检索结果-南通市图书馆

反相离子对HPLC法测定三磷酸胞苷二钠注射液的含量

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药物分析杂志 2006年第8期26卷 1132-1134页

作者：乔红群何学军张爱琴凌明圣王雪根南京凯腾科技有限公司南京210009 南京工业大学南京210009

目的:用反相离子对高效液相色谱法测定三磷酸胞苷二钠注射液中三磷酸胞苷二钠(CTP)的含量。方法:以 Luna ODSC_(18)为色谱柱(250 mm×4.60 mm,5～μm),含50 mmol·L^(-1)磷酸二氢钾的四丁基氢氧化铵(75 mmol·L^(-1))溶液(磷酸调 pH为4.... 详细信息

目的:用反相离子对高效液相色谱法测定三磷酸胞苷二钠注射液中三磷酸胞苷二钠(CTP)的含量。方法:以 Luna ODSC_(18)为色谱柱(250 mm×4.60 mm,5～μm),含50 mmol·L^(-1)磷酸二氢钾的四丁基氢氧化铵(75 mmol·L^(-1))溶液(磷酸调 pH为4.0)-甲醇(75:25)为流动相,检测波长271 nm,进样量20μL。结果:CTP 浓度在40～200μg·mL^(-1)范围内,与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为 Y=9.302×10~4X+1.000×10~6(r=0.9997);含量测定的重复性 RSD 为0.5%(n=6),回收率为99.96%,检出限为0.15 ng,定量限为0.5 ng。结论:方法灵敏度高,重现性好,专属性强,用反相离子对高效液相色谱法测定三磷酸胞苷二钠注射液中 CTP 的含量,国内未见报道。

关键词：三磷酸胞苷二钠(CTP) 反相离子对高效液相色谱法含量测定

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的红外光谱研究

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云南大学学报（自然科学版） 1994年第S2期16卷 26-27页

作者：姜厚理宋占军凌明圣马贤凯军事医学科学院

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的红外光谱研究姜厚理，宋占军（军事医学科学院，仪器分析中心，北京，１００８５０）凌明圣，马贤凯（军事医学科学院，基础医学研究所，北京，１００８５０）集落刺激因子是人体内脊髓和红细胞系前体造... 详细信息

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的红外光谱研究姜厚理，宋占军（军事医学科学院，仪器分析中心，北京，１００８５０）凌明圣，马贤凯（军事医学科学院，基础医学研究所，北京，１００８５０）集落刺激因子是人体内脊髓和红细胞系前体造血细胞的分化、繁殖和生长所需的一类...

关键词：红外光谱研究军事医学科学院马贤凯红细胞系集落刺激因子医学研究所仪器分析明圣红外分析造血细胞

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Alport综合征及其分子生物学研究

国外医学（遗传学分册） 1994年第2期17卷 66-70页

作者：凌明圣军事医学科学院基础医学研究所南京军区南京总医院肾脏病研究所

Ａｌｐｏｒｔ综合征（遗传性肾炎）是一种Ｘ染色体连锁的遗传疾病［１，２］。利用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术，缺陷性基因定位在Ｘｑ２２－２６区域［３，４，５］。这种疾病具有进行性血尿症状并最终导致终末期肾疾病，同... 详细信息

Ａｌｐｏｒｔ综合征（遗传性肾炎）是一种Ｘ染色体连锁的遗传疾病［１，２］。利用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术，缺陷性基因定位在Ｘｑ２２－２６区域［３，４，５］。这种疾病具有进行性血尿症状并最终导致终末期肾疾病，同时还可能伴有一些非肾病症状，诸如听力丧失、圆锥形晶状体、视网膜异常、血小板减少症等。主要的病理学发现是肾小球基底膜（ＧＢＭ）超微结构的变化，包括区域性变薄，增厚和致密层分离，这表明缺陷在于ＧＢＭ结构框架，它是由ＧＢＭ特有的胶原Ⅳ型（ＣＯＬ４）分子形成的复杂网状物。近年来，许多学者致力于Ａｌｐｏｒｔ综合征的分子生物学研究，尤其是胶原Ⅳ型α５亚基（ＣＯＬ４Ａ５）基因，已对其进行了ｃＤＮＡ克隆和基因结构及序列分析［６］，发现了５种大片段缺失和７种点突变。

关键词：肾炎遗传性分子生物学

以包涵体形式存在的重组蛋白的纯化和体外折叠

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中国生化药物杂志 1995年第3期16卷 135-139页

作者：凌明圣许祥裕丁树标南京军区军事医学研究所南京210002

基因工程技术已使许多有重要意义的生物活性蛋白质的基因在原核生物中得到表达,为人们欲获得具有潜在临床和工业应用价值的大量蛋白质提供了丰富的来源.但是许多重组蛋白质是以包涵体形式在大肠杆菌中产生,它们的理化性质与天然蛋白质... 详细信息

基因工程技术已使许多有重要意义的生物活性蛋白质的基因在原核生物中得到表达,为人们欲获得具有潜在临床和工业应用价值的大量蛋白质提供了丰富的来源.但是许多重组蛋白质是以包涵体形式在大肠杆菌中产生,它们的理化性质与天然蛋白质有许多不同之处,故从包涵体中获得高纯的重组蛋白质,进而对变性的重组蛋白质进行构象重折叠,即复性得到具有生物活性的蛋白质,是得到遗传工程产品的重要途径.

关键词：包涵体折叠重组蛋白提纯

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分子伴侣HSP70研究进展

国外医学（分子生物学分册） 1993年第5期15卷 227-230页

作者：凌明圣徐明波姚志建军事医学科学院基础医学研究所北京100850

分子伴侣HSP70在原核、真核细胞均已发现,它们具有共同的生化特征,在细胞内各自分布在特定的区域。其主要生物学功能是促进新生多肽链的正确折叠,对于分子重排、解离聚集蛋白和新生多肽的膜运输也具有重要的辅助作用。

关键词：热休克蛋白研究

大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的纯化

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生物工程学报 1995年第3期11卷 217-221页

作者：凌明圣邹民吉徐明波王嘉玺马贤凯军事医学科学院基础医学研究所北京100850

对重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）高效表达克隆ｐＺＷ．ＧＭ的表达产物进行了纯化，并对纯化的ＧＭ－ＣＳＦ进行了Ｎ端氨基酸序列分析。人ＧＭ－ＣＳＦ基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在，经过... 详细信息

对重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）高效表达克隆ｐＺＷ．ＧＭ的表达产物进行了纯化，并对纯化的ＧＭ－ＣＳＦ进行了Ｎ端氨基酸序列分析。人ＧＭ－ＣＳＦ基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在，经过超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层析、复性、离子交换一系列化步骤，终产物纯度达９９％，按蛋白总量计算回收率达１０％，比活性达１×１０＾７ｕ／ｍｇ蛋白质。

关键词：重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 rhGM-CSF

利用傅里叶变换红外光谱法研究重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子溶液中的构象

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药物生物技术 1995年第3期2卷 7-10页

作者：凌明圣许祥裕丁树标马贤凯南京军区军事医学研究所北京军事医学科学院基础医学研究所

利用傅里叶变换红外光谱（ＦＴＩＲ）技术研究了重组人粒细脑巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）在重水（Ｄ＿２Ｏ）溶液中的二级结构，结果表明：２０℃时ｒｈＧＭ－ＣＳＦ含有３５％α－螺旋，３２％β－折叠，１１％转角和２... 详细信息

利用傅里叶变换红外光谱（ＦＴＩＲ）技术研究了重组人粒细脑巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）在重水（Ｄ＿２Ｏ）溶液中的二级结构，结果表明：２０℃时ｒｈＧＭ－ＣＳＦ含有３５％α－螺旋，３２％β－折叠，１１％转角和２０％无规卷曲。

关键词：傅里叶变换红外光谱法重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子溶液构象

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大肠杆菌表达的重组人GM-CSF的纯化

生物技术通讯 1994年第4期5卷 163-165页

作者：凌明圣邹民吉徐明波王嘉玺马贤凯军事医学科学院基础医学研究所北京100850

本文对重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)高效表达克隆***的表达产物进行纯化,并对纯化的人GM-CSF进行了N端氨基酸序列分析。人GM-CSF基因表达产物在大肠肝菌中以不溶性包涵体形式存在,经超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层... 详细信息

本文对重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)高效表达克隆***的表达产物进行纯化,并对纯化的人GM-CSF进行了N端氨基酸序列分析。人GM-CSF基因表达产物在大肠肝菌中以不溶性包涵体形式存在,经超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层析、复性、离子交换一系列纯化步骤,终产物纯度达99％,按蛋白总量计算回收率达10％,比活性达1×10~7u/mg蛋白质。通过测定纯化人GM-CSF的N端16个氨基酸序列,与由其DNA序列推导的氨基酸序列完全一致。

关键词：重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子复性纯化氨基酸序列分析

聚乙二醇增加重组人粒-单系集落刺激因子复性效率的研究

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药物生物技术 1997年第1期4卷 5-8页

作者：凌明圣许祥裕施凤霞丁树标张永恒南京军区军事医学研究所南京210002 中国药科大学药物分析教研室南京210009

重组人粒 -单系集落刺激因子 (rh GM- CSF)在大肠杆菌表达后积累在细胞中形成包涵体 ,在变性的包涵体的抽提液复性过程中 ,目的产物可能聚积而使活性蛋白的得率降低。本研究对聚乙二醇 (PEG)增加复性的能力进行试验。将 rh GM- CSF在 6 ... 详细信息

重组人粒 -单系集落刺激因子 (rh GM- CSF)在大肠杆菌表达后积累在细胞中形成包涵体 ,在变性的包涵体的抽提液复性过程中 ,目的产物可能聚积而使活性蛋白的得率降低。本研究对聚乙二醇 (PEG)增加复性的能力进行试验。将 rh GM- CSF在 6 mol/L尿素中变性 ,迅速稀释到不同浓度尿素和 PEG的溶液中并保持蛋白浓度为 0 .2 mg/ml,在尿素浓度为 2 .0 mol/L,PEG4 0 0 0对rh GM- CSF的摩尔比为 2 0∶ 1时活性蛋白从 4 0 %增加到 55% ,rh GM- CSF的比活从 5.1× 10 6u/mg增加到 1.0× 10 7u/mg,总蛋白得率从 50 %增加到 10 0 %。表明 PEG能增加变性蛋白的复性效率。

关键词：集落刺激因子聚乙二醇复性