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1株鲫源维氏气单胞菌的分离鉴定

中国兽医杂志 2017年第3期53卷 91-95页

作者：冷东泽张培军焦雪巴翠玉李月红吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林省卫生监测检验中心吉林长春1300001

为快速分离鉴定鲫鱼出血性败血症致病因子,从病死鲫鱼肝脏分离细菌,经LB固体培养基划线分离,28℃,24 h培养后,见圆润光滑、表面微凸的菌株呈优势生长,挑取单菌落命名为AX002。观察该菌在RYAN培养基28℃,24 h后生长成深绿色有深核菌落,... 详细信息

为快速分离鉴定鲫鱼出血性败血症致病因子,从病死鲫鱼肝脏分离细菌,经LB固体培养基划线分离,28℃,24 h培养后,见圆润光滑、表面微凸的菌株呈优势生长,挑取单菌落命名为AX002。观察该菌在RYAN培养基28℃,24 h后生长成深绿色有深核菌落,同条件在RS培养基培养,24 h后长成黄色菌落,后逐步由内向外变为绿色菌落,通过全自动细菌鉴定系统,检测AX002对蔗糖等23种指标呈阳性反应,对山梨醇等22种指标呈阴性反应。设计引物扩增16S r DNA和促旋酶亚基(gyr B)基因并测序。测序结果与NCBI中其他菌株序列进行比对,建立系统发育树,确定AX002为维氏气单胞菌。同时该系统显示该菌对阿米卡星、头孢唑啉、复方新诺明、环丙沙星等15种抗生素敏感。该菌对头孢唑啉、氨苄西林和氨苄西林舒巴坦钠三中抗生素药物最低抑菌浓度>16μg/m L,对四环素最低抑菌浓度>8μg/m L,结果判定AX002对头孢唑啉、氨苄西林、氨苄西林舒巴坦钠和四环素具有耐药性。该菌对体长5~15 cm,体重30~50 g鲫鱼腹腔注射,测定半致死浓度(LD50)为2.38×107CFU/m L。本研究有利于进一步研究维氏气单胞菌。

关键词：鲫鱼分离鉴定维氏气单胞菌

异鼠李素对喉癌细胞生长、迁移及PI3K/AKT1/β-catenin信号的抑制作用

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海南医学院学报 2024年

作者：余南琼付一笑冷东泽胡美纯佘同辉湖北科技学院医学部药学院湖北科技学院医学部基础医学院

目的：探讨异鼠李素（isorhamnetin，ISO）对喉癌细胞生长、迁移的影响及其与PI3K/AKT1/β-catenin信号的关系。方法：以喉癌细胞株（HEP-2、TU212）、人结肠上皮细胞（NCM460）为研究对象，通过MTT法、克隆形成实验、划痕实验、Transw... 详细信息

目的：探讨异鼠李素（isorhamnetin，ISO）对喉癌细胞生长、迁移的影响及其与PI3K/AKT1/β-catenin信号的关系。方法：以喉癌细胞株（HEP-2、TU212）、人结肠上皮细胞（NCM460）为研究对象，通过MTT法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、台盼蓝染色、Hoechst 33258染色、线粒体膜电位（JC-1）检测、活性氧（ROS）检测等方法，分析ISO对喉癌细胞生长、迁移的影响；网络药理学及分子对接预测ISO作用于喉癌细胞的分子靶点；蛋白免疫印迹法检测喉癌细胞中p-PI3K、p-AKT1、β-catenin和cyclin D1蛋白的表达情况。结果：与对照组（ISO 0 μmol/L）比较，ISO（10、20、40 μmol/L）显著抑制HEP-2、TU212细胞的增殖、克隆形成、迁移与侵袭，并诱导细胞活性氧水平升高、线粒体膜电位降低，细胞凋亡率升高；网络药理学与分子对接提示ISO可能作用于AKT1分子靶点；Western blot结果发现，随着不同浓度的ISO处理HEP-2、TU212细胞后，p-PI3K、p-AKT1、β-catenin和cyclinD1的蛋白表达水平均显著低于对照组。结论：ISO能够抑制喉癌细胞的生长、迁移，并通过升高活性氧水平、降低线粒体膜电位诱导细胞凋亡，ISO作用的分子机制可能与调节喉癌细胞的PI3K/AKT1/β-catenin信号通路有关。

关键词：异鼠李素喉癌生长迁移 PI3K/AKT1/β-catenin

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大麻哈鱼温和气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

中国兽医科学 2016年第6期46卷 775-780页

作者：巴翠玉张雅斌张培军张蕾冷东泽李月红吉林农业大学吉林长春130118 吉林省水产科学研究院吉林长春130000 吉林省卫生监测检验中心吉林长春130000

为了解温和气单胞菌在大麻哈鱼中的发病症状并进行药敏试验,并为预防和治疗该病在大麻哈鱼中暴发提供试验数据,从患病大麻哈鱼鱼苗的鳃及内脏等病灶部位分离到1株细菌,经腹腔人工注射和人工浸浴感染试验均出现与自然病例相似的症状,并... 详细信息

为了解温和气单胞菌在大麻哈鱼中的发病症状并进行药敏试验,并为预防和治疗该病在大麻哈鱼中暴发提供试验数据,从患病大麻哈鱼鱼苗的鳃及内脏等病灶部位分离到1株细菌,经腹腔人工注射和人工浸浴感染试验均出现与自然病例相似的症状,并分离到革兰染色和生理生化特性结果与原菌株相同的细菌。结果表明,该菌为短杆状、两端钝圆的革兰阴性菌,与D-葡糖酸、丙二酸和葡萄糖等反应呈阳性,而与黏菌素、七叶苷和L-阿拉伯糖等反应呈阴性,结合16S r RNA基因序列分析结果,该菌与温和气单胞菌的亲缘关系最近,鉴定为温和气单胞菌。药敏试验结果显示,对氨苄西林、四环素和左氧氟沙星等药物表现出耐药,对阿米卡星和亚胺培南等药物敏感。本试验首次从大麻哈鱼体中分离出温和气单胞菌,并得到8种高度敏感的药物,同时阐明了温和气单胞菌在大麻哈鱼中的发病症状。

关键词：大麻哈鱼温和气单胞菌分离鉴定药敏试验

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西藏野生双孢蘑菇驯化

食用菌学报 2017年第2期24卷 15-17页

作者：郑丹丹胡扬扬杨健华董亮君冷东泽王琦吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心吉林长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

对采自西藏自治区日喀则市高海拔地区的野生双孢蘑菇(Agaricus bisporus)进行驯化。结果表明:试验范围内,西藏野生双孢蘑菇的最适母种固体培养基配方为200.0g去皮马铃薯、20.0g葡萄糖、3.0g蛋白胨、1.0g KH_2PO_4、0.5g MgSO4、20.0g琼... 详细信息

对采自西藏自治区日喀则市高海拔地区的野生双孢蘑菇(Agaricus bisporus)进行驯化。结果表明:试验范围内,西藏野生双孢蘑菇的最适母种固体培养基配方为200.0g去皮马铃薯、20.0g葡萄糖、3.0g蛋白胨、1.0g KH_2PO_4、0.5g MgSO4、20.0g琼脂、1.0L水、pH自然,菌丝生长速度最快为0.21cm/d。最适原种培养基配方为93%麦粒、5%牛粪粉、1%石膏、1%石灰,原种的生长周期是28d。在栽培试验中,子实体的单位面积产量是8.71kg/m^2及平均单菇重47.56g,子实体颜色以浅褐色为主。

关键词：双孢蘑菇野生型菌株驯化

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七彩鲑雌核发育及其倍性研究

淡水渔业 2017年第6期47卷 21-25页

作者：代静焦雪张培军冷东泽巴翠玉茆安婷李月红吉林农业大学长春130000 吉林省卫生监测检验中心长春130000

利用紫外线照射对七彩鲑(Salvelinus fontinalis)精子进行灭活处理,使其遗传物质失活,作为同源精子诱导源,与七彩鲑卵子进行受精,采用冷休克方法诱导雌核发育。结果表明:同源精子可以诱导七彩鲑的雌核发育,紫外照射强度为72 m J/cm2;距... 详细信息

利用紫外线照射对七彩鲑(Salvelinus fontinalis)精子进行灭活处理,使其遗传物质失活,作为同源精子诱导源,与七彩鲑卵子进行受精,采用冷休克方法诱导雌核发育。结果表明:同源精子可以诱导七彩鲑的雌核发育,紫外照射强度为72 m J/cm2;距离为8 cm;冷休克温度为20℃。七彩鲑减数分裂雌核发育倍性测定以鸡(Gallus sp.)红细胞DNA含量(2.5 pg/N)为标准、七彩鲑普通育苗子一代为参照,采用流式细胞术和微卫星标记技术对30尾七彩鲑减数分裂雌核发育鱼苗进行分析,证明了雌核发育鱼苗为雌核发育二倍体。

关键词：七彩鲑(Salvelinus fontinalis) 雌核发育流式细胞术 DNA含量微卫星标记

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3种气单胞菌耐药性及致病性的研究进展

中国兽医杂志 2016年第9期52卷 69-71页

作者：焦雪安俊花张翔宇张培军冷东泽王建超巴翠玉李月红吉林农业大学动物科学技术学院水产实验室吉林长春130118 内蒙古乌兰察布市农牧综合行政执法大队内蒙古乌兰察布012000 内蒙古乌兰察布市水产站内蒙古乌兰察布012000 吉林省卫生监测检测中心吉林长春130118

气单胞菌广泛分布于水生生态系统中,不仅存在淡水流域的河流、沿海等地,还存在于自来水中,隶属革兰阴性菌,既可以感染鱼类,也可以感染人畜,是一种人-鱼-兽共患的条件性致病菌。本文着重以鱼类感染嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、维氏气单... 详细信息

气单胞菌广泛分布于水生生态系统中,不仅存在淡水流域的河流、沿海等地,还存在于自来水中,隶属革兰阴性菌,既可以感染鱼类,也可以感染人畜,是一种人-鱼-兽共患的条件性致病菌。本文着重以鱼类感染嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、维氏气单胞菌所表现的临床症状为例,重点对这3种气单胞菌的形态特征及抗生素的耐药性、致病性进行讨论,以期为气单胞菌属的预防、治疗提供有利的参考和科学依据。

关键词：嗜水气单胞菌致病性耐药性水生生态系统温和气单胞菌革兰阴性菌气单胞菌属临床症状

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2株温和气单胞菌SNP位点比较分析

中国兽医学报 2017年第3期37卷 449-455页

作者：焦雪张培军冷东泽王建超巴翠玉李月红吉林农业大学吉林长春130018 吉林省卫生监测检验中心吉林长春130018

通过Illumina HiSeq 2500测序仪对2株温和气单胞菌A1、B2进行全基因组重测序,并与参考基因组(Aeromonas veronii B565,complete genome)序列进行比较,A1、B2与参考基因组之间共获得约100 018个SNP位点,与参考基因组平均比对率为74.46%... 详细信息

通过Illumina HiSeq 2500测序仪对2株温和气单胞菌A1、B2进行全基因组重测序,并与参考基因组(Aeromonas veronii B565,complete genome)序列进行比较,A1、B2与参考基因组之间共获得约100 018个SNP位点,与参考基因组平均比对率为74.46%。根据编码区SNPs分布与参考基因组间进行检测;通过COG和GO的功能注释,寻找A1、B2Diff基因的SNPs位点对2株温和气单胞菌进行注释分析,了解温和气单胞菌致病机制与基因组成,为今后温和气单胞菌的研究提供科学数据。

关键词：温和气单胞菌全基因组重测序 SNPs

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鲫鱼戴氏西地西菌的分离与鉴定

中国兽医杂志 2016年第5期52卷 107-109页

作者：巴翠玉赵福广张培军焦雪冷东泽李月红吉林农业大学吉林长春130118 吉林省卫生监测检验中心吉林长春130000

本试验旨在从患病鲫鱼的鳃、肾、肝、胰脏等病灶部位分离病原菌,并对其进行鉴定。采用革兰染色的方法观察其为短杆状、呈单双排列的革兰阴性菌,利用美国BD公司生产的PhoenixTM100型全自动微生物分析仪进行生化鉴定及药敏试验分析,结果... 详细信息

本试验旨在从患病鲫鱼的鳃、肾、肝、胰脏等病灶部位分离病原菌,并对其进行鉴定。采用革兰染色的方法观察其为短杆状、呈单双排列的革兰阴性菌,利用美国BD公司生产的PhoenixTM100型全自动微生物分析仪进行生化鉴定及药敏试验分析,结果为戴氏西地西菌,对亚胺培南、美洛培南、左氧氟沙星和环丙沙星等高度敏感;对氨曲南和头孢唑啉耐药性最强。并绘制了此菌的生长曲线,发现2-6 h进入对数期,对数期时间较早,22 h后就进入了稳定期。后进行回归试验发现死亡率为66.7%,危害较大。因鱼类中发现戴氏西地西菌较少,所以本文对于鱼类戴氏西地西菌的研究有重要意义。

关键词：鲫鱼戴氏西地西菌药敏试验

传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)分离株病原学研究及全基因组序列分析

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中国兽医杂志 2017年第3期53卷 39-42页

作者：焦雪吉尚雷张培军冷东泽茆安亭李月红吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林省卫生检测检验中心吉林长春130118

为初步了解东北地区某虹鳟养殖场的一株传染性造血器官坏死病病毒株的病原学特征,将该病毒株进行虹鳟鱼苗人工回接感染试验。结果显示,一周内人工感染试验鱼均出现明显的临床症状。将病死虹鳟鱼苗研磨过滤除菌后接种到胖头鱼肌肉细胞系(... 详细信息

为初步了解东北地区某虹鳟养殖场的一株传染性造血器官坏死病病毒株的病原学特征,将该病毒株进行虹鳟鱼苗人工回接感染试验。结果显示,一周内人工感染试验鱼均出现明显的临床症状。将病死虹鳟鱼苗研磨过滤除菌后接种到胖头鱼肌肉细胞系(FHM),出现了特征性病变(CPE),用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)4组水生动物病毒的6对特异性引物对该毒株进行race-PCR,扩增其全长。结果显示,该病毒基因组全长为11 132 nt,基因组序列中4种核苷酸G、A、T、C含量分别为24.28%、28.67%、19.46%、27.59%。将序列与多株GenBank中已发表的IHNV毒株相应基因进行比较。结果显示,分离株G基因与韩国株ChYa07和PcKw11同源性较高,分别为97.8%和97.5%,其进化树分析结果显示,CJ-13株与韩国株和日本株在遗传进化关系上较近。

关键词：传染性造血器官坏死病病毒(IHNV) 流行病原学全序列