL荧光染色和流式细胞术检测证实,藤黄酸以剂量依赖的方式诱导三阴性乳腺癌干细胞凋亡(P <0.05);qPCR和Western blot检测证实,藤黄酸可下调蛋白C受体mRNA和蛋白表达,下调Caspase-3、p-PI3K和p-AKT蛋白表达,上调Cleaved Caspase-3蛋白表达(P <0.05);siRNA-蛋白C受体转染实验也进一步证实,敲低三阴性乳腺癌干细胞蛋白C受体表达可提升Cleaved Caspase-3蛋白表达(P <0.05)、下调PI3K/AKT信号通路磷酸化水平(P <0.05),而应用PI3K激动剂740 Y-P能够降低Cleaved Caspase-3蛋白表达(P <0.05)、提升p-PI3K和p-AKT的磷酸化水平(P <0.05),一定程度上改善细胞凋亡情况;(4)结果表明,藤黄酸可能通过下调蛋白C受体来发挥三阴性乳腺癌及干细胞杀伤及诱导凋亡作用,进一步的分子机制可能和PI3K/AKT信号通路抑制有关。

关键词：三阴性乳腺癌干细胞网络药理学藤黄酸分子机制信号通路

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房山区口儿村沟“23·7”暴雨水毁修复建设分析

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中国水土保持 2025年第1期 57-59+85页

作者：张焜曹振胡晓静李卓凌王庆邢梦璇北京市水科学技术研究院北京市水利规划设计研究院北京市房山区水务局河海大学港口海岸与近海工程学院

“23·7”特大暴雨引发山洪和流域洪水，北京西部山区受灾严重。以房山区口儿村小流域为例，通过收集资料和实地调查，应用水文手册分析降雨、洪水特征，结合损毁及成因分析提出了按照小流域“生态修复区、生态治理区和生态保护区”三... 详细信息

“23·7”特大暴雨引发山洪和流域洪水，北京西部山区受灾严重。以房山区口儿村小流域为例，通过收集资料和实地调查，应用水文手册分析降雨、洪水特征，结合损毁及成因分析提出了按照小流域“生态修复区、生态治理区和生态保护区”三道防线，兼顾防洪安全、沟道自然形态与生态功能，因地制宜、因害设防的修复建设思路，以及科学布设谷坊坝、实施梯田整修、加强沟道治理、营造缓冲区等具体修复建议。

关键词： “23·7”暴雨小流域水毁修复房山区

部分典型量子材料中准粒子超快动力学的第一性原理研究

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中国科学:物理学力学天文学 2025年第1期 34-52页

作者：周亚梅关梦雪北京理工大学物理学院先进光电量子结构与测量教育部重点实验室

准粒子作为对单粒子激发背后复杂多体现象的有效描述,在理解量子材料的宏观性质中扮演着重要角色.近年来,结合超快激光技术与各类探测手段,实现了对量子态及其动力学过程的高精度监测和操纵.这不仅加深了对准粒子激发机制的理解,还有助... 详细信息

准粒子作为对单粒子激发背后复杂多体现象的有效描述,在理解量子材料的宏观性质中扮演着重要角色.近年来,结合超快激光技术与各类探测手段,实现了对量子态及其动力学过程的高精度监测和操纵.这不仅加深了对准粒子激发机制的理解,还有助于驱动物质进入非平衡态,从而揭示出新的物理现象,促进新型功能材料的设计和应用开发.基于实时演化含时密度泛函理论(rt-TDDFT)的计算方法,可以超越线性响应理论的限制,第一性地模拟强耦合准粒子在非平衡状态下的动力学响应,揭示由强激光诱导的高度非线性现象及其物理机制,为优化光电器件性能提供了重要的理论支持.本文通过介绍基于rt-TDDFT的Ehrenfest动力学方法的理论基础和激光激发条件下多种准粒子演化的案例研究,展示了超快激光在量子材料物性探索和操控中的巨大潜力,同时凸显了动力学模拟在非平衡态及其时域性质研究方面的关键作用.

关键词：准粒子含时密度泛函理论量子材料物性调控

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电视大屏活跃率继续上涨多部剧集收视创年度新高

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中国广播电视学刊 2025年第01期 135-136页

作者：滕勇黄瑞婷国家广播电视总局广播电视规划院总局广播影视信息网络中心研究分析处

据中国视听大数据（CVB）统计，2024年11月全国直播频道用户日均活跃率继续保持上涨，本月连续四周呈现上扬态势。中央和省级卫视多部优秀电视剧收获高收视好口碑，微短剧上大屏反响好，热度不断攀升。多家省级卫视推出重点文化类节目...

据中国视听大数据（CVB）统计，2024年11月全国直播频道用户日均活跃率继续保持上涨，本月连续四周呈现上扬态势。中央和省级卫视多部优秀电视剧收获高收视好口碑，微短剧上大屏反响好，热度不断攀升。多家省级卫视推出重点文化类节目，收视表现亮眼；新播纪录片题材丰富、表达多元，收视亮点频出；第25个中国记者节特别节目致敬广大新闻工作者，关注度高；系列节目围绕庆祝澳门回归25周年，广受观众关注和喜爱。

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